Ki-67在GCB及non-GCB弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的探讨Ki-67在GCB及non-GCB型弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及意义。方法收集60例DLBCL及19例淋巴结反应性增生组织,并制作其组织芯片,采用免疫组化观测CD1O、bcl-6、MUM1蛋白的表达对DLBCL进行生发中心样B细胞（germinal center B cell-like,GCB）和非生发中心样B细胞（non-GCB）免疫表型分类,同时检测Ki-67蛋白的表达。结果 （1）60例DLBCL中CD1O、bcl-6、MUM1蛋白的阳性表达率分别为33.3%、45%、63.3%,GCB类型29例（48.3%）,non-GCB类型31例（51.7%）。（2）Ki-67蛋白在淋巴结反应性增生（不包括生发中心）阳性率明显低于DLBCL（P〈0.05）。（3）Ki-67蛋白的表达在DLBCL中GCB及non-GCB亚型中有显著性差异（P〈0.05）。结论 Ki-67的表达可能与DLBCL免疫学分型有关,在non-GCB中,Ki-67高表达。     

CARD11与NF-_κB及Bcl-2在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的探讨CARD11与NF-κB及Bcl-2在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)不同免疫分型中的表达情况和相互作用关系,了解3种分子标记物对DLBCL的发展过程和临床特征的影响。方法收集临床资料,选取DL-BCL标本70例,反应性增生的淋巴结20例。应用免疫组织化学染色法和组织芯片技术对DLBCL进行免疫分型并检测分型中CARD11、NF-κB和Bcl-2的表达情况。对收集到的数据资料进行整理和统计学分析。结果 70例DLBCL组织标本中,GCB30例,non-GCB40例;Maxvision免疫组化结果显示在DLBCL组织标本70例中,CARD11阳性42例,阳性率60.0%;反应增生性淋巴结中CARD11阳性5例,阳性率25.0%。结论在DLBCL亚型的分类中CARD11、NF-κB和Bcl-2具有重要的作用,为临床治疗和预防提供了重要参考。     

恶性淋巴瘤诊断中Ig/TCR基因重排的分子病理检测分析

目的 探讨B细胞性淋巴瘤中Ig基因重排和T细胞性淋巴瘤中TCR基因重排的特点.方法 回顾性分析213例恶性淋巴瘤和24例淋巴反应性增生组织样本,利用3730毛细血管电泳对提取的DNA进行PCR扩增,检测B细胞性淋巴瘤中Ig基因重排和T细胞性淋巴瘤中TCR基因重排.结果 B细胞性淋巴瘤中IgHA的总阳性率为43.21％,IgHB的总阳性率为29.63％,IgHC的总阳性率为30.25％,IgHD的总阳性率为16.67％,IgHE的总阳性率为3.09％,IgLκA的总阳性率为42.59％,IgLκB的总阳性率为23.46％,IgLλA的总阳性率为25.93％,IgH (A+ B+ C+ D+ E)+ IgLκ(A+ B)+ IgLλA的总阳性率为88.27％;T细胞性淋巴瘤中TCRB-A的总阳性率为31.37％,TCRB-B的总阳性率为58.82％,TCRB-C的总阳性率为23.53％,TCRG-A的总阳性率为60.78％,TCRG-B的总阳性率为21.57％,TCRD的总阳性率为29.41％,TCRβ+ TCRγ+ TCRδ的总阳性率为78.43％.结论 Ig基因重排和TCR基因重排分别对B细胞性和T细胞性淋巴瘤的诊断具有重要价值.     

