肌肉骨骼棘球蚴囊肿:8例报告及文献复习

人类棘球蚴病共有四种:细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)引起的棘球蚴囊肿(囊型包囊虫病)、多房型棘球蚴(E.multi-locularis)引起的泡状棘球蚴病(泡状包虫病)、E.vogeli引起的多囊性棘球蚴病和少头棘球蚴(E.oligarthrus)引起的少头棘球蚴     

细粒棘球蚴和多房泡球蚴在人体内蛋白质表达谱初步分析

目的 初步掌握流行于青海省细粒棘球绦虫幼虫棘球蚴(原头节、囊壁、囊液)和多房棘球绦虫幼虫泡球蚴在中间宿主人体内蛋白质表达情况。方法 利用SDS-PAGE和 Western-blot分析棘球蚴原头节、囊壁、囊液蛋白质和泡球蚴总蛋白表达谱。结果 细粒棘球蚴原头节的蛋白质浓集在分子量72 kDa处,囊壁的蛋白质浓集在72 kDa、26 kDa和17 kDa 处,囊液的蛋白浓集在72 kDa、43~55 kDa、26 kDa和17 kDa;泡球蚴总蛋白质浓集在分子量72 kDa、55~72 kDa和26 kDa处。结论 不同地区细粒棘球蚴在人体内蛋白的表达存在差异;不同亚种泡球蚴原头节蛋白的表达存在差异。     

细粒棘球蚴细胞系细胞代谢抗原检测

体外培养细粒棘球蚴细胞并培育成传代细胞系,将有可能不受限制地提供寄生虫抗原,并用于诊断、免疫预防研究［１,２］。本实验对人源细粒棘球蚴细胞系（１３Ｇ－５）进行特异表达功能检测。１　材料与方法１．１　材料　检测样品为人源细粒棘球蚴１３Ｇ－５细胞系第１６代细胞的细胞代谢产物。检测用细粒棘球蚴病人血清、羊抗细粒棘球蚴囊液ＩｇＧ、ＨＲＰ—兔抗羊包囊液ＩｇＧ等均由卫生部包虫病基地李雄副研究员提供并协助检测。１．１　方法　双体抗夹心ＥＬＩＳＡ法。采用两种不同的第一抗体进行包被,具体为：１．２．１　细粒棘球蚴…     

宿主感染细粒棘球蚴免疫反应的研究进展

棘球绦虫的中绦期寄生于人体和动物 ,可导致棘球蚴病(也称为包虫病 )。由细粒棘球蚴绦虫 (Echinococcus granulosus,E.g.)所致的包虫病称为囊型包虫病 ,它是一种严重危害人畜健康的人兽共患寄生虫病。棘球蚴在宿主体内发育缓慢 ,人往往在感染数月甚至数年后因出现临床症状而被发现。细粒棘球蚴感染激发宿主产生免疫应答的机制较为复杂。细粒棘球蚴抗原成分多且可在特定的生活史阶段 (期 )表达特定的抗原 ,产生不同的特异性免疫应答 [1 ]。机体感染 E.g.后的初期 ,尤其是以前曾有过接触的患者对免疫杀伤作用较为明显 ,而一旦包囊在宿主体内…     

细粒棘球蚴原头蚴对两种染液的染色反应

为进行药物治疗细粒棘球蚴的体外试验,于1973～1981年试用染色法鉴别原头蚴的存活状况,结果报道如下。 材料与方法 一、自肉联厂收集羊内脏的棘球蚴,或从附属医院手术室取得包虫病人的棘球蚴囊,抽取囊液和棘球蚴砂,置4℃冰箱保存,逐日观察部份棘球蚴砂,或从动物内脏的棘球蚴中,吸取含原头蚴的囊液进     

人源细粒棘球蚴染色体测定

为鉴定棘球地细胞系及棘球绦虫的遗传分类提供依据，本实验测定了人源细粒棘球拗染色体。从外科手术的包虫病人体内获取棘球蚴原头节和生发层细胞，按染色体的常规制备方法并加以改进，制备染色体标本。通过对141个分裂像的观察分析，结果表明细粒棘球蚴染色体组的染色体数在5～20条之间，14～18条占明显优势。每一核型有一对染色体呈大棒状，似呈中间或亚中着丝粒，其余染色体呈方点状，似呈端着丝粒。本实验建立了适合棘球蚴染色体制备的方法，在国内首次测定了人源细粒棘球蚴染色体。     

