一株耐酸硫酸盐还原菌的分离筛选及生理特性研究

从四川化工集团硫酸厂废水污泥中分离到一株耐酸硫酸盐还原菌.分离菌属于中温菌,最佳生长温度为36℃;轻度耐盐,浓度在1%左右.分离菌具有较宽的pH生长范围(5.0~8.5),且在pH 5.0时的细胞生长量达到最高,与pH7.0时的生长水平相同.相对于已报道的硫酸盐还原菌,具有很强的耐酸性能.分离菌的另一显著特点是碳源利用范围广,能分别利用甲酸钠、乙酸钠、乙醇、丙酸钠、乳酸钠、葡萄糖作为电子供体,进行硫酸盐异化还原.菌体呈杆状或弧状,大小为(0.5~0.6)×(1.7~2.0)μm,革兰氏染色阴性,芽孢染色阴     

一株聚丙烯酰胺降解菌株的分离培养及其系统发育分析

应用Hungate厌氧技术,从大庆油田聚合物配注站的母液罐中分离到一株水溶性超高分子量聚丙烯酰胺(HPAM)的降解菌株I8,该菌株为短杆状,G-,黑色圆形菌落,最适温度为38℃,最佳pH值为7.8,具有硫酸盐还原功能,产H2S气体,兼性厌氧.研究表明,该菌株能以HPAM为唯一碳源,降解侧链,部分官能团发生改变;浓度为600 mg/L时,20 d菌株生物降解率为63.17%,其溶液粘度下降效果显著.16S rDNA序列与Enterobacter cloacae(ECL251469)的相似性为98%,通过形态、生理生化、G C含量以及16S rDNA序列鉴定,初步鉴定可能为肠杆菌属的一个新种,暂时命名为Enterobacter HPAM Dcgraded Bacteria I8,I8菌株的分离为HPAM的生物降解提供了新的微生物资源.图4,参14.     

聚丙烯酰胺降解菌株Enterobacter cloacae的分离鉴定

应用厌氧Hungate技术,从大庆油田聚合物配注站的熟化罐水溶液中分离到一株聚丙烯酰胺降解菌株.对该菌株进行形态、生理生化、分子生物学鉴定结果表明,菌株为G-,短杆状,无芽孢,最佳pH值为8.0,最适生长温度为40℃,具有硫酸盐还原功能,产H2S,严格厌氧,通过16S rDNA和16S~23S rDNA间隔区序列鉴定,菌株与Enterobacter cloacae有极高的相似性.初步鉴定为Enterobact-er中的新种,暂时命名为Enterobacter cloacae.红外光谱分析结果表明,菌株以聚丙烯酰胺为惟一碳源,菌株作用前后表面结构发生变化,分子链上的酰胺基水解成羧基,降解侧链,部分官能团发生改变,溶液黏度下降效果显著;GC-MS初步分析聚合物发生断链,低分子质量化合物除含双键、环氧和羰基的聚丙烯酰胺碎片外,大多属于一般丙烯酰胺低聚体的衍生物.     

常温等离子体诱变选育高效耐镉硫酸盐还原菌

从镉污染土壤中分离出35株硫酸盐还原菌(SRB),采用优化的硫酸钡沉淀法测定其硫酸盐还原活性,筛选出3株在缺氧和有氧条件下硫酸盐还原活性均较高的菌株,采用常温等离子体诱变技术对筛选的菌株进行诱变处理,筛选出一株硫酸盐还原活性高且耐受Cd生长能力强的诱变株WK 2-5-2,该菌株在液体培养基中能够耐受100mg/L Cd2+生长,菌数达到4.12×107CFU/m L,比其原始菌株WK 2-5的数量增加了约100倍。该菌株在缺氧和有氧条件下的硫酸盐还原活性分别为99.17%和78.37%,比其相应的原始菌株WK 2-5的硫酸盐还原活性分别增加了1.49%和43.88%。通过测定WK 2-5-2的16S rRNA序列,该菌株与路德维希肠杆菌(Enterobacter ludwigii EN-119)同源性达到100%,初步鉴定该菌株为路德维希肠杆菌。该菌株具有应用于镉污染土壤或水体修复的潜力。     

