Rhodopsin和S-opsin在MNU诱导的大鼠视网膜损伤过程中的表达变化

目的:观察在N-甲基-N亚硝酸脲(MNU)诱导的大鼠视网膜外核层细胞损伤过程中视紫质(rhodopsin)和蓝光视蛋白(blue-sensitive opsin/S-opsin)在视网膜中的表达变化,分析其与MNU诱导的视网膜损伤的关系。方法:将30只SPF级50 d龄雌性SD大鼠随机分为正常对照组和MNU模型1、3、7、10 d组,每组各6只大鼠。模型组以腹腔注射MNU(40 mg/kg)建立MNU模型;正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水(5 mL/kg)。右眼冰冻切片行苏木素-伊红(HE)染色判断视网膜损伤程度。通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫荧光检测各组视网膜中rhodopsin和S-opsin的mRNA及蛋白表达情况。结果:病理检测确定造模结果与以往实验一致,各组病理分级之间的差异显著(2=16.838,P0.01)。RT-PCR检测结果表明,与正常对照组相比,各MNU模型组rhodopsin和S-opsin的mRNA表达水平随MNU作用时间增加而逐渐降低且差异均显著(rhodopsin 1 d组P0.05;S-opsin 1 d组P0.01;3、7、10 d组rhodopsin和S-opsin均P0.01)。免疫荧光检测结果显示,在正常大鼠视网膜rhodopsin主要在光感受器细胞外段表达,MNU作用后rhodopsin主要在外核层表达,少量在内核层表达,并随MNU作用时间增加而逐渐表达降低。S-opsin在正常视网膜各层均有表达,在各模型组随MNU作用时间增加S-opsin的表达逐渐降低,在外核层和光感受器细胞内、外段尤为明显。结论:MNU诱导的视网膜外核层细胞损伤可降低rhodopsin和S-opsin的表达,并与MNU选择性引起光感受器细胞丧失有关。     

银杏苦内酯B对N-甲基-N-亚硝脲诱导的大鼠视网膜细胞凋亡的抑制作用

目的: 探讨银杏苦内酯B(GB)对N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的大鼠视网膜变性的影响及其机制。方法: 建立大鼠视网膜变性模型,应用TUNEL法检测光感受器细胞凋亡,RT-PCR法和免疫组织化学法分别检测MNU作用后不同时间大鼠视网膜中bcl-2和bax mRNA和蛋白的表达。结果: GB治疗组外核层细胞凋亡指数显著低于模型组(P<0.01)。MNU作用后12 h、1 d、2 d、3 d和5 d,bcl-2/bax mRNA模型组为0.36、0.15、0.29、0.42和0.64,GB治疗组为0.98、0.92、0.53、0.45和0.68,显著高于模型组(P<0.01)。GB治疗组Bcl-2蛋白在MNU给药后1 d表达最强,2 d阳性表达下降,3 d后阳性表达消失,模型组未见视网膜Bcl-2阳性表达;GB治疗组Bax蛋白表达显著低于模型组(P<0.01)。结论: 银杏苦内酯B能抑制MNU诱导的视网膜光感受器细胞凋亡,可能与上调Bcl-2的表达量,提高Bcl-2/Bax比值有关。     

