阿托伐他汀通过下调线粒体融合素2表达抑制大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡

目的研究阿托伐他汀对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤后细胞凋亡及线粒体融合素2表达的影响。方法选取雄性SD大鼠32只,随机分为假手术组(sham),缺血再灌注组(I/R),阿托伐他汀1组(statin 1)和阿托伐他汀2组(statin 2),每组8只。Statin 1组术前7 d开始每日给予阿托伐他汀10 mg/(kg·d)灌胃,statin 2组药物剂量为40 mg/(kg·d),I/R组以等体积蒸馏水灌胃,随后制备心肌I/R损伤模型。各组于再灌注3 h后剪取心脏I/R损伤区域,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,免疫印迹法检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达,免疫组化法检测线粒体融合素2的表达。结果与sham组相比,I/R组及statin 1组、statin 2组心肌细胞凋亡显著增加,p-Akt表达显著下降,线粒体融合素2表达显著增加(P0.01);与I/R组相比,statin 1组、statin 2组心肌细胞凋亡和线粒体融合素2表达均显著降低(P0.05),而p-Akt表达显著增高(P0.05),且statin 2组较statin 1组变化更显著(P0.05)。结论阿托伐他汀可抑制大鼠心肌缺血再灌注损伤后的细胞凋亡,其作用可能与抑制线粒体融合素2表达有关。     

安氟醚和异氟醚预处理对实验小鼠肝组织Bcl-2/Bax mRNA和蛋白表达的影响

目的:探讨吸入异氟醚和安氟醚预处理对实验小鼠肝组织Bcl-2和Bax基因和蛋白表达的影响。方法:120只C57BL/6小鼠随机分成安氟醚预处理组(E组)和异氟醚预处理组(I组),每组60只;各组又分为麻醉前(T0)、麻醉即刻(T1)、麻醉2h(T2)、麻醉4h(T3)、麻醉6h(T4)和麻醉终止后2h(T5)。取两组各时相肝组织检测Bcl-2和Bax mRNA及蛋白表达水平。结果:两组Bcl-2 mRNA及Bcl-2和Bax蛋白水平在T1表达均有所下调,但差异无统计学意义(P>0.05);在T2～T5表达上调(P<0.05或P<0.01),并随麻醉时间延长而逐渐增加,即T4时上调最明显(P<0.01);麻醉停止后(T5)开始恢复。两组Blc-2蛋白水平在T2～T5均较T0时增加,而Bax蛋白在T3～T5时增加(P<0.05或P<0.01);两组Bcl-2/Bax蛋白比值与T0时相比,E组在T1～T3、I组在T1～T5均明显升高(P<0.05)。结论:吸入安氟醚、异氟醚后肝组织Bcl-2和Bax表达增加,以Bcl-2更为明显;安氟醚、异氟醚预处理保护肝脏的作用可能与其抑制肝细胞凋亡有关。     

体液性免疫抑制因素

免疫抑制是构成免疫调节的一个重要方面,它与免疫激活相反相成,从而保障免疫反应的适度,维持机体内环境的稳定性。免疫抑制的太过与不及,都可导致免疫反应失控、紊乱甚至引起疾病,即所谓“免疫失调病”。免疫抑制因素包括细胞性和体液性两类。有关细胞性抑制因素已另有综述,本文重点介绍存在于循环血清中的几种体液性抑制因素及其在正常免疫调节和病理方面     

头孢地秦在免疫抑制小鼠白念珠菌败血症中的作用

为观察头孢地秦 (cefodizime ,CDZ )在实验性免疫抑制小鼠白念珠菌败血症中的免疫调节作用及其在抗感染免疫中的综合作用 ,本文用环磷酰胺 (CTX )免疫抑制昆明种小鼠 ,分别腹腔注射CDZ 6 0 0mg/kg、 2 0 0mg/kg、 5 0mg/kg及头孢曲松 (cef triaxone ,CRO ) 2 0 0mg/kg× 7d。并在第 3天尾静脉注射白念珠菌 ,第 8天分别测定各组的炭廓清功能、血清溶血素的生成及T细胞亚群的变化。观察小鼠注射白念珠菌后的生存期并作生存分析。研究表明CDZ 6 0 0mg/kg、CDZ 2 0 0mg/kg组能明显提高CTX抑制的炭廓清功能 (P <0 0 5 ) ;CDZ各组亦能增加被CTX抑制的血清溶血素水平 (P <0 0 1) ;与CTX组相比 ,CDZ6 0 0mg/kg组明显提高CD4/CD8比值 (P <0 0 5 )。整体比较各组生存率 ,与其免疫调节功能基本一致。尾静脉注射白念珠菌后 ,CTX组 3d就有小鼠死亡 ,其平均生存期为 5d ,而CDZ 6 0 0mg/kg组、 2 0 0mg/kg组、 5 0mg/kg组最长生存期分别为 16d、17d和 12d ,其平均生存期分别为 12 8d、 11 7d和 9 6d ,明显高于免疫抑制组小鼠 (P <0 0 1)。而CRO组和免疫抑制组相比 ,差别无显著差异。说明CDZ能提高免疫抑制机体的免疫功能 ,并在抗感染免疫中发挥作用 ,提示其在临床感染治疗上可能具有重要的实际意义。     

