HPLC测定九龙山国家自然保护区石杉科4种植物石杉碱甲的含量

目的：采用HPLC法测定九龙山国家自然保护区石杉科4种植物中石杉碱甲的含量。方泼：以2％酒石酸溶液提取总碱,用高效液相法测定4种植物全草和不同器官石杉碱甲的含量。结果：石杉碱甲在采集的4种植物及其不同器官中均有分布,其中柳杉叶马尾杉的石杉碱甲含量很高,达到1981．27μg/g,远远大于其他植物,石杉碱甲在不同器官中含量不同,总体表现为：叶〉茎〉根。结论：九龙山自然保护区4种石杉植物石杉碱甲含量较高;植物不同器官中石杉碱甲含量存在差异。     

石杉碱甲药源植物研究进展

石杉碱甲（Huperzine A）从石杉科（Huperziaceae）石杉属（Huperzia）植物蛇足石杉（Huperzia serrfta（Thunb．ex Murray）Trev．）中分离得到,其临床治疗阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）疗效显著。由于石杉碱甲的化学合成在短时间内难以克服合成步骤繁琐、成本高、活性低等特点,自然资源的挖掘和开发成为解决石杉碱甲短缺的有效途径之一。故对近年来石杉碱甲药源植物研究所取的成果和难点进行总结,以期为今后的研究提供一定参考。     

产石杉碱甲新资源研究方法探索

从老年痴呆症药物需求研究到药物生产开发全方位视角对近期治疗老年痴呆症一线药物-石杉碱甲来源及生产的发展与动态进行综述,并对今后产石杉碱甲菌株研发方法进行了展望。源于天然植物的药物开发历史悠久且富有生命力,植物提取获得石杉碱甲为最简便方式,但植物提取获得石杉碱甲已面临植物资源匮乏瓶颈;化学合成生产石杉碱甲仍是研发重要途径之一,但合成步骤繁琐、代价昂贵,很难获得纯光学活性的合成物;利用从野生蛇足石杉内分离获得的内生真菌及其发酵液中提取石杉碱甲正在取得成效;依托生物技术改造菌株获得石杉碱甲将会是工业化生产开发的一个重要方向。     

蛇足石杉生物碱成分的研究(Ⅳ)

从石杉科植物蛇足石杉中分离出二个生物碱,经光谱鉴定分别为６－β－羟基石杉碱甲和马尾杉碱Ｎ。这两个化合物均首次从该植物中得到。生物实验初步结果表明,６－β－羟基石杉碱甲为又一个强效胆碱酯酶抑制剂,其毒性低于石杉碱甲,而对电鳐ＡＣｈＥ的抑制作用比石杉碱甲强约４倍。     

石杉碱甲的研究进展

石杉碱甲(huperzine A,HupA)是来源于蕨类植物蛇足石杉的一种倍半萜生物碱,为高效、高选择性、可逆性的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂。HupA在治疗阿尔茨海默病(Alzheimersdisease,AD)方面的显著疗效,近年研究还证明HupA有神经保护和预防化学武器的潜力,引起世界各国药学工作者广泛关注和研究。现系统的综述石杉碱甲在药学研究各领域中的研究进展。     

石杉碱甲、他克林及加兰他敏对小鼠记忆障碍的改善作用比较

目的　采用水迷津法，分别测试灌胃（ｉｇ）石杉碱甲、他克林及加兰他敏对脑室内注射（ｉｃｖ）密胆碱所致的小鼠记忆障碍的作用。方法　小鼠每天训练一次，２ ～３ｗ 达标后，ｉｃｖ 密胆碱（４．４μｇ／４．４μｌ） 引起其记忆障碍，随机分组，分别ｉｇ 石杉碱甲、他克林及加兰他敏并与对照组比较。结果　ｉｇ 石杉碱甲０．４ｍｇ／ｋｇ 或他克林４０ｍｇ／ｋｇ 或加兰他敏４ ．０ｍｇ／ｋｇ 均能使小鼠的记忆障碍得到显著的改善。结论　石杉碱甲、他克林及加兰他敏均对密胆碱所致的小鼠记忆障碍有显著的改善作用，其中以石杉碱甲的改善作用最佳。     

