食管鳞癌人乳头瘤病毒DNA的检测研究

目的：对新疆食管鳞状细胞癌中进行人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）ＤＮＡ检测。方法：采用多重引物聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术。结果：新疆５个地区４个民族１０４例食管鳞癌中ＨＰＶＤＮＡ阳性者占５０．９６％（５３／１０４），其中ＨＰＶ１６型为４９．０６％（２６／５３），ＨＰＶ１８型５．６％（３／５３），ＨＰＶ６／１１型７．５％（４／５３）；１６型和１８型同时阳性者２０．７５％（１１／５３），１８型和６／１１型１１．３２％（６／５３），１６型、１８型和６／１１型三者同时阳性５．７％（３／５３）；两个或三个类型的混合感染占３７．７％（２０／５３）。５个地区的食管鳞癌中均有不同程度的ＨＰＶＤＮＡ感染，４个民族中以哈萨克族食鳞癌ＨＰＶ感染率较高（８０．４８％）。结论：新疆地区食管鳞状细胞癌中ＨＰＶ有较高的感染率，以１６型为主，伴随与其它类型的混合感染，哈萨克族食管癌的发生发展与ＨＰＶ具有密切关系。     

食管鳞癌DNA甲基化的研究进展

近年来研究结果表明,相关抑癌基因启动子区超甲基化导致的基因表达紊乱已成为食管癌发病机制研究的热点之一.众多研究表明DNA甲基化在食管癌的发生、侵袭和转移过程中发挥了积极的作用,外周血DNA甲基化谱可作为食管癌早期诊断、预后判断及随访的检测指标,有望将抑癌基因去甲基化作为食管癌的治疗靶点.     

食管鳞癌DNA和RNA含量测定的临床意义

目的:为探讨食管鳞癌DNA异倍体和RNA含量的变化及临床意义。方法:应用流式细胞仪对140例食管鳞癌石蜡标本进行研究。结果:食管鳞癌DNA异倍体检出率为90％(126/140),RNA含量为21.85±6.90,DNA异倍体和RNA含量与病期、恶性程度和淋巴结转移有关。结论:提示DNA和RNA含量测定有助于判断食管鳞癌患者的病期、恶性程度和淋巴结转移情况,为术后有针对性的制定治疗方案提供依据。     

食管鳞癌微血管密度检测的临床意义

目的　评价食管鳞癌组织内微血管密度与肿瘤进展和预后之间的关系。方法　采用免疫组化法检测 72例手术切除的食管鳞癌组织的微血管密度并对其与常见临床病理因素和预后之间的关系进行回顾性分析。结果　全组病例微血管密度值为 2 3 .74± 9.49/ 2 0 0倍视野 ,N1组、姑息性切除组、术后复发转移组和Ⅲ期 +Ⅳ期患者的微血管密度分别高于N0 组、根治性切除组、无复发转移组和Ⅱ期患者 (P <0 .0 5 ) ,高微血管密度组的术后生存曲线较低微血管密度组恶劣 (Logranktest ,P <0 .0 5 )。多因素分析表明微血管密度是影响预后的独立因素。 结论　血管形成可促进食管鳞癌的进展 ,并导致术后复发转移率升高及生存率下降 ,检测微血管密度具有判断术后复发转移的风险及预后的价值。     

食管鳞癌DNA含量及c-myc基因扩增与预后的关系

我们应用流式细胞分析术(ＦＣＭ)、图像细胞分析术(ＩＣＭ)的ＤＮＡ含量测定和ｃｍｙｃ基因ＰＣＲ扩增,对41例食管鳞癌石蜡标本进行了回顾性预后指标研究,现报告如下。一、材料与方法随机检测1979～1984年我院食管鳞癌行单一手术的标本41例。其中男性29例,女性12例。年龄35～72岁,平均518岁,术后生存5年以上者14例,占341%。应用ＦＣＭ和ＩＣＭ,按常规方法分别测定41例食管鳞癌细胞的ＤＮＡ含量。按文献报道方法,应用ＰＣＲ技术,检测41例标本的ｃｍｙｃ基因扩增。全部资料用χ2检验和ｔ检验。二、结果ＦＣＭ检测结果显示,二倍体肿瘤11例(268%…     

