大鼠腹主动脉瘤形成过程中T细胞及CD4+CD28-T细胞的动态变化及意义

目的 探讨T淋巴细胞及其亚群在腹主动脉瘤发病中的作用.方法 50只Wistar大鼠随机分成A、B、C、D、E5组,每组10只,A组为正常对照组,B、C、D、E组分别为术后3、7、14、28 d组,运用猪胰弹力酶灌注法建立腹主动脉瘤模型.免疫组化方法检测上述各组大鼠腹主动脉局部T、B淋巴细胞及巨噬细胞的表达水平,流式细胞术检测各组大鼠外周血中CD4+ CD28-T淋巴细胞亚群的分布变化.结果 大鼠腹主动脉局部T、B淋巴细胞及巨噬细胞表达的变化:术后7dT细胞显著升高(40±15,P＜0.05),B细胞及巨噬细胞有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05);术后14 d,3种细胞表达升高最为显著(P＜0.05);术后28 d,3种细胞的表达较术后14 d明显下降.术后各组大鼠外周血CD4+、CD28-T细胞均有升高(P＜0.05),以术后7d比例最高(8.1％±2.1％,P＜0.05).结论 T淋巴细胞是腹主动脉瘤形成过程中最重要的炎症细胞之一,T淋巴细胞的浸润及其亚群分布变化所致的免疫及炎症反应在腹主动脉瘤形成早期可能起着重要的触发及调节作用.     

动脉粥样硬化患者外周血CD4 T 细胞及CD4+CD25highCD127- 调节性T 细胞的变化

目的：探讨动脉粥样硬化（AS）患者外周血CD4 T细胞及调节性T细胞（CD4+CD25highCD127- Treg）比例及功能的变化。 方法：选择AS患者（AS组）及健康体检者（健康对照组）各40例,抽取外周静脉血,用流式细胞术测定CD4 T细胞、CD8 T细胞、IFN-γ+ CD4 T细胞、IFN-α+ CD4 T细胞和CD4+CD25highCD127- Treg细胞比例,以及各自的CD4+CD25highCD127- Treg细胞与CD4 T细胞共培养后,CD4 T细胞增殖能力以及CD4 T细胞分泌炎症因子能力的变化。 结果：与健康对照组比较,AS组外周血CD4 T细胞比例及CD4 T/CD8 T比值明显升高、IFN-γ+ CD4 T及IFN-α+ CD4 T细胞比例明显升高（均P<0.05）,而CD8 T细胞比例与CD4+CD25highCD127- Treg细胞比例差异无统计学意义（均P>0.05）。健康对照组CD4 T细胞的增殖能力、IFN-γ及IFN-α分泌能力在与CD4+CD25highCD127- Treg细胞共培养后较其单独培养均明显降低（均P<0.05）,而AS组CD4 T细胞的以上指标在与CD4+CD25highCD127- Treg细胞共培与单独培养间差异均无统计学意义（均P>0.05）。 结论：AS患者外周血CD4+CD25highCD127- Treg细胞功能的丧失,导致外周血CD4 T细胞比例升高、分泌炎症因子能力增强,从而引发AS的炎症状态。     

乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平的检测及意义

目的：探讨乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（Treg）水平检测的意义。 方法：流式细胞术检测74例乳腺癌患者与30例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞百分比,分析CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与乳腺癌患者临床病理特征及相关免疫组化指标的关系。 结果：乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞的百分比高于健康对照者[（9.15± 2.24）% vs.（2.29±1.36）%],差异有统计学意义（P<0.05）。统计分析显示,乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与肿瘤组织学分级、淋巴结转移、pTNM分期以及HER-2、pS2、nm23的表达有关（均P<0.05）,而与肿瘤大小、病理类型以及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、p53、Ki-67表达无关（均P>0.05）。进一步相关性分析显示,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与肿瘤组织学分级、淋巴结转移数、pTNM分期、HER-2的表达呈正相关（r=0.583,r=0.333,r=0.919,r=0.604,均P<0.05）而与pS2、nm23表达呈负相关（r=-0.229,r=-0.401,均P<0.05）。 结论：乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平升高,并与与乳腺癌的进展、转移密切相关,对其检测可能有助于患者预后及治疗效果的评估。

     