评价抗细粒棘球绦虫原头节药物效果的体外实验模型

利用体外实验模型来评价药物对细粒棘球绦虫原头节的作用。用碘酒消毒细粒棘球蚴囊表面,再以灭菌针头穿刺囊壁使囊液外流以减低囊内压力。打开囊腔,将原头节移入     

泡状棘球蚴原头节与肝癌细胞共培养的相互作用研究

目的 探究泡状棘球蚴原头节与肝癌细胞共培养后,原头节的活性、成囊以及肝癌细胞的增殖与凋亡情况.方法 构建泡状棘球蚴原头节与肝癌细胞共培养模型,以存在肝癌细胞共培养的泡球蚴原头节为实验组,无肝癌细胞共培养的泡球蚴原头节为对照组,光镜下观察泡状棘球蚴原头节存活数量、活性以及成囊情况;以存在原头节共培养的肝癌细胞为实验组,无...     

不同来源棘球蚴抗原间接荧光抗体试验诊断人体包虫病的比较

用不同来源(绵羊、牦牛、人)棘球蚴囊壁切制成4μm厚的冰冻切片和绵羊棘球蚴内原头节涂片作抗原,以间接荧光抗体试验(IFAT)诊断人体包虫病并进行比较。结果认为羊源细粒棘球囊壁抗原和头节抗原对诊断人体包虫病有一定价值。将IFAT和其它免疫学方法合用,能提高包虫病的检出率。     

氨基醇咔唑化合物BTB3体外抗细粒棘球蚴效果的评价

目的观察氨基醇咔唑化合物BTB3体外抗细粒棘球蚴的效果。方法体外培养羊源细粒棘球蚴原头节和继发感染小鼠来源的生发层细胞,用浓度为1、2、4、8、10和20μg/ml的BTB3作用3 d后,分别采用美兰染色法和CCK-8法检测原头节和生发层细胞的活性。用扫描电镜观察10μg/ml BTB3对生发层细胞造成的损伤。体外培养细粒棘球蚴囊,用浓度为1、5和10μg/ml的BTB3作用2周后,观察其对囊的影响,并用扫描电镜观察囊内部结构的变化。结果 10μg/ml和20μg/ml BTB3组原头节的死亡率分别为(100.0±0.0)%和(85.2±7.2)%。但当浓度降低后,原头节死亡率均低于10%。生发层细胞经8、10和20μg/ml BTB3作用后,其细胞活性抑制率均达100%,其余低浓度BTB3组的抑制率随浓度的降低而降低。扫描电镜观察发现,BTB3可使生发层细胞发生脱落、皱缩以及空腔化。10μg/ml BTB3作用于棘球蚴囊14 d后,全部囊均出现塌陷。其超微结构显示,BTB3作用后棘球蚴内囊中出现了细胞脱落和不均匀的现象。结论 BTB3对体外培养的细粒棘球蚴原头节、生发层细胞和棘球蚴囊均有较强的作用,是一种潜在的抗棘球蚴药物。     

细粒棘球蚴生发细胞特异性抗原的ELIB分析

应用SDS－PAGE和免疫印渍试验（EITB），证明体外培养的细粒棘球蚴生发细胞和囊液含有特异性抗原，分子量为52kDa和38kDa，而囊壁则含有此2种抗原。生发细胞的52kDa抗原可识别感染小鼠和包虫病患者血清的特异性抗体，对囊虫病人和正常人血清则无反应条带。     