不同MNU剂量诱导大鼠视网膜光感受器细胞损伤的视网膜电图和病理形态改变

目的： 探讨不同剂量N-甲基-N-亚硝脲（MNU）诱导的大鼠视网膜光感受器细胞损伤动物模型的眼电图和病理形态改变，寻找最适的MNU剂量。方法: 50 d龄雌性SD大鼠150只，随机分6组(每组25只大鼠)，即30 mg/kg、35 mg/kg、40 mg/kg、45 mg/kg和50 mg/kg MNU造模组和正常对照组，在造模后12 h、1 d、3 d、7 d和10 d测定大鼠的眼电生理，并取眼球进行病理检查。结果: 大鼠眼电生理结果显示，与正常组比较，30 mg/kg和35 mg/kg MNU组在各个时点对a波潜伏期和b波潜伏期的影响变化不大（P＞0.05）；a波振幅和b波振幅在第1、3 d下降较为明显(P＜0.05或 P＜0.01）。30 mg/kg和35 mg/kg MNU组在不同的时点:a波潜伏期、b波潜伏期、a波振幅和b波振幅明显高于40 mg/kg、45 mg/kg和50 mg/kg MNU组(P＜0.05或 P＜0.01）。45 mg/kg和50 mg/kg MNU组在不同的时点绝大多数呈现熄灭型电生理的表现。病理结果显示，在不同的时点，30 mg/kg和35 mg/kg MNU对大鼠视网膜光感受器细胞的损伤程度较轻，明显低于40 mg/kg、45 mg/kg和50 mg/kg MNU对大鼠视网膜外核层的损伤(P＜0.05或 P＜0.01）。损害程度为50 mg/kg＞45 mg/kg＞40 mg/kg。结论: 对大鼠视网膜光感受器细胞的病理和功能损害， 30 mg/kg和35 mg/kg MNU组损害较轻，40 mg/kg、45 mg/kg和50 mg/kg MNU组损害较重，40 mg/kg MNU是引起大鼠视网膜光感受器细胞最大损害的最低剂量。     

杞菊地黄汤防治MNU诱导大鼠视网膜变性的早期效应

目的:观察杞菊地黄汤在N-甲基-N-亚硝脲(MNU)诱导的SD大鼠视网膜变性早期的拮抗效应。 方法:生后46 d的雌性SD大鼠30只随机分为3组(n=10)：药物组以杞菊地黄汤灌胃，正常组和模型组以等量蒸馏水灌胃，每日1次，连续4 d。用药后第5 d，药物组和模型组大鼠皮下注射MNU 40 mg/kg，正常组皮下注射等量生理盐水做对照。注射后12 h，处死大鼠，每组大鼠的左眼（10眼）用于透射电镜观察；右眼（10眼）用于苏木素-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色观察并测量分析视网膜全层及外核层厚度，部分眼球行TUNEL法染色并计算细胞凋亡百分率。 结果:光镜下各组大鼠视网膜组织学未见明显改变，视网膜全层及外核层厚度组间比较均无显著差异（P>0.05）。TUNEL法染色见模型组和药物组外核层存在细胞凋亡，正常组未见。电镜下正常组和药物组光感受器细胞大小和核染色质分布均匀；模型组光感受器细胞开始变小，核染色质开始浓缩, 外节膜盘疏松，膜型不完整。 结论:杞菊地黄汤通过抑制细胞凋亡等选择性拮抗MNU对大鼠视网膜光感受器细胞的早期损伤。     

N-甲基-N-亚硝脲诱导的大鼠视网膜感光细胞损伤模型中Müller细胞增殖和细胞因子分泌的变化

目的：建立N-甲基-N亚硝脲（N-methyl-N-nitrosourea,MNU）损伤视网膜的模型,研究视网膜神经元凋亡对Müller细胞生物学特性的影响及神经营养因子的表达变化.方法：腹腔注射MNU建立视网膜损伤模型,免疫荧光染色方法研究感光细胞缺失对Müller细胞的生物学特性的影响,并检测主要神经营养因子表达的变化.结果：TUNEL法显示,腹腔注射MNU后2 d,视网膜外核层细胞凋亡现象明显.核增殖抗原（PCNA）及细胞周期素CyclinD1的表达明显增高.与此同时,Müller细胞也开始表达神经干细胞抗原巢蛋白（nestin） RT-PCR显示胰岛素样生长因子（IGF）,碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和肝细胞生长因子（HGF）mRNA的表达均升高.结论：在视网膜受到损伤时,Müller细胞增殖、去分化呈现出干细胞的特性.而视网膜中IGF、bFGF和HGF等细胞因子的表达明显增高,提示视网膜损伤后可能通过大量分泌细胞生长因子,促进Müller细胞的增殖.     

