“长白新喹”抗癌药对ANAE阳性淋巴细胞的影响

为了研究“长白新喹”抗癌药对ANAE阳性淋巴细胞的影响,本文采用酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)反应标记淋巴细胞的细胞化学方法对100例正常瑞士小白鼠尾血的淋巴细胞进行了ANAE阳性百分率测定和分型的工作。结果表明:ANAE阳性者为T淋巴细胞,阴性者为B淋巴细胞。阳性率平均值为62.5±110%。随机观察其中50例,其ANAE阳性率为63.5±0.1%,其中点状颗粒型的淋巴细胞百分率为55.5±0.9%(3粒以下者25.3±0.8%;4-8粒者24.6±1%;9粒以上者4.6±0.3%),而弥散型为8.5±0.3%。在研究“长白新喹”对小白鼠外周血ANAE阳性淋巴细胞影响时,实验组与对照组均接种S_(180)腹水癌细胞。于接种后第3天,实验组用“长白新喹0.8 mg/0.2 ml腹腔注射,连续7天。两组均有实验前后作为自身对照,实验结果表明:在两组动物之间以及实验前后的自身对照,血液内ANAE阳性淋巴细胞及弥散型淋巴细胞均明显增多(P<0.05)。根据上述结果,本文讨论了抗癌药“长白新喹”对细胞免疫的影响。     

中药猪苓多糖对小鼠血液ANAE阳性淋巴细胞的影响

本实验研究了猪苓多糖对正常小鼠血液ANAE性淋巴细胞的影响。实验动物每天腹腔注射猪苓多糖2mg/0.2ml,连续七天,实验前、后取血涂片,用α-醋酸萘脂酶法,标记ANAE阳性T淋巴细胞,测定其百分率。实验结果表明:猪苓多糖对小鼠血液ANAE阳性T淋巴细胞总数无影响,对颗粒型阳性淋巴细胞有减少,而对分散型有显著增加现象。根据上述结果,本文讨论了猪苓多糖对细胞免疫的作用。     

人淋巴细胞ANAE反应的阳性率和反应模型的观察及其临床应用的探讨

本文用酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)反应标记淋巴细胞的细胞化学方法,对80例正常人外周血淋巴细胞的ANAE阳性率进行了观察,见到正常人外周血淋巴细胞的ANAE阳性率为74.1±7.3％,其中ANAE反应为“点状颗粒型”的淋巴细胞百分率为61.5±7.3％,“分散颗粒型”的淋巴细胞百分率为12.6±3.5％。同时我们对20例癌症患者(胃癌10例,乳腺癌5例,直肠癌5例)进行了观察,发现三组癌症患者外周血的淋巴细胞ANAE阳性率都显著地低于正常人(P<0.01),“点状颗粒型”淋巴细胞的百分率也显著地低于正常人(P<0.01),但是,“分散颗粒型”淋巴细胞的百分率和正常人比较没有差别。     

小檗碱对DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应的影响

目的:研究小檗碱(Ber)对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响,探讨其免疫抑制作用的机制。方法:BALB/c小鼠分为对照组、DTH组与Ber处理的DTH组。对照组以不含DNFB的溶剂处理,DTH组以5g/LDNFB腹部致敏、耳廓激发的方法建立模型,Ber处理的DTH组每天腹腔注射(i.p)Ber,连续7d,总剂量为30mg/kg体质量。激发后48h,取小鼠双耳称重了解Ber对炎症抑制率的影响。镜下观察耳廓局部组织的变化;以结晶紫法检查Ber对脾脏T淋巴细胞与细胞外基质(ECM)黏附作用的影响;以膜联蛋白V(AnnexinV)染色检查淋巴结细胞的凋亡率。结果:双耳称重的结果显示,Ber处理的DTH组与DTH组具有显著的差异(P<0.05),能明显抑制DNFB引起的炎症反应;耳廓局部组织学检测也表明,Ber能够抑制DNFB诱导的DTH,明显减少淋巴细胞的浸润。Ber处理的DTH组的T细胞与ECM的黏附能力明显降低(P<0.05)。Ber处理的DTH组与DTH组和对照组的细胞凋亡率均无明显差异(P>0.05)。结论:Ber对DNFB诱导的小鼠DTH具有明显的抑制作用,降低小鼠T细胞与ECM的黏附能力可能是其抑制DTH的机制之一。     

