人剪切修复基因XPD转染对人肝癌细胞SMMC-7721的生物学影响

目的 将人剪切修复基因XPD稳定转染人SMMC-7721肝癌细胞,观察转染后细胞内野生型p53、XPD、周期素依赖性蛋白激酶(CDK)7、c-myc等基因表达的变化以及对细胞生长的影响,探讨野生型XPD基因与p53、CDK7、c-myc的相互作用及细胞凋亡机制.方法 将表达绿色荧光蛋白并含有人类全长野生型XPD的pEGFP-N2-XPD重组体质粒稳定转染人SMMC-7721肝癌细胞中,选择培养基筛选单克隆稳定转染重组质粒的人SMMC-7721肝癌细胞(SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD)和稳定转染空载质粒的人SMMC-7721肝癌细胞(SMMC.7721-pEGFP-N2),并将人SMMC-7721肝癌细胞作为空白对照,利用荧光显微镜观测绿色荧光蛋白表达,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westem blot法检测转染XPD基因后细胞内XPD、p53、CDK7、c-myc的表达量变化,并用细胞增殖力检测(MTT)法及流式细胞仪分别检测细胞增殖及凋亡和细胞周期变化.结果 ①免疫荧光显微镜下,SMMC.7721.pEGFP.N2.XPD和SMMC-7721-pEGFP-N2细胞中观察到绿色荧光蛋白表达,说明pEGFP-N2-XPD重组质粒和pEGFP-N2空载质粒成功转染.②RT-PCR检测:SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD中p53 mRNA、XPD mR-NA表达量与SMMC-7721-pEGFP-N2和SMMC-7721相比均明显增高(P<0.01),CDK7 mRNA、c-myc mRNA在SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD的表达量比两对照组明显降低(P<0.01),而两对照组各个基因的表达没有明显差异(P>0.05).③Western blot检测:SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞的p53、XPD蛋白表达最较两对照组升高(P<0.01),CDK7、c-myc的蛋白相对表达量比两对照组降低(P<0.01),两对照组差异没有统计学意义(P>0.05).④M1Tr检测:SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD的细胞增殖力较对照组减弱(P<0.05),两对照组筹异没有统计学意义(P>0.05).⑤流式细胞仪检测:SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞进入s期出现障碍,停滞在G1期的细胞增多.结论 将XPD成功稳定转染到人SMMC-7721肝癌细胞中,XPD、p53在转录和蛋白水平的表达明显升高,CDK7、c-myc表达明显降低,野生型XPD基因的过表达可能抑制CDK7、c-myc表达,改变细胞周期,并促进p53抑制肝癌细胞增长,促进细胞凋亡.     

野生型p53对SMMC-7721细胞中POLD1基因的影响

目的探讨野生型p53基因表达对人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因的影响。方法设计并构建p53特异性小干扰shRNA绿色荧光真核表达质粒（p53-siRNA）和表达EGFP-p53融合蛋白的p53绿色荧光真核增强表达质粒（pEGFP-p53）,通过稳定转染,将表达pEGFP-p53重组质粒、p53-siRNA转染入SMMC-7721细胞;经G418筛选,获得稳定细胞系7721-p53、7721-p53RNAi。通过RT-PCR检测转染后p53、POLD1的mRNA。结果在人肝癌细胞SMMC-7721中,野生型p53高表达组能够抑制POLD1的基因转录（P〈0.001）;而低表达组能够促进POLD1的基因转录（P〈0.001）。结论在人肝癌细胞SMMC-7721中,p53能够调控POLD1的基因转录。     

过表达CHD5基因对肝癌细胞SMMC-7721生物学行为的影响

目的:探讨过表达CHD5基因对人肝癌细胞SMMC-7721生物学行为的影响。方法:采用脂质体法将CHD5过表达质粒及对照质粒分别转染SMMC-7721细胞,Western blotting检测SMMC-7721细胞中CHD5蛋白的表达情况,CCK-8法检测SMMC-7721细胞生长增殖能力的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:转染CHD5过表达质粒后,SMMC-7721细胞CHD5蛋白表达水平显著增高（P<0.01）,抑制了细胞增殖、迁移和侵袭（P<0.05）,促进了细胞凋亡（P<0.05）。结论:过表达CHD5基因可抑制SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭并诱导其凋亡。     

野生型p53对SMMC-7721细胞中POLD1基因的影响

目的 探讨野生型p53基因表达对人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因的影响.方法 设计并构建p53特异性小干扰shRNA绿色荧光真核表达质粒(p53-siRNA)和表达EGFP-p53融合蛋 白的p53绿色荧光真核增强表达质粒(pEGFP-p53),通过稳定转染,将表达pEGFP-p53重组质粒、p53-siR...     

