蛋白激酶C-β抑制剂-治疗糖尿病肾病的新希望

PKC-β是一种在糖尿病相关肾病起重要作用的信号分子,抑制PKC-β的表达在动物实验中已证实能够阻止糖尿病肾病的发展,虽对人的糖尿病肾病效果尚需进一步临床试验,但它毕竟是一种新的治疗方法,为糖尿病肾病的治疗带来新希望.     

蛋白激酶C-β抑制剂—治疗糖尿病肾病的新希望

PKC-β是一种在糖尿病相关肾病起重要作用的信号分子。抑制PKC-β的表达在动物实验中已证实能够阻止糖尿病肾病的发展，虽对人的糖尿病肾病效果尚需进一步临床试验，但它毕竟是一种新的治疗方法，为糖尿病肾病的治疗带来新希望。     

蛋白激酶C亚型在高糖诱导肾系膜细胞中的表达

蛋白激酶C(PKC)激活在糖尿病肾病中的作用已受到广泛重视和研究[1]。但不同的PKC亚型在糖尿病肾病发病作用还不清楚。我们采用多光子激光共聚焦显微镜观察高糖作用的肾系膜细胞中的PKC亚型α、β、ε表达和转位,以探讨这3种PKC亚型在糖尿病肾病中的作用。 一、材料和方法 1.实验材料:兔抗鼠多克隆PKCα、PKCβ、PKCε抗体(Santa Cruz公司),FITC标记荧光抗体(IgG)(Dako公司),     

经典型蛋白激酶C在不同肾小球疾病患者肾组织的表达

目的:检测4种经典型蛋白激酶C同工酶(PKC-α、PKC-βⅠ、PKC-βⅡ和PKC-γ)在正常及不同肾小球疾病患者肾组织的表达,探讨其在肾小球疾病中的作用。方法:收集广东医科大学附属医院肾病内科行肾脏病理活检确诊的肾小球疾病患者肾组织50例,其中肾小球轻微病变、膜性肾病、局灶节段性肾小球硬化症、Ig A肾病及狼疮性肾炎各10例;收集6例来自肾肿瘤患者手术切除远离肿瘤部分、病理检查无异常的肾组织做为正常组。免疫组化法检测并分析4种经典型蛋白激酶C同工酶在正常及肾小球疾病肾组织的表达变化。结果:PKC-α、βⅠ和βⅡ在正常肾组织肾小管上皮细胞和肾小球均有表达,PKC-γ仅表达于肾小球足细胞,在肾小管间质均无表达;各经典型PKC同工酶在肾小球疾病肾组织中表达部位与正常肾组织相同,但表达量不尽相同。结论:在肾小球疾病中,PKC-α和PKC-βⅠ可能参与肾小管间质纤维化,是慢性肾脏病的潜在治疗靶点,PKC-γ可能参与足细胞生理功能的维持,不参与肾小管间质的损伤。     

蛋白激酶C与糖尿病肾病

众所周知，蛋白激酶C（protein kinase C，PKC）参与信号转导途径、细胞增殖、分化和凋亡，但其在肾脏疾病中的作用尚未完全阐明。正常肾组织中可见多种PKC同工酶。当肾脏出现病变时部分PKC激活或缺失而发生表达的改变，如高糖使1，2-二酯酰甘油（DAG）水平或PKCβ升高，引起肾脏大血管和微血管病变，从而导致糖尿病肾病、IgA肾病等疾病的发生。[第一段]     

