靶向逆转KB细胞多药抗性时c-myc基因表达的改变

哺乳动物细胞接触某种治疗药物后可获得对其它非相关药物的广泛耐药性 ,这种现象称为多药耐药性 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ)。近期研究发现ｃ ｍｙｃ与多药耐药基因ＭＤＲ1密切相关[1] 。ＭＤＲ特性的出现与ＭＤＲ1基因的过度表达及其基因产物Ｐ糖蛋白有关。本研究通过监测人口咽腔表皮样癌细胞株 (ｈｕｍａｎｏｒａｌｃａｖｉｔｙｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃａｒｃｉｎｏｍａＫＢｃｅｌｌｌｉｎｅ ,ＫＢ细胞 )在逆转ＭＤＲ表型前后ｃ ｍｙｃ表达的改变 ,以了解ｃ ｍｙｃ基因是否影响了细胞内ＭＤＲ1基因调控水平以及细胞…     

喉咽癌患者多药耐药相关蛋白基因的表达及 …

目的 研究多药耐药基因及其产物Ｐ－糖蛋白、多药耐药相关蛋白基因的表达与喉咽癌２临床病理特征之间的关系。方法 应用逆转录－多聚酶链式反应技术,检测了２５例晚期喉咽癌患者ＭＤＲ－１ｍＲＮＡＭＲＰｍＲＮＡ基因的表达;采用免疫组化ＳＡＢＣ法对６０例患者喉咽癌标本ＭＤＲ－１基因产物Ｐ－ｇｐ进行检测。结果 初治喉问罪 癌组织中ＭＤＲ－１ｍＲＮＡ及Ｐ－ｇｐ的阳性表达率分别为４８％和３８．３％,在ＲＴ－ＰＣＲ检测     

喉鳞癌组织中CDK4cyclin,D1,P^16蛋白表达

目的：细胞周期中Ｇ１／Ｓ转换受到Ｇ１期的细胞周期蛋白及细胞周期蛋白依赖激酶（ＣＤＫＳ）和它们的抑制剂的调节，ｃｙｃｌｉｎＤ１／ＣＤＫ４复合物磷酸化（ＰＲＢ）基因产物，Ｐ＾１６与ｃｙｃｌｉｎＤ１竞争性地抑制ＣＤＫ４，这些蛋白质的不正常表达就使细胞增殖失控，进而导致肿瘤的形态和发展。本研究从细胞周期调控的角度来探讨喉鳞状细胞癌的发生、发展与ＣＤＫ４、ｃｙｃｌｉｎＤ１及Ｐ１６的关系，方法：用ＳＰ免疫组织     

雏鸡听毛细胞损伤后c-myc mRNA及其产物表达的研究

目的：探讨ｃ－ｍｙｃ基因表达在雏鸡基底乳头庆大霉素损伤后听毛细胞再生过程中的意义。方法：应用原位杂交和免疫组化技术检测庆大霉素药后第１、３、７、１４、２１和２８ｄ时ＢＰ损伤区域ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃ蛋白表达情况。结果：ＢＰ修复过程中ｃ－ｍｙｃ、ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃ蛋白表达水平明显升高,修复了７ｄ时表达水平达高峰,修复１４ 后ＢＰ中ｃ－ｍｙｃ基因表达水平开始下降。结论：提示ｃ－ｍｙｃ基因表     

Myc基因家族在喉癌中的异常扩增及其意义

目的 探讨Ｍｙｃ基因家族在喉癌中的异常扩增及其临床意义。方法 应用ＰＣＲ－非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳－激光扫描技术检测了３２例喉癌组织、１２例癌旁组织和６例正常组织。结果 正常组织细胞Ｍｙｃ基因无扩增，３２例喉癌中４７％（１５／３２）有Ｃ－ｍｙｃ和Ｌ－ｍｙｃ扩增，４１％（１３／３２）有Ｎ－ｍｙｃ基因扩增。Ｍｙｃ基因扩增率与年龄、性别、喉癌临床分期及分化程度无关（Ｐ〉０．０５），但有淋巴结转移的患者的     

