shRNA干扰PLCε1基因对人食管癌Eca109细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨沉默PLCε1基因对食管癌Eca109细胞增殖和细胞周期的影响及其可能的机制。方法 PLCε11、PLCε12和PLCε13质粒表达载体用于沉默PLCε1,通用阴性对照质粒表达载体HK作为对照。用阳离子脂质体进行转染,筛选出干扰效果最好的质粒表达载体(PLCε12)。实验分为Eca109组、HK组和PLCε12组。MTT检测细胞的存活率。FCM检测细胞周期,RT-PCR检测细胞P16、Cyclin D1基因mRNA表达。结果 HK、PLCε12质粒表达载体转染Eca109细胞后48和72 h,PLCε12组Eca109细胞的存活率分别为80.73%和75.88%,显著低于HK组(P0.001)。Eca109细胞转染后24 h,PLCε12组处于S期的细胞比例明显低于HK组(P0.01),细胞周期阻滞于G0/G1期。质粒表达载体转染Eca109细胞48 h后,PLCε12组Eca109细胞P16基因mRNA表达水平明显高于HK组(P0.01)。结论沉默PLCε1基因可能通过上调Eca109细胞P16基因的表达,阻止细胞周期从G1期向S期的过渡,抑制Eca109细胞的增殖活性。     

RNAi沉默HMGA1基因对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:筛选HMGA1基因沉默稳定转染肝癌细胞株,检测沉默后肿瘤细胞凋亡、周期和增殖的变化。方法:靶向HMGA1的RNAi载体转染肝癌细胞,G418筛选得到稳定转染细胞株并鉴定;MTT法和FACS检测细胞增殖、凋亡及细胞周期。结果:成功建立基因沉默HMGA1稳定细胞株;HMGA1基因沉默后,细胞凋亡百分率(29.46±3.04%)明显高于质粒对照组和空白对照组(1.96±0.76%和2.04±0.70%,P<0.01);G0-G1期细胞百分率(75.21±2.35%)明显高于质粒对照组和空白对照组(37.98±3.02%和39.23±3.63%,P<0.01),G2-S期(24.79±2.35%)显著低于质粒对照组和空白对照组(62.03±3.01%和60.77±3.63%,P<0.01);MTT检测显示,HMGA1沉默细胞增殖与质粒对照组和空白对照组相比显著降低(P<0.01或0.05)。结论:基因沉默HMGA1可促进肿瘤细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

染色体数目异常自然流产胚胎有丝分裂关卡蛋白基因的研究

目的探讨染色体数目异常自然流产胚胎中有丝分裂关卡蛋白(hsMAD2)基因的功能。方法分别用定量PCR和Western blotting在mRNA和蛋白水平检测染色体数目异常(实验组)和正常(对照组)的自然流产胚胎组织中目的基因的表达;构建针对hsMAD2基因的shRNA表达载体,抑制胚胎细胞内源性hsMAD2基因的表达,用Western blotting和定量PCR方法评价shRNA的干扰效果;用MTT法测定细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期。结果hsMAD2蛋白在实验组中的表达显著低于对照组。shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制胚胎细胞中hsMAD2基因的表达。胚胎细胞转染有效干扰质粒48 h后,细胞增殖抑制率达58%。有效干扰质粒引起G0/G1期和S期细胞的明显降低,G2/M期细胞增多。结论hsMAD2基因表达下调可能在染色体数目异常的自然流产胚胎发生中起着很重要的作用,为寻找可靠的临床检测指标奠定了基础。     