石杉碱甲对血管性痴呆小鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶的影响

目的观察石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶及其mRNA变化的影响,以探讨两者在血管性痴呆发病中的作用及石杉碱甲对其影响的机制。方法双侧颈总动脉线结,反复缺血-再灌注法制备模型,药物组用石杉碱甲溶液灌胃,跳台试验和水迷宫试验观察其行为学改变,采用免疫组织化学和原位杂交技术观察小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶及其mRNA的表达变化。结果石杉碱甲明显改善了模型小鼠学习、记忆成绩(P<0.01)。同时,药物组海马的胆碱乙酰转移酶阳性神经元的面密度值为(0.1133±0.0118),高于模型组(0.0827±0.0118);并且药物组和模型组海马胆碱乙酰转移酶mRNA阳性神经元的面密度值相比,前者(0.1122±0.0137)也高于后者(0.0798±0.0184)(P<0.01)。而海马两者的表达在药物组与假手术组间差异无显著性。结论石杉碱甲改善血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩与其恢复海马低水平的胆碱乙酰转移酶及其mRNA有关。     

石杉碱甲对血管性痴呆小鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶的影响

目的观察石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶及其mRNA变化的影响,以探讨两者在血管性痴呆发病中的作用及石杉碱甲对其影响的机制.方法双侧颈总动脉线结,反复缺血-再灌注法制备模型,药物组用石杉碱甲溶液灌胃,跳台试验和水迷宫试验观察其行为学改变,采用免疫组织化学和原位杂交技术观察小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶及其mRNA的表达变化.结果石杉碱甲明显改善了模型小鼠学习、记忆成绩(P <0.01).同时,药物组海马的胆碱乙酰转移酶阳性神经元的面密度值为(0.1133±0.0118),高于模型组(0.0827±0.0118);并且药物组和模型组海马胆碱乙酰转移酶mRNA阳性神经元的面密度值相比,前者(0.1122±0.0137)也高于后者(0.0798±0.0184)(P <0.01).而海马两者的表达在药物组与假手术组间差异无显著性.结论石杉碱甲改善血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩与其恢复海马低水平的胆碱乙酰转移酶及其mRNA有关.     

HPLC法测定6种石杉科植物中石杉碱甲的含量

目的 测定6种石杉科植物中石杉碱甲的含量。方法 用2％酒石酸溶液提取总碱，HPLC法测定，外标法定量。结果 石杉碱甲在所测定的5种石杉科植物蛇足石杉、皱边石杉、四川石杉、金丝条马尾杉、柳杉叶马尾杉中均有较高分布，分别达到0．0481％，0．0579％，0．0706％，0．0345％，0．1961％，在闽浙马尾杉中含量较少，仅为0．0061％。结论 方法简便、准确，可用于石杉碱甲资源的寻找。     

4种石杉科植物中产生石杉碱甲的内生真菌的分离及初步鉴定和HPLC测定石杉碱甲的含量

目的 从4种石杉科植物中得到产生石杉碱甲（Huperzine A）的内生真菌,改进筛选内生真菌的培养条件。方法 消毒后的材料在培养基上培养和分离其内生真菌,HPLC检测代谢产物,显微形态鉴定菌种。结果 从蛇足石杉,长柄石杉,伏贴石杉,柳杉叶马尾杉中分离得到32株内生真菌,其中从柳杉叶马尾杉分离出的2株内生真菌能够产生石杉碱甲,分别是HA15.（芽胞菌属）和HA23.（葡萄孢属）。结论 首次从柳杉叶马尾杉中分离出能产生石杉碱甲的内生真菌。     

单克隆抗体2E6对乙酰胆碱酯酶活性的影响

以超速离心制备的电鳐乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）及蛋白Ａ亲和层析纯化的单克隆抗体２Ｅ６为材料，以酶抑制法观察了２Ｅ６对ＡＣｈＥ活性的影响，结果显示，随着２Ｅ６量的增大，对ＡＣｈＥ的抑制作用逐渐增强，表明２Ｅ６是ＡＣｈＥ的抑制性单克隆抗体。     

In Vivo and in Vitro Acetylcholinesterase Inhibition by Metacid—50 and Carbaryl in Channa punctatus under Natural Field Condition

