脲酶结合邻甲酚酞络合剂显色检测血清及尿液尿素含量

目的　建立一种实用的血清和尿液中尿素含量的比色测定方法。方法　脲酶水解尿素产生氨(NH3),使溶液pH升高,以邻甲酚酞络合剂(OCPC)作为pH指示剂,波长570nm吸光度变化与尿素浓度成正相关。结果　该法线性范围血清1.00～200mmol/L,尿液10.0～1000mmol/L;检测界限血清0.36mmol/L,尿液2.19mmol/L。精密度分析血清批内CV1.13%～2.78%,批间CV1.81%～3.91%,总CV2.13%～4.80%。尿液批内CV0.68%～1.72%,批间CV0.96%～2.24%,总CV1.17%～2.82%。平均回收率血清100%,尿液102%。该法(Y)与酶速率法(X)比较相关性良好(血清Y＝1.048X+0.511,r＝0.998,S     

脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联法动力学测定血清或尿液中尿素

目的　建立适合于自动化分析血清和尿液尿素的脲酶和亮氨酸脱氢酶偶联的连续监测法。方法　对pH、2 酮基异乙烯酸钠、亮氨酸脱氢酶和脲酶浓度等反应条件进行实验研究 ,并对建立的方法进行评价。结果　用双试剂连续监测法 ,试剂Ⅰ :10 0mmol/LN ,N 二乙醇胺基乙酸缓冲液 (pH 8.80 ) ,含 2 酮基异乙烯酸钠 3.0mmol/L、NADH 0 .3mmol/L、亮氨酸脱氢酶 2 .0kU/L。试剂Ⅱ :试剂Ⅰ中加入脲酶 70kU/L。本法线性范围血清 0 .5～ 15 0mmol/L ,尿液 8.0～ 6 5 0mmol/L。血清和尿液的平均回收率分别为 10 2 .1%和 10 1.5 %。血清批内和批间平均CV分别为 1.0 2 %和 1.70 % ;尿液批内平均CV为 1.98%。本法 (Y)和脲酶偶联谷氨酸脱氢酶法 (X)对比相关良好 (血清Y =0 .992X +0 .0 4 0 ,r=0 .993;尿液Y =0 .990X +0 .6 1,r=0 .991)。胆红素 <32 5 μmol/L、血红蛋白 <5g/L、抗坏血酸 <80 0 μmol/L、三酰甘油 (TG) <7.5mmol/L和NH+ 4 <0 .5mmol/L对测定无明显干扰。结论　本法简便、准确、线性范围广 ,可用于常规自动分析。     

全自动酶偶联法测定腺苷脱氨酶

目的　建立全自动测定腺苷脱氨酶 (ADA)的酶偶联分光光度法。方法　用酶联比色法对pH值、腺苷浓度等反应条件及各种实验参数进行研究。用该法测定了 90例健康者的血清样本及 99例胸腹水的ADA活性。结果　该法最低检出限为1.7U/L ,线性范围可达 2 2 0U/L(r=0 .9989) ,批内CV为 2 9%～ 5 .4 % ,批间CV为 4 .7%～ 6 4 % ,回收率为 99.7%。胆红素 <136 .8μmol/L ,血红蛋白 <3.5g/L ,抗坏血酸 <2 84 μmol/L和三酰甘油 <9.0 3mmol/L的情况下 ,对测定结果无显著性影响。 结论　本法灵敏度高 ,线性、精密度好 ,结果准确 ,干扰少 ,且操作简便快速 ,适用于全自动生化分析仪分析。     

糖化血清蛋白的简易比色测定法

本文报道了用氮化硝基四氮唑蓝(NBT)还原法测定糖化血清蛋白的方法。作者成功地合成了1-脱氧1-吗啡啉果糖(DMF),以此为标准参照物,以果糖胺(mmol/L)报告结果。50例正常人结果X±2S 为1.9±0.25mmol/L。方法批内CV=1.55%,批间CV=2.45%。除血红蛋白有正干扰外,葡萄糖、果糖尿素、肌酐、草酸盐均不呈色。     