食管鳞癌组织中肺耐药蛋白表达和DNA含量的定量分析

目的：探讨食管鳞癌组织中肺耐药相关蛋白（lung resistance-related protein,LRP）的表达和DNA含量检测的临床意义。方法：应用流式细胞术（flow cytometry,FCM）定量分析52例原发食管鳞癌组织和相应癌旁组织中LRP蛋白表达及DNA含量的变化状况。结果：食管鳞癌组织LRP表达的相对荧光强度（RFI）的中位数（M）为1.39,而相应癌旁组织为0.75;差异有统计学意义,P〈0.05。癌组织DNA指数（DI）、SPF和PI显著高于相应癌旁组织,P〈0.05。LRP蛋白表达在不同的性别、病理分级、临床分期和有无淋巴结转移间的表达均差异无统计学意义,P〉0.05。DNA倍体和SPF、PI均与性别、病理分级和临床分期无明显关系,P〉0.05;但与有无淋巴结转移有关,P〈0.05。非整倍体肿瘤患者淋巴结转移率（63.9%,23/36）高于二倍体肿瘤患者淋巴结转移率（18.8%,3/16）,P〈0.05。有淋巴结转移患者SPF和PI显著高于无淋巴结转移患者,P〈0.05。非整倍体肿瘤LRP蛋白表达水平（Median=1.42）略高于二倍体肿瘤（Median=1.35）,但两者差异无统计学意义,P〉0.05。结论：LRP蛋白表达和DNA含量在食管鳞癌发生中起重要作用。DNA含量与淋巴结转移有关,可作为预测食管鳞癌预后的指标。     

食管鳞癌DNA含量与预后关系

探讨食管癌ＤＮＡ含量与临床特点及预后之间关系。方法应用流式细胞分析术和图像细胞分析术对４１例食管鳞癌石蜡标本进行ＤＮＡ含量测定,回顾性分析其预后指标。     

人食管鳞癌EC9706细胞线粒体DNA与凋亡的关系

目的：建立人食管鳞癌EC9706细胞的无线粒体DNA（ρ°）细胞,探讨食管癌线粒体DNA与凋亡的关系。方法：在细胞培养液中加EB 50μg/ml、尿嘧啶50μg/ml、丙酮酸100μg/ml,进行连续传代培养,获得完全缺失mtDNA的细胞（ρ°细胞）;运用实时荧光定量PCR技术,检测EB处理后不同时间的人食管鳞癌细胞EC9706 mtDNA的拷贝数,并采用琼脂糖凝胶电泳对mtDNA进行定性检测;采用TUNEL染色和流式细胞技术,检测EB处理后不同时间人食管鳞癌细胞EC9706的凋亡情况。结果：成功建立了人食管鳞癌细胞EC9706的ρ° 细胞,经实时荧光定量PCR鉴定,发现在EB存在下,随着细胞分裂,mtDNA拷贝数进行性减少,直到12天,mtDNA完全丢失;流式细胞术检测结果显示,EC9706细胞EB处理后,第4天、8天及12天细胞凋亡率（%）分别为（2.78±1.04）、（11.68±1.85）、（26.62±1.06）,与对照组相比,差异均有统计学意义（P<0.05）;TUNEL检测结果与上述一致,从第4天到第12天凋亡也逐渐增加。结论：成功建立了EC9706 ρ° 细胞。随着EC9706细胞mtDNA拷贝数量的逐渐减少,细胞凋亡率逐渐增加,表明mtDNA在诱导细胞凋亡中起着一定调控作用,提示选择性地诱导食管癌细胞mtDNA损伤,使食管癌细胞mtDNA拷贝数量明显减少,进而诱导细胞凋亡,可望成为食管癌生物治疗的一个新靶点。     

老年食管鳞癌患者的放射治疗

老年食管鳞癌患者的放射治疗刘荣华，黎艳萍，李长青我院１９７５年至１９８８年共收治食管癌患者１７６０例，其中老年（６ｏ岁以上）经病理证实为鳞状细胞癌且行放射治疗ＤＴ４０Ｇｙ以上者有５９例，总结分析如下。材料与方法一、病例资料５９例中，男５１例，女８例，...     

