激光共聚焦扫描显微镜观察变异链球菌高致龋力临床株与标准株合成胞外多糖能力差异

目的了解变异链球菌(简称变链菌)593号高致龋力临床分离株在生物膜状态不同时期与标准株ATCC25175(均为血清型c)合成胞外多糖的能力差异。方法在聚苯乙烯塑料片上分别形成3、12、20 h变链菌生物膜标本,采用异硫氰酸荧光素标记的伴刀豆球蛋白A对合成的胞外多糖进行染色,用激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)观察。采用静置法培养形成黏附生长的细菌,蒽酮法测定3～24 h其合成胞外多糖的量。结果胞外多糖与染料结合后发出绿色荧光,各时间段593号临床株绿色荧光的分布较ATCC 25175标准株更致密和广泛。3～20 h 593号临床株合成水溶性葡聚糖能力强于标准株(P<0.05);3～16 h 593号临床株合成水不溶性葡聚糖能力强于标准株(P<0.05);其他时间两者合成胞外多糖的能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论在生物膜形成过程中两菌株合成胞外多糖的模式相同,均随时间延长而合成量增加,但在生物膜形成早期(3～16 h)高致龋力临床株表现出不同于标准株的胞外多糖合成模式,其更强的合成胞外多糖能力可能是其具高致龋力的原因之一,提示研究致龋机制时使用临床株作为研究样本较标准株更为敏感。     

黏液性铜绿假单胞菌体外不同方法药敏试验的探讨

<正>铜绿假单胞菌是临床中常见的易形成生物膜的条件致病菌~([1])。细菌生物膜(bacterial biofilm,BBF)是细菌黏附于生物材料或机体腔道表面,分泌多糖蛋白复合物并将其自身包绕其中,形成大量细菌聚合体的膜状物~([2])。黏液型铜绿假单胞菌能在细菌表面形成一层生物被膜,对抗菌药物具有顽强抵抗性,而其生长速度较慢,24 h后接种的平板上难见到该细菌的菌落。使得K-B法药敏试验及最小抑菌浓度测定法(MIC     

不同材质导尿管对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响研究

目的研究不同材质导尿管对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响及不同物理方法对不同生长时期生物膜的清除效应.方法体外用平板法,经过7d孵育在4种导尿管材质膜片上均培养出生物膜模型.采用乳胶镀膜、硅胶镀膜、纯硅胶和红橡胶等不同材质导尿管的膜片制备铜绿假单胞菌生物膜,通过菌落计数法了解粘附于导尿管材生物膜内细菌菌落数量与材质的关系;用冲洗、冲洗 涡旋振荡、冲洗 超声振荡3种方法处理附有不同生长时期生物膜的导尿管,通过菌落计数法了解3种方法对不同生长时期生物膜的清除效应.结果以乳胶镀膜和硅胶镀膜所分离出的生物膜内细菌最多,分别为1.91×107CFU/cm3和1.20×107CFU/cm3;以纯硅胶上所分离的生物膜内细菌最少,菌落数为2.7×105CFU/m3,红橡胶上所分离的菌落数稍高于纯硅胶,为6.5×106CFU/cm3,四者两两比较,均有统计学差异(P＜0.001).不同处理方法结果表明,在生物膜形成的初期(2d),3种处理方法具有相同清除效应;但当生物膜趋于成熟后,单用冲洗方法难于将粘附细菌洗脱下来,3种方法的效应强弱顺序为:冲洗 超声＞冲洗 涡旋振荡＞冲洗.结论不同材质导尿管与铜绿假单胞菌形成生物膜的数量有一定关系,以纯硅胶和红橡胶尿管形成的生物膜数量较少,而乳胶镀膜和硅胶镀膜尿管形成生物膜数量较多.在生物膜形成初期,对导尿管一般冲洗能较彻底地清除粘附细菌.     