耐酸性硫酸盐还原菌的驯化及处理硫酸盐的研究

采用Starkey培养基对硫酸盐还原菌进行培养,观察不同pH值下其生长特性,pH 5.0～10.0范围内菌种均可以生长,最适pH值为7.0.选择pH值为7.0扩培的菌株S7进行耐酸驯化,对驯化后的菌株进行多次传代,SO24-去除率稳步提高,能够稳定传代.驯化前后菌株通过革兰氏染色和电子显微镜观察,初步表明革兰氏染色特性和形态无显著性的变化,驯化后菌株比驯化前菌株表面更光滑.经驯化传代后的SRB可以在pH值4.0条件下生长,生长情况良好,SO24-去除率由驯化前的1%提高到驯化初期的15%、传代后进一步达32%,从而扩大硫酸盐还原菌的适应范围.     

大庆油田地面系统的硫酸盐还原菌的分离与鉴定

大庆油田地面系统中的硫酸盐还原菌(SRB)危害严重,SRB菌的分离鉴定尚属空白,针对其不同种类进行杀菌研究具有重要意义.应用Hungate厌氧操作技术、绝迹稀释法以及"滚管"培养,从大庆油田地面系统的3种介质类型中分离到80株具有硫酸盐还原功能的菌株.对其中20株进行形态、生理生化以及16S rDNA序列系统发育分析.研究发现,液体培养基外观存在两种特征:一种为附着生长的SRB菌占多数,另一种为非附着生长的SRB菌占少数;地面系统的SRB菌主要分布于厚壁菌门(Firmicutes)梭菌纲(Clostridia)占总数的65%,变形菌门(Proteobacteria)γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria)占总数的25%,δ-变形菌纲(Deltaproteobacteria)中的脱硫弧菌属(Desulfovibrio)和脱硫肠状菌属(Desulfotomaculum)占总数的10%.地面系统中SRB的种类比较新颖,存在新种的可能性很大,本源的SRB菌很少,大部分是具有硫酸盐还原功能的外源微生物.图2,表2,参11.     

厌氧条件下硫酸盐废水中硫化物生成的影响因素

采用实验室模拟废水进行实验,研究了硫酸盐转化为硫化物的条件,包括厌氧环境中有菌和无菌情况下硫酸盐（SO42-）的浓度,反应时间,pH和温度对转化结果的影响,以出水硫化物的生成量为测定指标.得出结论：废水中硫酸盐含量为1 500 mg·L-1,时间36 h,pH介于6.8～7.0,温度在30～35℃之间,硫酸盐还原菌（Sulfate reducing bacteria,SRB）的生长活性较高,硫化物的生成量最大,为14.6 mg·L-1.     

具有砷(Ⅴ)还原能力的硫酸盐还原菌筛选及生长特性研究

采用亨盖特(Hungate)厌氧滚管技术从锦州湾受砷污染的底泥中分离纯化出3株具有砷(V)还原活性的硫酸盐还原菌,分别编号为S2、S3-11和S13.16S r RNA基因序列分析显示这3株菌分别与梭菌属(Clostridium)内的不同"种"之间亲缘关系最近.在As(V)初始浓度为1.0 mmol·L-1时,菌株S3-11可在10 h内还原23.4%的As(V),但当As(V)初始浓度增加到3.0或5.0 mmol·L-1时,菌株S2和S13则相对于S3-11展现出更强的砷还原能力,菌株S2甚至可以在7.0 mmol·L-1的砷环境中生长并在24 h内将14.2%的As(V)还原.菌株S2为严格厌氧菌,为直杆状革兰氏阳性菌,产芽孢,其细胞大小约为2.0μm×0.6μm,16S r RNA基因序列与梭菌属中Clostridium sporogenes strain JCM 7849同源性为99%.菌株S2可利用蔗糖、葡萄糖、甲酸钠、乳酸钠和乙酸钠为唯一碳源生长,生长适宜温度为30℃.     

苯酚降解菌SZH3的分离及降解特性的初步研究

自上海市苏州河中游分离得到一株兼性厌氧苯酚降解菌SZH3,该菌株能够在以苯酚为唯一碳源和能源的培养基上生长,经形态、生理生化以及16S rDNA序列特性分析,初步将该菌株鉴定为泛菌属(Pantoea sp.).进一步研究发现,在初始苯酚浓度为500 mg,/L时,SzH3的苯酚降解率在60 h内就可达到95.4%.该菌株最高可耐受浓度为1300 mg/L的苯酚,对苯酚最适降解条件为pH 7.0,温度30 ℃,转速200 r/min.     

