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GM1激活环核苷酸磷酸二酯酶的作用 总被引:2,自引:0,他引:2
神经节苷脂GM1能激活CaM依赖性环核苷酸磷酸二酯酶,其AC为50为1.56μg/ml,这种作用并不一定依赖Ca^2+的存在,在有Ca^2+存在时,GM1对PDE的最大激活活性低于CaM,仅为CaM的80.4%;没有Ca^2+存在时,GM1与CaM对PDE有同样的最大激活活性。 相似文献
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神经节苷脂(Gangliosides)对人红细胞膜Ca^2+—Mg^2+ATPase的影响 总被引:2,自引:1,他引:1
神经节苷脂(Gangliosides)是红细胞膜Ca^2+-Mg2+ATPase的一种激活剂,这种激活作用也是依赖于Ca^2+存在。在200μmol/L Ca^2+存在的反应体系中,100μg/mL Gangliosides对Ca^2+-Mg^2+ATPase的激活作用最大,为基本酶活性的150%以上。实验还发现CaM拮抗剂三氟嗪(TEP)、粉防已碱(Tet)等也同样抑制Gangliosides的 相似文献
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用PAGEA活性染色分析了D.radiodurans过氧化氢酶(Cat)和起氧化物歧化酶(SOD)。2种同种异型D.radiodurans(R1和Sark)的Cat在电泳带型上存在差异,两者Kat均可分为A、B和C3条带,但各带所占比例明显不同,SOD的分析结果表明,D.radiodurans SOD以Fe^2+和Mn^2+离子的嵌合体形式存在,其中Fe-SOD成分占90%以上。PAGE活性染色法 相似文献
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夏威环毛蚓纤溶酶的分离纯化及部分性质研究 总被引:6,自引:0,他引:6
以夏威环毛蚓(Pheretima hawayana)为材料,采用磷酸盐缓冲液抽提、(NH4)2SO4分段盐析,离子交换树脂 D290、 Sephadex G-100和 DEAE-sephadex A-50三种连续柱层析方法得到一种在 PAGE上显示单一区带的纤溶酶组份。采用凝胶柱层析和 SDS-PAGE测其分子量为 12 000和 12300,由一条肽链组成。该酶具有强烈的纤溶活力和水解BAEE的活力,能直接作用纤维蛋白和间接激活纤溶酶原。其最适反应温度为45℃,最适反应pH为8.0。该酶水解BAEE的活力可被Na+、K+、Mg2+、Hg2+、金属离子和EDTA、巯基乙醇抑制,Ca+则有激活作用。该酶中性糖含量为5%,氨基酸组成中Arg、Len含量较多. 相似文献
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报道了弹性蛋白亲和层析分离弛化芳香黄杆菌产胞外弹性蛋白酶,经一步柱层析可获聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的酶制品,收率可达50%,并制备了酶的结晶。该酶在SDS-PAGE上测得分子量为21380,EF-PAGE测得等电点8.9最适作用温度为50℃,最适作用,PH为7.4在40℃以下热稳定性良好,PH4.5-9.5范围内稳定,重金属离子Fe^3+,Zn^2+,Co^2+,Hg^2+,Ni^2+Ag^+,Cu 相似文献
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兔阑尾中一种新的21kD的钙结合蛋白的纯化与鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
纯化与鉴定了B淋巴细胞中一种新的分子量为21kD的钙结合蛋白(CaBP21)。兔阑尾淋巴细胞匀浆经热变性,Phenyl-Sepharose与DEAE-Sepharose柱层析,自每1kg细胞沉积物中获得SDS-PAGE均一的CaBP215.3mg。HCl水解后的酸性氨基酸(Asp+Glu)含量为26%。如同大多数钙结合蛋白一样,N末端封闭阻止其进行Edman降解。CaBP21中疏水性氨基酸(计Gly,不计Trp)约占46%,碱性氨基酸10%,酸性氨基酸与极性氨基酸约44%。CaBP21有较高的Ser、Tyr含量。肽谱分析等确证CaBP21为2个相同或相似亚基二聚体。以ArsenazoⅢ作Ca2+结合分析表明每分子CaBP21可结合4分子Ca2+,对Ca2+的结合常数约为10-5mol/L。各种性质表明CaBP21是一种不同于其他已知钙结合蛋白的新钙结合蛋白。 相似文献
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外源钙调素(CaM)对粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)细胞增殖的影响。实验结果表明外源CaM能明显抑制粟酒裂殖酵母细胞的增殖,其作用方式是延长了粟酒裂殖酵母细胞生长的延滞期,抗粟酒裂殖酵母CaM抗体,TFP及Phenyl-SepharoseCL-4B能降低CaM对细胞生长的抑制作用,而Ca^2+及Ca^2+螯合剂EGTA对CaM的抑制作用均无影响。以上结果提示,外 相似文献
