PPARs信号通路在小鼠糖尿病肝病中的作用

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)及炎症相关信号通路在糖尿病肝病中的作用。方法:高能量饲料喂养联合多次腹腔注射小剂量链脲菌素(STZ;40 mg·kg~(-1)·d~(-1),5 d)诱导糖尿病形成后,继续喂养4周,HE染色观察肝脏形态学改变;检测代表小鼠肝功能的丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的变化;检测空腹血糖(FBG)、血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)及血清胰岛素水平(INS),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);利用q PCR和Western blot分别检测PPARs和炎症相关信号通路中相关m RNA及蛋白表达。结果:给予STZ 7 d后,小鼠FBG持续11.1 mmol/L,糖尿病形成。4周后,实验结束时血清胰岛素水平及HOMA-IR均明显增加(P0.01),血脂升高(P0.01),ALT和AST亦显著增加(P0.01),病理检查见肝细胞脂肪变性及炎性细胞浸润,提示糖尿病小鼠出现肝损伤。与正常对照组相比,糖尿病肝损伤小鼠肝脏PPARα、PPARβ及PPARγ的mRNA和蛋白表达均明显下调(P0.01),核因子κB(NF-κB)、环氧合酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的表达则明显上调(P0.01)。结论:PPARs下调及NF-κB-COX-2/i NOS信号通路激活可能与糖尿病肝损伤的发生发展有关。     

柚皮素对多囊卵巢综合征模型大鼠的卵巢保护及激素调节作用

目的 探究柚皮素对多囊卵巢综合征模型大鼠的卵巢保护及激素调节作用。方法 32只雌性SD大鼠分成4组：对照组、柚皮素组、PCOS组和PCOS+柚皮素组（n=8）。大鼠皮下注射脱氢表雄酮（6 mg/100 g·d）以诱导PCOS模型，向柚皮素组和PCOS+柚皮素组大鼠注射20mg/kg的柚皮素，持续15天。检测血清中雌二醇、黄体酮、睾丸激素和脱氢表雄酮水平；检测卵巢组织病理学形态和发情周期的改变；检测卵巢组织中炎性因子水平及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、p75NTR和核因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果 柚皮素可以显著降低PCOS大鼠血清中雌二醇和睾丸激素水平，并增加黄体酮和脱氢表雄酮的水平；改善卵巢损伤和发情周期；降低卵巢中白细胞介素-1β(IL-1β)，卵巢中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)并增加白细胞介素-10(IL-10)的水平；降低卵巢组织中Cleaved Caspase9、p75NTR和p-NF-κB的表达水平。结论 柚皮素通过抑制NF-κB通路对多囊卵巢综合征大鼠发挥卵巢保护及激素调节作用。     

连翘苷对感染性休克小鼠急性肺损伤的作用与机制

目的 探讨连翘苷通过腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)/p70核糖体S6蛋白激酶(p70 S6 kinase,p70S6K)信号通路介导的自噬对感染性休克小鼠急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)的影响。方法 随机选择12只小鼠作为对照组,其余小鼠通过腹腔注射20 mg·kg^-1脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)构建感染性休克小鼠模型,将感染性休克小鼠随机平分为模型组、低、中、高剂量实验组(5 mg·kg^-1、10 mg·kg^-1、20 mg·kg^-1连翘苷)、高剂量+抑制剂组(20 mg·kg^-1连翘苷+20 mg·kg^-1AMPK抑制剂compound C),每组均12只小鼠。称量肺干重及湿重,计算W/D比值;ELISA法检测...     

糖尿病大鼠心肌NF-κB、iNOS、COX-2表达的研究

目的：观察核因子-κＢ（ＮＦ-κＢ）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）以及环氧化酶-2（COX-2）3种炎症因子在糖尿病大鼠心肌组织的表达。方法:30只SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病组，糖尿病组大鼠按60 mg/kg的剂量1次性腹腔注射链脲菌素。实验于24周末结束，观察2组大鼠的体重、平均血糖浓度、心重指数。并取心肌组织石蜡切片分别行NF-κＢ、iNOS和COX-2免疫组化染色。同时用凝胶电泳迁移率（EMSA）的方法测定心肌组织ＮＦ-κＢ活性。结果:(1)糖尿病大鼠心肌组织ＮＦ-κＢ阳性表达细胞明显多于对照组；（2）EMSA方法显示，糖尿病大鼠心肌组织ＮＦ-κＢ表达强度明显高于对照组；（3）对照组大鼠心肌组织未见iNOS的表达，糖尿病大鼠见明显iNOS的表达；（4）对照组大鼠心肌组织偶见COX-2的表达，糖尿病大鼠见明显COX-2的表达。结论:NF-κＢ、iNOS和COX-2在糖尿病大鼠心肌组织中表达活性明显增强。     

柚皮素下调galectin-3可缓解高糖诱导的小鼠足细胞损伤

目的 研究柚皮素联合下调半乳糖凝集素-3(galectin-3)对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响.方法 小鼠足细胞给予高糖、柚皮素、galectin-3 siRNA、NF-κB信号激活剂PMA处理,MTT方法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测C-Caspase-3、NF-κBp65蛋白表达,硫...     