β-连环蛋白反义cDNA对肝癌细胞恶性表型的影响

目的：探讨应用反义核酸技术降低细胞内β—连环蛋白水平对人肝癌SMMC-7721细胞恶性表型的影响。方法：构建β—连环蛋白反义cDNA重组质粒，转染人肝癌SMMC—7721细胞，筛选β—连环蛋白低表达株，研究其恶性细胞表型的变化。结果：转染β—连环蛋白反义质粒后，低表达β—连环蛋白的SMMC—7721中c-myc基因表达降低，细胞形态向未转化方向变化，细胞生长受到抑制，软琼脂克隆形成率下降，细胞周期发生改变，G0—G1期增加，S期减少。结论：降低β—连环蛋白表达可显著抑制7721细胞的恶性表型。     

AFP对裸鼠肝癌移植瘤生长的促进作用及对血管形成相关因子的影响

目的:探讨AFP对肝癌移植瘤生长及血管生成调节因子表达的影响。方法:采用pEGFP-N1-AFP和pEGFP-N1质粒分别转染SMMC-7721细胞构建SMMC-7721/AFP和SMMC-7721/CON细胞,将裸鼠分为实验组和对照组,分别于裸鼠皮下接种SMMC-7721/AFP和SMMC-7721/CON,从而建立人肝癌移植瘤模型,动态观测裸鼠肿瘤体积和质量变化;取肿瘤组织用实时定量RT-PCR和Western blot检测组织中的HOXA7、eIF4E、VEGFA和FGF2表达。结果:构建SMMC-7721/AFP和SMMC-7721/CON细胞,并将其接种到裸鼠皮下成功建立肝癌移植瘤模型。与对照组比较,实验组移植瘤体积与质量显著增高,成瘤后第12天,实验组移植瘤体积和质量分别为（307.71±47.63）mm3和（20.243±0.411）g,差异均具有显著性（P=0.012,P=0.04）。实时定量RT-PCR结果显示AFP过表达提高了肝癌移植瘤细胞HOXA7、eIF4E和FGF2 mRNA表达水平,分别为2.488±1.155、23.828±2.465和4.407±1.164,与对照组相比增高程度具有显著性差异,但VEGFA mRNA表达未见显著增强。Western blot结果显示:SMMC-7721/AFP较SMMC-7721/CON细胞显著提高HOXA7蛋白表达水平,但对FGF2和VEGFA无显著影响。结论:AFP基因转染可明显促进裸鼠肝癌移植瘤的生长,该作用可能与其促进肿瘤血管形成因子在mRNA水平的调控有关。     

反义RNA技术对抑制人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因表达的研究

目的:应用反义RNA技术抑制人肝癌细胞SMMC-7721中POLD1基因的表达,探索采用该技术干预肝癌的可行性。方法:制备人POLD1基因的反义RNA表达质粒,同时建立空白对照组与阴性对照组,由此将实验分为阴性对照组(转染空载体的SMMC-7721细胞)、空白对照组(肝癌细胞SMMC-7721)和实验组(转染人POLD1基因反义RNA表达质粒的肝癌SMMC-7721细胞)3组。MTT实验分析细胞增殖变化,并在转染SMMC-7721细胞48h后,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测POLD1基因的表达。结果:MTT实验显示,与空白对照和阴性对照组相比,转染了反义RNA的实验组细胞增殖受到明显抑制。在转染后24～72h,实验组吸光度24h为0.306 7±0.015 4,48h为0.459 2±0.033 2,72h为0.567 1±0.061 1,与空白和阴性对照组相比,P值均<0.05。实时荧光定量PCR实验显示,实验组POLD1的mRNA表达明显下调为0.142 5±0.020 5,阴性对照组为1.017±0.188,空白对照组为1.00±0.00(F=26.5,P<0.05),说明POLD1基因表达受抑制。蛋白质印迹实验显示,POLD1基因蛋白水平(p125)变化趋势与mRNA相同,均为下调,其中实验组为0.222 3±0.009 7,阴性对照组为0.237 9±0.005 9,空白对照组为0.235 4±0.003 4(F=1 365.754,P值均<0.05),说明反义RNA可抑制p125蛋白表达,结论与基因水平趋势一致。结论:针对POLD1基因设计的反义RNA体外抑制了肝癌细胞SMMC-7721的增殖,这与POLD1在基因和蛋白水平的表达下调有关。     