用酸性α-乙酸萘酯酶(ANAE)法测定小鼠淋巴组织中T、B淋巴细胞的组成

本文报道用Mueller的酸性α-乙酸荼酯酶法(ANAE)测定的LACA、C57、及杂种小鼠的胸腺、骨髓、脾脏、淋巴结及外周血淋巴细胞中的ANAE标记细胞的组成含量百分比(见表1),初步实验结果表明,除C57小鼠的骨髓中淋巴细胞ANAE标记细胞百分数低于其他二组动物外(P<     

妊娠期机体细胞免疫功能状态的探讨——外周血ANAE阳性淋巴细胞的观察

妊娠时,母体对胎儿为什么不发生同种异体移植物的排斥,我们采用了酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)的方法标记T淋巴细胞,对母体细胞免疫功能状态进行探讨。观察83例正常孕妇并分早、中、晚三期和23例正常未孕妇女作对照。结果表明妊娠各期淋巴细胞百分率均下降,与未妊娠组有非常显著性差异。妊娠各期淋巴细胞ANAE阳性率均下降,与未妊娠组有非常显著性差异。到妊娠晚期淋巴细胞ANAE阳性率又有回升,与早、中期有显著性差异。此结果支持妊娠期母体细胞免疫机能降低的学说。     

ANAE染色和抗Thy1-SPA菌体花环双标记法的建立及其用于检测小鼠T淋巴细胞的研究

目的建立 ANAE染色联合抗 Thy1SPA菌体花环双标记法 ,并试图利用此法证明抗θ抗体对 ANAE阳性淋巴细胞的特异作用。方法利用双标记法对正常小鼠胸腺及脾细胞进行检测 ,观察抗 Thy1SPA抗体对 ANAE阳性细胞结合的专一性。结果双标记法中 ,抗 Thy1SPA菌体花环阳性同 ANAE阳性一样 ,能很好反映 6 15小鼠胸腺或脾脏 T细胞数 (P>0 .0 5 ) ;胸腺和脾脏细胞 Thy1 - ANAE 率 ,即双标记阳性率略低于总的 ANAE 或总抗θ菌体花环 数 ,但 3者之间有明显的相关性。结论成功建立了 ANAE-抗 Thy1SPA菌体花环法 ,并首次用此法证明抗θ血清对 ANAE阳性细胞的特异作用     

创伤对细胞免疫功能的影响及补充淋巴细胞对创伤恢复作用

目的 研究严重创伤对机体细胞免疫功能的影响,探索促进创伤恢复新措施.方法 采用小鼠创伤模型,诱导迟发型超敏反应(DTH).流式细胞仪检测FITC阳性细胞及其表面分子CD11c和MHC Ⅱ.在DNFB致敏的早期和晚期,将小鼠腹股沟淋巴结细胞转移至正常小鼠,并测定DTH反应.结果 小鼠的DTH反应在伤后24 h下降到最低点;创伤小鼠的腹股沟淋巴结中的FTTE+,CD11c+,MHC Ⅱ+细胞都显著低于正常小鼠.在早期细胞转移实验中,与正常组相比,创伤组显著降低,混合组显著升高(P＜0.01);在晚期细胞转移实验中,混合组与创伤组均显著低于正常组(P＜0.01).结论 严重创伤导致机体细胞免疫功能下降,体内补充淋巴结细胞对促进创伤的恢复有一定的积极作用.     

内毒素血症幼年大鼠心肌降钙素基因相关肽的动态变化及谷氨酰胺、地塞米松对其影响

目的 通过观察内毒素血症幼年大鼠心肌降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)的动态变化及谷氨酰胺(glutamine,Gin)、地塞米松(dexamethosone,Dex)对其影响,探讨CGRP对内毒素血症大鼠心肌的保护作用.方法 选用健康18日龄Wistar大鼠128只,按腹腔注射药物不同分为:Oh对照组(Ctrl:生理盐水,n=8),内毒素血症组(LPS:n=40)、谷氨酰胺组(Gin,n=40),地塞米松组(Dex,n=40),后3组又分为2、4、6、24及72h 5个时点,每个时点8只,在各指定时点分别将大鼠断头分离心脏,用放射免疫方法测定心肌CGRP表达水平.结果 1.与对照组比较,各组心肌组织内CGRP均下降,P＜0.05～0.01;LPS组CGRP下降最明显,最低点在6h,Gin和Dex组最低点均后延至24h,Gin降低最轻,但3组最低点之间无显著差别,P＞0.05.2.在内毒素血症早期,Dex组下降最慢,但在恢复期,Gln组恢复最快,虽明显高于LPS组,但仍显著低于Oh对照组,P＜0.05.结论 Gln和Dex具有抑制CGRP下降的作用,其中Dex抑制早期CGRP下降作用较大,而Gln促进恢复作用更明显.     