蛋白酶激活受体2/P38MAPK信号通路在缺血后处理对抗老年糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的:研究蛋白酶激活受体2/P38MAPK(PAR-2/P38MAPK)信号通路在缺血后处理(IPost)对抗老年糖尿病大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤中的作用。方法:22-24月龄雄性Wistar大鼠32只,随机选取24只采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备老年糖尿病模型。成模大鼠随机分成3组(每组8只):I/R组、IPost组、PAR-2抑制剂组(PAR-2组),PAR-2组大鼠于缺血处理前1h尾静脉注射PAR-2抑制剂FSLLRY-NH2,其余处理同IPost组;未造模的8只大鼠作为对照组(SC组)。采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥比色法分别测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)浓度,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率,Western Blotting测定PAR-2及P38MAPK、P-P38MAPK蛋白表达水平。结果:I/R组MDA浓度、心肌细胞凋亡率及P-P38MAPK水平均较SC组显著增加(P0.05或P0.01),SOD活性、PAR-2蛋白表达水平明显降低(P0.01)。IPost组SOD活性及PAR-2水平较I/R组显著增加(P0.05),P-P38MAPK水平、MDA浓度及心肌细胞凋亡率均下降(P0.01)。PAR-2抑制剂则可抑制IPost作用,使P-P38MAPK蛋白表达水平上调、心肌细胞凋亡率增加、MDA浓度升高、SOD活性降低(P0.05或P0.01)。结论:IPost对老年糖尿病大鼠心肌I/R损伤有保护作用,其机制与PAR-2/P38MAPK信号通路的调节有关。     

不育夫妇外周血淋巴细胞对男性抑制物质的LPCA反应

<正> 现知精液中含有男性抑制物质(maleinhibition material,MIM)或称精浆免疫抑制物质,它能抑制淋巴细胞对PHA及抗原的反应,抑制NK活性和E花环形成。为了研究MIM在男性不育或女性不孕中可能起的作用。我们用外周血淋巴细胞促凝血活性(LPCA)的方法检测76例怀孕夫妇和112例不孕夫妇、24例习惯性流产夫妇外周血淋巴细胞对MIM的细胞免疫反应。     

大鼠视上核、室旁核肠三叶因子表达与实验性胃溃疡的关系

目的探讨大鼠实验性胃溃疡自愈期间肠三叶因子(ITF)在下丘脑视上核(SON)、室旁核(PVN)的表达及其与实验性胃溃疡愈合的关系。方法以免疫组织化学染色、酶联免疫吸附实验分别检测溃疡组(42只)和正常组(6只)大鼠下丘脑和血清及ITF的表达及含量变化,RT-PCR检测ITFmRNA的转录情况。结果 ITF免疫反应阳性物质主要位于视上核和室旁核大细胞部。溃疡1d视上核和室旁核ITF积分吸光度略增高,2d、4d和6d逐渐升高,6d达高峰(P0.01),10～23d均维持在较高水平(P0.05)。血清ITF的变化与免疫组织化学法结果相似;溃疡组ITF/3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)吸光度比值在溃疡2～23d均高于正常组(P0.01,或P0.05)。结论胃溃疡自愈期间可能通过下丘脑和血清ITF的高表达参与溃疡愈合的调节。     