分枝杆菌多糖促人LAK细胞增殖及对喉癌HEP－2细胞杀伤活性的研究

为探讨分枝杆菌多糖（ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）在体外对ＬＡＫ细胞（ｌｙｍ－ｐｈｏｋｉｎｅａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒｃｅｌｋｉｎｅ）活性的影响，以提高ＬＡＫ细胞杀瘤活性、减少ＩＬ－２（白细胞介素－２）用量和毒副作用。通过ＭＴＴ法测定不同浓度ＩＬ－２、不同浓度ＭＰＳ对ＬＡＫ细胞促增殖能力的影响；以细胞计数法测定不同浓度ＩＬ－２、ＭＰＳ对ＬＡＫ细胞扩增倍数的影响；应用乳酸脱氢酶法测定不同条件刺激的ＬＡＫ细胞对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性的作用。结果证明小剂量ＩＬ－２（２×１０５Ｕ／Ｌ）诱导ＬＡＫ细胞过程中加入ＭＰＳ０．４ｍｇ／Ｌ能显著增强ＬＡＫ细胞的增殖和杀伤喉癌ＨＥＰ－２细胞的活性。其扩增倍数及杀伤活性均显著超过单纯应用ＩＬ－２（１０６Ｕ／Ｌ）诱导的ＬＡＫ细胞。通过检测不同条件下诱导的ＬＡＫ细胞表型，显示ＭＰＳ联合ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ细胞ＣＤ２５百分率明显增高，提示ＭＰＳ可能通过促进ＬＡＫ细胞表面ＩＬ－２膜受体表达，提高ＬＡＫ细胞增殖及杀伤活性。因此，ＭＰＳ可望作为一种新型免疫调节剂用于抗肿瘤治疗     

上颌窦鳞癌myc,c—erbB—2,EGFR的表达及意义

目的：检测上颌窦鳞癌中癌基因ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ的表达情况，并分析ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ的蛋白表达与上颌窦鳞癌临床分期、病理分化及预后的关系。方法：应用免疫组织化学ＡＢＣ法。结果：上颌窦鳞癌中ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－２、ＥＧＦＲ表达的阳性率分别是６０．０％、４２．５％、４７．５％。ｍｙｃ蛋白高表达者（阳性细胞〉３０％）上颌窦鳞癌３年生存率明显低于ｍｙｃ蛋白低表达（阳性细胞〈     

Myc基因家族在喉癌中的异常扩增及其意义

目的探讨Ｍｙｃ基因家族在喉癌中的异常扩增及其临床意义。方法应用ＰＣＲ非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳激光扫描技术检测了３２例喉癌组织、１２例癌旁组织和６例正常组织。结果正常组织细胞Ｍｙｃ基因无扩增，３２例喉癌中４７％（１５／３２）有Ｃｍｙｃ和Ｌｍｙｃ扩增，４１％（１３／３２）有Ｎｍｙｃ基因扩增。Ｍｙｃ基因扩增率与年龄、性别、喉癌临床分期及分化程度无关（Ｐ＞０．０５），但有淋巴结转移的患者的Ｎｍｙｃ扩增率明显高于无淋巴结转移者（Ｐ＜０．０１）。结论Ｍｙｃ基因３个成员异常扩增是喉癌发生的原因之一，Ｎｍｙｃ扩增在喉癌淋巴结转移过程中可能起正性调控作用。     

鼻咽癌肿瘤c—myc基因表达及p16基因失活的研究

目的 以原发性鼻咽癌为研究对象,探讨ｐ１６抑癌基因,ｍｙｃ家族癌基因在鼻咽癌发生、发展及其生物学行为的变化规律。方法 用多重聚合酶链反应（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ,ＭＰＣＲ）,限制性内切酶ＰＣＲ、免疫组化及逆转录ＰＣＲ（ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ ＰＣＲ,ＲＴ ＰＣＲ）方法,检测６９例鼻咽癌活检肿瘤组织中,Ｐ１６基因纯合缺失、甲基化、ｐ１６基因蛋白表达（免疫组化）、ｃ－ｍｙｃ基因表达等情况。结果 Ｐ１６基因纯合缺失７例,甲基化１１例,总失活率为２６．１％（１８／６９）。免疫组化检测ｐ１６基因蛋白表达阴性６０．９％（４２／６９）;阳性３９．１％（２７／６９）。ＲＴ ＰＣＲ,ｍｙｃ基因检测表达结果７３．９％（５１／６９）,无表达者２６．１％（１８／６９）。     