IgH/TCR基因重排与EB病毒原位杂交联合分析在淋巴瘤诊断中的应用

目的：探讨免疫球蛋白重链/T细胞受体（IgH/TCR）基因重排检测联合EB病毒（EBV）原位杂交在淋巴瘤诊断中的应用,分析EBV＋-B细胞淋巴瘤的细胞学及基因组学特征、鉴别诊断要点,以缩短诊断时间,减少误诊。方法采用IgH/TCR基因重排与EB原位杂交联合分析诊断EBV＋-B细胞淋巴瘤1例,分析其免疫组化特征、EBV原位杂交、基因重排结果。结果 EBV＋-B细胞淋巴瘤临床上主要表现为淋巴结增大,常伴骨髓和外周血浸润。淋巴结活检显示其结构破坏,淋巴滤泡减少,淋巴结高度增生性病变,可见轻至中度异型淋巴细胞,淋巴窦扩张,组织细胞增生。免疫组化证实EBV感染的细胞毒性B细胞构成病变主体;EBV原位杂交显示部分淋巴细胞核阳性;基因重排提示IgH、免疫球蛋白轻链（Igκ）基因发生克隆性重排,TCRγ无克隆性重排。结论 EBV＋-B细胞淋巴瘤从形态学上难以与伯基特淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病等淋巴瘤区分,早期诊断困难。联合应用IgH/TCR基因重排与EBV原位杂交技术对EBV＋-B细胞淋巴瘤的诊断有较高准确性。     

弥漫大B 细胞淋巴瘤研究进展

弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是成人最常见的非霍奇金B细胞淋巴瘤,在第四版WHO造血与淋巴组织肿瘤分类中,根据形态学及临床特征,将DLBCL分为非特殊类型、特殊亚型和独立疾病。DLBCL在形态学、免疫表型、遗传学特征及临床表现上具有显著的异质性。根据基因表达谱,DLBCL可分为预后较好的生发中心B细胞型(GCB型)DLBCL和活化B细胞型(ABC型)DLBCL。根据免疫组化分型,也可将DLBCL分为GCB型和非GCB型(或ABC型)。GCB型和非GCB型(或ABC型)的预后因素通过不同的通路而发挥其生物学作用,表现在蛋白的异常表达或基因的断裂重排、扩增及易位。但这些蛋效应是否影响着应用利妥昔单抗治疗的DLBCL患者的预后,目前还不是很确定。本文通过对DLBCL的分类、免疫分型等研究进展的总结,增强对该疾病的认识。     

R-CHOP与CHOP方案治疗生发中心和非生发中心来源DLBCL疗效评价

目的研究美罗华联合环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、甲泼尼龙(R-CHOP)方案与单用环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、甲泼尼龙(CHOP)方案治疗生发中心来源(GCB)和非生发中心来源(non-GCB)的CD20阳性的弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)疗效。方法选取2008年1月至2012年6月确诊为CD20阳性的DLBCL患者52例,其中GCB 25例,non-GCB 27例。将GCB患者随机分为两组,观察组(R-CHOP方案治疗)12例,对照组(CHOP方案治疗)13例;将non-GCB患者随机分为两组,观察组(R-CHOP方案治疗)13例,对照组(CHOP方案治疗)14例,比较四组总有效率、低密度脂蛋白(LDL)水平变化、无病生产期、总生存期及不良反应。结果 GCB的DLBCL患者采用R-CHOP方案治疗与CHOP方案治疗的两组总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05),但无病生产期、总生存期观察组总有效率优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。non-GCB的DLBCL患者用R-CHOP方案治疗与CHOP方案治疗的两组比较,其总有效率、无病生产期、总生存期观察组均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。另LDL水平均明显下降,不良反应均为轻、中度,差异无统计学意义(P>0.05)。结论治疗GCB的DLBCL患者根据经济情况可选用R-CHOP方案治疗,non-GCB的DLBCL患者则尽可能选用R-CHOP方案治疗。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤克隆性基因重排检测研究

目的对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)进行IgH基因重排研究。方法用免疫组化法标记筛选DLBCL,用针对IgH单轮扩增引物对DLBCL石蜡包埋组织进行多聚酶链反应(PCR)扩增检测克隆性基因重排。结果60例DLBCL IgH基因重排阳性率为51.7%(31/60),其中中心母细胞型阳性率54.5%(30/55),免疫母细胞型阳性率0.0%(0/3),间变性大细胞型阳性率50.0%(1/2)。结论DLBCL IgH基因重排检出率低于B细胞淋巴瘤总检出率,可能与DLBCL中存在IgH可变区体细胞超突变及背景细胞的数量有关。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤中Survivin和bcl-2蛋白表达及相互关系

