汗腺中EGF、EGFR、IL和CKs等基因的表达特征及意义

汗腺是皮肤中的重要功能器官之一,许多基因参与了汗腺的形态发生和功能维持。大量试验探讨了在汗腺发育过程中不同基因的表达特征及促进汗腺发育的分子机制。本文通过对近期文献的回顾,总结了表皮生长因子及其受体、白介素和细胞角蛋白等基因对皮肤汗腺的发生和结构的形成以及皮肤生理功能的维持的生物学意义。希望通过对上述基因的表达特征和功能的了解,为实现基因调控受损皮肤汗腺的完美修复找出一条新路。     

深Ⅱ度烧伤的瘢痕防治与护理措施

目的：探索深Ⅱ度烧伤瘢痕防治护理措施。方法：针对MEBT/BEBO治疗深Ⅱ度烧伤与汗腺再生表皮干细胞修复中存在的问题采用相应的护理措施，并对141例病人作为护理对象。结果：全部病人经创面康复护理，功能锻炼，心理护理等均达到无瘢痕愈合与身心健康。结论：科学规范的MEBT/MEBO治疗与全面准确的实施康复护理措施能有效地防治深Ⅱ度烧伤瘢痕增生。     

少儿瘢痕组织和正常皮肤表皮干细胞增殖分化特征的比较研究

研究少儿增生性瘢痕组织和正常皮肤表皮干细胞增殖分化特征与规律的差异，探讨这些差异与烧伤后创面瘢痕愈合的关系。采用免疫组织化学E1ivision两步法检测表皮干细胞、短暂扩充细胞特异表达的β1整合素和K19以及分化表皮细胞表达的K14和K10。结果显示，少儿增生性瘢痕组织表皮基底层表达β1整合素与K19的阳性细胞数较健康皮肤明显减少，阳性强度降低。其瘢痕组织表皮中表达K14的阳性细胞仅位于表皮底部2～3层，明显少于健康皮肤，而K10表达阳性细胞则较健康皮肤分布广泛。提示少儿增生性瘢痕组织表皮基底层干细胞和短暂扩充细胞明显少于健康皮肤，且其瘢痕组织表皮干细胞的分化过程与健康皮肤不同，处于有丝分裂后分化阶段的细胞比例降低，而终末分化细胞的比例明显增高。少儿瘢痕组织表皮的修复能力下降，细胞的分化行为紊乱，这可能是少儿瘢痕组织表皮结构与功能改变、愈合能力下降的原因之一。     

不同发育阶段人皮肤表皮干细胞增殖分化特征及其与创面修复结局关系的研究

为从细胞分化角度研究人胎儿期，少儿期，成年人期皮肤中表皮干细胞增殖分化特征，以及这些特征与创面修复结局的关系，分别取因创伤等原因致流产的22－24周龄胎儿和4－12周岁少儿，35－53岁成年人3组全层皮肤，采用免疫组化方法检测表皮干细胞特异表达的β1整合素和细胞角蛋白19（K19）， 结果发现，胎儿期皮肤表皮基底层细胞β1整合素和K19染色均为强阳性，少儿期表皮基底层细胞中60％－80％的细胞表达β1整合素和K19，成年人表皮基底层中表达β1整合素和K19的细胞较少儿组进一步减少，且染色强度较弱，结果提示，胎儿期表皮基底层增殖细胞均为表皮干细胞和短暂扩充细胞，而少儿期表皮基底层中部分细胞为干细胞和短暂扩充细胞，成年人期干细胞与短暂扩充细胞所占的比例则进一步降低，这种干细胞增殖分化的差异可能与三种不同发育阶段皮肤损伤的完全与不完全修复有关。     

烧伤湿性医疗技术对表皮再生干细胞作用的研究

目的：探索烧伤湿性医疗技术于浅Ⅲ度烧伤时脂肪层烧伤创面自然修复的机制。方法：应用细胞免疫化学方法生物素－抗生物素蛋白（ｂｉｏｔｉｎａｖｉｄｉｎ）ＤＣＳ体系间接免疫荧光技术。以沁鼠抗人角蛋白１９的单克隆抗体检测表皮再生干细胞。结果：烧伤后２４ｈ可见表皮再生干细胞出现。烧伤后４天表皮再生干细胞数理增多。烧伤后７天和１４天表皮再生干细胞数量最多。烧伤后２１和２８天表皮再生干细胞减少。结论：烧伤湿性医疗技     