HOXB7基因敲除对人肝癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响

目的 研究同源异型盒基因HOXB7（Homebox7）对人肝癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响及部分机制。方法 采用荧光定量PCR法选取HOXB7 mRNA高表达的人肝癌SMMC-7721细胞和HepG2细胞;设计靶向HOXB7的shRNA,瞬时转染肝癌SMMC-7721细胞,荧光定量PCR和Westernblot法检测shRNA靶向沉默的效果,CCK8、Transwell和划痕实验分别用于检测细胞增殖、侵袭和迁移能力;Western blot法测量肝癌SMMC-7721细胞中Smad3、p-Smad3表达水平。结果 HOXB7 shRNA转染的肝癌SMMC-7721细胞中HOXB7基因mRNA和蛋白表达水平均显著降低,同时细胞增殖、侵袭和迁移能力随之下降,且TGF-β通路中p-Smad3蛋白表达水平下调。结论 HOXB7可促进肝癌细胞增殖、侵袭以及迁移能力,其机制可能与调节Smad3磷酸化水平有关。     

恩度诱导抑制性VEGFA选择性剪切异构体VEGF165b的表达及其意义

目的:探讨重组人血管内皮抑制素(恩度)对人肝癌细胞SMMC-7721VEGF165b表达的影响,及上调VEGF165b表达后,SMMC-7721对恩度敏感性的变化.方法:采用RT-PCR法和蛋白质印迹法检测恩度干预SMMC-7721后VEGF165b的表达变化;稳定转染VEGF165b真核表达质粒到SMMC-7721,RT-PCR和免疫细胞荧光共聚焦显微镜检测VEGF165b、HIF-1α和下游靶基因VEGFA表达的变化;MTT法检测恩度对人肝癌细胞生长抑制率的影响.结果:100和400 μg/mL恩度能够诱导VEGF165bmRNA和蛋白表达上调,而外源性VEGF165b下调HIF-1α及下游靶基因VEGFA的表述.转染空质粒后,500和1000μg/mL恩度引起SMMC-7721的生长移植率分别为1.6%和0.4%,转染VEGF165b后,500 μg/mL和1000 μg/mL恩度引起的生长移植率分别为8.5%(P=0.000 0)和20.2%(P=0.000 0).结论:恩度抗肿瘤新生血管的作用部分是通过上调VEGF165b介导的,VEGF165b增加SMMC-7721细胞对恩度的敏感性,两者治疗肿瘤有协同作用.     

构建STK11基因融合质粒检测其对肺癌细胞迁移能力的影响

目的 构建表达STK11（serine/threonine kinase 11,STK11）基因和报告基因EGFP融合蛋 白的重组质粒,并转染肺癌A549和H460细胞株,检测其对肺癌细胞迁移能力的影响。方法 构建重 组质粒pEGFP-STK11,双酶切和测序进行鉴定。重组质粒转染A549和H460细胞株,荧光显微镜观察 EGFP蛋白表达情况,Western blot检测STK11蛋白表达情况,划痕实验检测其对肺癌细胞迁移能力的 影响。结果 酶切和测序结果表明pEGFP-STK11重组质粒构建成功;在转染A549和H460细胞后24h观 察到绿色荧光最强;Western blot结果显示STK11蛋白在转染后24 h条带最深;划痕实验显示,转染组 细胞迁移距离小于0.9%氯化钠溶液对照组（P<0.05）。结论 成功构建STK11基因重组质粒,并能转 染A549和H460细胞,转染后对肺癌细胞迁移能力起一定抑制作用。     