胸腺肽α1围手术期应用对肝癌患者T细胞亚群的作用

目的:探讨胸腺肽α1围手术期应用对肝癌患者细胞亚群的影响。方法:选取45例可切除肝癌患者,按手术大小分为治疗组(23例)和对照组(22例),治疗组术后当天、第3、第5d皮下注射胸腺肽α14mg,观察两组术前、术后第1、4、7d外周血T淋巴细胞CD3 、CD4 、CD8 、CD4 /CD8 分子的变化。结果:对照组术后CD3 、CD4 、CD4 /CD8 降低(CD4 、CD4 /CD8 术后1、4、7d与术前相比P<0.05),CD8 升高(术后1、4、7d与术前相比P<0.05),以第4d明显。治疗组CD3 、CD4 /CD8 术后第1、7d比较有统计学差异(P<0.05)。两组间比较,CD4 、CD4 /CD8 治疗组大于对照组(术后第1、4、7d均P<0.05),CD8 试验组小于对照组(术后第1、4、7d均P<0.05);CD3 试验组大于对照组(术后第4、7dP<0.05)。结论:手术对肝癌患者术后T淋巴细胞免疫功能抑制,胸腺肽对T淋巴细胞免疫功能有较好的保护作用。     

二苯乙烯苷通过抑制ROS减轻MPTP对帕金森病小鼠的神经毒性作用

目的:探讨2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4’-tetrahydroxystibene-2-o-β-D-glucoside,TSG)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-pheyl-1,2,3,6-tetrahydrophridine,MPTP)诱导的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺能神经元保护作用的机制。方法:实验分成三组,即健康C57BL小鼠随机分为对照组(腹腔注射生理盐水);模型组,连续7 d给C57BL小鼠腹腔注射MPTP(30 mg/kg)制备亚急性PD模型;治疗组,在给予MPTP后1 h腹腔注射TSG(60 mg/kg)。爬杆实验检测小鼠的行为学变化;活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测ROS水平;免疫荧光组织化学染色法测定黑质酪氨酸羟化酶(TH)和多巴胺转运体(DAT)的表达变化。结果:行为学:与对照组比较,模型组爬杆时间与转头时间明显延长(P<0.01),而治疗组较模型组时间缩短(P<0.05)。模型组ROS水平较对照组大幅度升高(P<0.01),治疗组较模型组明显下降(P<0.05)。免疫荧光染色:与对照组相比,模型组TH及DAT阳性神经元的数目明显减少(P<0.01),而治疗组TH及DAT阳性神经元数目减少的幅度明显有所下降(P<0.05)。结论:TSG对MPTP诱导的神经毒性具有保护作用,其机制可能与TSG抑制ROS有关。     

黏膜免疫壳聚糖-多胺转运蛋白D(PotD)DNA纳米微粒对小鼠鼻咽部肺炎链球菌定植的保护作用研究

目的 探讨以壳聚糖包裹的PotD DNA(Chitosan-potD)纳米微粒经鼻黏膜免疫小鼠对肺炎链球菌鼻咽部定植的保护作用.方法 将制备的Chitosan-potD微粒、裸pVAX1-potD重组质粒(裸potD)及pVAX1分别鼻腔免疫小鼠,收集黏膜和血清标本用以检测特异性抗体水平;分离并培养脾淋巴细胞,检测IL-17A、IL-4及IFN-γ的分泌水平;于免疫小鼠鼻腔进行肺炎链球菌攻击,通过菌落计数评估各免疫组对小鼠肺炎链球菌鼻咽部定植的保护作用.结果 Chilosan-potD纳米微粒在小鼠体内诱导产生的抗PotD特异性血清IgG、IgG1、IgG2a、黏膜IgA抗体水平及IL-17A、IL-4、IFN-γ水平与裸potD组及pVAX1组相比均明显升高,且差异具有统计学意义(P<0.05);菌落计数结果 显示,Chitosan-potD微粒组在鼻咽部定植的肺炎链球菌数量显著减少(P<0.05).结论 壳聚糖包裹PotD DNA微粒对肺炎链球菌鼻咽部定植具有免疫保护作用.     