三七片及瘢痕霜对烧伤后瘢痕增生的影响

三七片及瘢痕霜对烧伤后瘢痕增生的影响郭保军★孙爱玲★周玉新★王伟勇★韩明花★苏静★李艳★张崇亮★关键词烧伤瘢痕三七片中国图书资料分类法分类号Ｒ６４４我们多年来探索在瘢痕增生早期有效控制或抑制其增生，使瘢痕在增生期不增生或少增生，尽快进入萎缩期的方法。...     

创面愈合过程中表皮干细胞的分布特征及意义

研究皮肤干细胞在全层皮肤创面愈合过程中的分布特征及其作用。11天龄Wistar幼鼠20只，腹腔内注射BrdU。60天后制备4个面积为2．54cm^2的全层皮肤创面。分别于伤后动态观察各组治疗效果，并以BrdU、β1整合素、角蛋白19(K19)免疫组化法检测表皮干细胞在创面愈合过程中的分布情况。结果显示，EGF组创面愈合率为80％(32/40)，对照组为60％(24/40)。两组创缘表皮棘层或颗粒层出现了散在的BrdU、β1整合素和K19同时染色阳性细胞。上皮化后，这些阳性细胞逐渐减少。提示表皮干细胞能动地参与了创面的修复，创缘表皮干细胞异位的主要功能可能是促进创面再上皮化。     

特定微环境诱导人脐带沃顿胶间充质干细胞向汗腺样细胞分化的实验研究

目的鉴定人脐带沃顿胶间充质干细胞(hUCWJ-MSCs)经汗腺诱导培养基培养后向汗腺样细胞分化的潜能。方法酶消化法分离培养人正常汗腺细胞,热休克汗腺细胞后收集培养基上清液,按10%的体积分数配制汗腺分化诱导培养基。酶消化法分离获取hUCWJ-MSCs,流式细胞仪分析细胞表型特征;成骨诱导培养基和成脂诱导培养基中培养2～3周后采用碱性磷酸酶染色和油红-O染色对其分化潜能进行鉴定;在汗腺诱导培养基中培养3周,倒置显微镜观察细胞形态变化,分别收集培养1、2、3周时的细胞,采用免疫组织化学和流式细胞术检测汗腺标记物CEA、CK14、CK19的表达,RT-PCR检测汗腺发育基因(EDA)的表达。结果正常汗腺细胞呈铺路石状克隆样增生。hUCWJ-MSCs呈梭形、成纤维细胞样,流式细胞分析显示其CD44、CD105、CD34、CEA阳性率分别为97.37%9、6.26%、0.56%0、.52%;经成骨诱导培养基和成脂诱导培养基培养2～3周后,可诱导成为油红-O染色阳性的脂肪细胞和碱性磷酸酶染色阳性的骨细胞;在汗腺诱导培养基中培养3周后,细胞具有类似汗腺样结构,免疫组织化学DAB显色结果显示分化后的hUCWJ-MSCs表达汗腺细胞标记物CEA、CK14、CK19,流式细胞仪检测其阳性率分别为54.37%、60.25%、62.13%,RT-PCR结果显示其可较高水平地表达EDA基因。结论 hUCWJ-MSCs具有向汗腺样细胞分化的潜能。     

美比欧疤痕平治疗烧伤皮肤瘢痕的实验研究

目的是探讨美比欧疤痕平治疗烧伤皮皮肤瘢痕，使之迅速软化的作用机理。方法是选健康小鼠４０只，背部皮肤去毛后，以２０ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ烧伤１分钟，造成深Ⅱ度皮肤烧伤。伤后２周局部瘢痕形成。随机分为二级，Ⅰ组为对瘢痕吵作处理作为对照组；Ⅱ组为应用美比欧疤痕平进行治疗。治疗２周处死，取烧伤处皮肤进行ＨＥ及改良的Ｍａｓｓｏｎ染色。结果Ⅰ组上皮层增生、角化，胶原纤维增生、排列紊乱，并侵入肌组织内，可见大量炎性     