肝癌患者CD8+CD28-Foxp3+调节性T细胞的变化及意义

目的:探讨肝癌患者外周血和癌组织中CD8~+CD28~-Foxp3~+调节性T细胞(CD8~+CD28-Foxp3~+Tregs)的改变及意义。方法:采用流式细胞仪检测72例肝癌患者和22例健康对照人群外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+T细与CD8~+T细胞比值(CD8~+CD28-Foxp3~+Tregs/CD8~+T),分析CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T与肝癌患者临床病理因素的关系;分别用免疫组化和Western blot检测肝癌患者癌组织及癌旁组织中Foxp3阳性细胞与Foxp3蛋白表达水平。结果:与健康对照人群比较,肝癌患者外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T明显升高(P0.05);外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T与患者TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关(均P0.05);肝癌组织中平均Foxp3阳性细胞数与Foxp3蛋白表达量均明显高于癌旁组织(均P0.05);外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T,肝癌组织Foxp3阳性细胞数与Foxp3蛋白表达量在高、中、低分化的肝癌中均呈依次升高趋势,但差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs在肝癌患者外周血及癌组织中增多,可能与肿瘤免疫抑制作用有关,其检测对肝癌患者病情有一定评估价值。     

兔腹主动脉瘤模型的建立

目的：探讨一种简便、成功率高的兔腹主动脉瘤（AAA）模型建立的方法。
方法:健康雄性新西兰大白兔20只,随机分为实验组和对照组（各10只）,实验组应用CaCl2浸润法建模,对照组应用生理盐水浸润法。6周后观察两组动物腹主动脉扩张率、大体形态学及显微病理改变。
结果:实验组兔腹主动脉直径扩张至（124.12±8.11）%,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）。实验组腹主动脉的病理改变为中膜弹性纤维组织严重破坏,平滑肌细胞减少。
结论:CaCl2溶液浸润法制作兔AAA模型简单可行,为AAA的实验性治疗研究提供一种合适的造模方法。

     

腹主动脉瘤患者T淋巴细胞Fas系统功能的研究

目的 通过分析Fas诱导的外周血活化T淋巴细胞的凋亡来评价腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm,AAA)患者Fas系统的功能. 方法采用细胞培养方法,应用Fas单克隆抗体激活Fas通路,分析20例AAA患者和15例腹主动脉硬化闭塞症(aortic atherosclerotic occlusive disease,AOD)患者以及25例正常人外周血T淋巴细胞Fas系统的功能,并计算细胞的存活率和死亡率. 结果 AOD组和正常人组中Fas诱导的活化T细胞发生很强的凋亡反应,而AAA患者组则不明显.AAA组细胞存活率(98.9%±10.3%)明显高于AOD组(58.9%±15.2%)和正常人组(59.4%±12.9%,P＜0.01).该结果与采用FICT-Annexin-V和propidium iodide染色及流式细胞仪检测分析细胞凋亡的结果一致.T细胞Fas功能的缺陷并不是Fas表达减少所致,而且这种功能缺陷具有Fas特异性,因为采用甲基强的松龙均可诱导细胞凋亡.结论 AAA患者T淋巴细胞中存在Fas系统功能缺陷,这种缺陷可能是主动脉瘤发展的重要影响因素.     

重症急性胰腺炎患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞的动态变化研究

目的 动态观察重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)患者外周血CD4+CD25 high调节性T细胞(Treg)和Foxp3及细胞因子IL-10、IFN-γ及IL-4的变化,探讨其临床意义.方法 将2008年8月-2009年6月收治的42例SAP患者根据病程的变化分为3期:Ⅰ期(全身炎症反应综合征期即SIRS期);Ⅱ期(SIRS下调期);Ⅲ期(感染相关并发症期).对照组为同期住院的38例急性轻型胰腺炎(MAP)患者.分别抽取外周血,以流式细胞仪检测Treg及Foxp3百分率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测IFN-γ、IL-4及IL-10的水平,并对以上指标进行相关性分析.结果 Treg百分率和IL-4水平在SAP Ⅰ期开始升高(Treg:1.37%±1.12%;IL-4:22.92±4.17),Ⅱ期高于Ⅰ期(Treg:3.12%±1.21%;IL-4:35.42±12.50),Ⅲ期升至最高(Treg:4.47%±1.04%;IL-4:76.04±14.58);IFN-γ水平在SAP Ⅰ期最高(978.57±213.29),Ⅱ期降低(571.43±157.14),在Ⅲ期降至最低(357.14±150.00);各期相比差异有统计学意义(P＜0.05),且均明显高于对照组(P＜0.05).Treg比例与IFN-γ水平负相关(r=-0.895,P＜0.01),与IL-4水平正相关(r=0.813,P＜0.01).结论 Treg可能通过抑制IFN-γ的分泌及促进IL-4的产生,对抗过度炎症反应对机体造成的损害.     

