HPLC-MS/ESI测定人血浆中米格列醇

 目的　建立高效液相色谱 质谱联用测定人血浆中米格列醇浓度的方法,并用于健康人体内米格列醇药物动力学研究。方法　采用MACHEREY NAGELCN色谱柱(4.6mm×250mm,5 μm),柱温50℃,以乙腈甲醇0.02%盐酸水溶液为流动相,流速0.80mL·min^-1;质谱采用电喷雾电离源正源(ESI⁺),定量分析采用选择离子监测(SIR),质荷比为准分子离子峰;血浆样品用乙腈沉淀后,将乙腈挥干,残渣用氯仿-异丙醇提取杂质,磷酸液提取药物,外标法定量。结果　米格列醇浓度在32～32.00ng·mL^-1内线性关系良好,相关系数为0.9997,最低检测浓度5ng·mL^-1(S/N =3)。批内、批间RSD符合方法学要求,单次服用10.0mg米格列醇片后药动学参数AUC_0～12 ,AUC_0～∞,c_max,t_max,t_1/2 分别为(7592.7±4207.4)ng·h·mL^-1,(7957.6±4425.7)ng·h·mL^-1,(1883.9±912.3)ng·mL^-1,(2.4±0.6)h,(2.5±0.9)h。结论　该方法稳定、灵敏度高、操作简单 ,适用于米格列醇血药浓度测定及药动学研究。     

灯盏乙素在大鼠体内药代动力学及组织分布的研究

目的：研究灯盏乙素在大鼠体内药代动力学和组织分布特性,为临床合理用药提供科学依据。方法：灌胃给予80 mg·kg^-1的灯盏乙素,HPLC测定大鼠体内灯盏乙素的血药浓度及组织中的浓度,血浆样品用固相萃取的方法处理,其他生物样品用液-液萃取法处理。结果：灯盏乙素在血浆和组织匀浆中线性范围分别为10～1 280 ng·mL^-1(R2>0.99)和40～1 280 ng·g^-1 (R²>0.99),最低检测限分别为10 ng·mL^-1和40 ng·g^-1,日内、日间精密度均小于8%。主要药代动力学参数：达峰时间t_max为(7.7±1.0) h,峰浓度C_max为(288.0±75.2) ng·mL^-1,药时曲线下面积AUC0～t为(5.6±1.6) μg·mL^-1·h,MRT0～t为 (17.5±1.4) h。结论：灯盏乙素口服后在体内呈非房室模型,药时曲线有双峰现象。     

HPLC-MS同时测定人血浆中吡格列酮及其活性代谢产物的浓度

 目的建立高效液相色谱质谱联用测定人血浆中吡格列酮及其活性代谢产物M-Ⅲ(酮类衍生物)和M-Ⅳ(羟化衍生物)的方法。方法采用WatersXTerraTN C₁₈色谱柱(2.1mm×150mm,3.5μm),Phenomenex C₁₈保护柱,柱温50℃,流动相:乙腈-30mmol·L^-1醋酸铵溶液(含0.1%的甲酸和0.05%的三氟醋酸)(35:65),流速0.22mL·min^-1。质谱采用电喷雾电离源正离子模式(ESI⁺),选择性监测质荷比(m/z)357.4(吡格列酮),358.2(内标),371.5(M-Ⅲ),373.2(M-Ⅳ)的准分子分子离子峰;血浆样品经盐酸酸化后,采用叔丁基甲醚-氯仿提取,内标法定量。结果吡格列酮,M-Ⅲ和M-Ⅳ分别在11.16～1748.60,3.33～520.50,5.00～687.50ng·mL^-1内线性良好(r≥0.9997),最低检测浓度分别为2.90,1.10,1.20ng·mL^-1,3个化合物的方法回收率均在90%-110%范围内,日间和日内RSD皆小于15%。结论本方法操作简单,灵敏准确,稳定性好,适用于临床吡格列酮治疗药物监测,药动学及其药物相互作用的研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中艾地苯醌浓度

 目的:建立人血浆中艾地苯醌浓度高效液相色谱测定方法?方法:色谱条件:色谱柱为C₁₈反相柱,流动相为甲醇-水(70∶30),紫外检测波长为280nm?血浆样品加盐酸后用乙醚萃取,浓缩后进样?并测定2名健康受试者口服艾地苯醌后的血浆药物浓度?结果:标准曲线范围为20～1600ng·ml^-1,线性良好?最低定量浓度为5ng·ml^-1?40,200,800ng·ml^-13种浓度的平均回收率(n=5)分别为73.86%,83.72%和76.17%?日内、日间RSD≤5.38%(n=5)?结论:本方法操作简便,结果准确可靠,适用于临床血药浓度监测和人体生物利用度研究?     