siRNA干扰人BMP9重组腺病毒载体的构建及其促进乳腺癌SK-BR-3细胞增殖

 目的 筛选特异性干扰人BMP9基因的siRNA序列并制备重组腺病毒AdsiBMP9,探讨RNAi人BMP9基因后对乳腺癌SK-BR-3细胞增殖能力的影响。方法 设计制备3对干扰人BMP9的双链DNA序列,亚克隆至Pses-Hus质粒中获得Pses-Hus-siBMP9质粒,脂质体转染乳腺上皮细胞HBL-100筛选有效干扰质粒,构建重组腺病毒并感染SK-BR-3细胞,RT-PCR,Western blot 检测BMP9表达,MTT检测细胞增殖能力。 结果 成功构建并筛选出针对人BMP9基因的有效干扰质粒并包装成腺病毒,病毒滴度为1×1010IU/mL,感染SK-BR-3细胞显示BMP9在转录水平和翻译水平表达量显著低于对照组和空白组(P<0.05),第5天AdsiBMP9组细胞的增殖率显著高于AdsiNC组（P<0.05）。结论 成功构建特异性沉默人BMP9基因的siRNA腺病毒载体,可有效抑制SK-BR-3细胞中BMP9基因的表达从而促进该细胞增殖。     

重组Ser17 突变型hIFN鄄茁腺病毒的构建及其对结肠癌细胞的增殖抑制作用

目的:构建表达突变型人源茁干扰素(Ser17 hIFN-β)的重组腺病毒,体外评价其对结肠癌细胞的抑制增殖作用及细胞周期的影响。方法:人工合成含Ser17 突变型hIFN-β基因并克隆至穿梭载体pshuttle-CMV,pshuttle-Ser17 hIFNβ与腺病毒骨架质粒pAd 同源重组后转染HEK293 细胞,包装重组腺病毒rAd-Ser17 hIFNβ。rAd-Ser17 hIFNβ转染人结肠癌细胞株HT-29,Western blot 检测rAd-Ser17 hIFNβ在HT-29 中的表达;MTT 细胞生长实验检测rAd-Ser17 hIFNβ对HT-29 细胞的体外增殖的影响,流式细胞术检测HT-29 细胞周期改变情况。结果:重组腺病毒经HEK293 细胞扩增后滴度可达109.125 CCID50/ ml;Western blot 检测到外源性Ser17 hIFN-β基因在HT-29 细胞中的表达;rAd-Ser17 hIFNμ转染后HT-29 细胞生长受到抑制(P<0.05),细胞处于S 期百分比增加。结论:表达Ser17 突变型hIFN-μ的重组腺病毒能抑制结肠癌细胞的增殖及诱导S 期阻滞,为应用 干扰素对结肠癌进行基因治疗提供了实验基础。     

重组Ser~(17)突变型hIFN-β腺病毒的构建及其对结肠癌细胞的增殖抑制作用

目的:构建表达突变型人源β干扰素(Ser17hI FN-β)的重组腺病毒,体外评价其对结肠癌细胞的抑制增殖作用及细胞周期的影响。方法:人工合成含Ser17突变型hI FN-β基因并克隆至穿梭载体pshuttle-CMV,pshuttle-Ser17hI FNβ与腺病毒骨架质粒pA d同源重组后转染HEK293细胞,包装重组腺病毒rA d-Ser17hI FNβ。rA d-Ser17hI FNβ转染人结肠癌细胞株HT-29,Western blot检测rA d-Ser17hI FNβ在HT-29中的表达;MTT细胞生长实验检测rA d-Ser17hI FNβ对HT-29细胞的体外增殖的影响,流式细胞术检测HT-29细胞周期改变情况。结果:重组腺病毒经HEK293细胞扩增后滴度可达109.125CCID50/ml;Western blot检测到外源性Ser17hI FN-β基因在HT-29细胞中的表达;rA d-Ser17hI FNβ转染后HT-29细胞生长受到抑制(P0.05),细胞处于S期百分比增加。结论:表达Ser17突变型hI FN-β的重组腺病毒能抑制结肠癌细胞的增殖及诱导S期阻滞,为应用β干扰素对结肠癌进行基因治疗提供了实验基础。17     

RNA干扰MAD2基因对细胞增殖的影响

目的:探讨MAD2对HepG2细胞周期的影响。方法:构建针对MAD2基因的shRNA表达载体,MAD2基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达质粒pmad2-EGFP共转染HepG2细胞株,用Western印迹法检测shRNA的抑制效应;用MTT法测定细胞增殖率;用流式细胞仪检测细胞周期。结果:shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制MAD2绿色荧光融合蛋白的表达。HepG2细胞转染有效干扰质粒48h后,细胞增殖抑制率达65%。有效干扰质粒引起G0/G1期和S期细胞的明显降低,G2/M期细胞增多。结论:在细胞水平,可通过RNA干扰特异性抑制MAD2基因来抑制细胞的增殖,为研究MAD2基因在细胞增殖中的作用机制奠定基础。     