WWOX基因真核表达载体的构建及其在SMMC-7721中的表达

Objective:To construct eukaryotic expression plasmid pEGFP-N1-WWOX and transiently express it in SMMC-7721 cells.Methods:Total mRNA was extracted from normal human liver tissue.RT-PCR was used to amplify the aimed segments WWOX cONA which was then digested with Hindlll and BamHl and inserted into a eukaryotic expression plasmid pEGFP-N1 to construct pEGFP-N1-WWOX.The constructed plasmid was transfected into SMMC-7721 cells by lipofectamine 2000-mediated transfer method.The expression of WWOX in transfected SMMC-7721 cells was detected 24.36 and 48 h post-transfection with fluorescence microscope and the expression level of WWOX mRNA in transfected SMMC-7721 cells was assay by using RT-PCR.The change of WWOX expression and cell proliferation rates were detected by immunocyto-chemistry and MTT methods respectively.Results:The results showed pEGFP-N1-WWOX was successfully constructed and expressed transiently in SMMC-7721 cells.At 48th hour post-transfection.the number of positive cells was jncreased significantly and much brighter green fluorescence could be detected,while no green fluorescence was detected in the control group.In SMMC-7721 cells transfected with pEGFP-NI-WWOX a high level of porcine WWOX was detected.WWOX ex-pressed by transfected cells could significantly inhibit che proliferation of SMMC.7721 cells.Conclusion:pEGFP-N1-WWOX was expressed successfully in SMMC-7721 cells,which suggested that might be used as a new therapeutic method for liver cancer.     

miR－338对人肝癌细胞增殖及迁移的影响

目的：观察过表达miR－338对人肝癌细胞SMMC－7721增殖及迁移能力的影响。方法：化学合成miR－338寡聚核苷酸,并行测序确认。利用pcDNA6．2－GW／Em－GFP－miR 质粒构建miR－338真核表达载体。pcDNA6．2－GW／Em－GFP－miR－338质粒载体瞬时转染SMMC－7721细胞,实时荧光定量PCR检测miR－338的mRNA表达水平。高表达miR－338后,CCK－8法和划痕实验分别检测SMMC－7721细胞增殖能力及迁移能力的变化。结果：设计的miR－338序列与寡核苷酸测序结果比对,匹配程度达100％。pcD-NA6．2－GW／Em－GFP－miR－338质粒瞬转后人肝癌SMMC－7721细胞 miR －338的表达量与对照组相比显著增加（P＜0．05）。miR－338过表达SMMC－7721细胞的增殖能力与各对照组相比均有显著下降（P＜0．05）;miR－338过表达细胞迁移速度降低。结论：上调的miR－338可抑制人肝癌SMMC－7721细胞的增殖及迁移能力。     

干扰PRMT2基因对肝癌细胞系生物学行为的影响

目的:研究抑制蛋白质精氨酸甲基转移酶2(protein arginine methyltransferase 2,PRMT2)基因的表达对肝癌细胞系生物学行为的影响。方法:qRT-PCR检测人肝癌细胞系(HepG2和SMMC-7721)和人正常肝细胞(LO2)中PRMT2的表达情况;设计并合成针对PRMT2基因的3对小干扰RNA,体外通过脂质体Lipofectamine 3000转染到相对高表达PRMT2的人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721中抑制PRMT2基因的表达,并设置阴性对照组（NC组）和空白对照组。qRT-PCR、Western blot检测转染后细胞PRMT2 mRNA水平和蛋白水平的变化。CCK-8法检测转染后细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞体外迁移及侵袭能力。结果:与人正常肝细胞LO2相比,PRMT2基因在人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721中相对高表达。将siPRMT2转染HepG2和SMMC-7721细胞后,与NC组相比,siPRMT2-1和siPRMT2-2组的PRMT2 mRNA和蛋白表达均明显降低（P均<0.05）,NC组与空白对照组无明显差异。与NC组相比,将siPRMT2-1和siPRMT2-2转染进HepG2和SMMC-7721细胞后,细胞增殖速度减慢、迁移和侵袭能力显著减弱（P均<0.05）,NC组与空白对照组无明显差异。结论:RNA干扰抑制PRMT2表达后,抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,PRMT2可能影响肝癌的预后。     