N-甲基-N-亚硝脲诱导的大鼠视网膜感光细胞损伤模型中Müller细胞增殖和细胞因子分泌的变化

目的:建立N-甲基-N-亚硝脲(N-methyl-N nitrosourea,MNU)损伤视网膜的模型,研究视网膜神经元凋亡对Müller细胞生物学特性的影响及神经营养因子的表达变化。方法:腹腔注射MNU建立视网膜损伤模型,免疫荧光染色方法研究感光细胞缺失对Müller细胞的生物学特性的影响,并检测主要神经营养因子表达的变化。结果:TUNEL法显示,腹腔注射MNU后2 d,视网膜外核层细胞凋亡现象明显。核增殖抗原(PCNA)及细胞周期素CyclinD_1的表达明显增高。与此同时,Müller细胞也开始表达神经干细胞抗原巢蛋白(nestin);RT-PCR显示胰岛素样生长因子(IGF),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肝细胞生长因子(HGF)mRNA的表达均升高。结论:在视网膜受到损伤时,Müller细胞增殖、去分化呈现出干细胞的特性。而视网膜中IGF、bFGF和HGF等细胞因子的表达明显增高,提示视网膜损伤后可能通过大量分泌细胞生长因子,促进Müller细胞的增殖。     

碘酸钠诱导大鼠视网膜损伤的病理改变和SOD、CAT的变化

目的: 探讨不同剂量碘酸钠诱导大鼠视网膜损伤过程中的病理形态改变及抗氧化系统中超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的改变。方法: SD大鼠80只,随机分为4组(每组20只),即40 mg/kg、50 mg/kg、60 mg/kg碘酸钠造模组和正常对照组。在造模后第1、4、7、14 d取大鼠右眼进行病理检查;取左眼视网膜,检测SOD和CAT的活性。结果: 病理结果显示,与对照组比较,第1 d,40 mg/kg和50 mg/kg碘酸钠造模组视网膜各层未见损伤,60 mg/kg碘酸钠造模组出现视网膜色素上皮层损伤、外核层细胞排列紊乱;第4、7、14 d,各剂量组均出现明显损伤,且损伤程度比第1 d和对照组明显加重,呈现外核层细胞波浪状改变和外核层厚度减少(P＜0.05或P＜0.01)。生化检测结果显示,与对照组比较,第1、4 d,60 mg/kg碘酸钠造模组视网膜组织SOD、CAT的活性均显著下降(P＜0.05);第7、14 d,各剂量组视网膜SOD、CAT活性均呈明显下降趋势(P＜0.05或P＜0.01)。结论: 40 mg/kg、50 mg/kg和60 mg/kg的碘酸钠均可导致大鼠视网膜色素上皮层和外核层细胞损伤,并使大鼠视网膜抗氧化系统受损。碘酸钠用量越大,视网膜细胞损伤出现时间越早、程度越重。     

海洛因对小鼠视网膜结构和抗氧化物酶的影响

目的 探讨海洛因对小鼠视网膜结构的影响。 方法 60只昆明小鼠随机分为对照组和海洛因组2组,海洛因组用递增剂量(2,3,4 g/L)连续(1～5、6～10和11～15 d)腹腔注射海洛因溶液15 d（每d 2次,每次0.2 ml）,对照组注射等量生理盐水。称量检测小鼠体重及眼球重的变化,用生物显微技术观察小鼠视网膜组织结构的变化,用比色法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量的变化,用免疫组织化学法检测Bax和肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白的表达情况。 结果 海洛因组小鼠体重和眼球重量均低于对照组,小鼠视网膜组织均有不同程度的损伤,神经节细胞减少,出现空泡样变性,内核层和外核层结构紊乱,疏松成网状;视网膜组织SOD活性显著降低,MDA含量显著增加;Bax,TNF-α蛋白表达显著增加。 结论 海洛因会降低视网膜组织抗氧化能力,使组织脂质过氧化反应增加,诱导视网膜细胞凋亡和炎症的发生,对视网膜有一定的损伤效应。     