Channa punctatus(Bloch),cultiveated under paddy-cum-fish culture programs,was exposed to non-lethal levels of 0.239 ppb of Metacid-50 and 3.73 ppm of Carbary for 7 days in the field.These insecticides effected significant inhibition of brain acetylcholinesterase(AChE) activity accompaniced by a concurrent increase in acetylcholine(ACh),In vitro inhibition of brain acetylcholinesterase was also compared between unexposed and pesticide exposed fish.Data revealed that the time taken for 50% inhibition(t0.5)of the enzyme was less in the pesticide exposed fish as compared to that of the unexposed fish.This indicates a preformed effect of the test pesticides on fish brain AChE during the in vivo exposure while the in vitro effect is an addivive inhibition of the enzyme caused by the cirulating inhibitors reducing the t0.5.Acetylcholinesterase inhibition may thus be utilized to monitor pesticide pollution in agricultural fields.     

银杏叶提取物对点燃模型幼鼠学习记忆及海马乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶活性的影响

目的研究银杏叶提取物（EGb）对点燃模型幼鼠学习记忆等认知功能,对大鼠海马乙酰胆碱酯酶（AChE）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）活性的影响。方法21、35日龄SD大鼠各40只,经初筛后随机分为生理盐水对照组、点燃对照组及EGb大、中、小剂量治疗组,采用戊四氮（PTZ）诱导幼鼠点燃模型,以Y型电迷宫及生化检测方法,观察用药前后大鼠学习记忆功能和海马AChE、ChAT活性的变化。结果EGb呈剂量依赖性显著改善实验大鼠的学习记忆能力,并显著抑制海马AChE活性、增强ChAT的活性。结论EGb可以通过抑制功能脑区AChE活性、增加ChAT的活性,增强中枢胆碱能神经系统的功能,改善发育期癫痫大鼠学习记忆功能。     

蔬菜对大鼠肝匀浆脂质过氧化物生成的影响

研究了郑州市常见蔬菜对大鼠肝匀浆脂质过氧化物生成的影响。发现各种蔬菜的生理盐水或蒸馏水菜浆均有明显抑制过氧化脂质生成的作用,抑制作用随菜浆浓度增加而增强;生菜浆较熟菜浆的抑制作用更强。提示各种蔬菜中可能存在着天然抗氧化物。     

金丝桃抗脂质过氧化作用研究

为研究金丝桃的抗脂质过氧化作用,用分光光度法测定了金丝桃提取物对大鼠离体组织匀浆的脂质过氧化及由Fe2+-H2O2体系、Fe2+-VitC体系和Fe2+-Cys体系诱导的脂质过氧化的抑制作用。发现金丝桃提取物对大鼠肝、心、肾组织匀浆脂质过氧化和线粒体诱导的脂质过氧化具有抑制作用并表现出剂量依赖关系,而且提取物F003的抑制作用要强于F004、F005的抑制作用。认为金丝桃具有较好的抗脂质过氧化作用,具有进一步研究与开发价值。     

淡豆豉提取物抑制乙酰胆碱酯酶活性的研究

目的：研究淡豆豉提取物对乙酰胆碱酯酶活性的抑制能力。方法：单因素考察淡豆豉在不同乙醇浓度,不同固液比,不同浸提时间和不同浸提温度下提取物对乙酰胆碱酯酶的抑制能力,采用Ellman法测定不同条件下的提取物对乙酰胆碱酯酶抑制率。结果：淡豆豉提取物的提取工艺为浸提时间60min,乙醇浓度100%,温度70℃,固液比1∶20时,对乙酰胆碱酯酶的抑制效果最佳,且古法炮制淡豆豉提取物对乙酰胆碱酯酶活性的抑制率比市购淡豆豉高。结论：古法炮制淡豆豉提取物对乙酰胆碱酯酶的活性有很好的抑制效果。     