邻苯二甲醛双试剂法测定血清尿素的探讨

目的 对邻苯二甲醛双试剂自动分析测定血清尿素的方法进行探讨。方法 用优选法对试剂成份进行优化组合。以含邻苯二甲醛67 mmol/L、硫酸1.6 mol/L和磷酸1.6 mol/L的混合溶液作为第一试剂;以含偏钒酸铵4.3 mmol/L,安替比林0.21 mmol/L的混合溶液为第二试剂测定血清尿素。结果线性范围0-35 mmol/L,回收率98.1％-101.1％,平均回收率为99.6％;批内CV:低尿素含量血清为1.32％,高尿素含量血清为0.91％。批间CV:低尿素含量血清为2.04％,高尿素含量血清为1.08％。与UV-GLDH法比较,r=0.992,回归方程Y=1.02X+0.127,P>0.05;脂肪乳糜和溶血标本对测定结果无影响。结论 该法线性范围宽,精密度好,回收率高,试剂配制方便、稳定,易于保存,适用于手工操作和自动化分析。     

单一酶试剂快速测定血清鸟嘌呤脱氨酶

本文介绍用单一酶试剂测定血清鸟嘌呤脱氨酶,并进行了实验探讨.批内CV 为2.14～2.72%,批间CV 为4.81～5.01%,Km 为1.2×10~(-2)mmol/L.本法采用0.27mmol/L 的底物浓度为Km 的22.5倍.最适pH8.0,光吸收峰为550nm 波长.76名正常成年人血清乌嘌呤脱氨酶活性(?)±SD 为4.28±1.87U/L.32例早期急性肝炎患者血清鸟嘌呤脱氨酶活性除2例正常外,其他均显著高于正常人,(?)±SD 为33.72±11.87U/L(P<0.001)。     

低密度脂蛋白胆固醇一步法测定与公式计算法比较

目的　对直接一步法测定血清中低密度脂蛋白胆固醇(LDL- C)进行方法学评价,并探讨friedewald公式计算法的可行性。方法　通过重复性试验、回收实验、线性实验对该方法进行评价;并同时与friedewald公式计算法进行比较。结果　该方法线性范围为:0 . 8～9 .5mmol/L ;精密度:批内CV为2 . 86 % ,批间CV为3 .2 6 % ;平均回收率是99. 5 % ;参考范围为(2 .2 3±0 .4 5 )mmol/L。与friedewald公式计算法相比,在TG <4 . 5 6mmol/L时,二者有良好的相关性;心脑血管病组与正常组相比,二者差异有显著性(P <0 . 0 1)。结论　一步法准确性及重复性均符合要求,方便快速,在TG <4. 5 6mmol/L时用计算法经济更方便;而TG≥4 . 6 2mmol/L时,用测定法才能得到准确的结果。     

连续监测法测定腺苷脱氨酶

目的 建立连续监测法测定腺苷脱氨酶的方法。方法 用连续监测法对 pH值、腺苷浓度等反应条件进行实验研究，并对所建立的方法进行评价。结果 用双试剂连续监测法；试剂Ⅰ：含α－酮戊二酸6mmol/L,NADH 0.35mmol/L,ADP0.8mmol/L,EDTA-Na2 0.1mmol/L，谷氨酸脱氢酶1000U／L，试剂Ⅱ：腺苷12mmol/L,均用磷酸盐缓冲液（0．1mol/L);pH7.2。线性范围达97U／L，批内CV＝4．90％，批间CV＝6．53％。与波氏显色法有良好的相关性（r=0.9902)。结论 本法操作简便，结果准确，可用于常规分析。     

直接一步法测定低密度脂蛋白胆固醇

目的　对直接一步法测定血清中低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)进行方法学评价 ,并探讨friedewald公式计算法的可行性。方法　通过重复性试验、回收实验、线性实验对该方法进行评价 ;并同时与friedewald公式计算法进行比较。结果　该方法线性范围为 :0 .7～ 9.1mmol/L ,精密度 :批内CV 2 .76 % ,批间CV为 3.5 6 % ;平均回收率是 99.2 % ,参考范围为 (2 .4 5± 0 .5 5 )mmol/L ,与friedewald公式计算法相比 ,在TG <4 .5 2mmol/L时 ,二者有良好的相关性 ,与文献相符 ;心脑血管病组与正常对照组相比 ,二者差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　一步法准确性及重复性均符合要求 ,方便快速 ,在TG <4 .5 2mmol/L时 ,用计算法经济更方便 ;而TG≥ 4 .5 2mmol/L时 ,用测定法才能得到准确的结果。     