LC-MS法研究血浆中氧化苦参碱及其代谢物在犬体内的药代学

目的 :建立同时测定Beagle犬血浆中氧化苦参碱及其代谢物的LC MS分析法 ,研究氧化苦参碱及其代谢物药代学过程。方法 :采用LichrospherC₁₈柱 (4.6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,柱温 2 5℃。流动相 10mmol·L^-1醋酸铵水溶液 甲醇 (2 5∶75 ) ,流速 1mL·min^-1;电喷雾离子化 (ESI)方式 ,采用选择性离子检测法 ,检测离子为正离子 ,氧化苦参碱SIM的离子是 [M +H]⁺ ,m/z 2 6 5 .1;苦参碱SIM的离子是 [M +H]⁺ ,m/z2 4 9 2。结果 :氧化苦参碱与苦参碱在 2～ 5 0 0 0ng·mL^-1呈良好的线性关系 (r≥ 0. 9990 ) ,二者最小检出含量分别为 0. 6 ,0. 3ng·mL^-1。日内和日间误差均小于 4.7% ,方法回收率大于 96. 5 % ;氧化苦参碱的T_1/2 ,T_max,C_max,MRT ,AUC_{0→24 h}为 (5. 5± 1 5 8)h ,(1.0± 0 .30 )h ,(2 4 18 3± 970 78)ng·mL^-1,(3.2± 0. 6 4 )h ,(5 797 4± 90 8 16 )ng·mL^-1·h ,苦参碱的T_1/2 ,T_max,C_max,MRT ,AUC_{0→24 h}为 (9.8± 2.77)h ,(1.9± 1.0 9)h ,(15 32. 4± 4 94 86 )ng·mL^-1,(4 4± 1 97)h ,(5.5 30 5± 10 4 2.6 5 )ng·mL^-1·h。结论 :氧化苦参碱和苦参碱LC MS定量法灵敏、快速、简单 ,专属性强 ;氧化苦参碱口服后在Beagle犬体内转化较多。     

RP-HPLC测定人血浆中咪唑斯汀浓度

 目的测定人血浆中咪唑斯汀的浓度方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱为日本HiQ silC₁₈ V(4.6 mm×150 mm,5μm),检测波长为285nm,流动相为0.025 mol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液-乙腈-甲醇(75:25:5)(pH=2.58).流速0.5 mL·mm^-1。结果回归方程Y=0.002 8X+0.0013(r=0.999 4),其线性范围为20.8～554.7 ng·mL^-1,最低检测浓度为13.87 ng·mL^-1(S/N>3),提取回收率在77.93%～88.84%之间(RSD为2.49%-7.45%),日内和日间RSD分别为4.58%～8.25%和2.08%～7.65% 结论该法操做简便、快速、准确、重现性好,适用于咪唑斯汀的药动学研究。     

六一散配伍规律的药动学研究

目的:研究甘草及六一散在大鼠血浆中甘草次酸药动学参数的差异,以探索六一散配伍的合理性。方法:将甘草及六一散制成水煎液,分别灌胃给予SD大鼠,采用HPLC/MS/MS法测定大鼠血浆中甘草次酸的血药浓度,并计算主要药动学参数。结果:给予六一散或甘草后大鼠血浆中甘草次酸的T_max,C_max,T_1/2,AUC_0-480:给六一散后分别为:(45.0±10.6)min,(532.8±257.7)ng·mL^-1,(72.6±36.5)min,(26568.7±7682.7)ng·mL^-1·min^-1;给甘草后分别为(240.0±30.4)min,(480.7±157.6)ng·mL^-1,(141.4±26.7)min,(100447.4±58896.2)ng·mL^-1·min。结论:相对于单用甘草,给予六一散水煎液后大鼠血浆中的甘草次酸达峰时间提前,达峰浓度提高,有利于复方快速而集中的发挥药效。     

RP-HPLC测定人血浆中盐酸依匹斯汀浓度及其药动学

 目的建立RP-HPLC测定人血浆中盐酸依匹斯汀浓度。方法采用Agilent 1100系列高效液相色谱仪。色谱柱Kro—masil^TM C₁₈(4.6 mm×150 mm,7μm);固定进样环50μL;流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(0.05 mol·L^-1KH₂PO₄用H₃PO₄调pH至3.5)(30:70),流速1.0 mL·min^-1;紫外检测波长:210 nm;柱温:室温;内标为替硝唑。结果盐酸依匹斯汀血药浓度线性范围为1.062 5～34.0000 ng·mL^-1,最低检测浓度1.062 5 ng·mL^-1;方法回收率为94.02%～106.46%;日内、日间RSD分别为2.54%～8.09%和4.90%～9.09% 结论本法灵敏、准确,可用于盐酸依匹斯汀进一步的临床研究。     