一株高效SRB的选育及其硫酸盐转化性能研究

采用Starkey培养基富集培养的方法对硫酸盐还原菌(SRB)进行了选育、鉴定,研究了Desul fotomaculum A3菌株对硫酸盐的转化性能.实验通过改变A3菌株生存条件,得出主要环境因素,如pH、温度等对硫酸盐转化性能的影响,从而提出采用合适的环境因素来提高SRB的活性及转化性能,期望在印染废水处理的脱硫工艺中得以应用.     

高效产絮突变体Enterobacter sp. W16-c的筛选及其产絮特性

采用原生质体融合-紫外诱变技术分离得到高效絮凝剂产生菌Enterobacter sp. W16-c,并对其产絮特性和影响因素进行分析。结果表明:Enterobacter sp. W16-c的絮凝能力比出发菌提高13.91%;突变菌株发酵产絮最适碳源为蔗糖,最适氮源为酵母膏,最佳初始发酵pH值为5～9;金属离子Fe2+、Na+对Enterobacter sp. W16-c的产絮效果有促进作用;在最佳发酵条件下所产絮凝剂的絮凝率可达96.2%;Enterobacter sp. W16-c的主要成分为多糖;Enterobacter sp. W16-c是一株产絮性能稳定的高效产絮突变菌株。     

Isolation and Identification of Phosphate-accumulating Strain PAO3-1 and Its Phosphorus Removal Characteristics

A phosphate-accumulating bacteria strain PAO3-1 was isolated from biological phosphorus removal sludge supplied with sodium acetate as carbon source under stable performance. This strain has good enhanced biological phosphorus removal effect on normal activated sludge system. Phosphorus removal ratio was raised form 44%with no added strain to more than 82% with strain strengthening biological phosphorus removal. It is identified to be AlcaUgenes sp. according to its morphology,biochemical characteristics and 16S rDNA sequence analysis. The cell of strain PAO3-1 is straight bacilli form, 0.4×1.1 μm, no flagellum, gram negative and special aerobiotic. The optimal temperature and pH for growth are 32℃-37℃ and 5.5-9.5, respectively. The shape of slant clone is feathery. The phosphate situation, which was 76. 5% higher than that in non-starving situation. Its phosphate release rate of log course in anaerobic phase and in culture without phosphorus was lower than that in log course.     

一株硫酸铵耐性菌株的分离鉴定及其特征研究

本研究以赣州稀土矿区尾矿土壤微生物为研究对象,利用限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism, RFLP)技术,获得一株硫酸铵耐性菌株。通过16 S rDNA序列测定,鉴定该菌株属于短波单胞菌属(Brevundimonas sp.),命名为Brevundimonas sp. LNa,该菌株对硫酸铵的最高耐受浓度可达0.9 mol/L。进一步研究了环境因素对菌株LNa生长的影响,并表征其生理生化特性。结果表明:菌株LNa对硫酸链霉素不敏感,在低于1 mol/L硫酸铵处理,pH在6-7.5之间,菌株均能正常生长。菌株LNa能不同程度地降低培养基中氨氮和硫酸盐浓度,在0.7 mol/L硫酸铵胁迫下降解效果最好,氨氮浓度能降低约29%,硫酸盐浓度降低约36.7%;随着硫酸铵胁迫浓度的升高,菌株LNa的FDA水解酶(Fluorescein diacetate, FDA)、蛋白酶、脱氢酶和过氧化氢酶的活性都有不同程度的降低,当浓度上高到0.6 mol/L后,菌株的过氧化氢酶活性将不再发生变化。LNa菌株对氨氮和硫酸盐的降解能力,可能与细菌FDA水解酶和蛋白酶活性的分泌有关。     

