环维黄杨星D对正常和心肌缺血大鼠血液流变学的影响

大鼠冠状动脉结扎５ｍｉｎ后，血液流变学无明显变化。但３０ｍｉｎ后，出现明显异常，主要表现为血小板和红细胞聚集性增强，血液粘度升高。静脉注射环维黄杨星１．１ｍｇ．ｋｇ＾－１对正常大鼠血液流变学无明显影响，但明显抑制心肌缺血引起的血液流变学异常，有利于用改善心肌缺血。西文结果还提示，冠脉结扎后致的早期缺血性心律失常可能与血液流变学关系不大。     

环维黄杨星D对正常和心肌缺血大鼠血液流变学的影响

大鼠冠状动脉结扎５ｍｉｎ后，血液流变学无明显变化．但３０ｍｉｎ后，出现明显异常，主要表现为血小板和红细胞聚集性增强，血液粘度升高。静脉注射环维黄杨星Ｄ（ＣＶＢ－Ｄ）１．１ｍｇ·ｋｇ（－１）对正常大鼠血液流变学无明显影响，但明显抑制心肌缺血引起的血液流变学异常，有利于用改善心肌缺血。本文结果还提示，冠脉结扎所致的早期缺血性心律失常可能与血液流变学关系不大。     

环维黄杨星D对脑缺血再灌注大鼠生长相关蛋白-43 mRNA表达的影响

目的观察易卒中型肾血管性高血压大鼠（RHRSP）脑缺血-复流脑组织大鼠脑缺血生长相关蛋白-43（GAP-43）mRNA表达情况及中药单体环维黄杨星D（CVBD）的影响。方法采用环形银夹使SD大鼠的双侧肾动脉狭窄，制成RHRSP，将大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组及CVBD组．再用线栓法制成一侧大脑中动脉闭塞（MCAO）脑缺血再灌注模型，用原位杂交观测脑缺血2h后再灌注1d、7d、14d、30d不同时间点大鼠的GAP-43 mRNA表达。结果脑缺血再灌注2h后，缺血区周围及海马1d后可见GAP-43 mRNA表达。7d明显增多，14d开始下降，CVB—D组在上述区域各时间点较对照组显著增加。结论CVB-D上调实验性脑缺血再灌注大鼠脑GAP-43 mRNA的表达，可能与促进轴突的再生有关．     

丙酮酸对过氧化氢诱发PC12细胞损伤的保护作用

目的 研究丙酮酸对过氧化氢(H2O2)诱发小鼠嗜铬细胞瘤瘤细胞(PC12细胞)损伤的保护作用并初步探讨其保护机制.方法 将培养的PC12细胞分为三组:正常对照组;损伤组;保护组,在用H2O2处理前30 min加入丙酮酸.通过细胞形态学方法,化学比色法测定琥珀酸脱氢酶(MTT)含量,乳酸脱氢酶(LDH)释放量,超氧化物歧化酶(SOD)含量和丙二醛(MDA)含量,观察丙酮酸的神经保护作用.结果 通过形态学方法,保护组细胞数显著比损伤组多,受损变圆的细胞数较少.保护组可明显降低细胞LDH释放量和细胞内的MDA含量(P＜0.01);提高MTT测定值和SOD活性.结论 丙酮酸对H2O2诱发PC12细胞损伤有显著的保护作用.     

甘草苷对一氧化氮诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的应用NO诱导PC12细胞制作细胞损伤模型,探讨甘草苷对PC12细胞损伤的保护作用。方法甘草苷各剂量的PC12细胞用SNAP诱导48 h后,采用MTT法测定细胞活力,LDH法测定细胞膜通透性,化学比色法测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Annexin V-FITC/PI检测PC12细胞凋亡率。结果与模型组相比,甘草苷可以使PC12细胞存活率显著增加,细胞培养上清中LDH含量显著减少,SOD活性显著升高,MDA含量显著下降,并明显降低PC12细胞凋亡率。结论甘草苷对NO诱导的PC12细胞凋亡有明显保护作用。     

神经甾体化合物对PC12细胞损伤的保护作用

目的 研究神经甾体化合物(CPU 03-03)对H2O2和Aβ25～35所诱导的PC12细胞损伤的保护作用.方法 用H2O2和Aβ25～35造成PC12细胞损伤模型,采用MTT比色法检测细胞存活率,同时检测乳酸脱氢酶(LDH)活力和丙二醛(MDA).结果 CPU 03-03能显著减少细胞死亡,降低LDH漏出量及MDA生成.结论 CPU 03-03对PC12细胞损伤具有保护作用.     