HPLC测定小儿智力糖浆中远志酸的含量

目的:建立小儿智力糖浆中远志酸的含量测定方法。方法:HPLC法,采用C₁₈柱(4.6mm×250mm,0.5μm);流动相:乙腈-0.2%磷酸(40∶60),流速:1.0mL·min^-1;检测波长:210nm;柱温:30℃。结果:远志酸在10.575μg·mL^-1～211.5μg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.9997,平均回收率为98.58%,RSD为1.52%(n=6)。结论:该法简便、准确、专属性强,可用于小儿智力糖浆中远志酸的含量测定。     

乌拉地尔缓释胶囊相对生物利用度和体内外相关性研究

 目的　对乌拉地尔缓释胶囊进行相对生物利用度和体内外相关性研究。方法　采用反相高效液相色谱法测定24名健康志愿受试者单剂量和多剂量口服乌拉地尔缓释胶囊供试制剂与参比制剂后乌拉地尔血药浓度的变化。用3P97药动学程序处理试验数据,并对试验结果进行方差分析和双单侧t检验;体外释放度采用中国药典2000版二部的转篮法。结果 单剂量试验乌拉地尔的相对生物利用度为:(96.37±13.77)%;两种制剂乌拉地尔的药-时曲线下面积(AUC_0→t)分别为:(2347.6±493.2),(2458.9±526.5 )ng·h·mL^-1;达峰时间(t_max)分别为:(4.17±0.28),(4.23±0.29)h;峰浓度(c_max)分别为:(325.6±40.3),(322.0±75.5 )ng·mL^-1。多剂量试验乌拉地尔的相对生物利用度为:(99.99±16.24)%;两种制剂乌拉地尔的药-时曲线下面积(AUC_0→t)分别为:(4513.1±1372.7) ,(4549.7±1308.8)ng·h·mL^-1;稳态达峰时间(t_max)分别为:(4.00± 0.49),(4.08±0.43)h;稳态峰浓度(c_max)分别是 :(544.5±147.1),(565.7±146.8)ng·mL^-1;波动度DF分别是(91.22±14.07)%,(84.53±26.10)%。体外12h平均累积释放86.33%和87.35%。结论　对单剂量口服两种制剂后的lnAUC_0→∞,lnAUC_0→t,lnc_max经双单侧t检验，t_max经秩和检验进行生物等效性评价，表明两者为生物等效制剂，且乌拉地尔缓释胶囊的体内吸收与体外释药有良好的相关性(P<0.05)。     

血和尿中7-氨基硝西泮的GC-ECD检测

 目的　建立血、尿中硝西泮的代谢物 7-氨基硝西泮GC-ECD检测方法。方法　碱性条件下用苯-异戊醇(98.8∶1.5)提取,七氟丁酸酐为酰化试剂,室温无水条件下进行酰化,GC-ECD法检测。结果　血、尿中7-氨基硝西泮浓度在5～300ng·mL^-1范围内呈良好的线性关系,血、尿中的提取率分别为(86.9±4.5)%(n=5)和(96.9±3.9)%(n=5),检出限分别为2.8及1.4ng·mL^-1。结论　该方法灵敏度高,线性范围宽,将建立的方法应用于人口服药物后的血、尿检测,结果满意。     

人血浆中加兰他敏的HPLC测定及药动学研究

 目的建立加兰他敏血药浓度测定方法并进行了药动学研究。方法采用HPLC-UV检测法测定血药浓度，检测波长224 nm。血样加1 mol·L_-1 NaOH碱化后用醋酸乙酯-正己烷(1∶1)萃取；色谱柱：Hypersil C18(200 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：乙腈-水-四氢呋喃(60∶910∶30)(pH2.6)，1 L流动相含有1.8 g庚烷磺酸钠,1 mL三乙胺；流速：1.0 mL·min_-1。结果血药浓度线性范围2.5～160.0 ng·mL_-1(r=0.9998，n=7)，血浆最低检测浓度为1.25 ng·mL_-1，低、中、高3种浓度平均回收率分别为：(106.35±5.76)%，(105.41±7.30)%，(100.19±5.81)%。20名受试者单次po10 mg氢溴酸加兰他敏主要的药动学参数分别为t1/2(8.68±1.87) h,t_max(0.88±0.61) h,c_max(69.72±14.73) ng·mL_-1,AUC_0～30(519.57±94.79) ng·h·mL_-1，AUC_0～∞(571.91±102.54) ng·h·mL_-1。结论该法为加兰他敏药动学研究提供了一种检测方法。     