A/O MBR处理印染废水中进水pH值对降解性能的影响

采用厌氧好氧膜生物反应器(A/OMBR),系统考察了当进水pH值在5.0～9.0范围变化时,各反应槽的活性污泥对活性艳蓝KNR染料及COD的降解性能变化情况.从而探索出在厌氧与好氧微生物协同作用下,微生物对染料及有机污染物的降解性能不受明显影响的进水pH值波动范围,为降低实际印染废水处理中化学试剂的使用量提供理论依据.结果表明,只有当进水pH值为9.0时,厌氧槽对脱色率的贡献大于好氧槽,而当进水pH值在5.0～8.0范围内变化时,好氧槽对系统脱色率的贡献大于厌氧槽.进水pH值对厌氧活性污泥的COD的去除效果几乎没有影响,而中性及偏酸性的进水条件更有利于好氧活性污泥对COD的降解.在偏碱性的进水条件下,膜对可溶性COD的截流作用更明显.当进水pH值在5.0～9.0范围内变化时,由于厌氧槽的pH值都能够稳定在6.0附近,使好氧槽和系统出水的pH值能够分别保持在7.0和7.5附近,从而保证了整个系统对染料及COD的降解性能处于最佳状态.     

四种华重楼内生细菌的初步研究

从华重楼（Paris polyphylla var Chinensis）的新鲜块茎中分离得到107株内生菌．对这107株菌进行了液体培养,经初步检测鉴定,有6株菌产生薯蓣皂甙或其类似物等甾体皂甙,对其中4株菌的形态学和理化特征进行了研究,确定这4株菌分别属于德克斯氏菌属（Derxia sp）、芽孢杆菌属（Bacillus sp）、动性球菌属（Planococcus sp）、肠杆菌属（Enterobacter sp）.     

16S rRNA测序在细菌鉴定中的应用

对分离获得的一株细菌P29,经聚合酶链式反应扩增后测定该菌株的16S rRNA基因序列,由16S rRNA基因序列比较可知,菌株P29与肠杆菌属和泛菌属亲缘关系最为接近,16S rRNA基因相似性达到99%.结合生理生化实验结果综合分析后,将其鉴定为泛菌属的成团泛菌.     

阿特拉津降解菌Enterobacter sp.的基因差异分析

筛选并分析生物降解菌Enterobacter sp.在阿特拉津作用下的差异基因。以Enterobacter sp.BIDMC 29基因组为参考,利用高通量测序技术,对阿特拉津降解菌株和对照菌株进行转录组测序分析。结果表明,共有368个基因表现出显著差异,其中上调基因231个,下调基因137个。在差异基因GO富集分析的前30个条目中,尿嘧啶分解代谢、氮利用、硝酸盐同化、硫化氢生物合成、裂解酶活性和过氧化物酶活性等相关基因表现富集。Pathway分析显示,差异基因涉及70条代谢途径,与氮代谢、氨基酸合成和代谢、ABC转运蛋白、丙酮酸代谢等过程有关。菌株通过调节基因表达来提高对阿特拉津的降解能力,为进一步解析阿特拉津的代谢机制奠定基础。     

调剖微生物菌群的分离,鉴定和特性研究

从大港油田含油土样中,分离驯化出一组可在兼性厌氧条件下,产水不溶性聚合物的混合菌群Y4,它们分别是Y4-1(Paenibacillus sp.),Y4-2(Actinomadura sp.),Y4-3(Uncultured bacteri-um clone)和Y4-4(Brevibacillus sp.).菌群Y4的最适生长条件是:温度46℃,pH7.0,盐度20.0g/L.通过菌群和单菌的作用效果对比实验发现,菌群产聚合物产率比单菌株要高.应用光学和电子显微镜对聚合物进行了观察,发现生物聚合物是一种水不溶性的相互缠绕的网状结构;利用纸层析分析其酸水解产物是葡萄糖,推断生物聚合物为纤维素类物质.一系列室内填砂模拟实验表明:菌群通过自身的生长和产生聚合物,能够降低高渗油藏的渗透率,提高水驱效率.提高采收率可以达到3.5%.     

光合细菌的分离鉴定及其对废水净化效果研究

为筛选能够高效净化当地废水的光合细菌,采用双层平板法,从宜宾当地废水中分离得到1株光合细菌,将其命名为YBX-1,并对该菌株进行形态学和生理生化实验,鉴定为红色假单胞菌.该菌株的最适生长条件为:45 W的白炽灯为光源,pH值为6.0~6.5,接种量为15%~20%.该菌株对宜宾本地3种废水的净化能力与外购对照菌株相当,最高CODCr去除率可以达到63.2%,具有潜在的应用价值.