肝细胞癌患者外周血中miR-30a、miR-106b的表达及其与预后的关系

目的:探讨肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清miR-30a、miR-106b的表达及其与 预后的关系。方法:选取2015年6月-2017年2月本院收治的HCC患者80例为研究对象,20例同期健康人群作为对照组。荧光定量PCR检测外周血中miR-30a、miR-106b的表达水平,分析患者血清miR-30a、miR-106b水平与HCC临床病理的关系。分析HCC患者预后的影响因素以及血清miR-30a、miR-106b水平与HCC患者预后的相关性。结果:HCC患者血清miR-30a表达水平（1.03±0.02）低于正常人群（5.15±0.06）（P=0.00）;血清miR-106b表达水平（2.62±0.35）高于正常人群（1.15±0.06）（P=0.00）。miR-30a、miR-106b表达与患者肿瘤直径、组织分化类程度、肝内转移、淋巴结转移、甲胎蛋白（AFP）水平、门静脉癌栓、肿瘤数目及TNM分期有显著相关性(P＜0.05) 。miR-30a低表达组患者3年总生存率（39.8%）低于miR-30a高表达组（64.6%）（P=0.002）;miR-106b低表达组患者3年总生存率（75.8%）高于miR-106b高表达组（51.2%）（P=0.003）。二元Logistic回归分析提示,淋巴结转移、TNM分期、miR-106b及miR-30a水平是患者预后的重要影响因素。结论:miR-30a在HCC患者血清中低表达,miR-106b在HCC患者血清中高表达,与肿瘤的进展、预后不良有关。     

上皮性卵巢癌血清miR-1294及miR-4443的表达及其与预后的关系

目的:探讨上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer,EOC）患者血清miR-1294及miR-4443的表达水平及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取我院2015年1月至2017年12月收治的106例EOC患者作为EOC组,另选取90例卵巢良性肿瘤患者作为良性组和60例正常健康女性作为对照组,检测血清miR-1294及miR-4443表达水平。以miR-1294及miR-4443的最佳截断值为标准将EOC患者分为高miR-1294组（n=33）、低miR-1294组（n=73）和高miR-4443组（n=36）、低miR-4443组（n=70）。EOC患者预后不良的危险因素应用单因素及多因素COX回归模型进行分析。结果:血清miR-1294表达水平（0.48±0.13 vs 1.16±0.57、1.21±0.62）在EOC组明显低于良性组和对照组（P均<0.001）。血清miR-4443表达水平（0.71±0.18 vs 1.36±0.64、1.45±0.70）在EOC组明显低于良性组和对照组（P均<0.001）。miR-1294和miR-4443高表达组的EOC患者临床分期、分化程度、淋巴结转移及腹膜转移与miR-1294和miR-4443低表达组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。Kaplan-Meier分析显示,EOC患者生存期短与miR-1294及miR-4443低表达有关（P<0.001）。多因素分析显示,EOC患者预后不良的独立危险因素为淋巴结转移［HR（95%CI）=1.885（1.206～4.118）］、腹膜转移［HR（95%CI）=3.106（2.315～6.226）］、miR-1294＜0.73［HR（95%CI）=2.614（1.865～5.512）］及miR-4443＜1.04［HR（95%CI）=1.975（1.508～4.903）］。结论:miR-1294及miR-4443的低表达与EOC患者生存期短有关,是EOC患者预后预测的生物标志物。     

结肠癌中miR-106a的表达与临床特征和预后相关性

目的：探讨结肠癌组织中miR-106 a表达与患者临床资料的关系及其作为结肠癌预后标志物的意义。方法回顾性收集105例初诊为结肠癌的患者的临床资料和组织切片,采用qRT-PCR检测癌组织和癌旁组织中miR-106 a的表达水平,分析miR-106 a的表达与临床资料及预后的关系。结果miR-106a在癌组织的表达高于癌旁组织（1．142 vs．0．685）（P＜0．001）;miR-106a与患者的临床分期和淋巴结转移相关;miR-106 a的表达越高,预后越差;结肠癌患者miR-106 a高表达组较低表达组死亡风险增加3．390（95％CI：1．028～11．178）倍。结论 miR-106a的异常表达与结肠癌密切相关,可能是潜在的临床治疗靶点,并可成为结肠癌潜在的预后因子。     

