β-防御素基因在牙龈组织中的表达

目的:检测人β-防御素(HBD-1,-2,-3)基因在牙周炎病变和健康牙龈组织中的表达。方法:应用反转录多聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测健康牙龈(HC组,11例)、慢性牙周炎(CP组,12例)和侵袭性牙周炎(AgP组,9例)牙龈组织中HBD-1、HBD-2和HBD-3mRNA表达水平。结果:HBD-1,-2,-3在所有牙龈组织样本中均有mRNA表达;HBD-3mRNA在HC组、CP组、AgP组的表达水平分别为0.53±0.12,0.30±0.17和0.40±0.17,3组间差异有统计学意义(P<0.01),健康牙龈中HBD-3mRNA表达相对强度明显高于慢性牙周炎组;HBD-2和HBD-3基因的mRNA表达水平呈正相关(P<0.01,r=0.48)。结论:牙龈上皮表达的β-防御素(HBD-1,-2,-3),尤其是HBD-3在健康牙龈组织较高水平的mRNA表达,提示其在牙周宿主免疫防御反应中可能发挥重要作用。     

β-防御素-3及其与牙周炎和糖尿病的关系

β-防御素-3的表达与牙周炎和糖尿病密切相关,而后两者间亦关系密切。研究显示,β-防御素-3在牙周炎患者龈沟液中的表达明显降低;且当炎症越重,致病菌种类越多时,β-防御素-3的表达越低。格氏链球菌、血链球菌和非典型韦荣菌等牙周非致病菌轻微上调β-防御素-3的表达,具核梭杆菌和中间普雷沃菌等橙色复合体细菌可强烈地诱导β-防御素-3分泌,齿垢密螺旋体、牙龈卟啉单胞菌和福赛斯拟杆菌等红色复合体细菌则会抑制β-防御素-3的产生。β-防御素-3在健康牙周组织中的表达相对于炎症牙周组织较高,有利于维持牙周组织的稳定。β-防御素-3与牙周有关的生物学功能主要包括抗菌活性、免疫调节作用和促进细胞增殖生长等。在糖尿病状态下,机体的免疫防御功能受损,β-防御素-3在糖尿病感染伤口组织表达降低。目前,有关β-防御素-3的可能的不良反应、生物学功能、在感染性疾病中的具体作用机制还有待进一步研究。     

β-防御素-2多肽在不同类型牙周炎及健康牙龈组织中的表达

目的:检测人β-防御素-2(humanbetadefensin-2,HBD-2)在牙周病病变牙龈和健康牙龈中的表达。方法:应用SP法检测健康牙龈(HC组,11例)、慢性牙周炎(CP组,18例)和侵袭性牙周炎(AgP组,9例)牙龈中HBD-2蛋白的表达水平,所得数据用SPSS11.5统计分析软件进行单因素方差分析。结果:HBD-2蛋白在所有牙龈标本中均有表达;HBD-2蛋白表达可见于牙龈复层鳞状上皮全层,主要位于棘层以上细胞胞质内。3组的表达水平分别为:健康牙龈组(31.55±12.66)%、慢性牙周炎组(17.31±7.64)%、侵袭性牙周炎组(25.06±8.04)%,健康组表达水平显著高于慢性牙周炎组(P<0.05),其他组间差异无统计学意义。结论:HBD-2多肽在健康牙龈和牙周病牙龈上皮中广泛表达,提示其在维系牙周健康及宿主免疫防御反应中可能发挥重要作用。     