腹主动脉瘤患者腔内血栓厚度及外周血中同型半胱氨酸与C反应蛋白浓度的临床意义及相互关系

目的：探讨腹主动脉瘤（AAA）患者瘤腔内血栓（ILT）厚度及外周血中同型半胱氨酸（Hcy）与C反应蛋白（CRP）浓度的临床意义及相互关系。方法：选取2014年1月—2015年12月年间收治的AAA患者60例,以ELISA法测定外周血中Hcy浓度和CRP浓度,影像学方法测定ILT厚度。分析ILT厚度与临床因素的关系,以及ILT厚度、Hcy、CRP之间的相互关系。结果：厚ILT（厚度≥7.8 mm）患者的高血压史比例、Hcy和CRP浓度明显高于薄ILT（厚度<7.8 mm）患者（均P<0.05）;相关分析显示,Hcy浓度与ILT厚度（r=0.942）、ILT厚度/AAA最大直径比值（r=0.844）、AAA最大直径（r=0.505）均呈明显正相关（均P<0.05）,而CRP浓度与其他因素间均无相关（均P>0.05）。结论：ILT厚度、外周血Hcy与CRP浓度均可能是AAA进展的危险因素,且ILT厚度与Hcy浓度之间可能存在相互促进的关系。

     

贝那普利抑制家兔腹主动脉瘤形成的实验研究

目的观察贝纳普利干预对家兔腹主动脉瘤(AAA)形成的影响并探讨其可能机制。方法将雄性家兔24只按灌注液(盐水,弹力蛋白酶,弹力蛋白酶+贝纳普利)随机分为3组,观察灌注后各组腹主动脉的形态学变化;行HE染色及VG弹力染色观察其组织学改变;用Western Blot法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达;RT-PCR检测MMP-9的mRNA的表达;明胶酶谱法检测MMP-9的活性。结果术后7d,3组腹主动脉平均扩张率分别为7.50%(盐水灌注组,A组),120.62%(弹力蛋白酶灌注组,B组),39.20%(贝纳普利干预组,C组)。C组均未形成腹主动脉瘤,其中层弹力纤维含量及结构完整性优于B组(P0.01),且血管壁炎症细胞浸润减少。B组MMP-9表达及活性增强,C组MMP-9蛋白及mRNA表达明显减弱(P0.01),其活性亦明显降低(P0.01)。结论贝纳普利能显著抑制家兔AAA模型形成;其机制可能与抑制炎症浸润,多水平下调细胞外基质降解,保存弹力纤维有关。     

骨保护素在腹主动脉瘤中的表达及作用

目的：探讨骨保护素（OPG）的表达在腹主动脉瘤（AAA）形成中的作用。方法：收集20例AAA组织和6例正常腹主动脉组织,用补片法构建兔AAA动物模型（18只AAA模型动物分别于造模后7,21,35 d取材,以6只假手术兔为对照）。用免疫组化法检测OPG在人AAA组织与正常腹主动脉组织中的表达;Western blot和RT-PCR法检测上述组织以及动物模型AAA组织中OPG、基质金属蛋白酶9（MMP-9）蛋白及mRNA的表达;末端转移酶标记（TUNEL）法观察动物模型AAA组织中膜血管平滑肌细胞（VSMC）的凋亡情况。结果：免疫组化显示,人AAA组织中OPG蛋白表达量较正常腹主动脉组织增加,且随AAA直径的增大而增加,在破裂性AAA组织中表达量最高。Western blot和RT-PCR结果显示,OPG与MMP-9蛋白及mRNA的表达在人AAA组织及动物模型AAA组织组均较各自的对照组明显升高（P<0.05）,且两者的蛋白与mRNA表达水平均随瘤体直径的增加或造模时间的延长而逐渐增加。TUNEL染色显示模型组VSMC凋亡细胞较对照组明显增加,且随造模时间延长有增加趋势（P<0.05）。结论：OPG表达水平与AAA的发生发展密切相关,机制可能与其促进MMP的表达和诱导VSMC凋亡有关。