肝细胞癌高表达基因TPT1转染对肝细胞系生物学行为的影响

目的 将TPT1转染肝癌细胞系SMMC-7721和肝细胞系L-02,观察肝细胞系生物学行为的变化.方法 将连有TPT1的、带有绿色荧光蛋白标签的真核报告表达载体pEGFP-N3TPT1,通过Lipofectamine分别转染SMMC-7721和L-02细胞,同时设pEGFP-N3对照.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TPT1 mRNA水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、软琼脂克隆形成实验、细胞周期分析检测细胞增殖和致瘤性.结果 pEGFP-N3TPT1转染后,SMMC-7721细胞TPT1 mRNA相对表达水平与对照组的比值为1.78,L-02细胞TPT1 mRNA相对表达水平与对照组的比值为2.59.pEGFP-N3TPT1转染可明显增强肝细胞的增殖能力,转染SMMC-7721后24、48、72、96h的吸光度(A)值分别为0.80、1.56、2.69和2.94,均高于pEGFP-N3(分别为0.71、1.23、1.92和2.75)和脂质体对照(分别为0.76、1.27、1.89和2.78),差异均有统计学意义(均P＜0.05).在接种500个和1000个细胞时,pEGFP-N3TPT1组软琼脂克隆形成数分别为(6.00±1.73)个和(12.00±2.65)个,pEGFP-N3组软琼脂克隆形成数分别为(1.00±1.00)个和(7.00±1.00)个(P＜0.05).pEGFP-N3TPT1转染后的SMMC-7721细胞增殖指数(P1)为40.9%,高于pEGFP-N3组(26.4%).EGFP-N3TPT1转染正常肝细胞L-02后,24、48、72、96、120 h测得的A值分别为0.87、1.11、1.55、2.12和2.42,均高于pEGFP-N3组(分别为0.65、0.79、1.02、1.49和1.96)和脂质体组(分别为0.67、0.82、0.89、1.56和1.85),差异有统计学意义(P＜0.05);pEGFP-N3TPT1组平板克隆数为(18.00±2.00)个,pEGFP-N3组为(7.00±2.65)个(P＜0.05),但L-02细胞不能在软琼脂中形成克隆.pEGFP-N3TPT1转染后L-02细胞的PI为35.9%,高于pEGFP-N3组(26.1%).结论 TPT1转染可增强肝癌细胞SMMC-7721的恶性表型,促进正常肝细胞L-02的增殖能力,但不能使L-02发生恶性转化.

Abstract：

Objective The aim of this study was to transfect TPT1 into cell lines SMMC-7721 and L-02, seperately, and to observe the changes of biological behaviors of the cell lines. Methods Through lipofectamine, the eukaryotic report expression vector containing TPT1 ORF( open reading frame), pEGFP-N3TPT1, were transducted into hepatocarcinoma cell line SMMC-7721 cells and normal liver cell line L-02 cells, seperately. The transduction was repeated three times in 24 hrs. The differences of biological behaviors between the pEGFP-N3TPT1 and pEGFP-N3 groups were studied by RT-PCR, MTT assay, soft agar colony formation assay and cell cycle analysis. Results The pEGFP-N3TPT1 transfected cells had a high mRNA level in the two cell lines ( P ＜ 0. 05 ) compared with the pEGFP-N3 controls. The ability of proliferation and the soft agar colony formation were enhanced in the SMMC-7721 transducted cells with pEGFP-N3TPT1 compared with that transducted with pEGFP-N3 ( P ＜ 0.05 ), and the cell cycle analysis showed that the cells in the phase G2 + S/M increased after pEGFP-N3TPT1 transduction. In the L-02 cell line, we obtained similar results, pEGFP-N3TPT1 enhanced the colony formation in plate( P ＜0.05 ), but not make it form colony in soft agar. Conclusions TPT1 can enhance malignant phenotype of SMMC-7721 cells and promote the growth of L-02 cells, but not transform L-02 into malignant phenotype.     