龈沟液β-防御素-2、β-防御素-3在慢性牙周炎与2型糖尿病中的水平研究

目的通过检测龈沟液中β-防御素2、β-防御素3的表达水平,探讨其在慢性牙周病与2型糖尿病中的可能作用。方法选取慢性牙周炎伴2型糖尿病组(T2DMCP组)20例,2型糖尿病组(T2DM组)20例,慢性牙周炎组(CP组)20例,健康组(H组)20例作。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测龈沟液中β-防御素-2和β-防御素-3水平。比较组间龈沟液中β-防御素-2和β-防御素-3水平的差异性,分析β-防御素-2和β-防御素-3之间的相关性与β-防御素-2和β-防御素-3与牙周指标的相关性。结果 CP组、T2DM组、T2DMCP组的临床指标PD、CAL、BI和GCF量均高于H组(P<0.05)。T2DMCP组的PD、CAL、BI和GCF量均高于T2DM组和CP组(P<0.05)。龈沟液中β-防御素-2,β-防御素-3水平在H组高于CP组、T2DM组和T2DMCP组(P<0.05),CP组和T2DM组高于T2DMCP组(P<0.05)。龈沟液中β-防御素-2水平与β-防御素-3水平呈正相关(P<0.05)。结论慢性牙周炎和2型糖尿病可降低龈沟液β-防御素-2和β-防御素-3的水平,提示β-防御素-2、β-防御素-3对牙周组织起保护作用。     

牙周炎大鼠龈沟液中β防御素浓度的检测

目的：通过建立大鼠的牙周炎模型,检测β防御素在牙周健康大鼠和慢性牙周炎大鼠龈沟液中浓度的变化,探讨β防御素与牙周炎的关系.方法：结扎法建立慢性牙周炎大鼠（20只）模型,分别采集结扎前,结扎后第2,4,6周末4组龈沟液（gingival crevicular fluid,GCF）样本,首先用ELISA方法检测β防御素总蛋白的浓度,然后应用蛋白质印迹法分别检测β防御素1,2的蛋白表达,并傲半定量分析.利用SPSS 16.0统计软件进行单因素方差分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果：临床观察慢性牙周炎大鼠模型的形成过程,在第2周末牙龈炎形成期龈沟液β防御素蛋白与β-防御素2浓度与结扎前均明显上升（P＜0.05）;在第4,6周末牙周炎期,两者的表达强度又明显降低（P＜0.01）;β-防御素1浓度随时间未见明显改变（P＞0.05）.结论：β防御素总蛋白与β-防御素2浓度在牙周炎大鼠的龈沟液（GCF）中两者的浓度显著上升后又降低,提示两者可与慢性牙周炎的病程和致病机制密切相关.     

β-防御素2在实验性大鼠牙周炎口腔龈上皮、颊黏膜上皮及腮腺导管上皮的表达

目的:探讨β-防御素2在大鼠牙周炎模型口腔龈上皮、颊黏膜上皮和腮腺导管上皮的表达变化及与牙周炎发展的关系。方法:利用结扎法建立大鼠上颌第一磨牙牙周炎模型并设对照组,于第6周取实验牙及牙周组织、相对颊黏膜和腮腺组织,制备组织切片,免疫组化染色法检测防御素2在口腔龈上皮、颊黏膜上皮、腮腺导管上皮的表达并行免疫组化评分和统计学分析。结果:β-防御素2主要表达于口腔龈上皮和颊黏膜上皮的棘层和颗粒层以及腮腺的导管上皮细胞。在口腔龈上皮的表达为牙周炎组显著低于对照组(P<0.01),在颊黏膜上皮的表达为牙周炎组显著高于对照组(P<0.01),而在腮腺导管上皮的表达牙周炎组和对照组无显著差异。结论:牙周炎症时β-防御素2在口腔龈上皮、颊黏膜上皮和腮腺导管上皮的分布各有不同的变化,提示在牙周炎进展过程中不同部位口腔上皮对牙周化学屏障改变的影响不同。     