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大熊猫乳酸脱氢酶同工酶H4的分离纯化和某些性质的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
采用8-(6-氨己基)-氨基-5-AMPSepharose亲和层分析法和DEAE-Sepharose离子交换层析法从大熊猫心肌中分离纯化出乳酸脱氢酶同工酶H4,纯化的大熊猫LDH-H4,比活为445U/mg蛋白,经SDS-PAGE,APGE,等电聚焦电泳鉴定均为一条带,其亚基分了量为36000,等电点为5.45。经测定大熊猫LDH-H亚基N端被封闭,C端氨基酸残基经测定为Leu。氨基酸组成分析表明 相似文献
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麻蝇幼虫肠道蛋白酶BGP的分离纯化及性质 总被引:1,自引:0,他引:1
棕尾别麻蝇幼虫肠液经SDS-PAGE后,X光片显影,呈现两条蛋白酶活性带.IEF后,两条蛋白酶活性带的等电点分别为pH7.7和6.8.麻蝇幼虫肠液经55%~75%硫酸铵沉淀,以及连续两次制备等电聚焦,分离纯化出等电点约为pH7.7,分子量约为35kD的蛋白酶BGP.该酶能分解酪蛋白和类胰蛋白酶专一底物Bz-Phe-Val-ArgNA,不能分解弹性蛋白酶专一底物elastin-CongoRed和类胰凝乳蛋白酶专一底物Suc(Ala)2Pro-PheNA.SBBI,Leupeptin和PMSF能强烈抑制其活性.专一底物和抑制剂的结果表明,BGP是一种类胰蛋白酶.其最适反应温度为50℃,最适作用pH为8.5.不耐高温,50℃保温30min活性急剧下降.Hg2+,Zn2+和Cu2+能抑制酶活性.Ca2+,Mg2+对酶无激活作用,EDTA无抑制作用. 相似文献
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中温碱性脂肪酶的研究:Ⅲ.扩展青霉PF868变株碱性脂肪酶的纯化及其… 总被引:8,自引:1,他引:7
扩展青霉PF868变株发酵液经硫酸铵盐析和Sephadex-G-200及Sepharose4B柱层析纯化,获得纯化倍数为32.4的酶粉。该酶分子量为23442Dal,酶学特性表明:该酶的最适作用温度为32℃,50℃保温30min仍保留50%酶活性,最适pH为9.0,作用pH稳定范围在7.0-10.0之间,Ca^2+和Mg^2+对酶有激活作用,Fe^2+,Cu^2+和Mn^2+酶活力有抑制作用。 相似文献
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以IL-8免疫的BALB/C小鼠脾细胞与Sp2/0或653小鼠骨髓瘤细胞融合构建了淋巴细胞杂交瘤克隆I8-S2和I8-63。ELISA叠加试验(ELISA Additivity Test)表明这两杂交瘤克隆分泌的单抗分别识别IL-8分子的不同表位。IL-8能激活人颗粒细胞,引起细胞内Ca^2+浓度(「Ca^2+」)上升。通过流式细胞仪分析「Ca^2+」的变化,发现两个克隆单抗对IL-8激活细胞的活 相似文献
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本文测定了数种蝙蝠葛碱衍生物对钙调素激活的人红细胞膜Ca^2+-Mg^2+-ATPase和的影响,结果表明,这些化合物对该酶都有不同程度的抑制作用,其机制表现为性抑制,过量的CaM能完全逆转这些化合物所引起的抑制。当Ca^2+-Mg^2+-ATPase被胰蛋白酶限制性酶解完全活化后,其活力不再受CaM激活,但仍被这些化合物所抑制。 相似文献
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比较了菠菜和蚕豆叶绿体的光合磷酸化活力以及由不同活化方法活化的叶绿体及可溶CF1的Mg^2+-ATPase和Ca^2+-ATPase的活力,观测到两种叶绿体ATPase的合成和水解ATP的功能有明显差异。从两种叶绿体CF1的SDS-PAGE图谱上可见蚕豆CF1的ε亚基分子量明显上于菠菜的,蚕豆CF1的α和β亚基间分子量的差别也比菠菜的小。 相似文献
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采用8-(6-氨己基)-氨基-5'-AMPSepharose亲和层析法和DEAE-Sepharose离子交换层析法从大熊猫心肌中分离纯化出了乳酸脱氢酶同工酶H4.纯化的大熊猫LDH-H4,比活为445U/mg蛋白,经SDS-PAGE,PAGE,等电聚焦电泳鉴定均为一条带,其亚基分子量为36000,等电点为5.45.经测定大熊猫LDH-H亚基N端被封闭,C端氨基酸残基经测定为Leu.氨基酸组成分析表明每个亚基含有5个Cys,9个Met. 相似文献
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用制霉菌素穿孔膜片钳方法研究5-HT和NA对急性分离的大鼠骶髓后连合核神经元甘氨酸门控氯离子通道电流(IGly)的调控作用及其胞内机制。发现:(1)5-HT激活与非胰岛激活蛋白(IAP)敏感型G蛋白偶联的5-HT2受体亚型,激活磷脂酶C(PLC),增加甘油二酯(DAG)的生成。DAG增强不依赖Ca^2+的新型PKC(nPKC)的活性,从而增强IGly;(2)NA激活与IAP敏感型G蛋白偶联的α2受 相似文献