Ghrelin、melanotan-Ⅱ以及胆囊收缩素对下丘脑双侧室旁核损伤大鼠摄食的影响

目的探讨大鼠下丘脑双侧室旁核(PVN)损伤引起的过食和肥胖的产生机制。方法 Wistar雄性大鼠36只,通过电损伤下丘脑双侧PVN使大鼠产生过食和肥胖,检测ghrelin、melanotan-II(MT-II,一种合成的α-黑色素细胞刺激素——α-MSH的结构同源体)以及胆囊收缩素-8(CCK-8)摄食作用的改变。结果双侧PVN损伤后大鼠的体重和摄食量明显增加,显示出过食和肥胖,手术后1周,外周给与Ghrelin,3～4h后PVN损伤组比伪损伤组的摄食量增加明显,Ghrelin显示出更强的刺激摄食的作用;中枢给予MT-Ⅱ可明显抑制24h节食大鼠的食物摄取,然而PVN损伤后MT-II对24h节食大鼠摄食的抑制作用减弱甚至消失;外周给予CCK-8可明显抑制大鼠各时间段的摄食作用,PVN损伤组和伪损伤组之间未见明显差异。结论大鼠下丘脑双侧PVN损伤引起的过食和肥胖可能与增强的ghrelin对摄食的刺激作用和(或)α-MSH受体的破坏有关。     

短期运动对大鼠缺血/再灌注心肌的保护作用

目的研究短期中等强度运动训练对大鼠缺血/再灌注(I/R)心肌的保护作用及与蛋白激酶C(PKC)激活的相关性。方法40只Wistar大鼠随机分为4组(每组10只):对照组(CON组)、运动组(EXE组)、运动 PKC抑制剂组(E C组)和PKC抑制剂组(CHE组)。应用Langendorff离体心脏I/R模型,观察各组大鼠心脏再灌注期间心律失常的发生情况、心功能指标恢复率及心肌梗死范围。结果EXE组大鼠LVDP(再灌注30、60 min)和RPP(再灌注20、30、60 min)恢复率高于CON和E C组(P<0.05或P<0.01),心肌梗死范围显著低于CON和E C组(P<0.01)。CON、CHE组上述各指标无差异。结论短期中等强度运动训练对I/R心肌有保护作用,保护作用与PKC的激活有关。     

多疣壁虎断尾再生中巨噬细胞的组织定位

目的:研究巨噬细胞与多疣壁虎断尾再生的关系.方法:多疣壁虎120只,断尾后随机分为野生型组(正常组)、生理盐水组(免疫正常组)、生理盐水+氢化可的松组(免疫抑制组)和生理盐水+脂多糖组(免疫增强组).免疫抑制组腹腔注射氢化可的松80μg·g-1·d-1;免疫增强组注射脂多糖10 μg·g-1·d-1;采用免疫组织化学检测巨噬细胞组织定位.结果:在壁虎断尾再生过程中,横断创面巨噬细胞的浸润定位层次是改变的,断尾12 h后迁移到尾巴断截面附近的巨噬细胞数量达到峰值.免疫正常组、增强组在断尾后24 h与免疫抑制组相比较,断面附近巨噬细胞的数量显著增加.结论:巨噬细胞有可能参与多疣壁虎断尾再生过程.     

切除大鼠肾上腺对丘脑下部CRF、VP和OT的影响——免疫组织化学研究

几乎只有向脑室内注入秋水仙素之后,才能在其丘脑下部室旁核(PVN)显示促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)免疫反应神经元。然而,我们切除肾上腺也能显示这类神经元,而且其细胞数目在术后3周时明显多于1周。切除肾上腺又用秋水仙素处理,细胞的数目及其免疫反应强度增加得更加显著。切除肾上腺1、3周后,PVN前份背内侧区出现一群淡染的VP样神经元。术后PVN内OT样神经元无明显变化。在正中隆起(ME)处:切除肾上腺1周时,外带CRF样纤维免疫反应强度较正常明显减弱,3周时又恢复到正常水平。1周时减弱的原因本文作了推测。外带VP样纤维的免疫反应在术后1周时不减弱,而是增加,3周时增加得更明显。OT样纤维束居于ME内带,术后1周时没有明显变化,3周时其免疫反应有所增强。切除肾上腺后即用地塞米松治疗,结果PVN及ME内CRF、VP免疫反应与未治疗者比较,均受到不同程度的抑制。上述结果证明,肾上腺对CRF和VP均具有反馈抑制作用,并说明它们都参与了丘脑下部-腺垂体-肾上腺轴的调控。然而,对OT还需进一步研究。     

低剂量干扰素对化疗乳癌患者NK细胞活性的影响

干扰素(IFN)在动物实验性肿瘤中有抗肿瘤效应,在肿瘤患者中也有治疗作用;IFN能增强或调节人及动物各种免疫效应,如NK细胞活性、ADCC等,显然,IFN的抗肿瘤效应与其免疫调节活性有关;IFN的免疫增强作用还能增大化疗的抗肿瘤作用,并能纠正化疗药物所致的免疫抑制。     