沉默蛋白激酶C 对高糖刺激成纤维细胞Toll 样受体及核因子kappa B 基因表达的影响

目的:探索siRNA 沉默蛋白激酶C(PKC)对高糖刺激成纤维细胞在Toll 样受体(TLRs)信号传导通路中TLRs 及核因子kappa B(NF-κB) 表达的影响。方法:高糖刺激下用real-time PCR 检测TLR2、TLR4 的表达水平,确定何种受体发生改变后进行后续实验。设计并合成针对PKC 不同亚单位的特异性siRNA :PKC-αsiRNA、PKC-βsiRNA、PKC-δsiRNA,在高效率转染的基础上,对PKC 进行沉默,高糖刺激后用real-time PCR 方法检测TLRs、NF-κBp50 和NF-κB p65 的表达情况,以低糖培养作对比。结果:成纤维细胞中高糖刺激下TLR2 的mRNA 水平显著升高(P ＜ 0.05),而TLR4 的mRNA 表达无明显变化(P ＞ 0.05)。在高糖刺激下PKC-αsiRNA、PKC-δsiRNA 可下调TLR2、NF-κB p65的mRNA 水平(P ＜ 0.05),而PKC-βsiRNA 对TLR2、NF-κB p65 的mRNA 水平无影响(P ＞ 0.05)。与低糖培养条件对比,高糖刺激下NF-κB p50 水平无改变(P ＞ 0.05),而且PKC-α siRNA、PKC-β siRNA 和PKC-δ siRNA 转染后不改变细胞中NF-κB p50 的水平。结论:成纤维细胞信号传导通路中PKC-α、PKC-δ 位于TLR2、NF-κB p65 的上游。     

转化生长因子β在糖尿病肾病中的作用

糖尿病肾病是糖尿病主要晚期并发症之一,细胞培养、动物实验及人体研究都证转化生长因子β（TGF-β）在糖尿病肾病发生发展中起了重要作用。本文阐述了糖尿病状态下导致TGF-β升高的因素,并介绍TGF-β在糖尿病肾病病理改变中的作用及针对TGF-β研究的临床意义。     

糖尿病肾病中TGF-β的作用

TGF-β参与糖尿病肾病的发生并促进糖尿病肾小球硬化的进展，在糖尿病肾病发病机制中可能起重要作用。本文综述了TGF-β在糖尿病肾病中的发病机制以及针对TGF-β的治疗的新进展。     

糖尿病肾病中TGF-β的作用

TGF-β参与糖尿病肾病的发生并促进糖尿病肾小球硬化的进展,在糖尿病肾病发病机制中可能起重要作用。本文综述了TGF-β在糖尿病肾病中的发病机制以及针对TGF-b的治疗的新进展。     

非经典型蛋白激酶C在尿蛋白诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的:探讨非经典型PKC同工酶(PKC-ζ和PKC-ι)在尿蛋白诱导的肾小管上皮细胞(RTECs)转分化中的作用。方法:首先免疫组化法检测PKC-ζ和PKC-ι在人正常及不同类型肾小球疾病患者肾组织的表达并分析其表达量的变化。接着应用不同浓度的尿蛋白(0 mg/ml、0.5 mg/ml、1.0 mg/ml、2.0 mg/ml、4.0 mg/ml及8.0 mg/ml)处理体外培养的HK-2细胞,应用免疫细胞化学法检测HK-2细胞E-cadherin和α-SMA的表达以观察HK-2细胞转分化情况,选择诱导HK-2细胞转分化适宜的尿蛋白浓度进行后续试验。将HK-2细胞分对照组和尿蛋白组,分别给予无血清培养基和尿蛋白(4.0 mg/ml)刺激,分别用免疫荧光及Western Blot法检测各组细胞内PKC-ζ和PKC-ι在细胞膜及细胞浆的活化易位情况。结果:(1)两种非经典型PKC同工酶PKC-ζ和PKC-ι在正常和肾小球疾病肾组织肾小球和RTECs均有表达,在肾间质均无表达,表达量不尽相同。PKC-ζ在肾小球疾病肾组织肾小球中的表达量均较正常肾组织显著减少(P<0.05),在MCD和FSGS的RTECs中的表达量较正常肾组织显著减少(P<0.05)。PKC-ι在FSGS的肾小球和RTECs中的表达量均显著减少(P<0.05),在Ig AN肾组织RTECs中表达显著增高(P<0.05),在肾小球表达无明显差别。(2)不同浓度的尿蛋白刺激HK-2细胞48 h后,当尿蛋白的浓度逐渐升高时,HK-2细胞随之转变为类似成纤维细胞形态,细胞E-cadherin表达下调及α-SMA表达上调。尿蛋白浓度为4.0 mg/ml诱导HK-2细胞转分化最明显。(3)尿蛋白诱导HK-2细胞转分化时,PKC-ζ和PKC-ι无明显活化易位。结论:两种非经典型PKC同工酶均在人类肾组织表达,提示PKC-ζ和PKC-ι均参与肾脏的生理过程,但PKC-ζ和PKC-ι在尿蛋白诱导的肾小管上皮细胞转分化中并未发挥相关作用。