细菌生物膜在临床中的研究进展

细菌生物膜是细菌在生长过程中附着于物体表面而形成的由细菌细胞及其分泌的含水聚合性基质(主要为胞外多糖)等所组成的膜样多细菌复合体。生物膜是细菌适应生存环境而形成的与游走态细胞相对应的存在形式,它具有很强的抵抗机体免疫和抗生素的能力,在临床上形成难治性感染。结合近年来的研究成果,介绍了生物膜的形成、基因调控、检测,讨论了其致病和耐药的机制以及防治等方面的问题。     

钛合金与甲基丙烯酸脂义齿基托表面细菌粘附临床研究

目的 :比较钛合金与甲基丙烯酸脂义齿基托表面细菌粘附的差异性 .方法 :选择上、下颌均有牙列缺损患者 10例 ,用钛合金与甲基丙烯酸树脂作基托材料分别制作义齿各一件 .戴义齿 6个月后 ,对义齿基托的组织面、磨光面进行细菌培养 ,计算出菌落数 (cfu/mL) ,比较分析其差异性 .结果 :甲基丙烯酸脂基托组织面、磨光面菌落数大于钛合金基托 ,两者具有统计学差异 (P <0 0 5 ) .而同种材料间义齿基托组织面、磨光面菌落数则无显著差异 (P >0 0 5 ) .菌种鉴定以变形链球菌、G -杆菌为主 ,其次为乳杆菌和葡萄球菌 .粘液放线菌和奈瑟氏菌较少 ,白色念珠菌未检出 .结论 :钛合金作为基托材料优于甲基丙烯酸脂 ,能减少细菌粘附 ,有益于口腔组织健康 .同种材料的义齿基托组织面、磨光面对细菌粘附没有明显差异     

生物膜和抗生素治疗：新释药系统对细菌耐药的抗衡

形成粘附生物膜的细菌导致抗生素敏感性明显降低。生物膜形成过程中许多因素可作为新释药技术的靶点，包括修饰医疗器械表面以减少细菌粘附和形成生物膜，结合抗生素防止细菌毓，加电使器械表面释放抗生素或使抗生素穿透生物膜。其他方法不特别强调生物膜，包括用抗生素气溶胶送入肺部及以脂质体或聚合物为赋形剂的制剂。脂质体系统已广泛使用，使抗生素靶向细菌生物膜表面，或使其接近网状内皮细胞。现用于预防和治疗感染的有许多聚合物载体系统，包括可生物降解的聚合物，如聚乙交酯及热敏水凝胶等。     

不同生长形态绿脓杆菌胞外粘液多糖的含量及其意义

探讨不同形态录脓杆菌外粘多糖的含量及其对体外培养的肺癌细胞粘附能力的影响。方法在分离一株形态对培养温度敏感的绿脓杆菌基础上,提取潜生体与繁殖体粘液多糖,以干重比评价二者粘液多糖的含量;并测定其对体粘附的影响。结果潜生体胞外粘液多糖含量显著增加,同时其对体外培养细胞的也显著提高。     

ica操纵子对表皮葡萄球菌在不同骨科植入物表面黏附和生物膜形成的影响

目的 探讨ica操纵子对表皮葡萄球菌在骨科植入物表面黏附和生物膜形成能力的影响,为临床骨科材料的使用提供理论依据.方法 采用PCR扩增表皮葡萄球菌ica操纵子的icaADBC基因,荧光定量PCR检测ica操纵子基因的表达,苯酚-硫酸法检测细胞间多糖黏附素(PIA)的合成,黏附能力检测采用菌落平板计数法,生物膜形成能力检测采用结晶紫染色法.结果 11株表皮葡萄球菌临床菌株扩增出ica操纵子的icaADBC基因,且在菌株中均有表达.ica操纵子基因表达高的菌株其PIA分泌量较高.表皮葡萄球菌在骨组织上的黏附和生物膜形成能力最强,其次为钛合金和不锈钢.icaA基因表达与细菌在3种生物材料上的生物膜形成相关.结论 表皮葡萄球菌在不同骨科植入物上具有不同的黏附和生物膜形成能力,ica操纵子基因通过调节PIA分泌量而影响表皮葡萄球菌生物膜的形成.     