目的探讨Survivin和bcl-2在弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuse large B cell lymphoma,DLBCL）免疫类型中的表达及相互关系。方法采用免疫组化MaxVision法检测凋亡抑制基因Survivin和bcl-2在DLBCL免疫类型中和反应性增生的淋巴结中的表达。结果免疫分型60例弥漫性大B细胞淋巴痛中免疫类型GCB（germinal center-B-cell like）25例,non—GCB（non germinal center-B-cell like）35例：免疫类型GCB中survivin的阳性率为72．0％,non-GCB中survivin的阳性率为42．9％,两者之间P〈0．05;GCB中bcl-2的阳性率为76．0％,non—CCB中bcl-2的阳性率为31．4％。两者之间P〈0．01;survivin阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤中bcl-2阳性率为69．7％．Burvivin阴性弥漫性大B细胞淋巴瘤中bcl-2阳性率为25．9％。在DLBCL中,Survivin的表达与bel-2蛋白表达密切相关。结论survivin、bcl-2的表达与弥漫性大B细胞淋巴瘤的免疫学类型相关,C-CB类型中高表达,non—GCB类型中低表达。在DLBCL中Survivin与bcl-2蛋白表达密切相关,两者协同发挥抗凋亡效应。     

B细胞淋巴瘤IgH基因重排的检测及临床应用

目的建立克隆性免疫球蛋白重链(IgH)基因重排检测技术,探讨B淋巴细胞IgH基因重排在恶性淋巴瘤诊断的临床价值。方法选取62例B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL),其中,弥漫大B淋巴瘤(DL-BCL)42例、滤泡性B细胞淋巴瘤(FL)15例、套细胞淋巴瘤(MCL)5例;15例未定性的淋巴组织增生性病变;20例良性淋巴组织反应性增生病例。从组织蜡块切片提取基因组DNA,经PCR扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染显示基因重排结果。结果62例B-NHL中53例IgH基因重排(85.5%),其中DLBCL37例、FL13例、MC14例,阳性率分别为88.1%、86.7%、80.0%,各组间阳性率差异无统计学意义(P>0.05);15例未确诊的疑难病例中10例IgH基因重排,其中7例经随访或会诊确认为B-NHL;20例良性淋巴组织反应性增生病例IgH基因重排均为阴性,IgH基因重排检出率在淋巴瘤组与良性组之间差异有统计学意义(P<0.001)。结论PCR法检测B淋巴细胞IgH基因重排可作为淋巴细胞来源的良、恶性病变的一种辅助诊断手段,适用于石蜡标本,进行回顾性研究。     

多重引物PCR和异源双链毛细管电泳技术在B细胞淋巴瘤诊断中的应用

目的探讨多重引物PCR和异源双链毛细管电泳技术(heteroduplex analysis HA)在B细胞淋巴瘤诊断中的应用。方法从普通石蜡切片组织中提取基因组DNA用多重引物PCR扩增。利用双链异源技术进行毛细管电泳,并对其产物进行分析。结果 32例B细胞淋巴瘤中29例检测有克隆性重排,检出率90.65%。10例反应性增生病例均成多克隆性重排。结论在B细胞受体IgH和IgK基因克隆重排检测中,多重引物PCR及异源双链毛细管电泳技术具有样本来源便利,灵敏度高,特异性强,耗时短等特点,可作为B细胞淋巴瘤的诊断及鉴别诊断的辅助检测手段。     

Biweekly CHOP therapy improves therapeutic effect in the non-GCB subtype of diffuse large B-cell lymphoma

CHOP (cyclophosphamide, doxorubicin, vincristine and prednisone) is accepted as the best available standard treatment for diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) patients; however, the therapeutic efficacy seems unsatisfactory. Additional rituximab will improve the cure rate, but it is not popular in China because of its increased medical cost. Germinal center B-cell (GCB) and non-GCB subtypes distinction have been described as independent prognostic factors, and provides likelihood for cure with chemotherapy. The aim of the study is to explore the association between Immunophenotype and treatment regimen. Between August 2003 and May 2006, 66 patients with DLBCL were enrolled, according to immunohistochemistry results (GCB and non-GCB phenotype), randomly assigned to receive either six to eight cycles of CHOP every 2 weeks or standard CHOP every 3 weeks. After a median follow-up duration of 32 months (range of 4 to 42 months), an estimated 3-year overall survival (OS) rate for the GCB patients were 68.2% and 55.6% for the biweekly CHOP regimen and standard CHOP regimen respectively, while the data were 62.8% and 37.9% respectively for the non-GCB cases. The biweekly CHOP therapy showed higher efficacy than standard treatment, and its superiority was more obvious with the non-GCB subgroup. All rights reserved.     