非对称性二甲基精氨酸通过激活铁死亡促进小鼠早期肾损伤

目的：探讨内源性一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)抑制物非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine, ADMA)是否通过诱导细胞铁死亡促进小鼠早期肾损伤。方法：将16只8周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=8)和实验组(n=8)，实验组小鼠正常饮食，每天灌胃给予小鼠ADMA(60 mg·kg^-1·d^-1),对照组小鼠正常饮食，每天灌胃给予等体积的生理盐水，实验周期为16周。采用口服葡萄糖耐量和胰岛素耐受实验检测血糖代谢；总胆固醇(total cholesterol, TC)和甘油三酯(triglyceride, TG)测定试剂盒(COD-PAP法和GPO-PAP法)以及高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C)检测试剂盒(微板法)检测血清TC、TG和HDL-C水平；HE染色法观察肾组织的形态变化；ELISA法检测血清中ADMA及肾组织炎症因子白细胞介素6(interleukin-6, IL-6)和...     

苯扎贝特减轻小鼠糖尿病肝损伤

目的:探讨苯扎贝特(BEZ)减轻小鼠糖尿病肝病的作用及可能机制。方法:长期高能量饲料联合链脲菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病肝病模型,给予BEZ(75 mg·kg-1·d-1)灌胃4周。每周监测空腹血糖(FBG);HE染色观察肝脏形态学改变,生化试剂盒检测小鼠肝功能(丙氨酸氨基转移酶和天门冬氨酸氨基转移酶)、血脂(总胆固醇和甘油三酯)、胰岛素(INS)和糖化血红蛋白(HbA1c)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。RT-qPCR和Western blot方法检测肝脏过氧化物酶体增殖激活受体(PPARs)的mRNA和蛋白表达。结果:给予STZ 7 d后,小鼠FBG水平持续>11.1 mmol/L。实验结束时模型组小鼠INS、HbA1c及HOME-IR均明显增加(P<0.01),血脂升高(P<0.01);肝功能指标升高(P<0.01),病理检查见肝细胞脂肪变性及炎症细胞浸润;肝脏PPARs的mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.01)。BEZ给药明显减轻模型小鼠肝脏损害(P<0.01),降低血糖相关指标和血脂水平(P<0.05),上调PPARs的mRNA和蛋白表达(P<0.01)。结论:BEZ减轻小鼠糖尿病肝损伤,该作用可能与其激活PPARs有关。     

瘤果黑种草子总皂苷的抗炎和免疫调节作用

目的 考察瘤果黑种草子总皂苷(TSSN)的抗炎和免疫调节作用。方法 建立脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7炎症模型，采用Griess法检测NO分泌水平，ELISA法检测细胞上清TNF-α、IL-6、IL-1β含量，采用qRT-PCR方法考察TSSN对NF-κB信号通路相关靶点mRNA表达水平的影响；酶动力学实验检测总皂苷对环氧酶-2(COX-2)以及5-脂氧酶(5-LO)的抑制活性；通过MTS法及ELISA法检测TSSN对静息期淋巴细胞的影响，并以TSSN对刀豆蛋白(ConA)、LPS分别诱导的小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响，以及对T淋巴细胞分泌细胞因子TNF-α、IL-2、IL-6、IFN-γ的影响来考察TSSN的免疫调节作用。结果 在LPS诱导的RAW 264.7炎症模型中，TSSN能显著降低LPS诱导的RAW264.7分泌炎症介质NO和促炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平，显著抑制TNF-α、IL-6、IL-1β m RNA表达水平，抑制iNOS、NF-κB p65 mRNA表达水平；在12.5～200μg·ml^-1剂量...     