结直肠癌中医辨证分型与miR-29、miR-34a表达的相关性分析

目的:探究结直肠癌患者血清miR-29、miR-34a表达水平及其与中医辨证分型的相关性。方法:选取2014年06月至2015年06月本院收治的127例结直肠癌患者作为研究对象（结直肠癌组）,并根据中医辨证分型标准分为湿热内蕴型21例、气滞血瘀型40例、脾肾阳虚型29例、气血两虚型18例、肝肾阴虚型19例;另选取同期在本院体检的127例健康者作为健康对照组。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测血清miR-29、miR-34a表达水平,并进行比较;采用Pearson法分析血清miR-29与miR-34a表达水平的相关性;采用Logistic回归模型分析影响结直肠癌患者不良预后发生的危险因素。结果:结直肠癌组患者血清miR-29、miR-34a表达水平均明显低于健康对照组（P＜0.05）。低分化、浸润程度T3-T4、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、淋巴结转移、远处转移患者血清miR-29、miR-34a表达水平明显低于高中分化、浸润程度T1-T2、TNM分期Ⅰ-Ⅱ期、无淋巴结转移、无远处转移患者（P＜0.05）。结直肠癌患者血清miR-29与miR-34a表达水平呈正相关（r=0.529,P=0.000）。低分化、浸润程度T3-T4、TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、淋巴结转移、低miR-29水平、低miR-34a水平是影响结直肠癌患者不良预后发生的危险因素（P＜0.05）。脾肾阳虚型、气滞血瘀型、湿热内蕴型预后不良患者比例依次明显增加（P＜0.05）。肝肾阴虚型、气血两虚型、脾肾阳虚型、气滞血瘀型、湿热内蕴型结直肠癌患者血清miR-34a表达水平依次显著降低（P＜0.05）,miR-29表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:结直肠癌患者血清中miR-29、miR-34a低表达,与肿瘤分期升高、分化程度降低、浸润程度增加、淋巴结转移、远处转移、不良预后等密切相关,且miR-34a对结直肠癌不同中医辨证分型有一定的分型参考意义。     

血清外泌体miRNA 对结直肠癌患者免疫调控及预后价值的研究

目的:研究血清外泌体miRNA 对结直肠癌患者免疫调控及预后价值。方法:本研究采取前瞻性病例对照研究,本次研究对象主要以2016年1月到2017年1月在我院进行诊断并治疗的结直肠癌患者180例作为研究对象,同期收集在我院进行肠镜检查,经病理确诊为大肠腺瘤患者60例以及同期健康体检的志愿者60例作为对照,比较三组患者以及不同疾病进展以及预后患者的miR-21、miR-92、miR-196a和miR-196b水平,研究miR-21、miR-92、miR-196a和miR-196b水平的联合检测对患者的不良预后的诊断价值。结果:结直肠癌组、大肠腺瘤组以及健康组的miR-21（F=18.47,P=0.000）、miR-92（F=16.68,P=0.000）、miR-196a（F=15.04,P=0.000）和miR-196b（F=16.31,P=0.000）水平之间的差异存在统计学意义,miR-21、miR-92、miR-196a和miR-196b水平从高到低依次为结直肠癌组、大肠腺瘤组以及健康组;Ⅲ-Ⅳ期、Ⅰ-Ⅱ期患者的miR-21（t=20.740,P=0.000）、miR-92（t=12.265,P=0.000）、miR-196a（t=4.114,P=0.000）和miR-196b（t=3.449,P=0.000）水平之间的差异存在统计学意义。miR-21、miR-92、miR-196a和miR-196b从高到低依次为Ⅲ-Ⅳ期、Ⅰ-Ⅱ期;通过对患者的随访分析,生存患者112例,死亡患者68例,生存组以及死亡组患者的miR-21（t=20.635,P=0.000）、miR-92（t=17.177,P=0.000）、miR-196a（t=12.974,P=0.000）和miR-196b（t=5.010,P=0.000）水平之间的差异存在统计学意义。miR-21、miR-92、miR-196a和miR-196b从高到低依次为死亡组、生存组;通过联合检测效能进行分析,miR-21、miR-92、miR-196a和miR-196b的联合检测对于结直肠癌组患者的特异度显著高于单独检测,通过ROC曲线分析,对于结直肠癌患者的预测分析,miR-21、miR-92、miR-196a和miR-196b的临界值分别为15.63、9.98、1.77、4.02。结论:血清外泌体miRNA 对结直肠癌患者免疫调控及预后具有重要价值,可作为日后诊断的重要依据。     