高效液相色谱法测定西罗莫司血药浓度

 目的　采用HPLC测定西罗莫司血药浓度。方法　色谱柱为Supelcosil LC-18 DB(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-水(75∶25)为流动相,柱温50℃,流速1.0mL·min^-1,检测波长 276nm。结果　西罗莫司血药浓度在2.5～70ng·mL^-1范围内,浓度与峰面积比有良好的线性关系(r=0.9998),最低检测浓度为0.8ng·mL^-1。平均方法回收率为( 99.0±4.7)%(n=15)。日内RSD≤3.2%,日间RSD≤6.7%。结论　本方法简单、快速、准确,可用于西罗莫司的临床药动学研究。     

固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆麦考酚酸浓度

 目的建立固相萃取反相高效液相色谱法测定人血浆麦考酚酸(MPA)浓度,探讨MPA与其代谢产物间的转化。方法用固相萃取法处理样品,以泼尼松为内标物,C₁₈硅胶键合相为固定相,甲醇-四氢呋喃-水(60∶2∶50)作流动相,在波长254 nm处紫外定量检测。结果MPA浓度在0.2～40 μg·mL^-1范围内与色谱峰高呈良好线性关系,血浆MPA回收率为92.3%～103.1%,绝对回收率为50.2%～53.7%。最低检测极限为0.2μg·mL^-1,批内与日间(n＝5)RSD为3.34%和4.70%。结论本法用于MPA测定具有准确、灵敏、简便等特点,能满足临床常规血药浓度监测。     

舒肝凉血方对三苯氧胺代谢产物影响的研究

目的:研究临床有效中药复方舒肝凉血汤对三苯氧胺(Tamoxifen,TAM)及其活性代谢产物4-羟基三苯氧胺(4OHtam)体内代谢的影响。方法:标本样品取自参加临床随机双盲试验的患者血标本。采用两组用药前后自身对照和组间对照的方法。TAM及4OHtam血清浓度采用高效液相-质谱联用(HPLC-MS)方法检测。使用SPSS13.0分析软件,进行统计学分析。结果:中药组服中药前血中TAM,4OHtam浓度分别为(215.63±95.36)ng·mL^-1,(4.49±1.49)ng·mL^-1。服中药后分别为(233.17±126.48)ng·mL^-1,(5.34±2.78)ng·mL^-1。安慰剂组服药前血中TAM,4OHtam浓度分别为(209.80±75.05)ng·mL^-1,(5.15±1.67)ng·mL^-1;服药后分别为(216.86±98.89)ng·mL^-1,(4.21±1.41)ng·mL^-1。两组间检验结果和用药前后各组自身比较差异均无统计学意义。结论:实验提示中药舒肝凉血汤对三苯氧胺及4-羟基三苯氧胺的体内代谢无明显影响,为该方与三苯氧胺合用的安全性提供了依据。     

高效液相色谱 荧光检测法测定人血浆中酒石酸唑吡坦的浓度

 目的建立酒石酸唑吡坦血药浓度测定方法。方法采用HPLC-荧光检测法测定血药浓度,激发波长254 nm,发射波长390 nm。血样加0.25 mol·L^-1KOH碱化后用乙醚萃取;色谱柱：HypersilODS2(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相：乙腈-0.02mol·L^-1KH₂PO₄(pH6.0)(40∶60);流速：1.0 mL·min^-1。结果血药浓度线性范围5.0～250.0 ng·mL^-1(r=0.9995,n=6),血浆最低检测浓度为2.5 ng·mL^-1,高、中、低3种浓度平均回收率分别为：(103.60±2.44)%,(104.40±0.84)%,(106.64±9.93)%。结论该法为酒石酸唑吡坦药动学研究提供了一种检测方法。     

RP-HPLC测定正常人口服复方川芎汤剂后血清中游离的阿魏酸

 目的：建立一种测定正常人po复方川芎汤剂后血清中游离阿魏酸（FA）浓度的方法。方法：采用高效液相色谱法，以香豆素为内标（42μg·ml^－1），甲醇 醋酸 水（38∶0．3∶61．7）为流动相，Lichrosorb RP₁₈（150mm×4．6mm，5μm）为分析柱，紫外检测波长为320nm。取500μl血清，加入内标，水浴（90℃）5min，超微搅拌器搅拌15s，离心（3000r·min^－1）15min取上清液进样分析。结果：FA的检测限为6ng·ml^－1（S／N＝3．5），最低检出血清浓度为8．8ng·ml^－1，线性范围为17．6ng·ml^－1～1408．0ng·ml^－1，r＝0．9995，方法平均回收率为（99．04±2．26）％，日内精密度RSD≤4．10％，日间精密度RSD≤5．82％。结论：本法简便、快速、灵敏，内源性物质及复方各组分药物不干扰测定。另还测定了正常人应用本口服液后的药动学参数。