白藜芦醇减轻直肠癌放疗大鼠肠道损伤效果及作用机制研究

目的 探讨白藜芦醇对直肠癌放疗大鼠肠道损伤的影响及其作用机制。方法 研究对象选取健康大鼠18只，均建立直肠癌模型。建立后随机均分为对照组及白藜芦醇组，每组9只，对照组给予安慰剂，白藜芦醇组给予20 mg·kg^-1·d^-1白藜芦醇，两组均给予单剂量5Gy放疗。连续干预3周后比较两组大鼠氧化应激(ROS)标志物、炎性因子介质表达水平；观察两组大鼠肠道病理组织学变化，使用TUNEL染色观察两组肠道绒毛、隐窝细胞凋亡；使用蛋白印迹检测两组大鼠PI3K、AKT、m TOR蛋白表达。结果 白藜芦醇组MDA水平显著低于对照组，HSH、CAT水平显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；白藜芦醇组TNF-α、NF-κB、IL-1β水平显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；白藜芦醇组绒毛、隐窝细胞凋亡率低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；白藜芦醇组PI3K、Akt和mTOR蛋白相对表达量显著低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；病理组织学检测显示，对照组肠黏膜部分绒毛尖端坏死，固有层白细胞炎症...     

益心舒对急性心肌梗死小鼠的保护作用及机制研究

目的：探究益心舒(YXS)对急性心肌梗死(MI)小鼠的心脏保护作用及其相关机制。方法：联合TCMSP与Metascape数据库进行生物信息学分析，探寻YXS可能的作用靶点。将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组：假手术组(sham组)、模型组(MI组)和YXS预处理组(YXS+MI组)，每组各20只。YXS+MI组给予YXS (60 mg·kg^-1·d^-1)灌胃，连续14 d,sham组和MI组给予等体积生理盐水灌胃。通过结扎冠状动脉左前降支建立MI模型，术后1 d用超声多普勒检测小鼠心功能；通过TTC染色检测MI面积；通过HE染色和CD45免疫组化染色分析梗死部位炎症细胞的浸润情况；采用透射电镜观察心肌超微结构和线粒体损伤；TUNEL染色检测凋亡细胞比例；Western blot检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl2的蛋白水平；流式细胞术检测髓源性炎症细胞的浸润情况。结果：与sham组比较，MI组小鼠左心收缩功能受损，射血分数(EF)和短轴缩短率(FS)也显著下降(P<0.01)，心肌组织炎症细胞浸润增多，心肌超微结构受到破坏，凋亡细...     

孕酮抑制大鼠脑损伤后炎症反应诱导的神经细胞凋亡

目的:研究孕酮(progesterone,PROG)对大鼠脑损伤后皮质COX-2、iNOS、NF-κB和caspase-3表达的影响,以探讨PROG脑保护作用的可能机制。方法:雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组、脑损伤组和PROG治疗组,按照改良的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型。PROG治疗组伤后1,6h腹腔注射PROG16mg/kg,各组于伤后24h取材。用免疫组织化学法及免疫蛋白印迹法,观察大鼠皮质COX-2、iNOS、NF-κB和caspase-3的免疫阳性细胞数和蛋白表达水平变化。结果:与假手术组大鼠相比,脑损伤组大鼠皮质COX-2、iN-OS、NF-κB和caspase-3阳性细胞数和蛋白表达水平较假手术组COX-2、iNOS、NF-κB和caspase-3显著增加(P0.05);PROG治疗组与脑损伤组比较,大鼠皮质COX-2、iNOS、NF-κB和caspase-3阳性细胞数和蛋白表达水平明显减少(P0.05)。结论:PROG可通过抑制NF-κB的活化,阻断NF-κB和iNOS自身强化的炎症反应过程,降低COX-2、caspase-3的表达,抑制脑损伤后的炎症反应和细胞凋亡,从而发挥脑保护作用。     

IGF1R敲除通过AMPK减轻Ang Ⅱ诱导的小鼠心肌炎症及细胞凋亡

目的：探讨胰岛素生长因子1受体(IGF1R)敲除对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的小鼠心肌炎症和细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：通过CRISPR/Cas9基因编辑技术构建杂合子IGF1R敲除(Igf1r^+/-)小鼠。将野生型(WT)和Igf1r^+/-小鼠各20只按照随机数字表法各分为2组,共4组,即WT+saline组、WT+Ang Ⅱ组、Igf1r^+/-+saline组和Igf1r^+/-+Ang Ⅱ组,每组10只。Ang Ⅱ各组小鼠皮下注射Ang Ⅱ(2 mg·kg^-1·d^-1)2周构建心肌损伤模型,而saline各组小鼠皮下注射等体积的生理盐水2周。通过心脏指数检查心脏功能;ELISA方法检测心肌组织中炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6水平;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;RT-qPCR和免疫印迹分析检测相关mRNA和蛋白的水平。结果：Ang Ⅱ诱导的WT小鼠心功能显著下降且心脏损伤标志物和IGF1R表达显著...     