呼吸道生物被膜菌体外生长群感效应的研究

目的:观察体外细菌群感效应对呼吸道生物被膜菌的生物膜形成和铜绿假单胞菌色素产生的影响。方法:从呼吸道感染患者痰标本中分离铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌与肺炎链球菌,用改良平板法建立铜绿假单胞菌生物膜及上述混合菌的生物膜,观察两者形成生物膜的差别。用液体培养法观测混合菌对铜绿假单胞菌色素产生的影响。结果:铜绿假单胞菌单独培养需7 d可形成生物膜,与其他细菌混合培养48 h即可形成生物膜;肺炎链球菌与铜绿假单胞菌混合培养24 h可促进其绿色素的形成。结论:不同菌种之间的群感效应能改变细菌某些生物学性状。     

生物膜胞外聚合物研究进展

生物膜胞外聚合物是生物膜形成过程中由微生物产生,导致生物膜内细菌致病性增强的基础物质,在改变生物膜中微生物行为、毒力及耐药性等方面发挥着至关重要的作用.现对生物膜胞外聚合物的成分、结构、功能、研究方法及针对胞外聚合物的生物膜感染治疗策略的进展做一综述.     

厚朴活性成分对致龋菌生长和产酸影响的体外研究

目的 研究厚朴活性成分对口腔致龋菌生长、代谢的影响.方法 利用MBECTM-Device研究厚朴酚及和厚朴酚对5种主要致龋菌生长和代谢的影响,测定药物对细菌的最小抑菌浓度(MIC)和细菌生物膜的最低清除浓度(MBEC),并在低于MIC的药物浓度下观察其对致龋菌产酸能力的影响.结果 厚朴酚及和厚朴酚对5种口腔浮游细菌及生物膜细菌均有良好的抑制作用,并对实验细菌产酸也有不同程度的抑制.结论 厚朴活性成分可影响致龋菌生长代谢,可能是一种天然防龋药物,值得进一步深入研究.     

天然药物对粘性放线菌生长和产酸影响的体外研究

目的 研究不同天然药物对粘性放线菌生长及产酸的影响。为筛选能有效调理口腔菌群生态平衡的药物奠定基础。方法 选用粘性放线菌标准株ATCC19246作为实验菌株，测定川芎，血藤和五倍子等十一种天然药物的最低抑菌浓度（MIC），再以低于MIC的4个浓度配制含药的TPY液体培养基，调定其初始pH为7.4，接种粘性放线菌，厌氧培养后测定其终末pH。结果 当药物浓度低于或等于8.000mg/ml时，除三七外，其他药物对粘性放线菌的生长都有一定的抑制作用。且以槟榔和蜂房较强，茶多酚，三七、大黄、蜂房和血藤对粘性放线菌的产酸具有一定的抑制能力。而黄芩、槟榔，川芎、五倍子，白芷和儿茶没有明显的抑制作用。结论 茶多酚、大黄、蜂房和血藤对粘性放线菌的生长和产酸都有一定的抑制作用。     

天然药物对粘性放线菌生长和产酸影响的体外研究

目的　研究不同天然药物对粘性放线菌生长及产酸的影响 ,为筛选能有效调理口腔菌群生态平衡的药物奠定基础。方法　选用粘性放线菌标准株 ATCC 192 46作为实验菌株。测定川芎、血藤和五倍子等十一种天然药物的最低抑菌浓度 (MIC)。再以低于 MIC的 4个浓度配制含药的 TPY液体培养基 ,调定其初始 p H为 7.4,接种粘性放线菌 ,厌氧培养后测定其终末 p H。结果　当药物浓度低于或等于 8.0 0 0 mg/ ml时 ,除三七外 ,其他药物对粘性放线菌的生长都有一定的抑制作用 ,且以槟榔和蜂房较强。茶多酚、三七、大黄、蜂房和血藤对粘性放线菌的产酸具有一定的抑制能力 ,而黄芩、槟榔、川芎、五倍子、白芷和儿茶没有明显的抑制作用。结论　茶多酚、大黄、蜂房和血藤对粘性放线菌的生长和产酸都有一定的抑制作用     