人β-防御素-3对小鼠牙周炎进展的保护作用

目的:探索人β-防御素-3在小鼠牙周炎进展中的保护作用。方法:用丝线结扎法建立小鼠牙周炎模型。实验组小鼠腹腔注射人β-防御素-3(100 μg/kg),另选结扎过小鼠和未结扎小鼠各1组,腹腔注射磷酸盐缓冲液为对照。8周后取上颌骨,Micro CT、HE染色、TRAP染色及免疫组化染色,评估人β-防御素-3对牙周炎进展的作用。结果:人β-防御素-3能减少牙槽骨吸收及骨内破骨细胞数量;减轻牙龈上皮棘层增厚、上皮钉突增生、炎症细胞浸润、胶原纤维变性断裂等病理变化,降低牙周组织中IL-6、MCP-1和TNF-α的表达强度。结论:人β-防御素-3能够减轻牙周组织炎症,减少牙周组织破坏,从而减缓牙周炎进展。     

吸烟对慢性牙周炎患者龈沟液及牙龈组织中β防御素2、3的影响

目的 探讨吸烟对慢性牙周炎患者龈沟液（gingival crevicular fluid,GCF）及牙龈组织中β防御素(human beta def-ensin,hBD)2、3表达的影响。方法 将研究对象分为吸烟慢性牙周炎组和非吸烟慢性牙周炎组。采用酶联免疫吸附法（Elisa）检测hBD2、3的浓度;反转录多聚合酶链反应(RT-PCR)检测hBD2、3mRNA的表达,并做半定量分析。相关数据采用SPSS 17．0软件包进行统计学分析。结果 在GCF中,hBD2、3在吸烟组的水平表达均低于非吸烟组;hBD2、3在2组牙龈组织样本中均有mRNA表达,其中吸烟组较非吸烟组mRNA表达水平减弱。结论 吸烟可使GCF及牙龈组织中hBD2、3的表达发生改变,提示吸烟可对牙周宿主免疫防御系统产生消极影响。     

牙周组织中β-防御素与TOLL样受体表达水平的研究

目的研究人β-防御素(h BDs)与Toll样受(TLRs)体这两大类免疫物质在牙周组织表达以及由于慢性牙周炎引起的表达水平变化。方法在口腔科门诊征集23例慢性牙周炎患者和15例健康对照者,分别在其进行牙周手术和拔牙手术时收集牙周组织,通过实时定量PCR和免疫组化实验分析h BDs和TLRs的表达水平变化。结果作为牙周炎相关的免疫因子,h BDs和TLRs在健康人和慢性牙周炎患者的牙周组织中的表达水平均有变化,但变化趋势有所不同。结论防御素和TLRs在牙周组织中的表达水平因为牙周炎的存在而发生一定的变化。由于表达部位不同,提示在慢性牙周炎进程中,这两大类内源性免疫因子之间也存在相互作用。     

白细胞介素-1β对遗传性牙龈纤维瘤和正常牙龈上皮细胞β-防御素的影响

目的:比较白细胞介素1β(IL-1β)刺激体外培养的正常牙龈、遗传性牙龈纤维瘤(HGF)上皮细胞β-防御素(HBD)表达的差异,探讨该差异与遗传性牙龈纤维瘤发病机制的可能相关性。方法:体外培养3例遗传性牙龈纤维瘤病人和6例正常人牙龈上皮细胞,经0,0.01,0.1,1,10,100 ng/mL的IL-1β分别刺激12、24、36、48 h,提取细胞总RNA,逆转录后,采用HBD-1、2、3特异性引物经PCR扩增,以β-肌动蛋白为内参,计算HBD-1、2、3与内参扩增产物相对值,对HBD-1、2、3进行半定量分析,采用SPSS软件单向方差统计分析法分析结果。结果:HBD-1 mRNA在正常牙龈和遗传性牙龈纤维瘤上皮细胞中呈固有表达,不受IL-1β刺激的影响。IL-1β可上调两种牙龈上皮细胞HBD-2、3的表达,在浓度为0.1～10 ng/mL时,作用时间大于12 h,受刺激组与未受刺激组差异有显著性(P<0.01)。相同浓度IL-1β作用不同时间时,正常牙龈上皮细胞中HBD-2、3的表达水平显著高于遗传性牙龈纤维瘤上皮细胞中表达水平(P<0.05,P<0.01)。且随作用时间延长差异更加显著。结论:遗传性牙龈纤维瘤病变组织和正常牙龈组织中β-防御素的表达有差异,这种差异可能与遗传性牙龈纤维瘤上皮细胞的分化及发病机制相关。     

