烟草黑胫病菌对甲霜灵的抗性测定

为合理防治烟草黑胫病,减少抗药性产生,从云南省6个地州分离烟草黑胫病菌菌株34个,就分离菌株对甲霜灵的抗药性进行了测定,结果表明,供试34个菌株中中高抗菌株12个,中抗菌株比例较高5个,低抗菌株17个。不同来源的烟草黑胫病原菌株的抗药性存在差异,以文山、玉溪的菌株抗药性最高,昭通、曲靖菌株抗药性最低,抗性倍数最高达16倍,其余地州抗药性居中。不同地州分离菌株高、中、低抗菌株的比例存在明显差别。分离自楚雄双柏县雨龙乡的113#菌株抗药性最强,来自大理巍山县大仓镇的218#菌株抗药性最低。34株烟草黑胫病菌菌株对甲霜灵的EC50值平均为0.0148μg/ml,范围在0~0.053μg/ml。     

MLST技术分析中国烟草野火病菌遗传多样性

明确烟草野火病菌多位点序列分型(MLST)情况,能为制订有效防治措施和选育品种提供强力技术支撑,并为病菌的生物学特性研究提供新视角。从湖南、重庆等5个产烟省（市）烟草生产区采集烟草野火病样,组织分离并鉴定,应用MLST分型,筛选管家基因,分析供试菌株遗传多样性。结果表明,从湖南等5个产烟省（市）分离获得烟草野火病菌144株,筛选得到Pgi、Pfk和Gap 3个管家基因,共获得92个ST型。以Pgi基因为标准,供试菌株可分出亚群5个,单一群4个,亚群1和亚群2菌株数量较多,亚群1菌株来自5个产烟省（市）,此亚群的ST43属于中国主要种群。说明中国烟草野火病菌遗传多态性丰富,烟草品种与病菌组群间不存在关联性。     

安徽省四地市水稻细菌性条斑病对链霉素的抗药性监测

于2010年采集安徽省滁州、安庆、宣城和巢湖四个城市水稻细菌性条斑病菌108株,以及2011年水稻细菌性条斑病菌168株,采用区分剂量法,测定其对链霉素的抗药性。能够在含10 μg/ml链霉素的 NA平板上生长,为抗药性菌株,不能生长的为敏感菌株。抗药性监测结果表明,安徽省四个城市的细菌性条斑病菌对链霉素还比较敏感,未发现抗药性菌株。对于该病菌对链霉素的抗药性仍需要连年进行。     

江苏省油菜菌核病菌对多菌灵和菌核净的抗药性监测

2006-2010年从江苏省12个地级市的油菜产区采集油菜菌核,经分离纯化共获得6017株油菜菌核病菌。采用区分剂量法测定其对多菌灵和菌核净的抗药性。结果表明,2006-2010年间江苏省各地均有多菌灵抗性菌株的分布且抗药性水平较高,抗药性频率分别为63.9%、24.0%、17.1%、16.7%和9.8%,呈逐年下降的趋势。同时经室内研究发现,多菌灵抗性菌株与敏感菌株在菌丝生长、菌核产生、以及致病力等方面无显著差异。而2006-2010年间江苏省油菜菌核病菌对菌核净表现敏感,平均抗性频率仅为0.10%,5年内只在盐城、常州、连云港三地监测到共6株低抗菌株,且菌核净低抗菌株在菌丝生长、菌核产生等方面明显弱于敏感菌株。     

浙江地区柑桔炭疽病对甲基硫菌灵的抗性水平及其分子机制

了解浙江地区柑橘炭疽病菌株对甲基硫菌灵的抗药性频率及其抗性分子机制。采用最低抑制浓度(MIC)法测定甲基硫菌灵对62株炭疽病菌株的敏感性,并利用PCR扩增的方法扩增12株代表性菌株的β-微管蛋白基因。结果表明：分离获得的菌株中,对甲基硫菌灵高抗菌株56株(90.32%),敏感菌株6株(9.68%)。通过对12株代表性的炭疽病菌株部分β-微管蛋白基因序列的分析。结果显示：甲基硫菌灵的抗性菌株发生单一的核苷酸突变(A→C),导致抗性菌株(HR)核苷酸所编码的198位氨基酸由敏感菌株的谷氨酸(GAG)突变为丙氨酸(GCG)。柑橘炭疽病菌对甲基硫菌灵的抗药性与β-微管蛋白198位氨基酸突变有关。     

