肺癌组织中的8-OH-dG及其与几种癌变相关基因的关系

为探讨 8 羟基 脱氧鸟苷 (8 OH dG)与人群肺癌发生及癌变相关基因的关系 ,使用针对 8 OH dG加合物的鼠抗人单克隆抗体 ,通过免疫学方法检测 1 50例肺癌、1 2 0例癌旁肺组织、40例肺良性病变和 40例正常肺组织中氧化损伤标志物 8 OH dG的含量 ;同时检测相应肺组织中P53、C MYC、K RAS、BCL 2、hTERT等癌变相关基因的表达 ,分析 8 OH dG与上述癌变相关基因表达的关系。结果显示 ,92 7% (1 39 1 50 )的肺癌组织中可检出氧化损伤标志物 8 OH dG ,其阳性标志细胞的比率为 (2 4 0 0± 2 5 1 1 ) % ;1 7 5 % (2 1 1 2 0 )的癌旁肺组织可检出 8 OH dG ,阳性标志细胞的比率为 (2 42± 5 98) % ;1 0 0 % (4 40 )的肺良性病变组织可检出 8 OH dG ,阳性标志细胞的比率为 (0 80± 1 30 ) % ;5 0 % (2 40 )的正常肺组织可检出 8 OH dG加合物 ,阳性标志细胞的比率为 (0 34± 1 0 1 ) % ,肺癌中 8 OH dG的含量高于其它肺组织 (P <0 0 1 )。将肺癌病例按性别、年龄、细胞类型和吸烟史分层 ,它们皆与 8 OH dG无关联。分析 8 OH dG与癌变相关基因的关系 ,发现肺癌组织K RAS、BCL 2基因阳性表达者 8 OH dG的含量高于上述基因阴性表达者 ,P值分别为 0 0 35和 0 0 34 ;而P53、C MYC和hTERT基因表达与 8 OH dG的含     

DNA修复基因O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在人群肺癌发生中的作用

目的：探讨DNA修复基因O^6－甲基鸟嘌呤－DNA甲基转移酶（O^6-methylguanine-DNA methyltransferase,hMGMT)在人群肺癌发生中的作用。方法：用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测150例肺癌组织、40例正常肺组织、50例对肺癌例和对照外周血单个核细胞中hMGMT基因mRNA的表达；用免疫组化检测p53、C－MYC、K－RAS基因表达，并分析有关暴露因素对修复基因hMGMT表达的影响，以及hMGMT基因与p53、C－MYC、K－RAS等癌变相关基因的关系。结果：32．7％（49／150）的肺癌组织和5．0％（2／40）的正常肺组织存在hMGMT基因表达低下，hMGMT基因表达低下与肺癌发生的危险度OR值为9．22（2．05－57．65），20．0％（10／50）的肺癌病人外周血和4％（2／50）的正常人外周单个核细胞细胞也可检出hMGMT基因表达低下，探讨影响hMGMT基因表达的各种暴露因素，发现吸烟可抑制hMGMT基因表达，另外发现，K－RAS癌基因的过度表达与hMGMT表达低下有关（P＜0．05）；而p53、C－MYC基因的表达与hMGMT无关。结论：DNA修复hMGMT在肺癌发生中起着重要的作用，其表达低下是人群发生肺癌的危险因素之一，该基因的低表达可作为有价值的肺癌易感性标志。     

修复基因hMSH2在肺癌发生中的作用

目的探讨错配修复基因hMSH2在人群肺癌发病中的作用.方法 RT-PCR技术检测细胞中hMSH2基因的mRNA表达;用免疫组化检测基因的蛋白表达.结果 32.0%(48/150)的肺癌组织和5.0%(2/40)的正常肺组织存在hMSH2基因表达低下,修复基因hMSH2表达低下与肺癌发生有关联,OR值为8.94(1.99,55.94),P＜0.01,估计其人群归因危险度PAR%为7.71%.16.0%(8/50)的肺癌病人外周血和2.0%(1/50)的正常人外周血单个核细胞也可检出hMSH2基因表达低下.分析各种暴露因素和临床特征对hMSH2基因表达的影响,未发现与该基因表达相关的因素.但发现,p53突变蛋白的过度表达与hMSH2表达低下有一定的关联(P＜0.05).结论 DNA修复基因hMSH2在肺癌发病中起着重要的作用,该基因表达低下可作为有价值的肺癌易感性标志.     