食管鳞癌组织VEGF表达及临床意义研究进展

正我国食管癌发病率和死亡率均居恶性肿瘤第四位,组织类型主要为鳞状细胞癌。由于患者确诊时多为中晚期,或已发生转移,所以食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)治疗缓解率低、易复发,预后较差,5年生存率仅为20%～30%。食管鳞     

微管不稳定蛋白Stathmin在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨Stathmin蛋白在食管鳞癌组织中的表达及意义.方法 收集新乡医学院2006年4月至9月期间食管鳞癌切除标本及其相应癌旁组织31例,以免疫组织化学法检测Stathmin蛋白在所取标本中的表达情况.结果 在31例食管鳞癌标本中,Stathmin蛋白表达阳性的标本为23例,阳性率为74.2%,阳性颗粒可见于细胞质;分别按年龄、性别、组织类型、分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期将31例食管癌标本分组,Stathmin蛋白表达差异有统计学意义的因素有分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期(P＜0.05).结论 食管鳞癌组织中Stathmin蛋白高表达,其表达与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期显著相关,Stathmin蛋白可能为人食管癌的生物治疗提供一个新靶点.     

食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达及意义

目的:探讨食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法:应用RT-PCR和免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管粘膜组织中mRNA和蛋白的表达.结果:在食管鳞癌癌变过程中RECK在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常粘膜组织中mRNA的含量依次增高,分别为1.052±0.078、1.274±0.235、1.306±0.121,组间比较有明显差异(F=49.936,P＜0.05):不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECK mRNA相对含量差异均有统计学意义(F=5.081,F=26.084,U=24.011,P均＜0.05).食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中RECK蛋白表达均低于正常粘膜组织,表达量分别为59.7%(37/62)、71.0%(22/31)、85.5%(53/62),组间比较有明显差异(x2=10.331,P＜0.01);食管鳞癌组织中RECK蛋白表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论:食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白表达均降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.检测RECK mRNA及蛋白的表达可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

Ⅱ型环氧合酶和CDK4在食管鳞癌中的表达及意义

目的 探讨Ⅱ型环氧合酶(COX-2)和CDK4在食管鳞癌中的表达与食管鳞癌的发生、浸润及转移的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测49例食管鳞癌及癌旁黏膜组织中的表达.结果 COX-2在癌旁正常上皮、单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织中的阳性表达率分别为0%(0/25)、7.1%(2/28)、33.3%(7/21)、50.0%(5/10)、69.2%(9/13)和73.5%(36/49).正常上皮组织与单纯增生上皮比较差异没有统计学意义(P＞0.05),但与轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织比较差异有统计学意义(P＜0.01).其在食管鳞癌中的阳性率与癌组织分级有关(P＜0.05).CDK4蛋白在癌旁正常上皮、单纯增生上皮、轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织中的阳性表达率分别为8%(2/25)、21.4%(6/28)、42.9%(9/21)、70%(7/10)、61.5%(8/13)和91.8%(45/49).正常上皮组织与单纯增生上皮比较差异没有统计学意义(P＞0.05),但与轻度不典型增生上皮、重度不典型增生上皮、原位癌和浸润癌组织比较差异有统计学意义(P＜0.01).CDK4阳性率与鳞癌分级无关(P＞0.05).COX-2、CDK4蛋白表达与食管鳞癌的浸润深度和淋巴结转移无关(P＞0.05).食管鳞癌组织中COX-2、CDK4蛋白阳性率有正相关性(P＜0.01).结论 COX-2、CDK4蛋白表达与食管鳞癌的发生有关.     