细粒棘球蚴生发层细胞系的建立

目的：为获得能在体外稳定繁殖的细粒棘球蚴细胞系。方法：用研磨法将绵羊源细粒棘球蚴生发层处理得分散的生发细胞，将其在含10％—20％小牛血清的RPMI1640培养基在24孔培养板和包被胶原的24孔细胞培养板上交替培养至14代，随后在常规24孔培养板上连续传代培养；用倒置显微镜观察细胞形态及生长繁殖情况；将培养细胞接种BALB／c小鼠以观察其形成继发性包囊的能力；用ELISA法研究细胞系抗原的免疫学特征。结果：生发层细胞已在体外连续培养75代以上，生长良好；细胞系细胞呈圆形，具有形成合胞体乃至类组织块 的趋势，在4℃冰箱中至少可保存半个月，在液氮中至少可保存10个月；将细胞接种BALB／c小鼠后3个月至7个月，解剖未见细粒棘球蚴包囊生长; 细胞系抗原可和抗生发层体抗原、原头节可溶性抗原、囊液抗原的小鼠血清及人工感染原头节的阳性小鼠血清起反应。结论: 细粒棘球蚴生发层细胞系已经建立。     

从小鼠的继发性细粒棘球蚴中分离生发细胞

小鼠的继发性细粒棘球蚴囊组织,经用0.25％胰蛋白酶溶液消化和密度梯度离心,可获得分离的生发细胞。此种细胞在含20％小牛血清的RPMI1640中培养约7d后开始增殖,增殖后的细胞表面光滑,形体增大。免疫学检测显示生发细胞的表面及其可溶性蛋白中有抗原成分。将培养的生发细胞返种至小鼠腹腔中时,少数可发育成囊。     

新疆三个不同地区细粒棘球蚴可溶性蛋白质的SDS-PAGE银染分析

应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对新疆三个不同地区的绵羊细粒棘球蚴囊液和原头节可溶性蛋白组分进行了比较分析。电泳结果显示原头节的蛋白区带数明显多于包囊液,不同地区之间的包囊液和原头节样品的蛋白组分比较接近,但又存在着明显的特征性区别。策勒(东部昆仑山地区)、福海(阿尔泰山地区)和特克斯(西部天山地区)的包囊液分别可见26、22、20条蛋白区带;原头节样品在降解条件下分别可见36、40、37条区带,非降解条件下可见23、24、23条区带。电泳图谱的扫描结果也反映出存在着差异。此项研究结果确定了新疆绵羊细粒棘球蚴可溶性蛋白组分存在着地方性差异,并证明SDS-PAGE银染分析法可用于棘球属绦虫种下分类的研究。     

细粒棘球蚴囊液蛋白组分分析

目的　利用鸟枪法分析细粒棘球蚴（Echinococcus granulosus）囊液蛋白（hydatid cyst fluid protein,HCFP）组分,寻找其中具有潜在调控免疫失调性疾病功能的活性组分。方法　无菌收集细粒棘球蚴病患者肝囊肿中的细粒棘球蚴囊液,采用鸟枪法进行液相色谱⁃串联质谱鉴定,采用MaxQuant 1.6.1.0软件进行数据库检索。利用基因本体论（Gene Ontology,GO）对已鉴定的蛋白质从细胞组分、分子功能和生物学功能三个方面进行分类。结果　经十二烷基磺酸钠⁃聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS⁃PAGE）分离的细粒棘球蚴囊液蛋白条带相对分子量为25～70 kDa,质谱分析共获得37个蛋白,其中已鉴定蛋白32种、未知蛋白5种。已初步发现至少有4种蛋白具有潜在调节免疫失调性疾病作用,即抗原B、谷胱甘肽S⁃转移酶、硫氧还蛋白过氧化物酶和苹果酸脱氢酶。GO富集分析显示,已鉴定蛋白具有149种分子功能,参与341种生物学过程。结论　细粒棘球蚴囊液蛋白成分复杂多样,从已知蛋白中初步筛选出4种与调节免疫失调性疾病潜在相关的蛋白。     

''Arc 5'' antibodies in sera of sheep infected with Echinococcus granulosus, Taenia hydatigena and Taenia ovis