     

腹主动脉瘤开放和腔内治疗的合理选择

对腹主动脉瘤（AAA）的治疗,目前以开放手术及血管腔内修复术为主。如何选择合理的术式使患者得到更快且更安全的康复,是目前关注的焦点问题。笔者就两种方法的手术适应证、术前评估、并发症、病死率、生存率及成本效益进行对比,阐述了选择合理的术式的重要性,指出：目前既要不断提高血管腔内技术,也不能放弃传统的开放手术,应当根据自身技术水平及具体条件,严格掌握手术指征,本着为患者谋求最大治疗效果的目的客观地评价及选取最有利于患者的手术方式。

     

结肠癌患者外周血 CD4+ CD25+调节性 T细胞检测的临床意义

目的 探讨结肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞检测的临床意义。方法采用流式细胞技术对51例结肠癌患者和30例健康体检者外周血淋巴细胞CD4及CD25进行了检测。结果（1）结肠癌组CD4^＋CD25^＋细胞明显高于正常对照组（P〈0．05），CD4^＋CD25^＋细胞则显著低于正常对照组（P〈0．05）；（2）结肠癌组手术后患者CD4^＋CD25^＋、CD4^-CD25^＋细胞与手术前相比显著下降（P〈0．05）；（3）结肠癌组淋巴结转移患者CD4^＋CD25^＋细胞明显高于未转移组（P〈0．001）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数可以反映肿瘤患者免疫系统存在抑制状态，且可能与肿瘤的免疫耐受有关，并可反映肿瘤淋巴结转移状况。     

破裂型腹主动脉瘤开放手术围手术期并发症防治要点

破裂型腹主动脉瘤（rAAA）起病急、病情重、病死率高,目前开放手术依然是处理rAAA的基本术式。笔者从诊断、术中注意事项和术后治疗3个方面论述rAAA开放手术围手术期并发症防治措施,指出：rAAA并发症需防治并重,“防”之重点在于提高诊断效率,减少失血量,术中缩短阻断时间并维持血流动力学稳定;“治”之要点在于早期发现,明确病因,对因治疗,避免诱因,改善症状。

     

弹力蛋白酶加压灌注建立腹主动脉瘤大鼠模型方法的改进

目的：建立成功率高、符合人腹主动脉瘤（AAA）病理生理特点的大鼠AAA模型。方法：将20只SD大鼠随机均分为模型组和对照组,模型组通过左髂总动脉插管,行肾下腹主动脉节段猪胰弹力蛋白酶加压灌注（期间行一系列方法上的改进）,对照组以同样的方式接受生理盐水灌注。于术前、术后7,14 d通过彩色超声诊断仪检测两组灌注段腹主动脉尺寸,并于术后14 d取灌注段腹主动脉标本行弹力纤维染色。结果：术后7,14 d超声检测显示,对照组灌注段腹主动脉大小与术前比较无明显变化,模型组灌注段腹主动脉明显增大,模型成功率100%;术后14 d,模型组大鼠灌注段腹主动脉横截面积为术前的（5.17±0.61）倍,而对照组为（1.03±0.09）倍,两组差异有统计学意义（P<0.001）。弹力纤维染色显示,模型组血管中层弹力组织明显破坏,动脉壁弹性纤维相对含量明显低于对照组（P<0.001）。结论：通过改进方法,建立了成功率高,病理特征典型的大鼠AAA模型,为开展AAA的基础研究提供了良好稳定的实验模型。

     

腔内修复术与开腹手术治疗腹主动脉瘤围手术期疗效的Meta分析

目的：系统评价方法比较血管腔内修复术与开腹术手术治疗腹主动脉瘤（AAA）的围手术期疗效。方法：检索国内外文献数据库,收集血管腔内修复术与开腹术手术治疗AAA的随机对照试验,采用RevMan5.1软件进行Meta分析。结果：共纳入7个随机对照试验,8篇文献,共2 807例患者,其中行血管腔内修复术1?433例（腔内组）,开腹手术1 374例（开腹组）。Meta分析结果显示,腔内组较开腹组手术时间减少（SMD=-0.87,95% CI=-1.43--0.31,P=0.002）,术中输血量减少（SMD=-0.83,95% CI=-0.94--0.72,P<0.00001）,ICU监护时间缩短（MD=-38.11,95% CI=-48.61--27.61,P<0.00001）,术后住院时间缩短（MD=-5.11,95% CI=-6.26--3.95,P<0.00001）,术后30 d病死例数降低（OR=0.30,95% CI=0.16-0.55,P=0.0001）。结论：腔内修复治疗AAA较开腹手术具有创伤小、失血少、术后恢复快的优点,围手术期具有较大优势,但长期预后有待研究。