凋亡相关基因Bcl—2,Bcl—X,Bax和Bak在人扁桃体表达

通过检测凋亡相关基因Ｂｃｌ－２,Ｂｃｌ－Ｘ,Ｂａｘ和Ｂａｋ在扁桃体表达来了解扁桃体凋亡的发生及定位。方法应用免疫组织化学方法检测Ｂｃｌ－２,Ｂｃｌ－Ｘ,Ｂａｋ和Ｂａｘ在２４例扁桃体的表达,应用ＡＰＡＡＰ和ＰＡＰ法检测Ｂｃｌ－２,Ｂｃｌ－Ｘ,Ｂａｘ和Ｂａｋ基因蛋白分别与ＣＤ３,ＣＤ２１和ＣＤ６８在其中１０例偏桃的联合表达。结果促凋亡基因Ｂａｋ,Ｂａｘ蛋白主要在扁桃体生发中心的亮区呈过表达,而抑凋亡基     

p27Kipl在喉鳞状细胞癌癌变过程中表达的临床意义

依赖性激酶抑制蛋白 (ｃｙｃｌｉｎ ｄｅｐｅｎ ｄｅｎｔｋｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ,ＣＤＫＩ)是近年分离得到一类重要的细胞周期调控蛋白 ,参与细胞周期的负调控 ,可防止细胞过度增殖和恶变[1] 。ｐ2 7Ｋｉｐｌ(简写ｐ2 7)基因是新近发现的ＣＤＫＩ家族成员之一 ,其基因定位于 12ｐ12 13.1,编码的ｐ2 7蛋白可抑制细胞从Ｇ1期进入Ｓ期而参与细胞的负调控。本文采用免疫组化法通过对ｐ2 7蛋白在喉鳞状细胞癌 (ｌａｒｙｎｇｅａｌｓｑｕａｍｏｕｓｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ,ＬＳＣＣ)、喉不典型增生病变和喉正常粘膜的表达 ,探讨ｐ…     

喉癌的发生发展与某些相关癌基因及抑制基因

本文综述了喉癌的发生发展中癌基因（ｒａｓ,ｃ－ｅｒｂＢ１,ｃ－ｅｒｂＢ２,ｍｙｃ,ｃｙｃｌｉｎＤ１）及抑癌基因（ｐ５３,ｎｍ２３,ｐ１６,Ｒｂ,ｐ２１）的作用。     

Hep—2细胞MDR1基因蛋白的表达

采用单克隆抗全免疫荧光技术对Ｈｅｐ－细胞ＭＤＲ１基因的表达产物蛋白产量测定，结果证实Ｐ－１７０蛋白高度表达，旨从分子生物学角度探讨喉癌细胞的多药耐受性。     

两种免疫调节剂辅助LAK细胞杀伤喉癌细胞的体外研究

为探讨如何提高白细胞介素－２（ＩＬ－２）／ＬＡＫ细胞过继免疫治疗的抗肿瘤作用，应用免疫调节剂分枝杆菌多糖（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａｌｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ，ＭＰＳ）或ＣＤ３单克隆抗体协同ＩＬ－２诱导的健康人外周血淋巴细胞来源的ＬＡＫ细胞在体外扩增，测定其对喉癌ＨＥＰ－２细胞杀伤活性。实验结果：①不同免疫调节剂对ＬＡＫ细胞扩增的影响：实验组三组细胞于体外扩增均明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；ＭＰＳ组或ＣＤ３组细胞的扩增倍数比单纯应用ＩＬ－２组为高（Ｐ＜０．０１）；其中扩增倍数最高者为ＭＰＳ组，与ＣＤ３组相比，Ｐ＜０．０５。②不同免疫调节剂诱导的ＬＡＫ细胞对喉癌ＨＥＰ－２细胞的杀伤活性比较：在培养一周时，实验组三组对ＨＥＰ－２细胞的杀伤活性均高于对照组，以ＣＤ３组及ＭＰＳ组杀伤活性最高，其杀伤活性均为５５．５％；于培养第二周，ＣＤ３组杀伤ＨＥＰ－２细胞活性仍较高，其他实验组细胞杀伤活性均明显下降。结论：免疫调节剂ＭＰＳ和ＣＤ３单克隆抗体均可通过增强ＬＡＫ细胞体外增殖和杀瘤活性而提高肿瘤过继免疫治疗效果。     

华蟾素对喉癌细胞凋亡的基础研究

目的 探讨中药华蟾素对体外培养人喉癌Ｈｅｐ－２细胞生长作用及癌基因变化。方法 应用光镜,电镜：ＭＴＴ检测技术;ＳＰ免疫组化技术及流式细胞分析仪,对药物作用后Ｈｅｐ－２细胞的数量,形态,抑癌基因Ｐ５３,癌基因ｃｍｙｃ,Ｂｃｌ－２蛋白的表达以及细胞周期ＤＮＡ含量的改变进行研究。结果 发现华蟾素对Ｈｅｐ－２细胞作用在低浓度短时间时促进细胞分裂、增殖和诱导细胞分化;高浓度长时间则抑制细胞生长,促进细胞凋亡     