ERCC1,p53和bcl-2表达与晚期非小细胞肺癌铂类化疗疗效的关系

目的研究核苷酸切除修复交叉互补基因1(ERCC1),抑癌基因p53(p53)和B细胞淋巴瘤因子2(bcl-2)基因的表达水平与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者铂类化疗疗效的关系。方法收集晚期NSCLC患者的肿瘤组织并制备组织芯片,进行ERCC1,p53和bcl-2基因的免疫组织化学染色,检测其在NSCLC组织中的表达情况;同时采集患者外周血检测其血清中ERCC1,p53和bcl-2蛋白的表达情况。根据RECIST肿瘤化疗疗效的评价标准评价患者的疗效,分析影响NSCLC患者铂类化疗疗效的因素及3种基因的表达情况和疗效的关系。结果 ERCC1阴性表达和阳性表达时的化疗有效率分别为55.81%和25.58%(P<0.01);bcl-2阴性表达和阳性表达时的化疗有效率分别为45.28%和25%(P<0.05);p53阴性表达和阳性表达时的化疗有效率分别为53.85%和29.79%(P<0.05)。以ERCC1阴性,同时bcl-2阴性和p53阳性表达的患者人数为最多,与其他各组相比差异有统计学意义(P<0.05),而其他各组人数差异无统计学意义(P>0.05);以ERCC1阴性表达同时bcl-2阳性表达和p53阴性表达的患者采用铂类化疗的有效率为最高,与其他情况相比差异有统计学意义(P<0.05);而ERCC1,bcl-2和p53基因均为阳性表达时的化疗有效率最差,与其他情况相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论 ERCC1,p53和bcl-2基因的表达水平可以作为预测NSCLC患者铂类化疗疗效和预后的指标。     

反式二羟环氧苯并(a)芘-DNA加合物在肺癌发病中的作用

[目的]反式二羟环氧苯并 (a)芘 (BPDE)为苯并 (a)芘在体内的代谢产物 ,是一种直接的致癌物 ,可攻击DNA形成BPDE_DNA加合物 ,本研究目的为探明该加合物在人群肺癌发生中的作用及其分子机制。[方法]使用针对BPDE_DNA加合物的单克隆抗体 ,通过免疫学方法检测150例肺癌、120例癌旁肺组织、40例肺良性病变和40例正常肺组织中BPDE_DNA加合物的含量 ,同时检测相应肺组织中P53、C_MYC、K_ras、BCL_2、hTERT等癌变相关基因的表达 ,分析BPDE_DNA加合物与上述基因的关系。并在BPDE诱导的体外人气管上皮细胞癌变模型上检测癌变过程中BPDE_DNA加合物的变化。[结果]82.0 % (123/150)的肺癌组织 ,37.5 % (45/120)的癌旁肺组织 ,15.0% (6/40)的肺良性病变和2.5% (1/40)的正常肺组织可检出BPDE_DNA加合物 ,肺癌组织中加合物的含量显著高于其他肺组织 ,P<0.01。分层分析发现男性肺癌病例加合物检出率为89.9% (107/119)高于女性的检出率51.6 % (16/31) ,P<0.05。有吸烟史的肺癌患者加合物检出率为99.1% (113/114)高于非吸烟肺癌患者的27.8% (10/36),P<0.01。肺癌组织P53、K_ras、BCL_2基因的阳性表达与BPDE_DNA加合物有关联 ,而C_MYC、hTERT基因的表达与BPDE_DNA加合物无关联。在体外用BPDE作用于人气管上皮细胞系 ,可诱导     