食管鳞癌中PTEN蛋白的表达及意义

目的　通过对PTEN在食管鳞癌中表达的研究,探讨其与食管鳞癌的发生、浸润、转移的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测49例食管鳞癌组织及40例正常食管黏膜组织中PTEN的表达。结果　食管鳞癌组织中PTEN蛋白表达率为5 3 0 6% (2 6/4 9)。显著低于正常食管黏膜组织的表达10 0 % (4 0 /4 0 ) ,在不同分化程度的癌组织中其阳性表达率有显著性差异(P <0 0 5 ) ,且PTEN蛋白表达率随癌组织浸润深度的加深而明显降低(P <0 0 5 ) ,有淋巴结转移组明显低于无淋巴结转移组(P <0 0 5 )。结论　PTEN基因缺失或蛋白表达降低在食管鳞癌的发生发展中可能起重要作用,且与肿瘤的分化程度、浸润转移密切相关。     

食管鳞癌组织中线粒体DNA拷贝数量的变化及意义

目的：比较线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）拷贝数量在食管鳞癌、癌旁粘膜和正常食管粘膜组织间的差异,探讨mtDNA与食管鳞癌发生、发展的关系。方法：应用荧光定量PCR（real-time PCR）技术,定量检测42例食管鳞癌、癌旁粘膜和正常食管粘膜组织中mtDNA拷贝数;并采用凝胶电泳对mtDNA进行定性检测。结果：食管鳞癌组织中mtDNA检测率为100%（42/42）,平均拷贝数为27.1894×106μgDNA;正常食管粘膜组织mtDNA检测率100%（42/42）,平均拷贝数为5.9347×106μgDNA;癌旁粘膜组织mtDNA检测率100%（42/42）,平均拷贝数为9.4102×106μgDNA,三者之间有显著差异（F=27.83,P〈0.05）。PCR产物经凝胶电泳后,在403bp处显示阳性条带,且食管鳞癌组织所在的泳道较亮,与real-timePCR检测结果一致。结论：mtDNA拷贝数量的增加与食管鳞癌的发生、发展有关。     

HMGB1 在食管鳞癌中的表达及其意义*

目的：初步探讨食管鳞癌中高迁移率蛋白B1（HMGB 1）的表达及其与淋巴结转移和患者预后的关系。方法：收集72例有完整临床及随访资料的胸段食管鳞癌石蜡标本,采用免疫组织化学染色和统计学的方法,观察HMGB 1 和VEGF-C、VEGF-D 、LYVE-1 在食管鳞癌组织中的表达,并分析HMGB 1 与VEGF-C、VEGF-D 、微淋巴管密度（MLD）、淋巴结转移及各种临床病理参数和患者预后之间的关系。结果：HMGB 1 在食管鳞癌组织中呈高表达,阳性率达69.44% ,而在正常组织中很少表达,并且有淋巴结转移的表达率为81.82% ,无淋巴结转移的表达率为58.97% ,有显著性差异（P<0.05）。 另外,HMGB 1 的表达与食管鳞癌的分期、VEGF-C、VEGF-D 的表达、MLD及患者的预后密切相关（P<0.05或P<0.01）;同时,VEGF-C、VEGF-D 的表达也与食管鳞癌的淋巴结转移、MLD密切相关（P<0.05或P<0.01）。 结论：在食管鳞癌中,HMGB 1 的大量表达可能是通过调控VEGF-C、VEGF-D 的表达来促进新生淋巴管生成,从而促进其淋巴结转移并影响患者的预后。因此,HMGB 1 有可能作为反映食管癌预后的重要生物学指标及抗食管癌淋巴管生成的重要靶点。     

