有关制作半薄切片捞片的改进

在制作电镜的超薄切片前,可用超薄切片机先切数片1μm～2μm 厚的半薄切片进行染色,在光镜下观察以确定方向和部位,同时对特殊细胞观察的筛选更为需要。从而提高所要观察以超薄切片上组织和细胞的准确性。并且半薄切片用甲苯胺     

超薄切片玻璃刀“废刀”的再用

在电镜观察生物样品中,以超薄切片最为常用。要研究细胞超微结构必须用超薄切片机,将标本切成适宜于电镜观察厚度的超薄切片。目前国内外电镜实验室在制作超薄切片时,除少数采用钻石刀外,绝大多数是用玻璃刀来切片。此种制刀的玻璃要求较高,制成的刀口要锋利平整,但玻璃刀一般在切过一个组织块后就不能再用,因此制刀玻璃的耗量较大。有些电镜单位为了寻找合用的玻璃,要花不少代价,甚至向国外进口,有时因找不到适用的玻璃,而影响科研工作的开展。为了适应科技工作要大干快上的形     

电镜半薄切片染色液的改良及应用

电镜是观察组织细胞超微结构的一种手段。但由于切片太小，有时难于观察到目标结构，为此需大量制备样品造成工作量大且消耗多。为使超薄切片能精确地切到目标部位，在行超薄切片前要做半薄切片进行定位。一般是在超薄切片机上切取数张1—2μm厚的切片进行染色观察。半薄切片的染色常规方法有：甲苯胺兰染色法、天青Ⅱ美兰染色法、H-E染色法和Giemsa染色法等，无论哪种方法都需预先做脱树脂处理，     

半薄切片技术

半薄切片(semithin section)又称厚切片(thick section).是相对于电镜的超薄切片(Ultrathin section)而讲的。半薄切片厚度是0.5～2μ,介于光镜石蜡切片(7μ)和电镜超薄切片(0.07μ)之间。半薄切片的制法是按电镜常规制备的树脂包埋组织块,在超薄切片机或经     

影响透射是生物样品超薄切片效果因素分析

由于电镜技术的不断发展,样品制备技术的不断改进,制备切片厚度在50nm 以下的超薄切片已成为透射电镜生物样品制备的常规制样技术。但是如何制得高质量的超薄切片,得到清晰的高反差电镜图像客观存在很多因素影响,比如超薄切片机性能好坏、玻璃切片刀是否锋利、组织包埋块硬度怎样、操作者技术经验等等。笔者根据几年的切片经验就上述影响超薄切片的几个因素作简略分析如下。1 具有性能良好的超薄切片机一台性能良好的超薄切片机是切出没有刀痕与颤痕的优质超薄切片的重要保证。我们电镜室1997年购置的德国徕卡牌超薄切片机,就是性能优…     

石蜡半薄切片制作透射电镜的方法

[目的]介绍石蜡半薄切片转制透射电镜的制样方法。[方法]对石蜡半薄切片进行脱蜡、水化、锇酸固定、缓冲液漂洗、梯度酒精脱水、环氧树脂包埋、超薄切片机切片、透射电镜下观察。[结果]组织细胞的超微结构保存完好,足以满足病理诊断之用。[结论]用石蜡半薄切片转制电镜比用石蜡组织块转制电镜方法简单,快速易行。     

制作病理组织薄切片的技术

采用薄切片技术能提高光学显微镜的分辨能力。我们用国产的上海牌切片机制成1～2μm的薄切片。现将操作过程介绍如下。一、取材将新鲜的肾组织切成1×1×1mm的组织块,经10%中性福尔马林液固     

环氧树脂连续半薄切片制备技术

在制备超薄切片之前,有些生物样品需要制作半薄切片,在光镜下确定所要观察的结构,并在环氧树脂包埋块上对此结构进行准确的定位,避免盲目的超薄切片,从而提高电镜的观察效率。用环氧树脂包埋的生物样品,如果采用适宜的染色方法对半薄切片进行染色,在光镜下观察,可获得比石蜡切片保存的更多的结构     

如何防止超薄切片过程中的震颤

超薄切片，即切片厚度为４００～１０００Ａ。而较常用的切片厚度为５００～７００Ａ，要想得到这样薄的理想切片，而毫无震颤，除与包埋块的软硬以及样品块大小、室内温度、湿度、玻璃刀的质量等间接因素有关外，还与切片的速度、切片机上各环节的螺丝是否拧紧等直接因素...     

利用超薄切片机制作半薄切片技术

近年来,由于半薄切片机的问世,为电镜工作者制作半薄切片进行定向选择,克服超薄切片的盲目性和电镜视野的局限性,创造了良好条件。但是,国内目前所使用的半薄切片机仍靠进口,价格昂贵。而定位部分的照明光源又不能达到满意效果,对定向选择带来一定困难,操作麻烦,花时间多。两年来,我室利用超薄切片机制作半薄切片,对心肌、肾等组织进行定向选择,省时省力,并获得了满意的效果。现将具体操作步骤介绍如下:     

影响透射电镜生物样品超薄切片效果因素分析

由于电镜技术的不断发展,样品制备技术的不断改进,制备切片厚度在50nm以下的超薄切片已成为透射电镜生物样品制备的常规制样技术.但是如何制得高质量的超薄切片,得到清晰的高反差电镜图像,客观存在很多因素影响,比如超薄切片机性能好坏、玻璃切片刀是否锋利、组织包埋块硬度怎样、操作者技术经验等等.笔者根据几年的切片经验就上述影响超薄切片的几个因素作简略分析如下.     