DNA修复基因在基于铂类药物化疗的非小细胞肺鳞癌患者中的预后价值

目的了解DNA修复基因在接受以铂类药物为基础化疗的非小细胞肺癌(NSCLC)患者中不同病理类型的预后价值。 方法应用免疫组织化学技术检测121例NSCLC铂类药物化疗患者石蜡包埋病灶组织中多聚ADP-核糖聚合酶基因1(PARP1),切除修复交叉互补基因1(ERCC1),错配修复同源型2基因(MSH2),乳腺癌易感基因1(BRCA1)表达状态。分析NSCLC患者DNA修复基因的表达与临床病理特征之间的关系。并通过生存分析判断DNA修复基因的表达在不同病理类型中NSCLC化疗患者中的预后价值及是否为独立的预后指标。 结果ERCC1、PARP1、BRCA1、MSH2在非小细胞肺癌的表达均未显示与患者的性别、年龄、吸烟指数、临床TNM分期的相关性(P均>0.05)。在NSCLC腺癌组中ERCC1、PARP1、BRCA1、MSH2均不是判断预后的独立因素(P均>0.05)。鳞癌组中ERCC1、PARP1是预后判断独立因素(P=0.019,0.031)。 结论ERCC1、PARP1是基于铂类药物化疗的非小细胞肺鳞癌患者独立的预后指标。     

非小细胞肺癌组织中ERCC1和K-ras的表达及意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中核苷酸切除修复交叉互补基因1 (ERCC1)和原癌基因Kirsten-Rous肉瘤病毒(K-ras)的表达及意义。方法选取2017年1月至2018年1月本院收治的78例非小细胞肺癌患者为研究对象,于患者手术时采集癌组织标本和癌旁正常组织标本,采用免疫组化法检测患者的癌组织、癌旁正常组织中ERCC1和K-ras表达情况,分析ERCC1、K-ras与非小细胞肺癌患者临床病理特征的关系。对患者进行术后随访观察,比较ERCC1、K-ras阳性表达和阴性表达患者预后差异。结果癌组织中ERCC1、K-ras阳性表达率均高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(均P0.05)。ERCC1、K-ras阳性表达情况与患者的病理分型、TNM分期有关,差异均有统计学意义(均P0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,ERCC1、K-ras阳性表达患者的中位生存期均明显短于ERCC1、K-ras阴性表达患者;ERCC1、K-ras阳性表达患者3年生存率均低于ERCC1、K-ras阴性表达患者,差异均有统计学意义(均P0.05)。多因素Cox回归分析显示,ERCC1、K-ras阳性表达、病理分型为腺癌、TNM分期为Ⅲ期是影响非小细胞肺癌患者预后的危险因素(均P0.05)。结论非小细胞肺癌组织中ERCC1、K-ras阳性表达率较高,与癌症的发生、发展及预后有着密切的关系,可用于预后评估。     

ERCC1蛋白表达及对草酸铂细胞毒作用影响

目的建立表达核苷酸切除修复交叉互补集团1（ERCC1）蛋白细胞系，评价ERCC1表达对草酸铂细胞毒作用的影响。方法由人肠癌肿瘤组织提取RNA，合成cDNA，扩增ERCC1基因片段，Gateway定向克隆技术转染UV20细胞后，细胞抑制率测定（SRB）评价草酸铂的细胞毒作用。结果获得转染成功的UV20-ERCC1细胞，West，emblot证实ERCC1的表达，细胞抑制率测定（SRB）分析表明，ERCC1表达水平增加与草酸铂敏感性降低密切相关。结论Gateway可成功构建包含ERCCl基因的表达载体，转染细胞后，提供体外研究ERCC1基因功能平台。草酸铂细胞毒作用与ERCC1基因表达水平具有一定关联。     