浙江地区柑橘炭疽病病原菌对甲基硫菌灵的抗性水平及其分子机制研究

了解浙江地区柑橘炭疽病菌株对甲基硫菌灵的抗药性频率及其抗性分子机制。采用最低抑制浓度(MIC)法测定甲基硫菌灵对62株炭疽病菌株的敏感性,并利用PCR扩增的方法扩增12株代表性菌株的β-微管蛋白基因。结果表明:分离获得的菌株中,对甲基硫菌灵高抗菌株56株(90.32%),敏感菌株6株(9.68%)。通过对12株代表性的炭疽病菌株部分β-微管蛋白基因序列的分析。结果显示:甲基硫菌灵的抗性菌株发生单一的核苷酸突变(A→C),导致抗性菌株(HR)核苷酸所编码的198位氨基酸由敏感菌株的谷氨酸(GAG)突变为丙氨酸(GCG)。柑橘炭疽病菌对甲基硫菌灵的抗药性与β-微管蛋白198位氨基酸突变有关。     

Tpb55菌株发酵液中活性代谢产物抑菌作用及稳定性测定

以烟草野火病生物防治为目的,分别用滤纸片法和牛津杯法测定了Tpb55菌株的发酵液和无菌滤液对烟草野火病菌的抑制作用,采取了水浴加热,调节PH及紫外光和日光照射无菌滤液等方法,测定了Tpb55产生抗细菌物质的热稳定性,酸碱稳定性及光稳定性等理化性质。结果表明,菌株Tpb55发酵液及其活性代谢产物对烟草野火病菌具有较强的抑制作用,滤纸片法测定抑菌圈直径达6.04 cm,琼脂扩散法测定抑菌圈达2.52 cm;发酵液在pH3~8范围内保持较高的活性,以pH为中性的条件下最好,最稳定;光照稳定性测定结果表明,Tpb55菌株产生的抗菌物质对紫外光具有较好的稳定性,连续紫外光照9 h,抑菌活性下降幅度不超过16%。由此可见,Tpb55是一株具有较高潜在价值的生防菌株,本研究为进一步分离、纯化该菌株发酵液中有效组分提供了重要参数,为该菌株的进一步开发提供了研究基础。     

洛阳市番茄灰霉病菌对嘧霉胺的抗药性检测

为了明确洛阳市番茄灰霉病菌对苯胺基嘧啶类杀菌剂嘧霉胺的抗药性状况,2012—2013年从洛阳市不同保护地中采集番茄灰霉病病果或病叶,经单孢分离共获得番茄灰霉病菌54株。采用菌丝生长速率法测定了其对嘧霉胺的敏感性。结果显示,高抗菌株9株（16.67%）,中抗菌株19株（35.19%）,低抗菌株10株（18.52%）,敏感菌株16株（29.63%）。比较抗性水平不同菌株间的菌丝生长情况,发现菌丝生长速度和抗性水平无相关性。研究表明,洛阳市番茄灰霉病菌已对嘧霉胺产生不同水平的抗药性,且以中抗菌株为主,生产上应合理更换或轮换使用与嘧霉胺无交互抗性的药剂防治番茄灰霉病。     

安徽省油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性监测

从安徽省望江、合肥、太湖、巢湖、蒙城、凤阳、灵壁、肥西、宣城、旌德等10个市县的油菜病茎上分离得到60个油菜菌核病菌菌株，并对其进行了抗药性监测。结果表明，有18株对多菌灵表现出不同程度的抗药性，上述各地均有抗药性菌株分布，但所占的比例不一，以蒙城系列（MCS）监测到的抗药性个体比例所占比例最大（66.7%），太湖（THS）最小（9.1%），但监测到THS-1对多菌灵的抗药性最强，高达743.8347mg/L。结果提示安徽省各地油菜菌核病菌已经对多菌灵产生了抗药性，且个别菌株已达到极高水平。     