肠系膜上动脉夹闭休克时大鼠肝线粒体损伤及其抗损伤的研究

本文探讨SMAO休克时大鼠肝线粒体损伤以及自由基清除酶(剂)对肝线粒体的保护作用。实验组线粒体RCR于松夹1 hr即明显下降(P<0.05),松夹2 hr下降更甚(P<0.01)。ADP/O值也明显降低(P<0.05)。单用ALLO或伍用SOD CAT,SOD ALLO,SOD CAT ALLO治疗对SMAO休克大鼠肝线粒体氧化磷酸化功能均有显著的保护作用,并且在松夹2 hr后,除单用ALLO组外,其它诸组RCR仍较对照组无显著下降(P>0.05),而且还明显高于实验组(P<0.01),其中以SOD CAT ALLO伍用效果最佳。提示脂质过氧化损伤是SMAO休克时肝脏线粒体损伤的重要原因;而伍用自由基清除酶(剂)是防止其损伤的理想选择。     

精神分裂症患者T淋巴细胞酸性非特异性酯酶反应类型及Ig的观察

用酸性a醋酸萘酯酶染色法(简称ANAE)及单向琼脂免疫扩散法对23例精神分裂症患者的细胞免疫及体液免疫功能进行了测定。结果表明;1、精神分裂症患者外周血ANAE总阳性率明显低于正常人P<0.01。其反应类型的变化:圆点状颗粒型淋巴细胞明显低于正常人P<0.01。散在颗粒型淋巴细胞与正常人相比无显著性差异P>0.05。2、精神分裂症患者血清内免疫球蛋白(简称Ig)及C3补体含量与正常人相比无显著性差异。提示:精神分裂症的发病机理与细胞免疫功能异常有密切关系。     

亚临床缺乏维生素A伴哮喘大鼠免疫功能低下与膜ATPase活性的关系

目的:探讨维生素A(VA)亚临床缺乏时免疫细胞ATPase活性下降对致敏性肺炎的影响。方法:用低VA基础饲料喂养大鼠7周时,卵蛋白致敏第20天后,分为VA缺乏组与VA组,分别隔天口服大豆油0.05ml或VA100μ/0.05ml。致敏后3周取肺、肝、脾匀浆,化学比色法测定上清液Na -K ATP酶、Ca2 -ATP酶活性;肺、脾等ANAE染色,体视学法计数肺、脾ANAE阳性巨噬细胞。结果:VA缺乏组肺局灶性坏死,大量渗血、水肿为主,间质浸润淋巴细胞少。淋巴器官内细胞稀疏,脾Na -K ATPase、Ca2 ATPase活性下降。VA组淋巴器官内细胞密集,肺间质浸润淋巴细胞、巨噬细胞增多,巨噬细胞吞噬抗原颗粒释放活性氧破坏肺泡壁引起肺泡隔较宽病变。结论:VA能提高细胞钠、钙泵活性,促进淋巴细胞增生和正常免疫功能,改善肺炎病变。     

原位DNA杂交和单克隆抗体染色法对离心培养的临床标本中巨细胞病毒的检测

一种巨细胞病毒(CMV)的原位DNA杂交检测盒用以检测离心培养物中的CMV,对其检测效果进行了评价。61份临床标本,以单克隆抗体染色法有17份CMV阳性(27.8％),而DNA杂交法对17份阳性标本中有15份显示阳性(24.5％)。早期检出的比较中,离心后DNA杂交法需要58h,而作为对照的单克隆抗体染色法只需16h。虽然DNA杂交法对CMV感染的研究和检测是一种好方法,但对离心培养物的检测,现在DNA杂交技术还不能完全取代单克隆抗体的应用。     

腺苷A1受体激动剂减轻糖尿病并发抑郁症大鼠的认知功能障碍

目的观察腺苷A1受体(A1R)激动剂对糖尿病并发抑郁症大鼠学习记忆功能的影响。方法将大鼠分为对照组、模型组、二甲双胍(Met)组[Met组:灌胃给予二甲双胍(0.18 g/kg) 28 d]和二甲双胍联合腺苷A1受体激动剂(Met+CPA)干预组[Met+CPA组:灌胃给予二甲双胍28 d,于第22天开始腹腔注射CPA(1 mg/kg),注射给药7 d]。观察大鼠血糖水平和学习记忆功能;ELISA检测大鼠海马谷氨酸的含量;用免疫组化法和Western blot检测海马谷氨酸转运体GLT-1和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血糖含量显著升高(P0.01);学习和记忆功能明显下降(P0.01);海马中谷氨酸含量明显升高(P0.01);而GLT-1和BDNF表达显著下降(P0.01或P0.05)。与模型组比较,Met组大鼠仅血糖含量显著下降(P0.01),其余指标均未见显著变化;而Met+CPA组大鼠血糖含量显著下降(P0.01),认知功能得到明显的改善(P0.01),海马中谷氨酸含量显著减少(P0.01),且GLT-1和BDNF表达显著增加(P0.01或P0.05)。结论激活腺苷A1受体可有效改善糖尿病并发抑郁症大鼠的认知功能,这可能与其通过减少谷氨酸释放和增加神经营养作用双途径共同减轻神经元兴奋性毒性有关。     