ERCC1与TS在非小细胞肺癌中的表达及与铂类化疗敏感性的关系

目的 通过对非小细胞肺癌(NSCLC)组织与癌旁组织中切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、胸苷酸合成酶(TS)的检测,探讨其表达与NSCLC临床特征及预后的关系,为NSCLC个体化治疗提供实验依据.方法 采用免疫组化方法检测50例NSCLC患者术后癌组织和癌旁组织标本中ERCC1、TS蛋白的表达水平,探讨ERCC1、TS的表达与NSCLC患者总生存期(OS)、疾病进展时间(TTP)及中位OS、中位TTP之间的关系.结果 (1)ERCC1、TS在NSCLC患者癌组织与癌旁组织中的阳性表达率比较,差异具有统计学意义(64.00％ vs 20.00％,x2=19.87,P＜0.01;48.00％ vs24.00％,x2=6.25,P＜0.05).(2)接受术后铂类方案化疗并随访,ERCC1阴性表达者中位OS明显长于阳性表达者(19.10个月vs 10.00个月,x2=8.133,P=0.002),中位TTP亦明显长于阳性表达者(15.30个月vs 9.00个月,x2=7.410,P=0.003).TS阴性表达者的中位OS(17.80个月vs11.00个月,x2=7.001,P=0.008)、中位TTP(11.40个月vs 6.80个月,x2=5.884,P=0.026)均明显长于TS阳性表达者.结论 ERCC1、TS蛋白可能成为NSCLC患者对铂类药物敏感性的预测因子;二者联合检测有助于NSCLC患者个体化治疗方案的选择.     

ERCC1反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力

目的 探讨核苷酸切除修复基因ERCCl在肺癌细胞修复苯并(a)芘所致DNA损伤中的作用。方法 构建表达ERCCl反义RNA的重组质粒,Lipofectin转染肺癌A549细胞,潮霉素筛选出稳定转染的细胞克隆;噻唑蓝法检测24h细胞生存力;Northern Blot分析细胞ERCCl基因mRNA表达水平;单细胞凝胶电泳技术检测DNA损伤程度,每组计算50个细胞损伤情况。结果 筛选出表达ERCCl反义RNA的7个阳性克隆,其生长特性与亲本细胞差别无显著性;内源性mRNA表达水平不同程度降低,为亲本细胞的12％-86％;DNA损伤修复速度减慢,10μmol/L苯并(a)芘作用24h后再孵育24h,修复程度为亲本细胞的29％-71％;相关分析表明DNA损伤修复程度与ERCClmRNA水平显著相关。结论 ERCCl反义RNA降低肺癌细胞对苯并(a)芘所致DNA损伤的修复能力。     

XRCC3 and XPD/ERCC2 single nucleotide polymorphisms and the risk of cancer: a HuGE review

Hundreds of polymorphisms in DNA repair genes have been identified; however, for many of these polymorphisms, the impact on repair phenotype and cancer susceptibility remains uncertain. In this review, the authors focused on the x-ray repair cross-complementing protein group 3 (XRCC3) and xeroderma pigmentosum group D (XPD)/excision repair cross-complementing rodent repair deficiency (ERCC2) genes, because they are among the most extensively studied but no final conclusion has yet been drawn about their role in cancer occurrence. XRCC3 participates in DNA double-strand break/recombinational repair through homologous recombination to maintain chromosome stability. XPD/ERCC2 is a helicase involved in the nucleotide excision repair pathway, which recognizes and repairs many structurally unrelated lesions, such as bulky adducts and thymidine dimers. The authors identified a sufficient number of epidemiologic studies on cancer to perform meta-analyses for XPD/ERCC2 variants in codons 156, 312, and 751 and XRCC3 variants in codon 241. The authors evaluated all cancer sites to investigate whether DNA repair is likely to take place in a rather nonspecific manner for different carcinogens and different cancers. For the most part, the authors found no association between these genes and the cancer sites investigated, except for some statistically significant associations between XPD/ERCC2 single nucleotide polymorphisms and skin, breast, and lung cancers.     