γ-促分泌酶抑制剂对哮喘小鼠肺组织COX-2与NF-κB表达的影响

目的探讨γ-促分泌酶抑制剂对哮喘模型小鼠肺组织环氧合酶-2(COX-2)与核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法 30只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和γ-促分泌酶抑制剂阻断组。用卵蛋白(OVA)致敏和激发,建立哮喘小鼠模型。免疫组织化学方法和ELISA方法检测各组小鼠肺组织COX-2与NF-κB的表达。结果哮喘组小鼠肺组织COX-2与NF-κB的表达水平显著高于正常对照组(P0.01),但是在应用γ-促分泌酶抑制剂处理后,哮喘组小鼠肺组织COX-2与NF-κB的表达水平显著下调(P0.01)。结论静脉注射γ-促分泌酶抑制剂能降低哮喘小鼠肺组织COX-2与NF-κB的表达。     

本刊有关文稿中法定计量单位的书写要求

本刊法定计量单位具体使用参照1991年中华医学会编辑出版部编辑的《法定计量单位在医学上的应用》一书。注意单住名称与单位符号不可混合使用,如ng·kg^-1·天^-1应改为ng·kg^-1·d^-1;组合单位符号中表示相除的斜线多用于1条时,应采用负数幂的形式表示,如ng/kg/min应采用ng·kg^-1·min^-1的形式;组合单位中斜线和负数幂亦不可混用.     

合欢皮乙醇提取物通过调控NF-κB通路减轻四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤

目的:研究合欢皮乙醇提取物对急性肝损伤的作用,并对其可能的作用机制进行初步探讨。方法:釆用25%四氯化碳(橄榄油助溶)单次腹腔注射诱导小鼠急性肝损伤模型,筛选合欢皮乙醇提取物抗急性肝损伤的活性部位。通过HE染色观察肝组织形态结构的病理变化,检测肝组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,ELISA检测血清中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,Western blot检测各组小鼠肝细胞中NF-κB p65、Bcl-2和Bax的蛋白表达水平。结果:与model组比较,合欢皮乙醇提取物正丁醇相低剂量(AB-L,4 mg·kg~(-1)·d~(-1))组和高剂量(AB-H,8 mg·kg~(-1)·d~(-1))组血清中AST水平和ALT水平显著降低。HE染色病理学观察可见肝细胞坏死范围、程度和炎细胞浸润较model组明显减轻。与model组比较,AB-H组和AB-L组小鼠血清中的TNF-α和IL-6水平明显下降,小鼠肝细胞核中NF-κB p65的蛋白表达水平显著降低(P0.05)。与model组比较,AB-H组和AB-L组的肝组织中Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高,Bcl-2/Bax比值升高(P0.05)。结论:合欢皮乙醇提取物正丁醇相可能通过减少NF-κB p65的活化而抑制IL-6和TNF-α炎性细胞因子的过度释放,以及调控Bcl-2和Bax蛋白的表达减轻肝细胞的凋亡,从而发挥对肝脏的保护作用。     

小豆蔻素调节Nrf2/HO-1/NF-κB信号通路对妊娠糖尿病大鼠氧化应激损伤的影响

目的 探究小豆蔻素（CAR）调节核因子e2相关因子2/血红素加氧酶-1/核因子-κB(Nrf2/HO-1/NF-κB信号通路对妊娠糖尿病（GDM）大鼠氧化应激损伤的影响。方法 实验分为对照组（Control组）、妊娠糖尿病模型组（GDM组）、低剂量CAR组（L-CAR组）、高剂量CAR组（H-CAR组），高剂量CAR+Nrf2抑制剂Brusatol组（H-CAR+BR组），每组12只。采用血糖仪测定大鼠空腹血糖（FBG）；胰岛素放射免疫分析试剂盒检测大鼠胰岛素（FINS）水平；试剂盒检测血清天门冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）以及总抗氧化能力（T-AOC）；试剂盒测定肝脏组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）水平；ELISA法测定血清炎性因子-肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-6)水平；H-E染色法检测肝脏组织病理变化；western blot法检测大鼠肝脏组织Nrf2、HO-1、NF-κB p65、p-...     