2—氯—4—硝基苯—β—D—半乳糖—麦芽二糖苷作底物测定淀粉酶总活性

目的 建立2－氯－4－硝基苯－β-D－半乳糖－麦芽二糖苷（GalG2-CNP）作底物测定淀粉酶的方法。方法 用连续监测法对pH值，Km值及最适底物浓度等反应条件进行实验研究，并对建立的方法进行评价。结果 用双试剂连续监测法；试剂Ⅰ：含KSCN 200mmol/L,CaCl26.7mmol/L,NaCl400mmol/L；试剂Ⅱ：含GalG2-CNP20mmol/L；均用pH6.0 50mmol/L MES缓冲液。线性范围达1200U/L批内CV＝2.77％，批间CV＝3.56％，与参考方法（BPS－G7）有良好的相关性。结论 本法操作简便，结果准确，可用于常规分析。     

离子选择电极法测定血清锂的临床应用

目的 分析评价离子选择电极测定血清锂离子浓度的方法学.方法 使用深圳希莱恒公司生产的IMS-972电解质分析仪直接测定血清锂离子浓度,同时进行方法学评价及临床应用结果分析.结果 离子选择电极法测定血清锂离子浓度灵敏度为0.1mmol/L,批内CV:3.86%,偏差为-4.45%;批间CV:4.76%、偏差-4.95%;平均回收率为96.7%;锂离子治疗狂燥症有效血药浓度在0.45～1.39mmol/L之间.X为0.78.SD为0.23.结论 离子选择电极法测定血清锂离子浓度准确、灵敏、快速、特异,适用于一般实验室进行临床研究与应用.     

血浆丙酮酸激酶2.4—二硝基苯肼呈色法实验研究及其临床应用

本文报道了血浆丙酮酸激酶2.4-二硝基苯肼呈色法,对其最佳实验条件进行了研究.反应体系中含有0.08 mol/L pH7.5Tris-HCl 缓冲液,ADP2mmol/L,PEP2mmol/L,Mg~(2+)10mmol/L,K~+150mmol/L,DTT5mmol/L;酶促反应的线性时间为20分钟,酶活性在300IU/L 内呈线性关系;批内CV1.23%,批间CV2.31%,126例健康人血浆PK 为59.4±13.6((?)±s)IU/L.初步临床应用表明,AMI发病后2～6小时PK 即开始升高,12～36小时上升至峰值(平均23小时),37～96小时下降至正常.PK 对AMI 早期诊断的敏感性100%;特异性98%.     

血清钙偶氮胂测定法的一点改进

在刘倩予等建立的碱性条件下偶氮胂 测定血清钙的方法基础上 ,减低了偶氮胂 浓度 ,使试剂空白吸光度降低 ,更适合分光光度计比色。方法评价试验结果 :线性范围 0～ 5mmol/L,批内 CV1 .66% ,批间 CV2 .0 8% ,回收率范围 96%～ 1 0 4 %。血红蛋白 1 7g/L、胆红素 1 0 3μmol/L对该法测定血清钙无明显干扰。该方法试剂稳定 ,操作简便快速、精密度、准确度好 ,值得推广应用。     

酶循环法检测血清总胆汁酸的方法学评价

目的通过对方法学评价试验,选择一种检测血清总胆汁酸的方法.方法ThioNADH黄色发光系统酶循环法检测血清总胆汁酸.结果本法线性达150μmol/L,精密度高,批内CV分别为0.98%和0.85%,批间CV为4.58%和4.13%.本法与普通酶显色法比较,r=0.903x-1.45,r=0.995 5,n=50,配对t检验P＞0.05,胆红素＜830μmol/L,血红蛋白＜5g/L,肝素钠＜120mmol/L,枸椽酸钠＜120mmol/L,乳酸＜30mmol/L,抗坏血酸＜28mmol/L,对测定结果无显著性干扰.结论本法线性好,精密度高,结果无明显干扰,对仪器管道比色杯基本无色素沉着污染,是测定血清总胆汁酸的一种理想方法,值得扩广应用.     