非小细胞肺癌组织中miR-449a／b／c的表达及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中微小RNA（miRNA）-449a/b/c的表达水平、临床意义及与预后的关系。方法 收集2013年1月至2015年12月收治的82例手术切除的NSCLC组织及69例癌旁组织标本,采用荧光实时定量PCR（QPCR）法检测以上组织中miR-449a/b/c的表达并比较3者在NSCLC组织及癌旁组织中的分布差异,Pearson相关分析NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c表达的相关性,分析NSCLC组织中miR-449a/b/c表达与临床病理特征（性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期、组织学类型和淋巴结转移）的关系,同时根据随访数据比较不同miR-449a/b/c表达患者的预后情况。结果 QPCR结果显示,NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的平均表达量依次为0.210±0.028、0.359±0.031和0.133±0.020,均低于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）;NSCLC组织中miR-449a、miR-449b和miR-449c的表达均呈正相关,相关系数rmiR-449a/b、rmiR-449a/c和rmiR-449b/c分别为0.246、0.390和0.331（P＜0.05）;NSCLC组织中miR-449a/b/c表达均与TNM分期有关,miR-449a和miR-449c表达与肿瘤大小有关。全组中位总生存期（OS）为12.4个月,其中miR-449a低表达组和高表达组的中位OS分别为11.2个月和13.5个月（P＞0.05）,miR-449b低表达组和高表达组的中位OS分别为9.6个月和14.2个月（P＜0.05）,miR-449c低表达组和高表达组的中位OS分别为11.7个月和13.7个月（P＞0.05）。结论 miR-449a/b/c在NSCLC组织中表达降低,且均与TNM分期有关,miR-449b表达与预后有关,可能与NSCLC发生、发展有关,对NSCLC诊断及病情评估有一定价值。     

胃癌患者血清中miR-106a的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌患者血清miR 106a表达及其与临床病理特征之间的关系。方法采用实时定量RT-PCR方法检测21例胃癌患者及10例健康人血清中miR-106a表达的水平。结果 实时定量RT-PCR方法能够检测到血清样本中微量miRNA的表达。21例胃癌患者miR-106a表达水平的中位数为0.34（0.17～0.69）,10例健康人为0.63（0.27～1.0）,两者差异有统计学意义（P=0.002）。在21例胃癌患者中,血清miR-106a表达水平与肿瘤分化程度有关,在低分化胃癌中的表达水平明显高于中分化胃癌（P=0.01）;血清miR-106a表达水平亦与血清CA724相关（P=0.03）,而与分期、性别、年龄无关（P＞0.05）。结论 采用实时定量RT PCR方法检测血清中miR-106a的表达敏感可靠。血清miR-106a作为新的生物学指标对于胃癌的诊断具有一定的价值。     

miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨miR-19a和miR-19b在骨肉瘤组织及配对瘤旁组织中的表达及其与临床病理特征的相关性。方法：收集32对骨肉瘤和配对的瘤旁组织,运用实时荧光定量PCR（qPCR）检测骨肉瘤组织及其瘤旁组织中miR-19a和miR-19b的表达,分析其与骨肉瘤临床病理特征的相关性及其临床意义。结果：qPCR结果显示骨肉瘤组织中miR-19a和miR-19b的平均表达量较瘤旁组织中均明显上调（P均 < 0.05）。二者的表达水平呈正相关（r=0.685,P=0.000）。miR-19a和miR-19b的表达与骨肉瘤病理分级之间存在正相关（r=0.478,P=0.027）;miR-19a的表达与临床分期呈正相关（r=0.365,P=0.031）且与预后相关。Cox回归多因素分析发现miR-19a可作为骨肉瘤患者预后的影响因子（P=0.037）。结论：miR-19a和miR-19b在骨肉瘤中表达上调,在骨肉瘤的发生发展中可能发挥重要的作用,其中miR-19a可能作为骨肉瘤独立的预后标志物。     