弥漫大B细胞淋巴瘤临床病理特点及预后因素分析

目的分析弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）临床病理学特点及与预后的关系。方法回顾性分析114例DLBCL患者的临床资料,分析患者临床病理学特征与疗效之间的关系。结果国人DLBCL中非生发中心来源（non-GCB）亚型占70%;CHOP样方案可以获得64.9%的持续完全缓解率;患者治疗前的ECOG评分、血清LDH水平、B症状、大病灶以及血红蛋白水平具有预后意义（P〈0.05或〈0.01）。结论国人DLBCL以non-GCB亚型为主,ECOG评分、血清LDH水平、B症状、大病灶以及血红蛋白水平具有预后意义。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤中CD40L的表达及意义

目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）组织中CD40L表达与DLBCL预后间的关系及意义。方法免疫组织化学法检测27例弥漫性大B细胞淋巴瘤、20例淋巴结反应性增生组织中CD40L的表达。结果（1）DLBCL中CD40L过度阳性率（25．93％）显著低于淋巴结反应性增生（63．64％），P〈0．05。（2）CD40L在Ⅲ、Ⅳ期DLBCL过度阳性率（14．29％）低于Ⅰ、Ⅱ期（38．46％），P〈0．05。CD40L过度阳性率在有结外浸润DLBCL（11．76％）低于无有结外浸润DLBCL（40％），P〈0．05。（3）DLBCL患者CD40L的过度阳性率与远处转移、临床分期均显著相关，P〈0．05。结论（1）CD40L过度阳性率与结外器官浸润及临床分期密切相关，其可能作为判断DLBCL侵袭性及预后的指标。（2）DLBCL中CD40L表达的减少可能是影响其发病的因素之一。     

克隆性分析在乳腺导管内增生性病变预后评估中的应用

目的探讨各级导管内增生性病变的克隆组成,以判断病变是否为肿瘤性增生。方法选取80例女性导管内增生性病变,包括普通导管增生（uDH）20例,平坦型上皮非典型增生（FEA）15例,非典型导管增生（ADH）20例,导管内原位癌（DCIS）25例,另外选取20份正常乳腺组织作为对照,应用显微切割技术分离所需病变,提取基因组DNA,经甲基化敏感的HhaI消化,巢式聚合酶链反应（PCR）扩增雄激素受体（AR）基因,应用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示AR基因的cAG重复序列长度多态性。结果100例标本中91例扩增成功;所有的DCIS均为单克隆性增生,所有正常组织和大多数的UDH（94％,17／18）为多克隆性增生,27Voo（3／11）的FEA及71％（12／17）的ADH为单克隆性增生。结论大部分的ADH及部分FEA,所有的DCIS为单克隆性增生,为肿瘤性增生。     

CARD11与Bcl-2在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达与意义

目的观察弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma）中CARD11与Bcl-2的表达情况,探讨它们在弥漫性大B细胞淋巴瘤中不同免疫分型中的表达及相互关系。方法选取弥漫性大B细胞淋巴瘤60例和反应性增生的淋巴结20例,采用组织芯片技术和免疫组织化学方法对弥漫性大B细胞淋巴瘤进行免疫分型并检测弥漫性大B细胞淋巴瘤免疫学类型GCB和ABC型中CARD11和Bcl-2表达情况。结果 （1）免疫分型60例弥漫性大B细胞淋巴瘤中免疫类型GCB25例,ABC35例。（2）60例弥漫性大B细胞淋巴瘤中免疫类型中CARD11与Bcl-2的表达情况：免疫类型GCB中CARD11的阳性率为24.0%,ABC中CARD11的阳性率为57.4%,两者之间P〈0.05;GCB中Bcl-2的阳性率为32.0%,ABC中Bcl-2的阳性率为62.9%,两者之间P〈0.05。结论①CARD11、NF-κB高表达与弥漫性大B细胞淋巴瘤的ABC类型相关。