微型光谱仪干试剂法检测血清钾离子的研究

目的研究一种基于微型光谱仪和干化学试剂技术快速检测血清钾离子浓度的方法。方法根据酶法制备干粉钾离子试剂,研究其在微型光谱仪上的检测方法,并对试剂及仪器的性能进行评价,进行统计学分析。结果制备的干试剂结构疏松、溶解性好,90d内反应稳定。用630nm波长检测,其线性范围为3～8mmol/L,批内变异系数(CV)<4%,批间CV<5%,回收率为98.5%～106.9%。当血清内胆红素小于290.40μmol/L,三酰甘油小于11.20mmol/L时,无明显干扰。与全自动生化分析仪电极法结果的相关性良好(r=0.978)。结论微型光谱仪及干试剂法测定血清钾离子浓度结果准确可靠,操作简便,仪器携带方便,可适用于现场或床旁的快速检测。     

血清钙偶氮胂Ⅲ测定法的一点改进

在刘倩予等建立的碱性条件下偶氮胂Ⅲ测定血清钙的方法基础上,减低了偶氮胂Ⅲ浓度,使试剂空白吸光度降低,更适合分光光度计比色。方法评价试验结果线性范围0～5mmol/L,批内CV1.66%,批间CV2.08%,回收率范围96%～104%。血红蛋白17　g/L、胆红素103　μmol/L对该法测定血清钙无明显干扰。该方法试剂稳定,操作简便快速、精密度、准确度好,值得推广应用。     

酶循环法测定血清总胆汁酸

目的　建立血清总胆汁酸 (TBA)测定的酶循环法。方法　基于用脱氢酶 辅酶体系循环底物的原理 ,建立了本法。结果　本法灵敏度 5 0 μmol/L ,A40 5nm ,1cm>0 .15 ;线性达 180 μmol/L ;批内CV <1.87% ,日间CV <2 .94 % ,总CV <3 .64% ;与普通酶显色法比较 :Y =0 .92 1X - 1.4 2 6,r=0 .9982 ,n =64。胆红素 <85 0 μmol/L、血红蛋白 <5 g/L、抗坏血酸 <2 .84mmol/L、乳酸 <2 4mmol/L、乳酸脱氢酶 <10 0 0 0U/L时 ,对结果无显著干扰。结论　本法灵敏度高 ,线性、精密度好 ,几乎无干扰 ,是一种理想的TBA测定方法。     

血清碱性磷酸酶连续监测法及其实验条件的探讨

参考国际临床化学联合会正式推荐方法,使用国产仪器和试剂连续监测血清碱性磷酸酶活性,对其实验条件进行了探讨。测得反应最适 pH 为10.0,DEA 缓冲液的最适浓度为0.8～1.0mol/L,4—NPP 的 Km 为1.26×10~(-3)mol/L,选择4—NPP 终浓度为19.05mmol/L,0.95～2.0mmol/L 的 Mg~(2 )对酶活性反应时间为5min。批内CV 为2.40%～3.96%,批间 CV 为3.28%～4.66%,和 Beckman 试剂盒比较两者显著相关(r=0.9762),98例健康成人参考值为93.8±21.4((?)±s)u/L。方法简便,快速准确,适合基层实验室推广应用。     

钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析性能评价

目的对钒酸盐氧化法测定血清总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)进行方法学评价.方法系统研究钒酸盐氧化法测定血清胆红素的精密度、灵敏度、稳定性及干扰因素,并比较其与重氮法结果的相关性.结果钒酸盐氧化法测定TBil批内变异系数(CV) 1.67%,批间CV 2.92%,平均回收率99.8%.DBil批内CV 1.25%,批间CV 3.52%,平均回收率99.6%.维生素C(VitC)≤0.5 g/L时对钒酸盐法和重氮法均无干扰.三酰甘油(TG)<6 mmol/L时对钒酸盐法无干扰,对重氮法有明显干扰.血红蛋白(Hb)在4 g/L以下对钒酸盐法无干扰,对重氮法有较大干扰.结论钒酸盐氧化法灵敏度高、重复性好,抗干扰能力强,适用于实验室常规应用.     

一种线性范围宽、抗干扰能力强的葡萄糖速率测定法

目的:建立一种线性范围宽、抗干扰能力强的血糖测定方法以满足临床高血糖样本测定之需要.方法:通过对葡萄糖速率法的改良,进行精密度试验、线性试验、对比试验和干扰试验以评价改良方法.结果:批内CV为2.04%～2.51%,批间CV为2.53%～3.01%;线性范围0.012 3～60 mmol/L;与终点法比较相关系数(r)为0.999,相关无显著性(P＞0.05),直线回归方程为y=0.996x-0.025;甘油三酯＜20.5 mmol/L、血红蛋白＜4 g/L、总胆红素＜960μmol/L不影响测试结果.结论:该法快速、准确、抗干扰能力强,线性范围宽,适用于全自动生化分析仪,有推广应用价值.