慢病毒介导的caspase-3沉默对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和凋亡的影响

 目的：探讨沉默caspase-3对大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法：构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染MSCs,通过real-time PCR和Western blotting 在mRNA及蛋白水平鉴定转染结果。采用MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期。Real-time PCR检测bcl-2和bax mRNA的表达。Hoechst荧光染色法检测细胞的凋亡情况。结果：Real-time PCR和Western blotting结果均表明成功建立稳定转染shRNA-caspase-3的大鼠MSCs细胞株。沉默caspase-3使MSCs的增殖率明显提高（P＜0.05）,且S期细胞百分比明显增多,为（52.66±0.30）%。沉默caspase-3后bcl-2 mRNA表达上调,bax mRNA表达下调,bcl-2/bax比值升高（P＜0.05）。转染组的细胞凋亡率为（15.01±1.73）%,低于空载体组的（25.67±3.05）%和空白对照组的（23.67±1.16）%（P＜0.05）。结论: 沉默caspase-3能调控MSCs的细胞周期,促进细胞增殖,减少细胞凋亡。     

人NRAGE基因重组腺病毒载体的构建及其对293细胞细胞周期的影响

目的构建hNRAGE基因的重组腺病毒载体,并研究其对293细胞细胞周期的影响。方法采用PCR方法扩增hNRAGE基因片段,并亚克隆至腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中,构建穿梭质粒pAdTrack-CMV/hNRAGE。经测序检测后,用PmeI酶切使pAdTrack-CMV/hNRAGE被线性化,然后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1用电穿孔法共转化大肠杆菌BJ5183,进行同源重组。经PacI酶切鉴定后,用磷酸钙法转染QBI-293A细胞,包装成重组体腺病毒Ad-hNRAGE颗粒。利用穿梭质粒pAdTrack-CMV中GFP报告基因的表达,观察重组腺病毒的产生,测定病毒颗粒的浓度。用Western blot检测目的基因的表达。采用MTT法检测293细胞的活力,用流式细胞术分析hNRAGE基因对293细胞周期的影响。结果成功地构建hNRAGE重组腺病毒载体。Western blot检测结果证实,hNRAGE基因可在293细胞中表达。收获病毒后,经测定病毒颗粒的浓度大约为6.5×109个/μL。转染了重组腺病毒Ad-hNRAGE的293细胞与正常细胞相比较,增殖率显著降低,G0-G1和G2-M期的细胞增多,S期的细胞明显减少。结论hNRAGE基因可能有抑制293细胞生长的作用。     

早期B细胞因子3对HepG2细胞周期的影响

目的:克隆人早期B细胞因子3 (EBF3)基因,构建真核表达载体pEGFP/EBF3,研究人EBF3对肝癌细胞株HepG2细胞周期的影响.方法:提取人胎盘组织总RNA,采用RT-PCR技术克隆人EBF3基因,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1,重组质粒双酶切鉴定,并进行序列测定.将重组质粒转染HepG2细胞,Western blot确证EBF3-EGFP融合蛋白的表达及亚细胞定位,流式细胞术分析转染细胞周期.结果:成功获得全长人EBF3基因,经双酶切和序列测定鉴定,真核表达质粒pEGFP/EBF3构建正确,将pEGFP /EBF3导入HepG2细胞24小时后,在倒置荧光显微镜下可观察到EBF3-EGFP融合蛋白主要表达于核内.Western blot证实转染pEGFP/EBF3后24小时和48小时细胞质和细胞核中均检出相对分子质量(Mr)为87 000的EBF3-EGFP融合蛋白.转染pEGFP/EBF3后48小时和72小时,S期细胞比例均明显高于pEGFP-N1转染细胞组,表明EBF3基因的导入可诱导细胞从G1期向G2期发展,从而促进细胞增殖.结论:成功构建了真核表达质粒pEGFP/EBF3,pEGFP /EBF3转染组S期细胞比例高于pEGFP-N1转染组,提示EBF3对人肝癌细胞株HepG2细胞有促进增殖作用.     