鐭酸固定甲基丙烯酸酯包埋组织薄切片的光学染色

鐭酸固定甲基丙烯酸酯包埋组织薄切片的光学染色在电子显微镜技术中起着重要的配合作用。在进行用于超薄切片的修组织块之前,切一薄切片(0.5—2μ)进行光学染色,可以选择需要观察的部位进行超薄切片,避免切片的盲目性,使之较为容易在电子显微镜下找到要观察的部位;在超薄切片之后,连续切薄切片进行光学染色,这就使同一结构可以进行光学显微镜与电子显微镜的直接对此观察,因而可以利用光学显微镜来确定电子显微镜下所见结构部位,也可以对它     

一种简单而快捷的半薄切片脱树脂新方法

目前, 在HE染色、特殊染色或免疫组化染色研究方面多采用普通石蜡包埋的切片, 其切片厚度最薄达4 μm,若更薄的切片,切割有一定的难度.对于各种染色而言,越薄的切片,细胞与组织结构越清晰,染色效果越好.环氧树脂包埋的组织块(Epon)不仅用于透射电子显微镜超薄切片的制备,也可用于光镜半薄切片的制备[1].本研究摸索出一种简单而快捷的脱树脂的方法,现介绍如下.     

超薄切片机的保养与维修

超薄切片机是专供电子显微镜制备超薄切片的大型精密仪器 ,集电子、机械于一身。保证获得理想切片 ,应置于洁净、恒温的环境中。切片质量与切片机的性能有着密切的关系 ,为确保其精确性和正常运转 ,必须经常保养和维护。如果忽略了这项重要的工作环节 ,致使超薄切片机精确度不够 ,甚至出现不该出现的故障 ,会缩短仪器的使用寿命。1　维护与保养开机前 ,先搞好室内及超薄切片机清洁工作。认真检查稳压器、切片机控制系统以及切片机各部件是否处于正常状态 ,开机后观察机器的运行情况 ,听其运行时是否有杂音。切片工作结束后及时清理修块时切…     

超低倍透射电镜切片技术

我们对超低倍观察切片的制作技术进行了探索,并获得了初步成效,现介绍如下。用常规处理的电镜组织包埋块,以瑞典LKB—Ⅲ型超薄切片机,常规玻璃刀制作大切片。用日立H-300型透射电镜进行广视超低倍观察。此法既能充分发挥电镜的分辨作用,又能观察多量细胞,可以弥补光镜与电镜之间过分悬殊的倍率差别。从而在形态学分析时能够进行由低到高、由简至繁等一系列过渡观     

建立基于超薄切片的高分辨成像技术解析组织的精细空间结构

目的 建立基于超薄切片方法的高分辨三维成像技术,提高Z轴分辨率,并用于组织的精细结构研究。方法 组织样品用LRWhite树脂渗透聚合后,用钻石刀将组织切片切成50~1 000 nm的连续半薄或超薄切片,具体切片的厚度即Z轴的分辨率。切片经甲基蓝-洋红染色或多重抗体标记后,利用全自动显微镜对连续切片进行成像,通过二维拼接和三维重构获得组织高分辨的三维空间信息。结果 对人正常结肠组织和小鼠肝脏进行高分辨成像分析,获得比传统显微镜更高的分辨效果和更丰富的结构细节。结合多重抗体染色方法,对小鼠脑组织微管蛋白的分布进行了高分辨三维成像。结论 所建立的高分辨三维成像技术适用于各种组织的空间精细结构研究,超薄切片方法同时为超高分辨显微成像提供Z轴的解决方案。     

树指包埋组织块半薄切片HE染色技术的改进

近年来,在临床诊断和科研工作中,在电镜超薄切片技术前制作半薄切片已成为常规。但树脂包埋组织块的半薄切片用HE染液染色时常难使组织着色,一般认为这是由于染液不易透过交联的疏水树脂所致。因而染色前需脱去树脂包埋剂,这常易损伤组织。目前国内外报道的很多染色方法中,则多用软化剂将色理剂软化后再进行染色,以使水溶性染液能渗入组织切片内,达到组织着色的目的,但有的程     

电镜半薄切片美蓝-天青Ⅰ快速染色法

为了提高透射电镜对组织观察的准确性,在进行电镜样品超薄切片前,对大多数研究样品以及临床外检的标本,需做半薄切片进行光镜定位。为缩短整个定位程序的时间,提高电镜观察效率,我们以Field氏染法为基础,改进了半薄切片染色方法,应用于国产环氧树脂618包埋组织的半薄切片染色。通过对肾、肺、胃、皮肤、十二指肠、支气管、骨、神经、耳蜗、角膜等组织染色,均获得较满意的效果。与     

利用AO石蜡切片机切超大组织块方法

利用ＡＯ石蜡切片机切超大组织块方法陈怀芳，汪德文（法医学系法医病理学教研室）关键词ＡＯ石蜡切片机；组织块通常ＡＯ石蜡切片机切组织块，不超过３ｃｍ×２ｃｍ。有时，科研制片需要做一些超大组织切片，如人的心脏、肾脏及狗的心脏的横断面，则需对ＡＯ切片机的切片...     

LKB超薄切片机照明方法的改进

随着生物医学超微结构研究工作的深入开展,超薄切片技术的应用日益广泛。瑞典LKB公司生产的超薄切片机因其设计合理、操作方便、性能稳定而被大家广泛采用。但其不足之处是照明亮度不够。在制作超薄切片过程中,检查玻璃刀的质量、调整标本块与刀刃的距离和平行度、切片、切片的展开、捞片等步骤都要在显微