四川豇豆根腐病菌对咪鲜胺敏感基线的建立

为评价四川豇豆根腐病菌对咪鲜胺的抗药性水平,科学使用咪鲜胺可持续防治豇豆根腐病,采用菌丝生长速率法,测定63株四川省豇豆根腐病菌对咪鲜胺的毒力曲线,建立敏感基线,评价其潜在的抗性风险。参试菌株的敏感性频率分布呈连续的单峰曲线,接近正态分布,平均值为EC50 值0.0063±0.0028 mg/L,这个值可用来监测豇豆根腐病原菌种群对咪鲜胺的敏感性变化。参试菌株中,61.9%为敏感菌株,38.1%为低抗药性菌株,没有出现高抗药性和中抗药性菌株。因此,只要加强田间抗药性监测,在四川豇豆生产上咪鲜胺仍可作为防治豇豆根腐病的有效药剂使用。     

大豆细菌性斑点病侵染大豆品种叶片的超微结构观察

大豆细菌性斑点病是严重危害大豆生产的叶部病害。本研究采用针刺法,对高抗大豆细菌性斑点病4号生理小种的大豆品种绥农8和高感品种合丰25分别接种大豆细菌性斑点病4号生理小种后,进行透射电镜观察。结果表明,随着接种时间的增加,抗感大豆品种叶片超微结构出现了明显差异,接种120h后,抗病品种叶片细胞内部结构基本上比较完整,而感病品种叶片细胞内部结构发生了较大的变化,细胞质膜、核膜、核质及叶绿体均受到严重的破坏;叶绿体基粒片层消失,大部分叶绿体膜也逐渐解体,线粒体的空泡化严重,说明大豆细菌性斑点病引起细胞结构病变在抗感品种间的表现不同。研究为揭示大豆细菌性斑点病病原菌的致病机理奠定一定的理论基础。     

烟草野火病菌在不同衬底上吸附的原子力显微镜研究

为了筛选植物病原细菌原子力显微镜（AFM）制样方法,对烟草野火病菌（Pseudomonas syringae pv. tabaci）在云母、硅、玻璃和硅烷化玻璃等衬底上的粘附情况进行了系统观察,结果表明硅烷化玻璃衬底能够较好地固定烟草野火病菌     

黄瓜细菌性角斑病的分子检测

探索黄瓜细菌性角斑病菌(Pseudomonas syringae pv.)的分子检测技术,为快速、准确鉴定和检测提供技术和方法。根据丁香假单胞杆菌黄瓜角斑病致病型病菌与其他黄瓜病原菌核糖体基因转录间隔区 (16S-23S Ribosomal DNA Intergenic Spacer,ITS)序列间的差异,设计特异性引物PLf1/PLr2 (PLf1: 5'-ATA AGG GTG AGG TCG GCA GTT-3',PLr2: 5'-CTC GTC TTT CAT CGC CTT TG-3')。引物PLf1/PLr2可从丁香假单胞杆菌黄瓜角斑病致病型病菌中增出一条473 bp的条带,将黄瓜细菌性角斑病菌和其他菌种分开。建立的黄瓜细菌性角斑病分子检测的方法可用于该病害的快速分子检测,可直接对黄瓜叶片汁液进行病原菌检测,并且可在接种后病症发生前72 h内检测到病原菌。     

香料烟品种细菌性斑点病的抗性鉴定

摘要：香料烟细菌性斑点病是一种由丁香假单胞菌烟草致病变种[Pseudomonas syringae pv. tabaci (Wolf et al. ) Young et al.]侵染引起的新病害,是香料烟生产中的主要病害。本文采用自然病圃结合人工接种的方法对香料烟品种的细菌性斑点病进行了抗性鉴定研究。结果表明不同品种发病动态差异明显,基可纳巴斯玛、巴斯玛14号、罗香1号、沙姆逊发病较早,发病后病情稳定,未发现扩展趋势,香料烟多叶发病晚,发病后病情加重迅速。接种后21天调查,伊兹密尔14号、科库鲁?伊兹密尔、土卡单株3、罗明2－1、香料烟多叶叶片全部枯竭,剩余23个品种有6个中感、10个中抗和7个高抗品种,分别占26.09%、43.48%和30.43%。高抗品种包括巴斯玛1号、卡拉巴格拉、杰尼克、罗香1号、沙姆逊、巴斯玛14号、基可纳巴斯玛。     