表皮生长因子、基质金属蛋白酶与汗腺发生相关性的实验研究

探讨胚胎期汗腺发生过程中表皮生长因子（EGF），基质金属蛋白酶－2（MMP－2）和MMP－7与汗腺发生的相关性。为诱导表皮干细胞向汗腺细胞定向分化奠定基础，分别取13－31周胚龄人胎儿背部全层皮肤，以免疫组织化学染色法（SP法）动态观察汗腺胚芽细胞或汗腺细胞及其周围局部基质对基质金属蛋白酶MMP－2，MMP－7与EGF及汗腺胚芽细胞或汗腺细胞对细胞角蛋白－7（K7）蛋白质表达情况，并以原位杂交法动态观察汗腺芽细胞或汗腺细胞MMP－2，MMP－7的mRNA信号特征，结果显示，MMP－2，MMP－7，EGF在14－20周于汗腺细胞及避部基质蛋白质表达逐渐加强，20－22周达峰值，并维持至所观察的全时段，MMP－2，MMP－7的mRNA信号强弱在汗腺胚芽细胞或汗腺细胞中与其蛋白质表达相吻合；K7始于14－16周在汗腺芽细胞内表达，并持续存在，研究表明，汗腺于胚龄14－16周开始发生，至第24周基本成熟，汗腺发生与MMPs所致细胞外基质改建，EGF间的相互作用密切关联。     

Morphology of sweat glands in determining time of death

This study demonstrates post-mortem autolytic alterations in the skin at cellular and subcellular levels and identifies parameters which may assist in determining the time of death in the first few hours post-mortem. Serial skin samples from the ventral surface of the arm were taken at intervals of 3, 6, 9 and 12 h after death in 29 subjects of various ages, with no signs of skin disease; causes of death were various. Three types of tests were performed: cytochemical (hematoxylin-eosin and alcian-PAS), immunohistochemical (S-100, CEA, Cytokeratin, ASM) and ultrastructural (electron microscopy). Electron microscopy proved useful for identifying transformations which were found to be specific for each chronological step considered: reduction of intracellular glycogen in clear cells and reduction of secretory granules in dark cells are typcial signs of the first stage (3 h) after death; mitochondrial dilatation and rarefaction of cristae in clear and dark cells are typical of the second stage (6 h); rarefaction of microvilli in dark and clear cells is a sign of the last stage (12 h). Cytochemistry and immunohistochemistry supply useful information — not for all the chronological stage considered here, but for individual phases (3 h for hematoxylin-eosin and 6 h for alcian-PAS). However, it is particularly important to use the results from all such techniques simultaneously, so that the question of the exact time of death within the first 12 h post-mortem may be more accurately answered.     

Accumulation of FDG in axillary sweat glands in hyperhidrosis: a pitfall in whole-body PET examination

A diabetic male with severe autonomic neuropathy and recently discovered Hodgkin's disease demonstrated bilateral uptake of [2-¹⁸F]-2-fluoro-2-deoxy-d-glucose (FDG) in the axillary sweat glands during profuse sweating caused by hypoglycaemia at positron emission tomography examination. It is not yet clear whether the sweating interfered with the distribution of the radiopharmaceutical. Regardless of the cause or mechanism for the uptake, the finding is clinically relevant. A bilateral symmetrical accumulation of FDG in the axillae of a tumour patient does not necessarily indicate malignant involvement of the lymph nodes. Received 14 February 1997; Revision received 6 April 1997; Accepted 6 May 1997     