ERCC1与恶性肿瘤化疗疗效及预后的最新进展

核苷酸切除修复交叉互补组1（ERCC1）是核苷酸切除修复途径的限速酶,ERCC表达与多种恶性肿瘤的化疗疗效及预后相关联,ERCC1单核苷酸多态性与肿瘤患者对化疗药物的敏感程度和预后有关,有助于预测化疗反应性。     

核苷酸切除修复基因表达水平与肺癌易感性的关系

[目的]探讨核苷酸切除修复基因表达水平与肺癌易感性关系。[方法]采用病例一对照分子流行病学方法，以RT-PCR技术检测98例原发性肺癌患者和112名健康者外周血淋巴细胞核苷酸切除修复基因(XPB、XPC、XPG、ERCCl)表达水平，比较基因表达水平与肺癌易感性的关系。[结果]肺癌病例组4种基因的表达水平均低于健康对照组，其中XPB和XPC表达水平在两组之间有显著性差异，吸烟人群中病例与对照组基因表达水平差异大于非吸烟人群与对照组的差异，低表达XPB和XPC的人群患肺癌的相对危险度分别是高表达人群的2．06和2．27倍。[结论]低表达XPB和XPC的人群肺癌发病风险增高。     

CYP2E1基因多态性和DNA损伤修复酶表达对肺癌易感性的影响

[目的]研究CYP2E1基因型与不同肺组织中切除修复鼠缺陷交叉互补基因2蛋白(ERCC2)、尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)、细胞增殖核抗原(PCNA)的表达水平的关系，探讨CYP2E1基因多态性对DNA稳定性和肺癌易感性的影响。[方法]通过免疫组织化学和原位杂交方法研究3种生物标志物在不同肺组织中蛋白质和mRNA的表达水平，同时采用PER-RFLP方法进行CYP2E1分型。[结果]在3种CYP2E1基因型(ww、mw、mm)中，ww和mm基因型对ERCC2的表达有明显影响，mw基因型对UDG的表达有明显影响，3种基因型均与PCNA的表达有关。交互分析结果显示CYP2E1多态性与UDG的表达存在交互作用。[结论]不同个体CYP2E1遗传多态性与DNA切除修复功能有关，并存在CYP2E1与UDG的交互作用，两者在肺癌易感性中均具有一定的作用。     

Arsenic exposure is associated with decreased DNA repair in vitro and in individuals exposed to drinking water arsenic

The mechanism(s) by which arsenic exposure contributes to human cancer risk is unknown ; however, several indirect cocarcinogenesis mechanisms have been proposed. Many studies support the role of As in altering one or more DNA repair processes. In the present study we used individual-level exposure data and biologic samples to investigate the effects of As exposure on nucleotide excision repair in two study populations, focusing on the excision repair cross-complement 1 (ERCC1) component. We measured drinking water, urinary, or toenail As levels and obtained cryopreserved lymphocytes of a subset of individuals enrolled in epidemiologic studies in New Hampshire (USA) and Sonora (Mexico). Additionally, in corroborative laboratory studies, we examined the effects of As on DNA repair in a cultured human cell model. Arsenic exposure was associated with decreased expression of ERCC1 in isolated lymphocytes at the mRNA and protein levels. In addition, lymphocytes from As-exposed individuals showed higher levels of DNA damage, as measured by a comet assay, both at baseline and after a 2-acetoxyacetylaminofluorene (2-AAAF) challenge. In support of the in vivo data, As exposure decreased ERCC1 mRNA expression and enhanced levels of DNA damage after a 2-AAAF challenge in cell culture. These data provide further evidence to support the ability of As to inhibit the DNA repair machinery, which is likely to enhance the genotoxicity and mutagenicity of other directly genotoxic compounds, as part of a cocarcinogenic mechanism of action.