复方龙脉宁不同配比药效学实验研究

目的:通过L9(34)的正交试验设计对复方龙脉宁处方中各味药材提取物进行不同配比,探讨复方龙脉宁对大鼠心肌缺血模型心电图的影响;对寒凝血瘀大鼠模型血液流变学指标的影响。方法:采用尾静脉注射垂体后叶素造大鼠急性心肌缺血模型,用心电图机记录大鼠心电图,比较各组大鼠给垂体后叶素前后心电图T波高度变化情况;另建立寒凝血瘀大鼠模型,肝素抗凝测血液流变学指标。结果:复方龙脉宁配比组3能明显抑制垂体后叶素致心肌缺血大鼠心电图T波高度变化以及显著降低寒凝血瘀大鼠的全血黏度、血浆黏度、全血还原黏度、红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞变形指数。结论:复方龙脉宁配比组3对急性心肌缺血大鼠可能具有预防性及治疗性保护作用;对大鼠寒凝血瘀模型能明显改善血液流变学指标。     

槟榔子中抗血小板聚集及抑制乙酰胆碱酯酶活性的有效成分（英文）

目的：研究槟榔子（Areca catechu）粗提取物中所含的抗血小板聚集及抑制乙酰胆碱酯酶活性的有效成分及其作用机制。方法：使用70%甲醇水溶液对槟榔子进行粗提取。使用生物发光血小板凝集仪在富血小板血浆中测定槟榔子粗提取物的抗血小板聚集作用,使用分光光度计在试管内测定槟榔子粗提取物对乙酰胆碱酯酶活性的抑制作用。检测槟榔子中的多种化合物以测定槟榔子中抗血小板聚集及抑制乙酰胆碱酯酶活性的有效成分。结果：槟榔子粗提取物能够抑制花生四烯酸、二磷酸腺苷、血小板活化因子、肾上腺素及钙离子载体引起的血小板聚集,尤其对二磷酸腺苷及钙离子载体引起的血小板聚集的抑制最为明显;槟榔子粗提取物能够显著抑制乙酰胆碱酯酶的活性。在所检测的槟榔子所含化合物中,只有儿茶素对肾上腺素引起的血小板聚集有显著的抑制作用,而这种抑制作用显著弱于槟榔子粗提取物,提示槟榔子中的其他成分参与了这种抑制作用;鞣酸、没食子酸、薯蓣皂苷元和异去甲槟榔次碱能够抑制乙酰胆碱酯酶的活性,其中鞣酸的抑制作用强于槟榔子粗提取物。结论：槟榔子中含有抗血小板聚集及抑制乙酰胆碱酯酶活性的有效成分,而发挥这些功效的确切成分有待进一步的研究证实。     

Inhibition of Ptychopetalum olacoides on Acetylcholinesterase Isoforms in Brain of Mice

Objective To further characterize the acetylcholinesterase inhibitors (AChE-Is) pattern of Ptychopetalum olacoides ethanol extract (POEE) on the cytosolic globular monomer (G1) and membrane bound globular tetramer (G4) AChE isoforms in brain areas relevant for cognition. Methods The G1 and G4 AChE isoforms were prepared according to the reported methods and the determination of AChE activity used was adapted from colorimetric method. Results POEE mostly inhibited G1 in hippocampus (75%), and G4 in frontal cortex (58%) and striatum (75%) (P < 0.05). Kinetic analysis indicated that POEE-induced AChE inhibition in hippocampus was of a competitive nature for G1 but uncompetitive for G4. Conclusion Considering the high density of cholinergic projection to the cortex and striatum, and the usefulness of conserving cytosolic acetylcholine to replenish synaptic vesicles in a highly active cognition site such as hippocampus, we argue that this could be a desirable profile for a clinically relevant AChE-I.     

金银花中酚酸类和黄酮类成分的黄嘌呤氧化酶抑制活性

建立基于紫外分光光度原理的微孔板筛选方法,用于金银花药材中黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选,并进行抑制活性测定。通过对筛选条件优化,建立了可靠的筛选模型,并对从金银花中分离得到的20个单体化合物进行了筛选,发现8个酚酸类成分和4个黄酮类成分具有黄嘌呤氧化酶抑制活性,其中3,4-二咖啡酰奎宁酸甲酯、槲皮素和木犀草素有很好的活性,其IC₅₀分别为8.36,6.46和2.08 μmol/L。筛选结果表明,金银花中黄酮苷元的活性优于黄酮苷,双咖啡酰奎宁酸的活性明显优于单咖啡酰奎宁酸类成分,双咖啡酰奎宁酸甲酯的活性明显优于双咖啡酰奎宁酸,且双咖啡酰奎宁酸的5位取代对化合物的活性贡献最大。