重组腺病毒介导的人AWP1基因转移对人源肝癌细胞增殖的影响

目的以重组腺病毒作为AWP1（associated with PRK1）的转基因载体,研究AWP1对人肝癌细胞增殖的影响,为进一步研究AWP1基因功能提供依据。方法重组腺病毒质粒pAd-flag-AWP1转染293细胞进行重组腺病毒的包装和扩增,并进行PCR鉴定。用空病毒Ad-Null和重组腺病毒Ad-flag-AWP1分别感染人源肝癌细胞SMMC-7721,并于感染后24 h、72 h、第5天和第7天收集细胞计数,绘制细胞生长曲线,计算细胞倍增时间。结果重组腺病毒Ad-flag-AWP1能够感染SMMC-7721细胞;依据细胞生长曲线计算的SMMC-7721细胞倍增时间分别为：SMMC-7721细胞约为5 d;而Ad-Null感染后其生长被抑制,倍增时间约为6 d;Ad-flag-AWP1感染后,其倍增时间约为3 d。结论重组flag-AWP1腺病毒转染SMMC-7721细胞过表达的AWP1蛋白可能具有促进人肝癌细胞生长的作用。     

2-脱氧-D-葡萄糖与奥沙利铂对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响

目的: 研究糖酵解抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)与奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)单独及联合应用对人肝癌细胞SMMC-7721增殖及凋亡的影响。方法: 将2-DG及L-OHP单药及联合用药作用于人肝癌细胞SMMC-7721,MTT法检测各组细胞的生长抑制率,并计算两药的协同作用q值,流式细胞仪检测各组细胞周期及凋亡情况,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性。结果: 不同浓度的2-DG和L-OHP均可使肝癌细胞增殖受到抑制,并呈时间、浓度依赖性,两药合用后对细胞的增殖抑制作用明显增强(P<0.05)。2-DG可诱导细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G₂/M期;与L-OHP合用后细胞凋亡率更高,可阻滞细胞于G₂/M期和S期。Caspase-3活性在两药联合应用时明显增强。结论: 2-DG能有效抑制SMMC-7721细胞生长增殖,并诱导其凋亡;当其与L-OHP联合应用时能增强L-OHP的抗肿瘤作用,其机制可能与增加caspase-3活性有关。     

Inhibitory effect of emodin on human hepatoma cell line SMMC-7721 and its mechanism

BackgroundDa Huang (Radix et Rhizoma Rhei) is the dried root or rhizome of Rheum palmatum L., Rheum tanguticum Maxim ex Balf. or Rheum officinale Braill of family Polygonaceae. It has heat clearing, damp drying, fire purging and toxin removing effects. Because of its definite curative efficacy, it has been widely applied in clinical settings.ObjectiveTo study the inhibitory effect of emodin on human hepatoma cell line SMMC-7721 and its mechanism.MethodsMTT assay, flow cytometry and electron microscopy were used to investigate the inhibitory effect of different concentrations of emodin on human hepatoma cell line SMMC-7721.Results12 h, 24 h and 48 h after the action of 20, 40 and 80 umol/L emodin on SMMC-7721 cells, the proliferation of human hepatoma SMMC-7721 cells was inhibited; the inhibitory effects showed time-and concentration-dependence. 48 h after the action of different concentrations of emodin on SMMC-7721 cells, cells in G2/M phase increased significantly, while the proportion of S phase cells gradually declined.ConclusionEmodin can inhibit human hepatoma cell line SMMC-7721.     