黑视素基因转染给光双极细胞部分恢复MNU诱导的视网膜感光细胞变性小鼠的视觉

 目的： 探索定向转染内源性光感受蛋白黑视素（melanopsin/opsin 4,Opn4）基因进入给光型双极细胞后,视网膜变性小鼠模型中视网膜神经元的光反应以及整体视觉行为的改变。方法：选用由甲基亚硝基脲（N-methyl-N-nitrosourea,MNU）诱导的成年CD1小鼠作为视网膜变性模型。于P0~P1 CD1乳鼠视网膜底注射Grm6-Opn4-GFP质粒,Grm6-GFP作为阴性对照。通过电转进行基因转染。术后5周对基因转染小鼠腹腔注射MNU诱导视网膜感光细胞变性,对照组注射生理盐水,共设计5个实验组：正常对照组（normal）、生理盐水Grm6-Opn4-GFP对照组（NS+melanopsin）、MNU诱导模型Grm6-Opn4-GFP治疗组（MNU+melanopsin）、MNU诱导模型Grm6-GFP对照组（MNU+GFP）和MNU诱导组（MNU）。诱导后连续7 d进行明暗箱测试,统计动物在暗箱中的活动时间比。随后进行视网膜电图（electroretinogram,ERG）测试,计算体现给光双极细胞光反应的b波峰值、潜伏期和反映视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）光反应的明视负波反应（photopic negative response,PhNR）。利用免疫荧光法检测动物视网膜黑视素基因转导效果。结果：黑视素可以被定向转染进入视网膜给光双极细胞。明暗箱实验显示MNU诱导7 d后Grm6-Opn4-GFP转染的CD1小鼠滞留在黑箱的时间显著长于未转染组（P<0.05）,ERG测试显示Grm6-Opn4-GFP转染的CD1小鼠的b波也有明显恢复（P<0.05）。结论：定向转染内源性光感受蛋白黑视素基因进入给光型双极细胞可部分恢复视网膜变性模型动物视觉。     

牛磺酸对光化学损伤视网膜中c-Jun和caspase-1表达的影响

目的： 从c-Jun以及caspase-1表达变化的角度探讨牛磺酸减轻大鼠视网膜光化学损伤的分子机制。方法: 140只SD大鼠随机分为对照组、牛磺酸组，分别以标准饲料或添加4%牛磺酸饲料喂饲15 d后接受0、1、3、6、9、12、24 h的（3 000±200）lx持续光照。RT-PCR法、免疫印迹法分别检测视网膜内c-Jun mRNA以及蛋白表达水平，免疫组织化学法检测caspase-1在视网膜中分布及表达变化。结果: 光照后2组动物视网膜内c-Jun mRNA 在3 h表达开始增高，6 h达到高峰，12 h仍然有较高表达，但牛磺酸组6 h、12 h对应时点mRNA表达低于对照组（P<0.05）；视网膜内 c-Jun蛋白在光照后6 h开始增高，9 h达到高峰，其后表达量仍然维持较高水平，牛磺酸组c-Jun蛋白表达相对量相应时点低于对照组（P<0.05）。免疫组化发现caspase-1异常表达于外核层光感受器细胞胞浆，光照9 h阳性细胞数（14.5%±3.5％）显著高于牛磺酸组（6.8%±3.2％）,P<0.05，随光照时间延长，caspase-1阳性细胞越密集，光照12 h阳性细胞数达（32.4%±5.0％），而牛磺酸组（12.3%±2.5％）显著低于对照组（P<0.05）。结论: 在视网膜光化学损伤条件下，牛磺酸可能通过下调视网膜c-Jun和caspase-1表达，影响光感受器细胞凋亡信号转导从而保护视网膜。     