细菌脂多糖诱导人牙龈上皮细胞β防御素-4表达的实验研究

目的观察不同浓度细菌脂多糖(BLPS)作用下原代培养的人牙龈上皮细胞(HGECs)β防御素-4(BD-4)的表达。方法体外原代培养HGECs,经免疫细胞化学鉴定,加入10、20、40、80、160μg/m L的BLPS,采用免疫组织化学和Western blotting检测BD-4蛋白在HGECs中的定位和表达变化。结果 HGECs组织块法原代细胞生长状态好,第3代细胞进行鉴定,Ck(AE1/AE3)(+)/Vimentin(-)。HGECs免疫细胞化学染色结果显示,HGECs胞浆可见棕黄色颗粒状着色,阳性染色弥漫分布于胞浆,随着BLPS浓度的增加表达更为强烈。Western Blotting结果显示,BD-4表达水平随BLPS浓度增加而增高。BD-4蛋白在BLPS浓度为160μg/m L表达的值最高,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论随着BLPS对牙龈上皮炎症刺激加重,BD-4表达增强,提示了BD-4在牙周炎症进程中的作用。     

精氨酸酶在大鼠实验性牙周炎牙周组织中的表达变化

目的:观察精氨酸酶(arginase,Arg)在不同时期、不同严重程度大鼠实验性牙周炎牙周组织中表达的变化,探讨Arg与牙周炎的相关性。方法:选用40只Wistar雄性大鼠,每只大鼠均用丝线结扎右下颌第一磨牙(实验组),左下颌第一磨牙不做处理(对照组),喂以高糖饮食。分别于结扎后1、2、4、6周,经临床和组织学(HE染色)观察确认大鼠牙龈炎、不同程度牙周炎模型建立成功后,取大鼠下颌骨连同受试牙和牙周组织,制备切片,免疫组化染色法检测正常对照组、牙龈炎组、不同程度牙周炎组大鼠牙周组织中Arg的表达,并进行图像定量分析。结果:在正常牙周组织中,偶有表达;而各实验组牙周组织中Arg主要在巨噬细胞和血管内皮细胞中表达,其表达阳性细胞数随炎症程度加重而增加,结扎4周(重度牙周炎)时达到高峰,到慢性牙周炎时期(结扎6周),表达较急性期有所降低,各组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:牙周组织内Arg的表达与牙周炎炎症程度呈明显正相关。     

β-防御素与牙周健康

口腔上皮不仅作为外界环境与宿主之间的一道物理屏障,还具有分泌多种抗菌肽参与天然免疫的作用。其中β-防御素家族具有广谱抗菌的作用,对口腔内的多种细菌有抑制作用,从而保护宿主的健康。本文就β-防御素在牙龈组织的表达及其与牙周可疑致病菌的相互作用关系作一综述。     

白细胞介素-6在大鼠慢性牙周炎合并动脉粥样硬化模型中的表达

目的探讨大鼠慢性牙周炎（CP）合并动脉粥样硬化（As）模型中牙周组织、As斑块中血清白细胞介素-6（IL-6）的表达。方法60只成年Wistar雄鼠随机分为4组：正常对照组（A组）、CP组（B组）、As组（C组）、CP加As组（D组）,每组15只,各组接受相应的建模处理。观察牙周组织及动脉血管病理改变,免疫组织化学方法半定量分析牙周组织及As斑块中IL-6表达,酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清IL-6水平。结果牙周病理学观察：B、D组实验牙牙周炎症表现明显,附着丧失（AL）水平较A、C组有明显增加（P〈0.05）。动脉病理学观察：C、D组主动脉形成粥样硬化病变。免疫组化染色：B、D组IL-6在牙周组织及血清中的表达均高于其他组（P〈0.05）,D组As斑块中IL-6表达高于其他组（P〈0.05）。相关性分析显示,D组IL-6在牙周组织与As斑块中的表达呈正相关。结论CP与As的发生发展可能与IL-6表达升高有关。     