空肠弯曲菌pcDNA3.1(-)-peb1A诱导的T细胞活化增殖研究

目的探讨空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,CJ)pcDNA3.1(-)-peb1A疫苗免疫昆明种小鼠后T细胞活化增殖状态。方法重组质粒CJ pcDNA3.1(-)-peb1A免疫昆明种小鼠后,取其脾淋巴细胞,应用ELISA法检测其膜表面分子CD3、CD4、CD8、CD25和CD28。结果检测结果显示:CD3检测,佐剂DNA组高于裸DNA组,在第10天有显著性差异(P<0.05);CD8检测,佐剂DNA组高于裸DNA组,在第10、20天均有显著性差异(P<0.05),裸DNA组也高于两对照组,但仅在第20天有显著性差异(P<0.05);CD25检测,裸DNA组高于NS组,但仅在第10天有显著性差异(P<0.05),佐剂DNA组高于裸DNA组,也仅在第20天有显著性差异(P<0.05);CD4及CD28检测,佐剂DNA组高于裸DNA组,在第10、20天均有显著性差异(P<0.05);在第10、20天各脾淋巴细胞膜表面分子检测,佐剂DNA组高于两对照组,有显著性差异(P<0.05)。结论 CJ pcDNA3.1(-)-peb1A疫苗能够有效地诱导T细胞活化增殖。     

RANTES在HPV感染的子宫颈鳞癌及癌前病变中的表达

目的 探讨趋化因子RANTES在人乳头瘤病毒(HPV)感染的子宫颈鳞癌及癌前病变中的表达.方法 用免疫组化方法 对133例HPV阳性病例子宫颈组织中趋化因子RANTES进行检测.其中正常子宫颈组织10例,子宫颈上皮内瘤变Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级各30例,子宫颈鳞癌33例.结果 RANTES在子宫颈鳞癌组的阳性表达率较CIN组和正常对照组显著增高(P<0.01),其阳性表达强度亦较CIN组和正常对照组显著增高(P<0.01).CIN组内的阳性表达率和阳性表达强度随分级升高而增高,且各组之间比较差异均具有统计学意义(P<0.05);CINⅢ组的阳性表达率和阳性表达强度较正常对照显著增高(P<0.05);CINⅠ、Ⅱ与正常组比较其阳性表达率和阳性表达强度均无统计学意义(P>0.05).结论 RANTES与HPV感染的子宫颈鳞癌及癌前病变密切相关.     

CEA 迷你基因串联体疫苗的体内抗肿瘤活性观察

目的:观察已构建的含有CEA625-667 基因单倍体疫苗pcDNA-CEA625-667 及三串联体的DNA 疫苗pcDNA-triCEA625-667 对荷瘤小鼠体内肿瘤的抑制情况及小鼠存活时间的改变。方法:建立小鼠肝细胞癌实验动物模型,应用单倍体疫苗pcDNA-CEA625-667 及三串联体DNA 疫苗pcDNA-triCEA625-667 免疫小鼠,以生理盐水为对照组,观察各实验组小鼠皮下肿瘤生长情况,记录皮下肿瘤生长曲线,观察疫苗对荷瘤小鼠肿瘤生长速度的影响以及疫苗对荷瘤小鼠生存时间的影响。结果:与生理盐水对照组相比,两种疫苗均能明显抑制CEA 阳性荷瘤小鼠的肿瘤体积以及生长速度(P <0.01),其中,pcDNA-triCEA625-667 疫苗组的抑制作用明显优于pcDNA-CEA625-667 疫苗组(P<0.01),而二者均不能抑制CEA 阴性荷瘤小鼠的肿瘤生长。pcDNA-CEA625-667 疫苗组平均生存时间为(48.50±6.73)d,与生理盐水对照组(39.00±6.64)d 相比有显著差异(P<0.01);pcDNA-triCEA625-667 疫苗组生存时间(48.50依6.73)d 明显高于生理盐水对照组和pcDNA-CEA625-667 疫苗组(P<0.01)。两组疫苗均不能延长CEA 阴性荷瘤小鼠的生存时间。结论:无论是单倍体还是三串联体的DNA 疫苗,均能够明显抑制CEA 阳性荷瘤小鼠的肿瘤生长速度(P<0.01)及明显延长其生存时间(P<0.01),而对CEA 阴性荷瘤小鼠则无治疗作用。