Orexin A预处理对过氧化氢损伤PC12细胞的保护作用

目的观察食欲素(Orexin)A预处理对过氧化氢(H_2O_2)损伤PC12细胞存活率及凋亡的影响。方法将PC12细胞分为对照组、H_2O_2组和Orexin A+H_2O_2组,分别通过噻唑蓝(MTT)、倒置显微镜进行形态观察、流式细胞术对细胞存活率、凋亡细胞形态、细胞凋亡率进行分析。结果 Orexin A+H_2O_2组细胞存活率显著高于H_2O_2组,细胞早期凋亡率及晚期凋亡率均显著低于H_2O_2组(P0.05)。结论 Orexin A能提高H_2O_2细胞存活率、降低细胞凋亡,发挥神经保护作用。     

褪黑素对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤的保护作用

目的研究褪黑素（MT）对β淀粉样蛋白片段（AB25书）诱发PC12细胞损伤的神经保护作用。方法将培养的PC12细胞分为三组：正常对照组，Aβ损伤组和MT保护组。Aβ损伤组用Aβ25-35处理细胞，MT保护组在用AB25-35处理前2h加入褪黑素。使用细胞形态学方法、LDH法、MTT法及Western印迹法观察MT的神经保护作用。结果形态学观察发现MT保护组细胞数显著比Aβ损伤组多，受损变圆的细胞数较少。MT保护组LDH活性显著低于损伤组（P〈0．01）；OD值显著高于损伤组（P〈0．01）。Western印迹结果表明Aβ25-35损伤组中Bcl-2的表达比正常对照组低；MT保护组Bcl-2的表达比Aβ25-35损伤组升高。结论褪黑素对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤有保护作用。     

软脉胶囊含药血清对PC12细胞损伤的保护作用

目的 探讨软脉胶囊对PC12细胞损伤的保护作用。方法 采用血清药理学方法体外培养PC12细胞，研究软脉胶囊对缺氧、GLU、NO引起的PC12细胞损伤的影响。结果 软脉胶囊含药血清可明显对抗缺氧、GLU、NO引起的PC12细胞形态改变，降低胞外LDH活性，增加细胞存活率。结论 软脉胶囊含药血清对PC12细胞损伤具有保护作用。     

Carnosine对Aβ25-35诱发PC12细胞损伤的神经保护作用

目的　研究 Carnosine对 β淀粉样蛋白片段 (Aβ2 5- 3 5)诱发 PC1 2细胞损伤的神经保护作用。方法　将培养的 PC1 2细胞分为三组 :正常对照组、损伤组和保护组。损伤组用 Aβ2 5- 3 5处理细胞 ,保护组在用 Aβ2 5- 3 5处理前 30 min加入 Carnosine。使用细胞形态学方法、LDH法、MTT法观察 Carnosine的神经保护作用。结果　通过形态学方法 ,保护组细胞数显著比损伤组多 ,受损变圆的细胞数较少。保护组 LDH活性显著少于损伤组(P<0 .0 1 ) ;MTT显著高于损伤组 (P<0 .0 1 )。结论　 Carnosine对 Aβ2 5- 3 5诱发 PC1 2细胞损伤有显著的保护作用。     

醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的保护作用

目的探讨醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞缺氧损伤的影响.方法采用血清药理学方法,体外培养PC12细胞,用Na2,S2O4产生缺氧损伤,观察PC12细胞形态学、m法细胞活力、乳酸脱氢酶LDH活性的变化.结果醒脑启智胶囊药物血清对PC12细胞的形态改变具有明显的保护作用,可增强细胞活力,降低LDH活性.结论醒脑启智胶囊药物血清能明显减轻PC12细胞的缺氧损伤,并呈现一定的剂量依赖关系.     

银杏叶提取物对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤的保护作用

目的研究银杏叶提取物（Extracts of ginkgo biloba leaves,EGB）对β淀粉样蛋白（Aβ25-35）诱导的PC12细胞损伤的保护作用.方法用Aβ25-35处理诱导体外培养的PC12细胞损伤,并用EGB进行保护,显微观察细胞形态的改变,LDHH法和MTT法检测细胞膜的损伤情况.结果EGB处理组细胞数比损伤组显著增多,受损变圆的细胞数较少,细胞形态明显改善,EGB处理组上清液LDH活性显著低于Aβ25-35处理组（P＜0.01）,MTT值显著高于Aβ25-35处理组（P＜0.01）.结论EGB对Aβ25-35诱导的PC12细胞损伤具有显著的保护作用.     