蜂房提取物对三种口腔常驻细菌产酸影响的体外研究

目的研究蜂房提取物对三种口腔常驻细菌产酸的影响。方法选用变形链球菌ATCC25175,血链球菌ATCC10556,粘性放线菌ATCC19246,测定蜂房四个化学组分的最低抑菌浓度MIC。再以低于MIC的4个浓度配制含药的TPY液体培养基,测定蜂房各化学组分对上述三种细菌产酸能力的影响,动态监测蜂房化学组分对变形链球菌产酸的影响。结果蜂房各化学组分对上述三种细菌的生长有一定的抑制作用,并且蜂房组分NVE1、NVE3、NVE4对变形链球菌、血液链球菌、粘性放线菌产酸均有显著的抑制作用。而蜂房组分NVE2对变形链球菌和血液链球菌的产酸未见明显的抑制作用,NVE2的高浓度组能够抑制粘性放线菌的产酸,动态pH监测显示,蜂房组分NVE1能够明显抑制变形链球菌的产酸,而NVE2则无此作用。结论蜂房各化学组分对三种口腔常驻细菌的产酸都有一定的抑制作用,其抑龋作用的物质基础及药理作用机制尚待进一步研究。     

对氨基苯甲酸对粘性放线菌表面疏水性的影响

目的　研究血链球菌合成的生态调节因子——对氨基苯甲酸 ( PABA)对粘性放线菌细胞表面疏水性的影响 ,进一步了解 PABA影响细菌粘附的机制。方法　在含不同浓度 PABA( 10 - 9g/ L、10 - 7g/ L、10 - 4 g/ L)的改良Carlsson液体培养基中厌氧培养粘性放线菌 ,并采用微生物粘着碳氢化合物法 ( MATH)测试细胞表面疏水性。结果　随着培养基中 PABA浓度的增高 ,粘性放线菌细胞表面疏水性随之逐渐降低 ,其疏水率分别为 0 .3 890 0±0 .0 0 0 2 6,0 .2 5 462± 0 .0 0 168,0 .163 60± 0 .0 0 0 2 6( P均 <0 .0 5 )。结论　 PABA可能通过降低细菌非特异性疏水作用而抑制粘性放线菌的粘附     

纳米TiO2-xNx薄膜的制备及抗菌性能分析

目的利用TiO2的抗菌特性,开发一种能够应用于口腔的无机抗菌材料。方法采用射频磁控溅射法在医用不锈钢表面制备TiO2-xNx薄膜,用XRD、SEM、EDS等测试手段表征薄膜的结构、形貌、组成,并通过覆膜法利用口腔常见致病菌考察TiO2-xNx薄膜的抗菌性能。结果纳米TiO2-xNx抗菌薄膜为锐钛矿相结构,氮元素质量比为0.13%,表面结构均匀致密,对变形链球菌、粘性放线菌及白色念珠菌的抗菌率分别为97.79%、49.42%和96.84%。结论纳米TiO2-xNx抗菌薄膜对口腔常见致病菌具有较强的抗菌效果,可作为一种新型抗菌剂应用于口腔临床。     

黄芩对三种主要致龋菌生长、产酸及产胞外多糖的影响

目的　通过研究黄芩对致龋菌生长、产酸及产胞外多糖的影响 ,探讨黄芩是否能有效调节口腔菌群生态平衡。方法　首先测定黄芩对三种主要致龋菌——变形链球菌、粘性放线菌和血链球菌的最低抑菌浓度(MIC) ,再以低于 MIC的 4个浓度配制含药的 TPY液体培养基 ,测定黄芩对上述三种细菌产酸及产生水不溶性多糖能力的影响。结果　黄芩对上述三种细菌的生长有一定的抑制作用。黄芩还能够有效抑制血链球菌、粘性放线菌产生水不溶性葡聚糖。结论　上述结果提示 ,黄芩有可能是一种潜在的天然防龋药物 ,值得进行更深入的研究。     