抑凋亡基因Bcl—X在鼻息肉中表达的初步研究

目的：探讨细胞凋亡基因Ｂｃｌ－２，Ｂｃｌ－Ｘ，Ｂａｋ和Ｂａｘ蛋白在鼻息肉中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学方法（ＡＰＡＡＰ法）检测Ｂｃｌ－２，Ｂｃｌ－２，Ｂａｋ和Ｂａｘ蛋白在６例鼻息肉中的表达。结果：６例鼻息肉上皮Ｂｃｌ－Ｘ均呈强阳性表达，３例（３／６）Ｂｃｌ－２阳性表达，２例（２／６）Ｂａｋ弱阳性表达，１例（１／６）Ｂａｘ阳性表达。结论：鼻息肉上皮抑凋亡基因Ｂｃｌ－Ｘ蛋白表达上调和促调亡基因     

千斤藤碱对头颈部恶性肿瘤细胞诱导分化的研究

为观察千斤藤碱（Ｓｔｅｐｈｏｌｉｄｉｎｅ，ＳＴ）对头颈部恶性肿瘤细胞株诱导分化作用，采用ＡＢＣ免疫组化结合图象分析仪及流式细胞仪，以维甲酸（ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ，ＲＡ）作对照，通过细胞形态学、细胞增殖动力学的研究，定量检测了癌基因Ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２及抑癌基因ｐ５３蛋白。结果表明：经无毒剂量的千斤藤碱及维甲酸处理后，头颈部恶性肿瘤细胞株的细胞形态趋向良性分化，细胞接触抑制部分恢复，集落形成率和细胞增殖指数明显降低，癌基因Ｃ－ｍｙｃ、ｂｃｌ－２蛋白明显降低，ｐ５３蛋白明显增高。结论：千斤藤碱及维甲酸对头颈部恶性肿瘤有诱导分化作用，其机理可能是通过抑制癌基因的表达，增加抑癌基因的表达，改变细胞的形态结构和生物学特性，促进癌细胞的分化。     

RA和VD诱导喉癌患者LAK细胞TNF－α的表达

本文应用全反式维甲酸（ＲＡ）和１，２５－二羟维生素Ｄ３（ＶＤ）诱导培养喉癌患者ＬＡＫ细胞，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术和ＥＬＩＳＡ检测ＴＮＦ－α基因ｍＲＮＡ及其蛋白的表达。结果显示，ＶＤ或ＲＡ加ＶＤ诱导的ＬＡＫ细胞ＴＮＦ－αｍＲＮＡ及其蛋白的表达显著增高。提示ＶＤ或ＲＡ加ＶＤ能够促进ＬＡＫ细胞合成和释放ＴＮＦ－α，有可能因此增强了ＬＡＫ细胞的抗肿瘤作用。这为提高头颈部恶性肿瘤过继免疫治疗的疗效开避了一条新的途径。     

CD44蛋白在人喉癌中的表达及其临床意义

目的：ＣＤ４４基因是一各肿瘤转移相关基因。研究检测ＣＤ４４ｖ６蛋白拓喉癌中的表达及其临床意义。方法：用ＣＤ４４ｖ６单克隆抗体,通过免疫组化Ｓ－Ｐ法,对６９例喉鳞状细胞癌蜡块标本和１０例正常喉粘膜标本进行研究,并结合资料进行预后分析。结果：６９例喉鳞状细胞癌、１０例正常喉粘腊中ＣＤ４４ｖ６蛋白阳性表达率分别为５２．２％（３６／３９）和０．０％（０／１０）。ＣＤ４４ｖ６蛋白阳性表达与肿瘤发生部位、病理     

RA和VD诱导喉癌患者LAK细胞TNF—α的表达

本文应用全反式维甲酸和１，２５－二羟维生素Ｄ３诱导培养喉癌患者ＬＡＫ细胞，采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术和ＥＬＩＳＡ检测ＴＮＦ－α基因ｍＲＮＡ及其蛋白的表达，结果显示，ＶＤ或ＲＡ加ＶＤ诱导的ＬＡＫ细胞ＴＮＦ－αｍＲＮＡ及其蛋白的表达显著增高。