β-防御素的抗肿瘤活性及其与口腔癌相关性的研究进展

防御素是在植物以及动物界广泛存在的一类阳离子多肽,是抗菌肽(一类具有广谱抗菌作用的短链多肽)中具有代表性的亚家族,是十分保守的宿主防御分子.至今为止,已发现多种防御素.人β-防御素(hBD)是其中的重要成员,具有很强的杀菌活性、趋化活性、调节吞噬细胞及获得性免疫等功能.此外,hBD还具有抗肿瘤活性,且与口腔癌有着密切的...     

人类β-防御素在正常、深龋和炎症牙髓中的表达

目的:研究人类β-防御素(human beta-defensins,HBD)在正常、深龋和炎症牙髓中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法分别对正常、深龋及炎症牙髓中β-防御素HBD-1、HBD-4的表达进行组织学定位,并通过Image pro-plus 5.1图像分析软件对HBD-1/HBD-4染色进行平均光密度值的测定。所得数据用SPSS 13.0统计软件进行相应的统计学分析。结果:在人牙髓中,β-防御素主要表达在成牙本质细胞的细胞核及细胞突起中。HBD-1在3组内表达无显著差异(P>0.05);HBD-4在深龋和牙髓炎组中的表达与正常组相比均显著增强(P<0.05),且炎症组亦强于深龋组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HBD-1参与牙髓天然免疫系统;HBD-4参与龋病发展过程中牙髓组织的免疫防御反应。     

牙龈卟啉单胞菌牙龈素在牙周炎症过程中的作用及其机制

牙周炎是口腔临床实践中最为常见的疾病之一。牙龈卟啉单胞菌与牙周炎密切相关,牙龈卟啉单胞菌表面的牙龈素(gingipains)、菌毛和脂多糖被认为是其最重要的毒力因子,是近年来牙周炎机制研究的热点,引起研究者的广泛关注。本文结合近年来的研究进展,就牙龈卟啉单胞菌gingipains的结构、引起牙周炎症的机制和所涉及的信号通路作一综述。     

IL-10mRNA及其蛋白在慢性牙周炎牙龈组织中的表达

目的检测IL-10 mRNA及其蛋白在慢性牙周炎牙龈组织中的表达及其组织细胞来源.方法随机选择12例慢性牙周炎翻瓣术患者作为牙周炎组,10例龈切术患者作为牙龈炎组,6例阻生牙拔除术患者作为健康对照组.分别采用原位杂交和免疫组化检测技术,检测各组牙龈标本中IL-10的表达.每组IL-10 mRNA及蛋白两种水平间的比较采用秩和检验;各组间数据的两两比较采用单因素方差分析.结果IL-10 mRNA及其蛋白在牙周局部牙龈组织均有表达,表达细胞类型有淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞及成纤维细胞等.IL-10在mRNA水平及蛋白水平表达无显著差异(P＞0.05)(牙龈炎组P＜0.05).牙周炎组IL-10表达强度显著高于健康对照组和牙龈炎组(P＜0.01),牙周炎组IL-10 mRNA表达强度显著高于健康对照组(P＜0.01),但与牙龈炎组比较差异无显著性(P＞0.05).结论IL-10在牙周组织中存在局部分泌机制.     

牙龈素在牙龈卟啉单胞菌生长及牙周致病过程中的作用

牙龈素是慢性牙周炎的重要致病菌---牙龈卟啉单胞菌的最重要毒力因子。作为一组半胱氨酸蛋白酶,牙龈素能结合并降解多种宿主蛋白质。本文总结了目前对牙龈素的结构和功能的研究,主要从牙龈素对牙龈卟啉单胞菌生长代谢、对牙周组织的致病作用及宿主免疫的影响三个方面阐述。