Effect of extracellular matrix on PC 12 cell shape and dopamine processing

Substrates of various origins can affect the morphology, growth and functional properties of many cell types. PC 12 cells (a clonal line of rat pheochromocytoma) synthesize, store and secrete dopamine as well as other transmitters. These cells are rounded and loosely attached when cultured on plastic, but flatten and spread extensively when cultured on an extracellular matrix secreted by bovine corneal endothelial cells. We determined that spontaneous dopamine release into culture medium was significantly higher from cells which were flattened on matrix, and that the cellular content of dopamine was less than in cells which were maintained on plastic. The higher levels of medium dopamine in matrix cultures were not due to an increase in cellular attachment or growth as determined by [3H]thymidine incorporation. A variant of PC 12 cells which is flat on plastic showed no change in cell shape or dopamine release when plated on matrix. These experiments suggest that extracellular matrix promotes a change in cell shape and that this change in the physical arrangement of these cells alters their release and storage of dopamine.     

氯通道阻滞剂在β_(25-35)淀粉样多肽诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的探讨氯通道阻滞剂(DIDS)对β25-35淀粉样多肽(Aβ25-35)诱导PC12细胞凋亡的影响。方法PC12细胞按实验不同分为对照组(DMEM培养液)、Aβ25-35组(Aβ25-35 40μmol/L)、DIDS组(Aβ25-35 40μmol/L+DIDS 50μmol/L)。MTT法测细胞存活率,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核形态学改变,流式细胞技术测细胞凋亡率。结果Aβ25-35组与对照组和DIDS组比较,PC12细胞的存活率明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显增高(P<0.05),不同DIDS浓度依赖性升高PC12细胞存活率,DIDS 50μmol/L能显著下调Aβ25-35诱导的细胞凋亡(P<0.05)。结论DIDS对Aβ25-35诱导PC12细胞损伤有保护作用。     

血管损伤影响离体平滑肌细胞增殖与钙稳态有关

本实验采用球囊剥脱术在体损伤血管，于术后３天和１０天取出血管做平滑肌细胞培养。结果发现，血管损伤后血管平滑肌细胞增殖活性显著增加，ＤＮＡ和蛋白质合成加速，细胞数目增多。在血管平滑肌细胞增殖过程中，钙内流增加，胞内钙含量升高。应用１０μｍｏｌ·Ｌ￣（－１）异搏定不但对钙稳态变化有一定的抑制作用，而且还对血管损伤诱导的平滑肌细胞增殖有抑制作用。这些结果提示血管损伤可致血管平滑肌细胞增殖；钙稳态失衡可能是血管损伤诱导血管平滑肌细胞增殖的细胞学机制之一。     

硫化氢对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用

目的:研究不同浓度的硫化氢(H_2S)对缺氧不同时间的乳鼠心肌细胞损伤的直接影响及其对复氧损伤的间接影响,分析其对乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用.方法:原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组、缺氧硫氢化钠(NaHS)0组、缺氧硫氢化钠 100 μmol/L组、缺氧硫氢化钠 200 μmol/L组、缺氧硫氢化钠400 μmol/L组以及缺氧-复氧硫氢化钠0组、缺氧-复氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠 200 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠 400 μmol/L组.在缺氧24 h、48 h、72 h后及复氧2 h后均检测细胞存活数量、培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:缺氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧硫氢化钠200 μmol/L组和缺氧硫氢化钠 400 μmol/L组缺氧培养24 h、48 h和72 h后与各自时间点缺氧硫氢化钠0组比心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、培养液中乳酸脱氢酶活性降低(P<0.01),差异均有统计学意义;缺氧硫氢化钠 200 μmol/L组和缺氧硫氢化钠 400 μmol/L组在缺氧培养24 h后较缺氧硫氢化钠100 μmol/L组心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、培养液中乳酸脱氢酶活性降低(P<0.05～0.01),差异均有统计学意义.缺氧-复氧硫氢化钠100 μmol/L组、缺氧-复氧硫氢化钠200 μmol/L组和缺氧缺氧-复氧硫氢化钠400 μmol/L组缺氧培养24 h、48 h、72 h并复氧2 h后较各自时间点缺氧-复氧硫氢化钠0组比心肌细胞存活数量升高(P<0.01)、复氧后心肌细胞乳酸脱氢酶漏出量降低(P<0.01),差异均有统计学意义.结论:100~400 μmol/L 硫氢化钠对缺氧-复氧心肌细胞具有保护效果.200~400 μmol/L 硫氢化钠对缺氧24 h的心肌细胞保护作用较好.     