结核分枝杆菌感染的肺癌患者血清中lncRNA CCAT2、miR-20a的表达及其临床意义

目的:检测结核分枝杆菌（MTB）感染肺癌患者血清结肠癌相关转录因子2（lncRNA CCAT2）、miR-20a的表达,分析其临床意义。方法:选取2013年6月至2015年1月本院收治的肺癌患者104例为研究对象,其中MTB感染患者54例,未感染患者50例,同期选取本院健康体检者55例为对照组;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测所有受试者血清lncRNA CCAT2、miR-20a表达水平;并对所有肺癌患者进行5年内随访,记录患者生存状态;Kaplan-Meier生存曲线分析lncRNA CCAT2、miR-20a与MTB感染肺癌患者及非MTB感染肺癌患者预后的关系;COX回归分析肺癌患者预后的危险因素。结果:与对照组比较,肺癌患者血清lncRNA CCAT2、miR-20a表达水平均显著升高（P＜0.05）,与非MTB感染肺癌患者比较,MTB感染患者lncRNA CCAT2、miR-20a表达水平均显著升高（P＜0.05）;肺癌患者血清lncRNA CCAT2和miR-20a表达与患者MTB感染、临床分期及组织分级有关;多因素COX分析表明,MTB感染、临床分期、组织分级、血清lncRNA CCAT2、miR-20a表达水平是影响肺癌患者预后的危险因素（P＜0.05）;对肺癌患者出院后随访,MTB感染患者和非MTB感染患者lncRNA CCAT2高表达组5年内生存率（12.9%、17.9%）均低于低表达组（21.7%、36.4%）,miR-20a高表达组5年内生存率（13.8%、18.5%）均低于低表达组（20.0%、34.8%）,MTB感染肺癌患者累积生存率（16.7%）低于非MTB感染肺癌患者（26.0%）。结论:lncRNA CCAT2、miR-20a可能参与MTB感染肺癌患者的预后,可能是MTB感染肺癌患者预后的生物标志物。     

血清miR-30a水平与乳腺癌化疗敏感性的相关性

目的:探讨血清miR-30a水平对局部进展期乳腺癌患者新辅助化疗敏感性的预测价值。方法:纳入145例TNM分期为II-III期乳腺癌患者,根据实体瘤疗效评价标准（RECIST 1.0）将患者分为化疗敏感组（103例）和化疗抵抗组（42例）,通过实时荧光定量PCR检测患者初次化疗前血清miR-30a水平,并与健康人群进行比较。通过受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic,ROC）确定血清miR-30a对化疗抵抗的预测价值和阈值,并分析化疗抵抗相关的独立危险因素。结果:与化疗敏感患者相比,化疗抵抗组中年龄大于40岁、T分期为T3-4期、TNM分期为III期患者比例更高,差异存在统计学意义（P＜0.05）。化疗敏感组患者血清miR-30a水平显著低于健康对照组（0.79±0.21 vs 1.24±0.36,P=0.004）,而化疗抵抗组患者血清miR-30a水平则低于化疗敏感组患者（0.34±0.12 vs 0.79±0.21,P＜0.001）。ROC曲线分析显示血清miR-30a对化疗抵抗的预测阈值为0.48,灵敏度81.2%,特异度76.5%,并且化疗抵抗组中血清miR-30a≤0.48的患者比例显著高于敏感组（71.4% vs 25.2%,P＜0.001）。多因素logistics回归分析显示,血清miR-30a≤0.48（OR=1.982,95%CI:1.672~2.583,P＜0.001）、TNM分期III期（OR=1.604,95%CI:1.123~2.084,P=0.001）是预测乳腺癌患者化疗抵抗的独立危险因素。结论:血清miR-30a水平能够有效预测局部进展期乳腺癌患者新辅助化疗疗效,有望成为预测乳腺癌化疗敏感性的有效生物标志物。     

miR-21的功能分析及其在结肠癌中的临床意义

目的:分析miR-21的功能及其在结肠癌中的临床意义。方法:采用miRWalk在线工具预测和筛选miR-21的靶基因,并使用DAVID分析靶基因的功能和信号通路;检测结肠癌患者和健康对照人群血清以及癌组织和癌旁组织标本的miR-21的表达水平;使用TCGA数据库中结肠癌的数据,分析miR-21表达水平与临床病理参数的关系以及与患者预后的关系。结果:共筛选出429个miR-21的靶基因,靶基因功能分析提示这些基因主要参与了正性调节代谢过程、蛋白结合等。结肠癌患者血清miR-21表达水平显著高于健康对照人群,差异有统计学意义（P<0.05）。TCGA数据显示,结肠癌组织中的miR-21表达水平与肿瘤的临床分期、肿瘤侵袭程度、淋巴结转移分期、远处转移分期无显著差异（P>0.05）。生存分析显示组织中高表达miR-21的患者其生存时间较低表达者短（P<0.05）。结论:miR-21调控多个肿瘤发生相关的基因,在结肠癌发生过程中具有重要的调控作用。结肠癌患者miR-21表达水平显著高于健康人群,且miR-21高表达的患者预后差。     