根皮素调控NF-κB对MRL/lpr狼疮性肾炎小鼠的保护作用

目的:观察根皮素对狼疮性肾炎的作用及机制。方法:用根皮素治疗MRL/lpr小鼠8周,然后分析肾功能和肾脏病理学。检测根皮素治疗后的抗ds DNA抗体的水平和免疫复合物的沉积。检测MRL/lpr小鼠的巨噬细胞浸润,NF-κB活化,NLRP3炎性体激活和炎性细胞因子TNF-α的产生。结果:用根皮素治疗的MRL/lpr小鼠显示肾脏损害明显减轻。根皮素处理的小鼠血清抗ds DNA抗体水平和免疫复合物沉积显著下降。根皮素抑制MRL/lpr小鼠中的NF-κB活化和TNF-α产生,同时抑制CCL2产生和巨噬细胞浸润,以及NLRP3炎性体的激活和IL-1β产生。根皮素能够显著降低狼疮性肾炎患者血清中IL-1β和TNF-α的水平。结论:根皮素通过抑制NF-κB活化和NLRP3炎症小体在狼疮性肾炎中发挥保护作用。     

核转录因子κB/环氧化酶-2参与糖尿病肾病大鼠肾细胞增殖

目的 探讨核转录因子-κB(NF-κB)/环氧化酶-2(COX-2)信号与糖尿病肾病大鼠肾细胞增殖的关系.方法 单侧肾切除大鼠ip链脲佐菌素诱发糖尿病模型,16周后切除左肾.用免疫组织化学检测肾皮质NF-κB和COX-2蛋白的表达;用正常糖和高糖培养基培养肾小管上皮细胞,24、48和72 h后收集细胞,用免疫细胞化学检测PCNA蛋白的表达,流式细胞术检测NF-κB和COX-2蛋白的表达.结果 (1)糖尿病模型组肾脏肥大指数增加.肾小球体积增大,系膜基质增多;(2)糖尿病模型组肾组织中活化的NF-κB和COX-2蛋白表达高于对照组,两者呈显著正相关;(3)高糖组肾小管上皮细胞PCNA表达强于正常糖组;(4)高糖能够上调肾小管上皮细胞NF-κB和COX-2蛋白的表达,两者呈显著正相关;同时COX-2蛋白表达与PCNA阳性率呈显著正相关.结论 活化NF-κB,上调COX-2蛋白表达从而引起肾脏固有细胞的增殖可能是糖尿病肾脏损伤的机制之一.     

柚皮苷调控心肌核因子NF-κB炎症信号通路对糖尿病心肌病大鼠防治作用

目的:探讨柚皮苷调控心肌核因子NF-κB炎症信号通路对糖尿病心肌病大鼠防治作用。方法:高糖高脂喂养和一次性腹腔注射低剂量STZ建立糖尿病心肌病大鼠模型,分为模型对照组和柚皮苷高、中、低剂量治疗组,另设正常对照组。免疫组织化学法测定心肌组织NF-κB蛋白的表达,放射免疫分析法分别检测外周血TNF-α、IL-6、IL-1β含量,透射电镜观察心肌组织超微结构。结果:与正常对照组比较,糖尿病心肌病大鼠心肌组织核因子NF-κB蛋白以及外周血TNF-α、IL-6、IL-1β表达明显增加(均P<0.05),糖脂代谢紊乱,心肌超微结构损伤明显,而在高、中剂量柚皮苷治疗组则明显受到不同程度改善,并呈剂量依赖性。结论:柚皮苷呈剂量依赖性对糖尿病心肌病具有明显的防治作用,其可能机制是有效地改善心肌糖脂代谢,下调了转录因子NF-κB的表达,继而抑制了NF-κB通路的激活。     

褪黑素对AD模型小鼠脑内小胶质细胞的影响

目的探讨褪黑素对APP/PS1转基因AD模型小鼠脑内小胶质细胞和炎症细胞因子COX-2的抑制效应。方法 AD转基因小鼠随机分为褪黑素处理组和对照组。14 d后,取海马通过免疫荧光化学染色检测小胶质细胞、老年斑位置情况;Western blot、ELISA方法分别检测CD11b、COX-2的变化;Western blot检测炎症信号通路TLR/NF-κB的变化。结果免疫荧光化学显示,老年斑周围有大量活化的小胶质细胞聚集;Western blot、ELISA结果显示褪黑素组小鼠脑内CD11b、COX-2表达显著减少;褪黑素组小鼠TLR/NF-κB炎症信号通路的TLR2、NF-κB-p65表达减少。结论褪黑素可能通过抑制TLR/NF-κB炎症信号通路来抑制小胶质细胞活化并抑制炎症细胞因子COX-2的分泌。