云南抗白叶枯病稻种的RGA初析

根据水稻抗白叶枯病Xa21基因的富含亮氨酸重复区域（LRR）和番茄抗细菌性斑点病(Pseudomonas syringae pv. tomato)的Pto基因编码蛋白质激酶的DNA序列，设计2对引物用于扩增抗水稻白叶枯病品种中的抗病基因同源序列。经聚丙烯酰胺凝胶电泳和聚类分析，结果表明供试抗病品种间具有丰富的RGA多态性，用同一引物测定的属于同一簇     

Inheritance of resistance to angular leaf spot in Nicotiana tabacum L. cultivars burley 21 and kentucky 14

Summary The genetics of resistance to angular leaf spot caused by Pseudomonas syringae pv. tabaci in Nicotiana tabacum cultivars Burley 21 and Kentucky 14 was investigated by studying disease reactions to three isolates of parental, F₁, F₂ and backcross generations derived from crosses between the resistant cultivars and the susceptible cultivar Judy's Pride. Studies were conducted in the greenhouse and in field plant beds. Chi-square values were computed to determine whether the observed ratios for disease reactions deviated from expected Mendelian ratios for a single, dominant gene controlling resistance to angular leaf spot in tobacco. Based on the resistance of the F₁ and the backcross generation to the resistant parent (BC-R), a 3 resistant: 1 susceptible segregation ratio in the F₂, and a 1 resistant: 1 susceptible segregation ratio in the backcross generation to the susceptible parent (BC-S), it was concluded that resistance to three isolates of Pseudomonas syringae pv. tabaci is governed by a single, dominant gene.     

解磷细菌对7种常见抗生素的抗性研究

摘要：测定8株供试菌株对氨苄青霉素,四环素,链霉素,卡那霉素,利福平,头孢霉素,氯霉素的不同浓度的抗性反应。结果发现抗氨苄青霉素的菌株有PSB3,PSB4,PSB13,PSB26,PSB58,PSB67,PSB77;抗链霉素的菌株PSB4,PSB13,PSB26,抗卡那霉素的菌株PSB4,PSB26,PSB67,PSB77;PSB4,PSB26,PSB77菌株对四环素具有较强的抗性;PSB4,PSB13,PSB15,PSB26,PSB67,PSB77菌株对氯霉素具有较强的抗性;PSB3,PSB4,PSB26,PSB58,PSB77菌株对利福平有抗性,PSB77菌株对头孢霉素有较强抗性。解磷细菌对抗生素的抗性实验结果,可用于研究今后8株解磷细菌在土壤中的定殖状态。     

Analysis of the molecular basis of Pseudomonas syringae pv. tomato resistance in tomato

Tomato (Lycopersicon esculentum) cultivars that contain the Pto bacterial resistance locus also exhibit sensitivity to fenthion, an organophosphorous insecticide. Resistance to Pseudomonas syringae pv. tomato (Pst) encoded by the Pto gene and sensitivity to fenthion cosegregate in large F₂ populations and were apparently introgressed together into tomato from the wild species Lycopersion pimpinellifolium. In order to isolate the genes responsible for these two phenotypes and to study their molecular basis, a multistep map-based cloning project was initiated. A closely linked RFLP marker was used to isolate a yeast artificial chromosome (YAC) clone that spanned the Pto region. Transcribed sequences within the Pto region were identified by isolating cDNA clones that hybridized to the YAC clone. Transformation of candidate cDNA clones into a Pst-susceptible, fenthion-insensitive tomato line succeeded in identifying a cDNA conferring Pst resistance and a separate cDNA conferring sensitivity to fenthion. The cDNA clones represent members of a tandemly repeated gene family and encode putative serine-threonine protein kinases. The role of these kinases in recognizing a signal from Pst or the fenthion molecule and in activating the plant response is currently being investigated.Abbreviations Pst Pseudomonas syringae pv. tomato - RAPD random amplified fragment polymorphism - RFLP restriction fragment length polymorphism - YAC yeast artifical chromosome