RNAi沉默Beclin 1基因对维生素K3损伤人肝癌细胞SMMC-7721的影响

目的： 探讨应用RNAi技术沉默Beclin 1基因对维生素 (vitamin K3,Vit K3)引起的人肝癌SMMC-7721细胞损伤的影响。方法: 应用真核细胞转染技术将Psilencer 3.1-siRNA-Beclin 1重组质粒转入人肝癌SMMC-7721细胞,同时分别设立转染空质粒阴性对照组和转染试剂阴性对照。于48 h后收集细胞,分别提取细胞总RNA及总蛋白,通过RT-PCR和Western blotting检测Beclin 1基因表达。应用40 μmol/L Vit K3作用Beclin 1-siRNA细胞株,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率。结果: 与对照组相比,siRNA重组质粒明显降低Beclin 1 mRNA水平,抑制其蛋白表达。40 μmol/L Vit K3作用人肝癌SMMC-7721细胞Beclin 1 mRNA表达明显高于对照组,细胞凋亡率增加(P<0.01）;而Beclin 1-siRNA细胞株,Beclin 1 mRNA表达显著低于对照组,与40 μmol/L Vit K3作用组相比细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论: Psilencer 3.1-siRNA-Beclin 1转染人肝癌SMMC-7721细胞后,可有效抑制Beclin-1 mRNA和蛋白的表达,抑制Vit K3引起的Beclin 1依赖性细胞自噬信号通路的激活,促进细胞凋亡。     

miR-141表达异常对人肝癌细胞恶性生物学表型的影响

 目的: 研究微小RNA-141(miR-141)在人肝癌细胞和正常胎肝细胞中的表达,同时分析miR-141表达异常对人肝癌细胞恶性生物学表型的影响。方法: 分别提取人肝癌细胞SMMC-7721和正常肝细胞HL-7702的总RNA,采用实时荧光定量PCR法检测miR-141的表达。采用脂质体介导的转染方法分别将miR-141 mimic转染SMMC-7721细胞,将miR-141 inhibitor转染HL-7702细胞;MTS试剂盒和BrdU-ELISA检测细胞增殖能力,流式细胞术检测转染前后细胞周期和凋亡率的变化。Transwell实验检测miR-141表达变化对细胞体外迁移能力的影响。结果: miR-141在SMMC-7721细胞中的表达较HL-7702细胞明显下降。与空白组、脂质体组和阴性对照组相比,转染25 nmol/L miR-141 mimic的SMMC-7721细胞中,细胞增殖速度减慢,S期细胞比例降低,凋亡细胞比例上升,细胞体外迁移能力下降;转染50 nmol/L miR-141 inhibitor的HL-7702细胞中,细胞增殖速度加快,S期细胞比例上升,凋亡细胞比例下降,细胞体外迁移能力增强。结论: miR-141在人肝癌细胞中表达下降,上调miR-141表达可抑制肝癌细胞体外增殖活性和迁移能力,影响细胞周期和凋亡。在肝癌发病进程中,miR-141可能扮演抑癌基因的角色。     

机械刺激对肝癌细胞形态及增殖周期的影响

本研究采用“四点弯曲梁加载装置” ,对培养的人肝癌细胞株SMMC 772 1施以拉伸刺激 ,通过显微计算机图像处理系统了解其形态变化 ,流式细胞仪了解其增殖行为 ,结果发现 (1)加载 2 4h后SMMC 772 1G2 -M期 8.6 3% ,对照组 15 .92 %。 (2 )加载 72h后SMMC 772 1铺展投影面积缩小。 (3)加载 2 4h后SMMC 772 1分裂指数 0 .4 6 ,对照组 0 .5 5。加载可部分抑制SMMC 772 1的生长。     

白藜芦醇对TRAIL诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的影响研究

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡作用及白藜芦醇对TRAIL的增敏效果。方法培养SMMC-7721细胞,同步化后,分成对照组、TRAIL干预组、Res＋TRAIL干预组,作用24h后,收集细胞,用流式细胞仪进行凋亡分析。结果对照组SMMC-7721细胞的凋亡率为3．02％±0．17％,TRAIL干预组凋亡率为8．55％±1．46％,Res＋TRAIl。干预组中25μmol·l-1、50μmol·l-1、100μmol·l-1。凋亡率分别为8．61％±1．41％、20．72％±1．33％、27．19％±1．43％。TRAlL干预组、Res＋TRAIL干预组与对照组相比,差异均有显著性（P〈0．01）。Res＋TRAIL干预组（5μmol·l-1、100μmol·l-1白藜芦醇）与TRAIL干预组相比,差异均有显著性（P〈0．01）;而Res＋TRAIL干预组（25μmol·l-1白藜芦醇）与TRAIL干预组比较差别无显著性（P〉0．05）。结论本研究表明’FRAIL对SMMC-7721细胞有凋亡诱导作用;白藜芦醇对TRAIL诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡有致敏作用,且呈剂量依赖关系。     