汗腺发生过程中基质金属蛋白酶与层黏连蛋白、纤连蛋白的表达特征

目的　探讨汗腺发生过程中基质金属蛋白酶 - 2 (MMP - 2 )、基质金属蛋白酶 - 7(MMP - 7)、层黏连蛋白 (LN)、纤连蛋白 (FN)的表达特征 ,为诱导表皮干细胞向汗腺细胞定向分化奠定基础。　方法　取 1 1～ 31周胎龄人胎儿背部全层皮肤 ,以免疫组化 (SP)与原位杂交法动态观察汗腺MMP - 2、MMP - 7、LN、FN的蛋白质表达及mRNA信号特征。细胞角蛋白 - 8(K8)免疫组化阳性为汗腺的鉴定标准。　结果　MMP - 2、MMP - 7蛋白在 1 4～ 2 0周于汗腺细胞及其周围局部基质表达逐渐加强 ,2 0～ 2 2周达峰值 ,此后表达减弱。同期LN、FN表达主要位于基底膜及汗腺芽周围基质 ,并呈进行性下降趋势 ,2 0～ 2 2周达最低值 ,此后则逐渐回升。MMP - 2、MMP - 7、LN、FN的mRNA信号强弱在汗腺胚芽细胞或汗腺细胞中与其蛋白质表达相吻合。K8于 1 4～ 1 6周开始在汗腺胚芽细胞内表达 ,并持续存在于汗腺发生全过程。　结论　汗腺于胚龄 1 4～ 1 6周开始发生 ,至2 4周基本成熟。MMP - 2、MMP - 7所介导的LN、FN等基质分解在汗腺形态发生中起重要作用     

与人汗腺细胞共培养的人骨髓间充质干细胞表型转化及相关机制

目的 研究人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)与经热休克处理的人汗腺细胞(sweat gland cells,SGCs)体外间接共培养状态下的细胞表型转化及相关机制.方法 体外分别分离扩增人MSCs及SGCs,原代SGCs生长融合后于47℃热休克,收集即刻和24 h后的上清加入第3代MSCs,7 d后分别以二步免疫细胞化学法和流式细胞术检测MSCs表达细胞角蛋白7(CK7)、CK18和癌胚抗原(CEA)的情况并与对照组比较.结果 加入SGCs上清后MSCs生长减慢,7 d内无明显形态改变;二步免疫细胞化学法显示部分细胞CK7和CEA染色刚性;流式细胞术显示,诱导组细胞CK7和CEA阳性率分别为5.76%和2.01%,对照组为1.12%和0.51%,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论 SGCs热损伤释放后某些信号物质,可诱导MSCs横向分化.     

重组核心蛋白多糖对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞增及生物学活性的影响

目的　观察重组核心蛋白多糖 (Decorin)对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞体外增殖和生物学活性的影响 ,以探讨Decorin在增生性瘢痕形成和成熟中的作用。　方法　分离培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞 ,分别加入不同质量浓度 (0 .0 1,0 .1,2 ,10 μg/ml)的重组Decorin ;培养 12 ,2 4 ,4 8h用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐 (MTT)法测定细胞增殖速度 ;培养 4 8h用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡 ;收集细胞培养上清 ,ELISA法检测TGF - β1蛋白水平 ,放射免疫方法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白 (PCⅠ、PCⅢ )含量。　结果　 2 ,10 μg/ml的Decorin可有效抑制正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞的增殖 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,明显增加两种细胞处于G1期的百分比(P <0 .0 1) ;并抑制细胞分泌转化生长因子 (TGF) - β1和PCⅠ、PCⅢ ,下调PCⅠ /PCⅢ比值。实验组和对照组 (未加重组Decorin)均未检测到终末期凋亡细胞。　结论　Decorin可抑制正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞的增殖及其生物学活性 ,可能在预防增生性瘢痕形成和促进瘢痕成熟中起一定的作用。     

诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织的神经与血管支配研究

目的研究诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织后的神经与血管分布特征,以确认再生汗腺组织是否受到新生神经的支配和新生血管的血液供应,进而评价再生汗腺组织的质量。方法选择烧伤后行瘢痕切除术患者4例。每例患者均设创面自体骨髓间充质干细胞（MSCs）移植和对照两个部位。移植部位在瘢痕切除的创面上接种经过诱导的MSCs,而对照部位除未接种MSCs外,其余方法同治疗创面。术后3个月在移植部位和对照部位分别进行发汗试验。在移植部位发汗试验呈阳性处取材,同时取对照部位的组织和术中切下的瘢痕组织。采用免疫组织化学二步法检测所取组织标本的S-100蛋白（S-100）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、八因子相关抗原（Ⅷ－RAg）和CD34的表达,并与正常皮肤作比较研究。结果4例创面移植部位发汗试验均呈阳性,对照部位发汗试验阴性。免疫组织化学检测显示移植部位的真皮浅层有结构类似于正常汗腺的组织团块,而对照部位未观察到类似结构。S-100、NSE、Ⅷ－RAg和CD34在移植部位、对照部位、瘢痕组织以及正常皮肤均有表达,并且S-100、NSE、Ⅷ－RAg和CD34在移植部位再生汗腺组织中的分布与在正常皮肤汗腺组织中的分布极其相似。结论诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺的组织中均有神经与血管分布,提示形成具有功能的汗腺组织可能受到新生神经的支配和新生血管的血液供应,骨髓间充质干细胞经诱导可以生成形态和功能较好的汗腺组织。     

毛囊隆突细胞体外诱导分化的形态学观察

目的：探讨体外诱导毛囊隆突细胞向毛囊和皮脂腺上皮细胞分化潜能。方法：体外分离培养人胎儿毛囊隆突细胞，分别利用与毛乳头细胞共培养，雄激素、胰岛素和地塞米松等为诱导剂诱导，观察毛囊隆突细胞的生长特性及形态变化。结果：毛囊隆突细胞与毛乳头细胞共培养后成克隆性生长，并被毛乳头细胞围绕，随着培养时间延长。细胞出现堆积和分层，中心形成毛囊样结构；在成脂诱导剂作用下，毛囊隆突细胞体积变大，出现特异的“扇贝”形细胞，胞浆内出现大小不等脂滴，随着培养时间延长，细胞形态变为椭圆、纺锤或不规则形，部分伸展的细胞相互融合，包裹形成不规则的网格状。结论：在不同诱导条件下，毛囊隆突细胞在形态上具有向毛囊和皮脂腺上皮细胞分化的潜能。     

程控降温后液氮保存对自体外周血造血干细胞含量和活性的影响

目的：观察程控降温后液氮保存对自体外周血干细胞含量和活性的影响。方法：13例接受APBSCT患者分离的造血干细胞利用程控降温仪进行冷冻,然后置液氮液相内（－196℃）保存,检测患者冻存前后的有核细胞数,CFU－GM,CD34＋细胞。结果：冻存前后CFU－GM,有核细胞数,CD34＋细胞统计学之间无显著性差异。结论：自体外周血干细胞体外冷冻处理和保存是有效和适当的。     

高压氧对去卵巢大鼠泪液分泌及泪腺形态学的影响

目的 建立去卵巢大鼠干眼症模型,并探讨高压氧对其泪液分泌及泪腺形态学的影响.方法 32只6个月龄雌性Wistar大鼠按随机数字表法分成4组(每组8只):假手术组、去势组、雌激素组与高压氧组.造模成功1周后给予治疗干预,12周后行Schimer Ⅰ试验、泪膜破裂时间检测、角膜荧光素染色检测及泪腺形态学观察.结果 去势组泪液分泌量与泪膜破裂时间均明显低于假手术组,且大鼠角膜干燥无光泽,上皮点状甚至片状缺失,荧光素染色阳性,泪腺形态学显示腺泡泡状黏液消失,分泌低下,表明造模成功;雌激素组[(6.14±2.13)ml,(11.21±1.99)s]与高压氧组[(5.16±1.79)ml,(10.86±1.78)s]泪液分泌量与泪膜破裂时间均明显高于去势组[(3.25±1.66)ml,(8.97±2.01)s](P＜0.05),且大鼠角膜透明,偶见点状荧光素染色,泪腺形态学显示分泌旺盛.结论 高压氧可减轻泪腺炎症反应,促进泪液分泌,在一定程度上可以减轻干眼症模型的泪液分泌过少症状.