     

肾移植患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的观察肾移植患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的变化，探讨其在诊断移植肾急性排斥反应中的作用。方法采用流式细胞仪检测26例肾移植患者及30例正常对照组外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平。结果①慢性肾衰竭患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。②非排斥组移植后1、2、4、8周CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显高于移植前（P〈0．01）。③急性排斥组排斥反应主要发生在术后第7～21d，其CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平明显低于同期的非排斥组（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平的测定可以作为肾移植患者移植后急性排斥反应诊断和预测预后的重要指标。     

胃癌患者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与TGF-β1检测的意义

目的:探讨胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Tergs)以及血清TGF-β1水平的变化及意义。方法:检测并比较42例胃癌患者(胃癌组)与24例健康体检者(对照组)外周血CD4+CD25+Foxp3+Tergs与血清TGF-β1水平,分析两者水平与胃癌患者临床病理因素的关系。结果:胃癌组CD4+CD25+Foxp3+Tergs和TGF-β1水平均明显高于对照组(均P<0.05)。胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tergs水平与TNM分期、淋巴结转移有关(均P<0.05),而血清TGF-β1的表达水平与TNM分期、分化程度、淋巴结转移有关(均P<0.05);胃癌组患者外周血内CD4+CD25+Foxp3+Tergs的表达水平与血清内TGF-β1的表达水平呈明显正相关(r=0.801,P<0.05)。结论:胃癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tergs水平及血清TGF-β1水平升高,检测两者水平有助于患者病情与预后的判断。     

破裂性腹主动脉瘤的急救及围手术期危险因素：附27例报告

目的:探讨破裂性腹主动脉瘤(r AAA)的急救经验及围手术期危险因素。方法:回顾性分析2007年1月—2015年9月间救治的27例r AAA患者的临床资料,其中男20例,女7例;中位年龄72岁;18例行开腹手术,6例腔内治疗(包括1例行杂交手术)。总结诊治过程、围术期情况及随访结果,并分析影响预后的因素。结果:术前死亡3例,术中死亡1例,术后死亡9例,术后死因有急性肾衰、急性呼衰、腹腔间隔室综合征、心肌梗塞、消化道出血,最终均出现多器官功能衰竭。总体抢救成功率为51.9%(14/27),开腹手术和腔内治疗成功率分别为50.0%(9/18)和83.3%(5/6)。围术期存活和死亡患者间的临床参数比较显示,发病到就诊时间、术前收缩压、术前肌酐、术中出血量及输血量、术中尿量的差异有统计学意义(均P0.05)。结论:r AAA病情危重,病死率高,尽早确诊后应紧急外科治疗控制出血,加强围术期管理。在r AAA的救治中,腔内治疗是一种有效的治疗手段。     

胃癌患者外周血调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞比例的变化及其临床意义.方法 采用流式细胞技术检测30例胃癌患者外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞玎分比,对照组为30例慢件胃炎患者.结果 胃癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为8.7%±1.3%,与胃炎患者相比差异无统计学意义.胃癌患者外周血中CD8+CD28-调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为30.3%±3.3%,明显高于胃炎患者的20.3%±2.7%.外周血中CD4+CD25+T淋巴细胞、CD8+CD28-T淋巴细胞百分比与胃癌淋巴结转移、病理分型无明显相关性.结论 外周血中调节性T细胞在胃癌发展中可能发挥一定作用.     

肝癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨应用流式细胞术检测肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义.方法 应用三色免疫荧光流式细胞仪测定37例肝癌患者及30例肝硬化患者外周血T细胞亚群CD4~+CD25~+/CD~+比值.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血中转化生长因子β1(TGF-B1)的表达水平.结果 肝癌患者外周血CD4~+CD25~+/CD4~+比值较肝硬化患者显著增高,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+T细胞水平与肝癌原发肿瘤的大小、TGF-βl呈正相关(P<0.05).结论 肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞增多,对肝癌患者具有免疫抑制作用.