雌激素对Aβ25-35致PC12细胞膜流动性改变的影响

目的观察可溶性Aβ25-35作用下PC12细胞膜流动性的改变及17β-雌二醇(17βE2)对此改变的影响。方法培养的PC12细胞分为空白对照组,Aβ损伤组及雌激素干预组,根据浓度梯度雌激素干预组再分为5个剂量亚组,采用荧光偏振法动态检测不同组PC12细胞不同时间膜流动性的改变。结果Aβ损伤组在加入5μmol/L可溶性Aβ25-35后各时间点,与空白对照组比较,其微黏度η值均明显升高(P<0.01);17βE2干预组在10-10mol/L浓度的条件下各时间点η值与Aβ损伤组比较差异无显著性(P>0.05);而在10-9~10-6mol/L浓度的条件下各时间点η值与Aβ损伤组比较均显著降低(P<0.01),且这种作用具有剂量依赖性,17βE210-91、0-8、10-7、10-6mol/L干预组与Aβ损伤组比较,在24 h时PC12细胞微黏度η值分别降低了36.4%、49.6%、60%及68.4%。结论可溶性Aβ25-35 5μmol/L使PC12细胞微黏度明显升高,膜流动性明显下降;雌激素具有改善膜流动性保护神经元的作用,且这种作用具有剂量依赖性。     

氧化型低密度脂蛋白致PC12细胞的毒性作用及抗氧化剂的细胞保护作用

目的探讨氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)致PC12细胞的毒性作用及白藜芦醇等抗氧化剂的细胞保护作用。方法 通过噻唑蓝(MTT)实验、乳酸脱氢酶(LDH)释放实验、DNA断端原位末端标记法(TUNEL)实验及caspase-3测定来观察oxLDL对PC12细胞存活率、细胞膜通透性、细胞核及caspase-3活性的影响。抗氧化剂白藜芦醇、丙丁酚及维生素E预处理细胞,再加入不同浓度oxLDL,观察抗氧化剂的细胞保护作用。结果 PC12细胞存活率随着ox-LDL浓度及作用时间增加而下降;LDH释放率、TUNEL阳性细胞数及caspase-3活性随着浓度增高而增高;低密度脂蛋白(LDL)对上述各项指标无影响。白藜芦醇、丙丁酚及维生素E均能减缓oxLDL所致的细胞存活率下降、LDH释放率的升高、TUNEL阳性细胞数的增加,其中白藜芦醇作用最强;白藜芦醇、丙丁酚减缓oxLDL所致的caspase-3活性增高,而维生素E对caspase-3活性无影响。结论oxLDL导致PC12细胞死亡,其浓度与PC12细胞存活率呈剂效关系,其作用时间与PC12细胞成活率呈时效关系。     

氟桂利嗪对缺血再灌注后PC12细胞质钙离子浓度和核转录因子表达影响的研究

目的　观察氟桂利嗪对缺血再灌注损伤中PC12细胞质Ca2 + 浓度的变化和核转录因子 (NF κB)表达的影响。方法　将传代培养的PC12细胞在特制的装置中进行缺血再灌注处理 (单纯缺血再灌注组 ) ,建立研究所需要的细胞模型并施以氟桂利嗪进行干预 (氟桂利嗪处理组 ) ,运用激光共聚焦显微镜检测不同处理条件下细胞质的Ca2 + 浓度 ,并应用免疫细胞化学和流式细胞仪技术对NF κB的表达情况进行检测。结果　氟桂利嗪处理组与单纯缺血再灌注组比较 ,细胞质Ca2 + 浓度和NF κB的表达均有降低。结论　氟桂利嗪能够减少缺血再灌注引起的细胞质PC12细胞Ca2 + 和NF κB的上调 ,可能具有细胞保护性作用 ;缺血再灌注损伤中NF κB的激活可能存在着Ca2 + 调控通路。