The 'arc 5' precipitin band, formed when test human serum is reacted against immunoelectophoresed hydatid cyst fluid antigen, has provided a positive diagnosis of Echinococcus granulosus infection. These antibodies to 'arc 5' antigen have now been found in the sera of sheep. They appear 2 weeks after infection with Taenia ovis, after 3 weeks with T. hydatigena and after 16 weeks with E. granulosus. An antigen similar to the 'arc 5' antigen of E. granulosus cyst fluid was also demonstrated in cyst fluid from T. hydatigena, but it would not be positively identified in T. ovis cyst fluid. The presence of 'arc 5' in immunoelectrophoresis tests is not suitable for specific immunodiagnosis of E. granulosus infections in sheep in New Zealand. 'Arc 5' antibodies were only associated with living E. granulosus cysts and were not present if cysts were dead. The location of the cysts in either liver or lungs and the onset of brood capsule production did not influence the presence of 'arc 5' antibodies.     

细粒棘球蚴和猪囊尾蚴的组织特征及其对化学疗法的影响

对细粒棘球蚴及猪囊尾蚴的组织结构进行了观察和比较。结果发现：两者的主要区别是前者具有宽厚的角质层，且含有少量血管的纤维外囊又远离囊腔，而后者则无角质层结构，且含有丰富血管的纤维外囊又紧密毗邻囊腔。上述区别为抗绦虫药对两种后绦期幼虫疗效差异的分析，提供了组织病理学的依据。     

Analysis of host components in hydatid cyst fluid and immunoblot diagnosis of human Echinococcus granulosus infection.

To improve serodiagnosis of cystic hydatidosis, immunoblotting studies were performed to look for a highly specific parasite antigen(s). First, commercially available hydatid cyst fluid antigen preparations were characterized by SDS-PAGE and by immunoblotting with sera specific for parasite and host animal proteins. One preparation, designed for use in complement fixation tests, did not appear to be suitable for immunoblotting because of the low concentrations of parasite antigens. Several host proteins, including serum albumin and IgG, were detected in the cyst fluid. Sera from patients with Echinococcus granulosus infections and other parasitic diseases were examined by immunoblotting for antibodies against specific cyst fluid parasite antigens. Several parasite antigens were variably recognized. Only one antigen, a 40 kDa protein, was recognized by all E. granulosus-infected patients. Reactivity against this antigen was also observed in all sera from E. multilocularis, cysticercosis, and schistosomiasis patients as well as in some filariasis cases. Two E. granulosus antigens, molecules of 12.5 and approximately 17 kDa, were only recognized by antibodies from some E. granulosus patients.     

Serum antibody response following parenteral immunization with hydatid cyst fluid in sheep infected with Echinococcus granulosus

Production of specific serum antibodies following immunization with hydatid cyst fluid antigens was investigated in sheep with Echinococcus granulosus infection and in noninfected controls. Six of 10 infected animals responded to intramuscular injection of antigen by rapid production of antibodies detected in indirect hemagglutination assays. Similar responses did not occur in any of 10 noninfected controls. It is suggested that differences in the rate of response to immunization with cyst fluid antigens between groups of sheep could be exploited in serodiagnosis of E. granulosus infection in sheep. The results also suggest that low levels of antibody found in the serum of sheep infected with E. granulosus are not the result of immunosuppression or immunological tolerance, but are due to sequestration of antigen from the immune system of the host.     

分泌抗包虫囊液抗原McAb杂交瘤细胞株的建立

应用Oriel法制备的包虫囊液抗原经腹腔注入供实验的小鼠,作为脾细胞供体。此脾细胞与不能分泌的骨髓瘤细胞株SP2/0和P3u_1相融合,以生成杂交瘤细胞株。用ELISA法从这些混合细胞培养基中筛选出上清液,用稀释法将上清液克隆,再克隆化之后,生成能分泌单克隆抗体、抗包虫囊液活性的杂交瘤,其染色体数目在80～100范围之内。单克隆抗体类及亚类13Fs和31G_(12)分别是IgG_1和IgA。DD和ELISA用于鉴定它们的敏感性和特异性。应用ELISA法比较杂交瘤和绦虫囊尾蚴液等其它寄生虫抗原制备物,包虫囊液和Pf抗原,表明单克隆抗体对包虫囊寄生虫有很高的特异性。