室旁核内花生四烯酰乙醇胺对心衰大鼠的心脏功能和交感神经活动的影响

目的:探究慢性心衰大鼠下丘脑室旁核(PVN)内花生四烯酰乙醇胺(AEA)对心脏功能和交感神经活动的影响。方法:采用冠状动脉结扎法构建大鼠心衰模型,超声心动图检测心功能;PVN内连续4周分别灌注AEA、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)选择性抑制剂KN-93、瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)通道特异性阻断剂辣椒平(CPZ)、Ca~(2+)螯合剂BAPTA-AM和小电导钙激活钾通道(SK通道)阻断剂apamin后,检测交感驱动及心功能指标;同时采用不同浓度AEA孵育NG108细胞,荧光测定法检测细胞内钙离子浓度([Ca~(2+)]_i);Western blot检测CaMKII、SK_2及磷酸化TRPV1蛋白水平。结果:与假手术组相比,心衰组左心室舒张末期压(LVEDP)明显升高,左室压力最大上升、下降速率(±dp/dt_(max))和射血分数(EF)明显下降;PVN内AEA含量、[Ca~(2+)]_i及CaMKII、SK_2和磷酸化TRPV1蛋白水平均显著降低;与溶剂组相比,心衰组PVN内灌注AEA可显著降低心衰大鼠死亡率和交感驱动指标,并改善心功能;然而,PVN内分别灌注KN-93、CPZ、BAPTA-AM和apamin均显著增强交感驱动指标并恶化心功能;AEA可剂量依赖性增加NG108细胞内[Ca~(2+)]_i及CaMKII、SK_2和磷酸化TRPV1蛋白水平。结论:室旁核内CaMKII/TRPV1/Ca~(2+)/SK_2信号通路可能参与了AEA对心衰大鼠心脏功能和交感神经活动的影响。     

霍山石斛多糖对小鼠的双向免疫调节作用

目的观察霍山石斛多糖对小鼠的双向免疫调节作用。方法将90只昆明种小鼠随机分成9组,分别为正常对照组、免疫亢进模型组、免疫亢进+霍山石斛多糖[低(50 mg?kg-1?d-1)、中(100 mg?kg-1?d-1)、高(200 mg?kg-1?d-1)]剂量组、免疫抑制模型组、免疫抑制+霍山石斛多糖[低(50 mg?kg-1?d-1)、中(100 mg?kg-1?d-1)、高(200 mg?kg-1?d-1)]剂量组。采用连续3 d腹腔注射环磷酰胺(80 mg·kg-1)制作免疫抑制模型小鼠,采用连续11 d肌注卡介苗0.5 mg/只制作免疫亢进模型小鼠,观察霍山石斛多糖对免疫抑制模型小鼠和免疫亢进模型小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性、体外脾淋巴细胞增殖能力和胸腺指数的影响。结果霍山石斛多糖能明显改善环磷酰胺所致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性降低、脾淋巴细胞体外增殖能力降低和胸腺指数降低,缓解卡介苗所致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性亢进、脾淋巴细胞体外增殖能力亢进和胸腺指数降低。结论霍山石斛多糖具有较好的双向免疫调节作用。     

2-脱氧葡萄糖诱导的内质网应激预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究2-脱氧葡萄糖(2-DG)诱导内质网应激(ERS)预处理对大鼠脑缺血再灌注的保护作用。方法 64只雄性SD大鼠随机均分为假手术组(SH组)、缺血/再灌注组(I/R组)、2-DG诱导的ERS预处理组(IP组)、IP+I/R组。采用TUNEL法检测CA1区凋亡细胞,免疫组化法、Western-Blot法检测p-JNK蛋白在海马CA1区的表达变化。结果与对照组比较,I/R组海马CA1区锥体神经元排列紊乱及变性坏死,形态正常椎体细胞百分数减少,凋亡细胞数目明显增加,脑组织p-JNK表达水平增加;与I/R组相比,IP+I/R组形态正常锥体细胞明显增加,凋亡细胞数目明显减少,脑组织表达较I/R组明显减少。结论 2-DG诱导的ERS对脑缺血再灌注损伤有保护作用,可能与其抑制细胞凋亡和p-JNK表达相关。     