酪醇诱导肝癌细胞NQO1酶基因表达增加及细胞增殖的抑制

目的:研究酪醇诱导肝癌细胞Ⅱ相脱毒酶NAD(P)H:醌氧化还原酶-1(NQO₁)基因表达情况和对细胞增殖的影响以及两者之间的关系。方法:肝癌细胞SMMC-7721接种后24h经β-酪醇处理24h,分别测定NQO₁酶活性,mRNA表达和细胞增殖情况。NQO₁酶活性采用微孔板直接测定法,诱导结果用NQO₁酶比活性=NQO₁酶活性/细胞数;mRNA水平的变化采用定量RT-PCR;细胞增殖采用结晶紫显色法。结果:NQO₁酶活性诱导上,酪醇大于60mg/L时有明显的剂量效应关系,且每一浓度点(60mg/L,70mg/L,80mg/L,90mg/L)与空白组比较均有显著差异(P＜0.05),80mg/L的酪醇与80μmol/L的β-NF(阳性对照)诱导的酶比活性相当;mRNA表达量存在剂量依赖性增加(r=0.824,P＜0.05),且与酶比活性存在明显的相关性(r=0.951,P＜0.01);酪醇在70mg/L-100mg/L范围内,其抑制细胞增殖的能力随着浓度的增加而增加。另外,细胞增殖与酶比活性呈负相关(r=-0.410,P＜0.01)。结论:酪醇在培养肝癌细胞SMMC-7721上能使NQO₁酶活性与mRNA表达量诱导性增加,同时酪醇能抑制细胞的增殖,这种增殖抑制与酶活性诱导增加有关。     

肝癌SMMC-7721细胞中侧群细胞分选及其生物学特性的研究

目的: 分选肝癌SMMC-7721细胞中的侧群(SP)细胞并分析其生物学特性。方法: 采用流式细胞荧光激活分选(FACS)技术将SMMC-7721细胞分为SP细胞和非侧群(NSP)细胞2个亚群。细胞生长曲线法和平板克隆法比较SP细胞和NSP细胞的增殖能力和克隆形成能力;Transwell法检测SP细胞和NSP细胞的迁移及侵袭能力;流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡率;裸鼠体内成瘤实验比较SP细胞和NSP细胞的致瘤性。结果: SMMC-7721细胞中分选出的SP细胞比例为(9.2±0.2)%。SP细胞中G₀/G₁期细胞比例高于NSP细胞,凋亡率低于NSP细胞(P＜0.05);SP细胞的增殖速度、克隆形成能力、体外迁移和侵袭能力均明显高于NSP细胞(P＜0.05);裸鼠成瘤实验显示SP细胞的致瘤能力明显高于NSP细胞。结论: 肝癌SMMC-7721细胞中的SP细胞可能富集了肝癌干细胞。     

腺病毒介导的p27mt基因转移对肝癌细胞生长的影响

目的 :研究突变型p2 7基因 (p2 7mt)对肝癌细胞生长的影响。方法 :采用重组腺病毒载体Ad p2 7mt将p2 7mt全长cDNA转入到肝癌细胞系SMMC 772 1中。3H TdR掺入法及软琼脂集落形成实验检测p2 7mt对肝癌细胞增殖的作用。结果 :转染p2 7mt基因的SMMC 772 1细胞在蛋白质水平有高水平的基因表达。其3H TdR掺入量及集落形成率明显低于对照组 (P <0 .0 5)。结论 :p2 7mt基因能抑制肝癌细胞增殖。p2 7mt可作为目的基因用于基因治疗。