局部注射辛伐他汀对骨质疏松大鼠股骨髁骨小梁的改建效应

背景：局部注射具有成骨作用的辛伐他汀,可显著增加骨质疏松大鼠股骨颈及股骨髁部的骨密度及力学强度,分析局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。 目的：进一步研究骨质疏松大鼠股骨内局部注射辛伐他汀对股骨髁骨小梁的影响。为将辛伐他汀应用于临床骨质疏松局部治疗提供实验基础。 方法：18只雌性SD大鼠双侧卵巢切除后3个月,制备大鼠骨质疏松模型。实验大鼠随机数字表法均分为3组,分别在实验大鼠的右侧股骨髓腔内单次注射辛伐他汀溶液5 mg、10 mg,对照组单纯注射空白载体。分别在注射后1个月处死大鼠并取材。Micro-CT扫描并定量分析骨组织形态变化。 结果与结论：给药后1个月,Micro-CT扫描结果显示,辛伐他汀治疗组的骨微结构参数如骨皮质厚度、骨小梁密度及连接率明显优于对照组。说明疏松骨骼单次注射小剂量辛伐他汀可显著促进股骨髁部骨小梁改建,改善骨骼微结构,可为强化局部、防治骨质疏松骨折的新选择进一步提供实验基础。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

石斛属民族药用植物的分类及生药学研究

中药石斛早在《神农本草经》中就被列为上品,其应用历史悠久,具有养阴生津、补肾益气、润喉护嗓、活血明目、抗癌防老等功效。本文对国内外石斛属民族药用植物的分类及生药学研究进行了综述。     

膝关节骨性关节炎的关节镜治疗体会

目的我科自2001～2005年4月对59例67膝的骨性关节炎（0A），进行关节镜检查及镜下清理术。方法镜检：膝关节骨性关节炎伴不同程度滑膜炎，滑膜皱壁粘连纤维片，关节软骨不同程度破坏。镜下清除增生滑膜，松解粘连，去除剥脱软骨、修复关节面。结果随访2月～4年，平均1.5年，术后综合评估2月～1年，优良率94％；1～2年，优良率79.2％；2年以上优良率54.8％。结论关节镜对膝关节骨性关节炎诊断能提供了比较全面的资料，并对骨性关节炎早期有良好疗效，具有创伤小、恢复快、并发症少和重复治疗等优点。     

Assessment of the efficacy of treatment of hemangiomas

Assessment of the aftereffects of cryoexposure and ultrahigh-frequency cryoexposure on hemangioma tissue of various types, cavernous and squamous, showed a higher cryogenic effect in hemangiomatous tissue preexposed to ultrahigh-frequency waves. A quantitative criterion is proposed for assessing the efficacy of the studied methods of exposure. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 119, N ^o 6, pp. 669–672, June, 1995     

Effect of route of antitoxin administration on efficacy of treatment of experimental tetanus

The efficacy of treatment with Diaform-3 antitoxin, given by either intracisternal or intralumbar injection in a dose of 400 i.u./kg, was compared in experiments on 100 rabbits with ascending, hematogenous, and cerebral tetanus caused by injection of 1 c.l.d. of tetanus toxin. Intracisternal injection of the antitoxin was found to be three times more effective than intralumbar (the proportion of animals cured was 31.4 and 10.2% respectively). The latter was effective only in animals with ascending tetanus, evidently because the portal of entry of the toxin into the CNS was along the peripheral nerves of the hind limbs.Central Research Laboratory, L'vov Medical Institute. (Presented by Academician of the Academy of Medical Sciences of the USSR A. M. Chernukh.) Translated from Byulleten' Éksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 86, No. 8, pp. 212–213, August, 1978.     

Effect of ultralow doses of thyroliberin on microviscosity of lipid components of biological membranes

Effects of the regulatory peptide thyroliberin on microviscosity of lipid components of endoplasmic reticulum biological membranes in mouse hepatocytes were studied by electron paramagnetic resonance. Thyroliberin in a concentration of 10⁻³–10⁻¹⁸ M decreased microviscosity of surface layers of membrane lipids. This decrease was the most pronounced (30%) under effects of 10⁻¹⁰ and 10⁻¹⁶ M thyroliberin. Physiological effects of thyroliberin corresponded to its influence on the membrane structure. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 129, No. 1, pp. 38–40, January, 2000     

Pathways of the realization of immunomodulating effects of neurotransmitters

Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 115, N ^o 4, pp. 401–404, April, 1993