miR-3666在胃癌中的表达及其临床意义

目的:检测胃癌组织中miR-3666的表达并分析其与临床病理特征的关系。方法:采用茎环逆转录实时定量PCR技术检测80例胃癌手术标本与相对应的癌旁组织中miR-3666的相对表达量,并分析其与胃癌临床病理参数和预后的关系。结果:miR-3666在胃癌组织中表达与癌旁组织相比显著下调（P<0.001）,miR-3666的表达与胃癌淋巴结转移（P=0.002）和TNM分期（P=0.017）相关,与年龄、性别、浸润深度、肿瘤位置及分化程度无关（P>0.05）。合并淋巴结转移的胃癌组织中miR-3666的表达低于无淋巴结转移的胃癌组织（P<0.001）。miR-3666低表达与高表达的患者1年及3年生存率分别为78.0%、22.6%和96.9%、48.1%,中位生存率分别为16个月和29个月,差异有统计学意义（P<0.001）。COX预后分析发现miR-3666低表达和肿瘤TNM分期是胃癌患者预后的独立影响因素。结论:miR-3666在胃癌组织中的表达量明显降低,提示miR-3666可能参与了胃癌的发生发展,并且与胃癌的淋巴结转移相关;miR-3666低表达提示胃癌患者预后不良。     

miR-155在弥漫性大B细胞淋巴瘤预后预测中的应用价值

目的:探讨miR-155在弥漫性大B细胞淋巴瘤预后预测中的应用价值。方法:选取我院收治的120例弥漫性大B细胞淋巴瘤作为研究对象,采用qRT-PCR检测所有患者癌组织miR-155的相对表达水平,根据miR-155的表达水平将所有患者分成miR-155高表达组（n=72）和miR-155低表达组（n=48）,比较两组患者的临床病理资料、生存率,采用 Cox比例风险回归模型对弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的预后进行单因素和多因素分析,并分析miR-155对弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞增殖和迁移能力的影响。结果:miR-155高表达组患者结外侵犯比例显著高于miR-155低表达组（P＜0.05）;miR-155高表达组患者3年无进展生存率（29.2%）及总体生存率（40.3%）均显著低于miR-155低表达组（81.3%和83.3%）;单因素和多因素分析结果均显示miR-155表达水平是DLBCL无进展生存期和总体生存期的影响因素;miR-155低表达组细胞划痕愈合速度(0.53±0.04)显著低于对照组细胞（1.0±0.03）(P＜0.05),miR-155低表达组细胞在培养的3、4 d的吸光度值显著低于对照组（0.38±0.01 vs 0.56±0.03;0.56±0.02 vs 0.76±0.02）（P＜0.05）。结论:弥漫性大B细胞淋巴瘤患者的miR-155表达水平显著影响患者的预后,其可能机制是通过影响弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞的增殖和迁移能力,提示miR-155可能是弥漫性大B细胞淋巴瘤新的和可靠的预后生物标志物,值得进一步深入研究。     

ｍｉＲ-２９在胃癌中的表达及其临床意义

目的　观察胃癌组织中ｍｉＲ-２９的表达情况及其与年龄、性别、分化程度、淋巴结转移、ＴＮＭ分期和预后的关系,探讨ｍｉＲ-２９在胃癌中表达的临床意义及其价值。方法　收集胃癌手术标本,采用Ｔｒｉｚｏｌ试剂抽提总ＲＮＡ,采用实时荧光定量ＰＣＲ技术检测８６例胃癌组织中ｍｉＲ-２９的表达水平,并对所有病例进行随访。结果　有淋巴结转移的胃癌患者ｍｉＲ-２９低表达的比例显著高于无淋巴结转移组（５９.６％ ｖｓ．２５.０％,Ｐ＝０.００４）,Ⅰ、Ⅱ期胃癌患者ｍｉＲ-２９低表达的比例显著高于Ⅲ、Ⅳ期患者（６３.８％ ｖｓ．４０.０％,Ｐ＝０.０２９）,ｍｉＲ-２９与年龄、性别、分化程度无关。４３例ｍｉＲ-２９低表达胃癌患者的中位生存期为３５.０月,３年生存率为３９.６％;４３例高表达者的中位生存期为４４.０月,３年生存率为６６.１％,两组差异显著（Ｐ＝０.００７）。结论　ｍｉＲ-２９在胃癌组织中高表达能抑制肿瘤淋巴结转移进而改善预后,可作为胃癌的预后判断指标及治疗靶标。