幼鼠中枢神经系统FOS蛋白表达升高与母婴分离相关

 目的 探讨幼鼠中枢神经系统下丘脑室旁核(PVN)及前皮质扣带回(ACC)内FOS蛋白表达与母婴分离(MS)的相关性。方法 按析因设计,32只SD新生大鼠分成4组,每组8只。A1B1组、A1B2组均为MS组,A1B1组在6周龄时接受结直肠扩张刺激(CRD),A1B2组在6周龄时未给予CRD;A2B1组、A2B2组均未给予MS,同为对照组,A2B1组在6周龄时接受CRD,A2B2组在6周龄时未给予CRD。A1B1、A2B1组幼鼠在接受CRD刺激后2 h和A1B2、A2B2组幼鼠一起处死。之后采用SABC免疫组化法检测不同脑区（包括PVN和ACC）内FOS蛋白免疫阳性（FLI）细胞表达情况。结果 新生期MS和幼鼠在6周龄时接受CRD刺激均可使PVN内FLI细胞数显著升高(F分别为7.033、35.212,P＜0.01)。也均使ACC内FLI细胞数显著升高(F分别为22.745、15.106,P＜0.01);两者对FOS蛋白表达的影响无交互作用。结论 幼鼠中枢神经系统（PVN和ACC）FOS蛋白表达升高与新生期MS明显相关。     

局部免疫调节是胎儿不被母体排斥的主要机制

对于作为半同种异体移植物的胎儿能耐受母体的免疫防御而不被排斥的机制的认识目前倾向于局部免疫调节学说。研究集中于母胎界面滋养层、蜕膜及多种具有免疫抑制作用的因子的探讨。滋养层通过其表面的TLX 抗原刺激母体免疫系统产生相应的抗TLX 抗体(ab_1)和独特型抗体(ab_2)建立TLX-ab_1-ab_2网络、分泌多种免疫抑制因子以及滋养层细胞本身对细胞毒T 细胞的固有抵抗力等途径发挥其免疫调节作用;蜕膜组织中的蜕膜细胞、巨噬细胞、颗粒小淋巴细胞及大抑制细胞则具有分泌PGE_2或可溶性因子,抑制IL-2生成,从而抑制局部母体免疫排斥的功能。此外,新近发现的早孕因子(EPF)也认为是通过局部发挥其免疫抑制作用的。     

真菌细胞壁病原相关分子模式TLR/Dectin-1通路及相关细胞因子的免疫作用

侵袭性真菌感染(IFI)是致ICU患者死亡的重要原因之一。机体通过天然免疫重要的模式识别受体(PRR)Toll样受体(TLR)及C型凝集素受体(CLR)与病原相关分子模式(PAMP)识别后启动抗真菌免疫反应。目前明确磷脂甘露聚糖(PLM)的识别主要依赖TLR2和TLR4;β-葡聚糖经TLR2/树突状细胞相关性C型凝集素-1(Dectin-1)或只经Dectin-1识别。PLM和β-葡聚糖被识别后及经Dectin-1驱动获得性免疫后产生一系列下游细胞因子,一些下游细胞因子的免疫作用对不同组织有所不同、不确定或存在争议,一些免疫反应在细节上还没有详尽描述。因此,深入研究PAMP与PRR相互作用及其细胞因子对免疫调节影响,对IFI的预防治疗有重要意义。     

创伤与免疫抑制因子

严重创伤后血清中出现的免疫抑制因子是导致机体免疫功能下降的主要原因,抑制因子可能来源于创伤部位炎症反应介质及内源性免疫调节因子,可导致免疫活性细胞亚群改变、抑制性细胞活性增强,导致广泛的免疫反应低下。     

17β-雌二醇对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 观察17β-雌二醇对大鼠心缺血再灌(I/R)损伤的保护作用并探讨其机制. 方法 30只成年雌性SD大鼠卵巢切除后,随机分成C组(I/R假手术组)、 I/R组和 I/R+E2组(17β-雌二醇预处理).17β-雌二醇预处理2周后建立大鼠心肌缺血再灌注模型,用氯化三苯甲基四氮唑(TTC)染色法测量心肌梗死范围,流式细胞术检测心肌细胞凋亡率,免疫组织化学方法检测心肌细胞原癌基因c-fos的蛋白表达. 结果 17β-雌二醇能明显减少缺血再灌注心肌梗死体积,降低心肌细胞凋亡率,减弱缺血再灌注心肌细胞c-Fos的表达. 结论 雌激素对大鼠缺血再灌注心有保护作用,其作用机制可能与抑制原癌基因c-fos的蛋白表达有关.