RMP基因沉默对肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移能力的影响

目的:建立RMP(RPB5-mediating protein)基因沉默的稳定细胞株,研究RMP小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的抑制作用.方法:首先,体外合成3条RMP基因的siRNA,并转染到SMMC-7721细胞中,RT-PCR检测3条siRNA对RMP基因表达的抑制作用,筛选出最佳干扰序列;然后,pGPU6-Neo-RMP-484真核表达载体转染,G418筛选出稳定干扰RMP基因的细胞株,RT-PCR法检测该稳定细胞株中RMP基因的干扰效率,MTT法检测RMP-siRNA对SMMC-7721细胞增殖及细胞黏附能力的影响,划痕实验检测细胞迁移能力的变化.结果:利用RNA干扰技术成功建立了RMP基因下调的稳定细胞株,与SMMC-7721细胞对照组比较,其RMP mRNA表达水平下调了(83.67±2.56)%.稳定转染siRNA的细胞株细胞增殖受到抑制,增殖抑制率可达(74.33±0.58)%.稳定转染细胞株的细胞黏附能力有所增加,迁移率则相应降低.结论:成功筛选出了稳定转染RMP-siRNA重组载体的细胞株.pGPU6-Neo-RMP-484重组载体能有效抑制RMP基因在肝癌SMMC-7721细胞内的表达,可作为RMP分子机制研究的细胞模型.RMP基因的下调能有效抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖,使其黏附率增加,同时细胞的迁移率降低.     

白眉蝮蛇去整合素rAdinbitor对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞黏附与增殖的抑制作用

Objective:To investigate the effects of rAdinbitor on the adhesion and proliferation of human hepatoma cell strain SMMC-7721.Methods:Cell adhesion assay was used to observe the effect of rAdinbitor on the adhesion of SMMC-7721 cells to fibronectin (FN).Crystal violet staining was performed to detect the influence of rAdinbitor on the adhesion of SMMC7721 cells.MTT assay was employed to detect the inhibitory effects of different concentration of rAdinbitor on the proliferation of SMMC-7721 cells.The morphologic changes of the control SMMC-7721 cells and the apoptotic cells induced by 200 μg/mL rAdinbitor for 36 h were observed under light microscope after HE staining.Flow cytometry analysis was applied to determine the apoptosis rate of SMMC-7721 cells.Results:(1) FN promoted the adhesion of human hepatoma cell strain SMMC-7721 in a dose-dependent manner.(2) rAdinbitor could dose-dependently inhibit the adhesion of SMMC-7721 cells to FN.The higher the concentration was,the stronger the inhibition was.There was significant difference among the groups (P＜0.05).(3) rAdinbitor had a strong inhibition on the proliferation of SMMC-7721 cells and showed a dose-dependent manner (P＜0.05).After a 48 h exposure,the IC5o value of rAdinbitor was 177.83 μg/mL.(4) After exposure of SMMC-7721 cells to 200 μg/mL rAdinbitor for 36 h,the eady morphologic changes appeared and the apoptosis rate was 20.68%,significantly higher than that of the control group (2.38%,P＜0.05).Conclusion:rAdinbitor can dose-dependently inhibit the SMMC-7721 cells adhesion to FN,and can inhibit the proliferation in dose-dependent manner and promote their apoptosis.     

TSA对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及其机制

目的:研究去乙酰化转移酶抑制剂TSA对肝癌细胞SMMC-7721的作用及其机理。方法:利用细胞计数,流式细胞仪分析细胞凋亡及细胞周期,Tunel试验研究TSA对肝癌细胞SMMC-7721的作用;利用western研究TSA对肝癌细胞蛋白表达的影响。结果:TSA可明显抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长,并可诱导细胞凋亡。可阻滞肝癌细胞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期。可增加p53,p21,bax等基因的表达,降低BCL-2的表达。结论:去乙酰化转移酶抑制剂TSA可明显抑制肝癌细胞SMMC-7721的生长并诱导其凋亡,其主要通过调控一些肿瘤相关基因的表达起作用。     

Survivin反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察Survivin反义寡核苷酸对SMMC-7721细胞增殖、凋亡的影响.方法：设计合成特异性Survivin 反义寡核苷酸,转染肝癌SMMC-7721细胞,MTT法测定Survivin ASODN对细胞增殖抑制情况的影响,FCM法检测对细胞周期、凋亡及Survivin蛋白表达的影响.结果：Survivin ASODN可抑制SMMC-7721细胞的生长增殖,并呈浓度和时间依赖性.ASODN转染组可诱导SMMC-7721细胞凋亡（P＜0.01）,细胞周期阻滞于G2/M期（P＜0.05）.ASODN转染组Survivin蛋白表达水平显著降低（P＜0.01）.结论：Survivin ASODN能下调SMMC-7721细胞Survivin表达,并可抑制其增殖并诱导凋亡.