Effect of para-aminobenzoic acid on the growth of Actinomyces viscosus]

OBJECTIVE: To examine the effects of para-aminobenzoic acid (PABA) on the growth of Actinomyces viscosus. METHODS: Different concentrations of PABA (10(-10)-10(-3) g/L) were each transferred to modified Carlsson medium. Actinomyces viscosus ATCC19246 grew in them. And the cultures were incubated at 37 degrees C anaerobically in the atmosphere of 80%N2, 10%H2, 10%CO2 for 48 h. Actinomyces viscosus OD values (lambda = 540 nm) were obtained with UV-1601. Colony forming unit (CFU) was established by growth of Actinomyces viscosus in culture when different concentrations of PABA (10(-10)-10(-3) g/L) were present. RESULTS: Different concentrations of PABA (10(-10)-10(-4) g/L) had different stimulating effects on the growth of Actinomyces viscosus (P < 0.05). But this kind of stimulating effect declined when PABA concentration was 10(-5) g/L, and as PABA (10(-3) g/L) was present, this kind of effect was missing. CONCLUSION: The phenomena indicated that PABA has stimulating effect on the growth of Actinomyces viscosus, particularly when PABA is at the concentration of 10(-6) g/L.     

酪蛋白磷酸肽钙磷复合体对黏性放线菌黏附影响的实验研究

目的：研究酪蛋白磷酸肽钙磷复合体（casein phosphopeptide-amorphic calcium phosphate,CPP-ACP）对黏性放线菌黏附的影响,进一步探讨CPP-ACP的防龋机制。方法：采用唾液包被的羟磷灰石（saliva-coated hydroxyapatite,S-HA）形成实验性膜的体外黏附实验模型,用不同浓度（0.5%～5.0%（W/V））CPP-ACP处理S-HA,定量观察黏性放线菌在S-HA上的黏附情况。结果：黏性放线菌对经各实验浓度的CPP-ACP处理后的S-HA黏附能力明显下降,黏附量（CPM）随CPP-ACP浓度的升高而降低,且黏附抑制率均达100%。结论：CPP-ACP对黏性放线菌在S-HA上的黏附具有抑制作用,随CPP-ACP浓度的升高其抑制作用增强。     

不同提取方法的紫地榆提取物对常驻口腔细菌的研究

摘要：目的  研究不同方法提取紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分对变形链球菌、黏性放线菌和血链球菌生长及产酸的影响。方法  首先分别测定不同方法提取的紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）,再以低于MIC的4个浓度配制含药的胰酶解酪蛋白-植物蛋白胨-酵母提取物液体培养基,测定紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分对3种常驻口腔细菌产酸的影响。结果  热提的紫地榆正丁醇部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的MIC分别为3.0、3.0和6.0 g/L,MBC分别为6.0、6.0和12.0 g/L。热提的紫地榆乙酸乙酯部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的MIC均为6.0 g/L,MBC均为12.0 g/L。冷提的紫地榆正丁醇部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的MIC均为6.0 g/L,MBC均为12.0 g/L。冷提的紫地榆乙酸乙酯部分对变形链球菌、黏性放线菌及血链球菌的MIC均为6.0 g/L,MBC均为12.0 g/L。一定浓度的紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分对3种常驻口腔细菌的产酸有一定的抑制作用,但提取方法的不同对其抑制产酸的能力差异无统计学意义。结论  紫地榆正丁醇部分和乙酸乙酯部分能有效抑制口腔致龋菌的生长和产酸,可能是一种潜在的天然防龋药物。