食管鳞癌中DACT2基因表达及甲基化状态研究

[目的]检测食管鳞状细胞癌(ESCC)中DACT2基因表达及启动子区甲基化状态,探讨DACT2基因在食管鳞癌发生发展中的作用.[方法]分别应用逆转录—聚合酶链反应(RTPCR)以及甲基化特异性PCR(MSP)的方法检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-dC)处理前后的食管癌细胞系(TE1、TE13、T.Tn、Eca109)以及食管鳞癌组织及相应癌旁组织中DACT2 mRNA表达情况及启动子区甲基化状态.[结果]经5-aza-dC处理后4种食管癌细胞系中DACT2基因的表达均增高.4种未经5-aza-dC处理的食管癌细胞系中DACT2基因呈高甲基化状态.应用5-aza-dC处理后,DACT2基因在4种细胞系中均呈非甲基化状态.DACT2基因在食管鳞癌组织中的表达显著低于癌旁组织(0.66±0.53 vs 0.95±0.64,t=-2.43,P=0.018),并与淋巴结转移密切相关(t=-2.030,P=0.048).食管鳞癌组织中DACT2基因的启动子区甲基化率显著高于癌旁组织(50.0％ vs 21.1％,x2=9.439,P=0.002),并与TNM分期、组织学分化程度和淋巴结转移密切相关(P均＜0.05).发生DACT2基因甲基化的食管鳞癌组织中DACT2基因的表达量显著低于未发生甲基化的食管鳞癌组织(0.46±0.32 vs 0.78±0.61,t=-2.341,P=0.023).[结论]DA CT2基因在食管鳞癌中的异常低表达与食管鳞癌的发生、发展密切相关,且其启动子区甲基化可能是导致其表达沉默的机制之一.     

骨桥蛋白与表皮生长因子受体在食管鳞癌中的表达及临床意义

目的研究骨桥蛋白（osteopontin,OPN）及表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法应用S．P免疫组化技术检测60例食管鳞癌及其相应的癌旁正常组织中OPN和EGFR的表达,并随访6-18个月。结果食管鳞癌组织中OPN和EGFR阳性表达率为80％和71．7％,与癌旁正常组织表达率0和18．3％差异有统计学意义（P〈0．05）;OPN和EGFR的表达与肿瘤浸润深度、肿瘤临床分期、淋巴结转移程度及生存率有关（P〈0．05）,且EGFR与分化程度有关（P〈0．05）;食管鳞癌组织中OPN与EGFR的表达呈正相关（r=0．333,P〈0．05）。结论OPN和EGFR在食管鳞癌组织中的表达与食管鳞癌的发生、发展及预后相关,二者的联合检测可为食管鳞癌的诊断和治疗提供重要信息。     

食管鳞癌中ABCG4和V-ATPase表达及其临床意义

[目的]探讨ABCG4、V-ATPase蛋白在食管鳞癌中的表达及其临床意义。[方法]采用免疫组化、免疫荧光法检测ABCG4和V-ATPase在66例食管鳞癌中的表达,分析两者表达相关性。[结果]ABCG4、V-ATPase阳性率分别为65.15%、68.18%。ABCG4、V-ATPase的表达与性别、病理分级、TNM分期及淋巴结转移情况有关（P〈0.05）,均与年龄无关。在食管癌及各病理分级、各TNM分期中,ABCG4和V-ATPase的表达均有相关性（P均〈0.001,相关系数rs均〉0.7）。[结论]ABCG4、V-ATPase在食管鳞癌中高表达,可能与耐药、转移有关;两种蛋白表达存在相关性,可能有相互作用的功能。     

食管鳞状细胞癌组织中P53蛋白的积聚及其临床意义

采用免疫组化方法，以DO—7单克隆抗体检测57例食管鳞状细胞癌组织中P53蛋白的表达。结果：48例癌组织有不同程度的P53蛋白积聚，阳性率为84．21％（48／57）。从21例有淋巴结转移的病例共取得61个有转移癌淋巴结，其中58个淋巴结中转移癌呈DO－7阳性，与其原发癌相比，阳性程度增高。将癌组织中P53蛋白积聚情况与病人临床病情分期进行比较，分析结果显示晚期病人癌组织中P53蛋白聚积有增加趋势。除此之外，对57修例食管鳞状细胞癌进行了PCNA染色，绝大多数P53阳性的癌细胞也呈PCNA阳性，二者呈明显的正相关，表明有P53蛋白积聚的癌细胞具有更活跃的增殖能力。本文结果提示，食管鳞状细胞癌中P53蛋白积聚与肿瘤演进有一定关系。