一氧化氮吸入对急性高浓度氧肺损伤新生大鼠肺水通道蛋白1和5表达的影响

目的：观察一氧化氮(NO)吸入对急性高浓度氧肺损伤新生大鼠肺上皮水转运体系的影响。方法：32只新生SD大鼠，随机分为：(1)空气组(C)：予空气48 h；（2）高浓度氧组(O)：予高浓度氧持续吸入48 h，维持FiO₂＞0.95；(3)高浓度氧+NO组(ONO)：予高浓度氧持续吸入48 h，维持FiO₂＞0．95，前24 h同时予1×10-5NO吸入；（4）空气 + NO组(CN)： 予空气48 h，前24 h同时予1×10^-5NO吸入。各组分别测肺组织湿重/干重比值(Q_W/Q_D)，行肺组织病理学检查，用RT-PCR方法测定肺组织AQP1、AQP5、α₁-NKA和α-ENaC mRNA含量。结果： 高浓度氧组肺湿重/干重比值明显高于正常对照组(5.81±1.01 vs 4.33±0.94，P<0.01)；而肺组织AQP1 mRNA含量明显低于正常对照组(0.68±0.38 vs 1.81±0.76， P<0.01)，AQP5mRNA含量无明显变化。1×10^-5 NO+高浓度氧组肺组织湿重/干重比值明显高于高浓度氧组(4.89±0.68 vs 5.81±1.01， P<0.05)；而肺组织AQP1 mRNA含量明显高于高浓度氧组(1.27±0.54 vs 0.68±0.38，P<0.05)，AQP5mRNA含量无明显变化。结论：1×10^-5NO吸入24 h能减轻急性高浓度氧肺损伤新生大鼠的肺水肿，提高肺内水通道蛋白1mRNA含量，水通道蛋白5的mRNA含量无明显改变，提示1×10^-5NO的吸入可能对急性高浓度氧肺损伤新生大鼠肺内水通道蛋白1有一定的保护作用。     

心力衰竭大鼠β3-肾上腺素能受体兴奋对室颤阈值和心室有效不应期的影响

目的: 观察实验性心力衰竭大鼠左心室β₃-肾上腺素能受体(AR)表达水平的变化及β₃-AR激动时对心脏室颤阈值（VFT）和心室有效不应期（ERP）的影响。方法: 雄性成年Wistar大鼠16只，随机分为心力衰竭组（n=8）及对照组（n=8）。结扎大鼠冠状动脉前降支致心肌梗死建立心力衰竭模型；使用RT-PCR法检测左心室β₃-AR mRNA的表达；观察使用β₃-AR激动剂BRL37344对VFT、ERP和LVESP、+dp/dtmax、-dp/dtmax的影响。结果： ①与对照组相比，心力衰竭大鼠左心室β₃-AR mRNA表达量(β₃/β-actin的比值) 增加（0.011 vs 0.028, P<0.05），所占比例(β₃/β₁+β₂+β₃) 增加（1.2% vs 5.4%, P<0.05）；②心力衰竭大鼠VERP较正常对照组VERP明显延长(70.5 ms±5.5 ms vs 59.5 ms±6.4 ms，P<0.05)；静注BRL37344后，心力衰竭大鼠VERP稍延长，但对比用药前VERP无显著差异(73.0 ms±4.8 ms vs 70.5 ms±5.5 ms，P>0.05)；③心力衰竭大鼠VFT较正常对照组VFT显著降低(10.9 mV±0.8 mV vs 30.5 mV±1.3 mV，P<0.05)；静注BRL37344后，心力衰竭大鼠VFT相比用药前亦显著降低(7.1 mV±0.6 mV vs 10.9 mV±0.8 mV，P<0.05)； BRL37344降低VFT的作用与BRL37344对LVESP、+dp/dtmax、-dp/dtmax及β₃-AR mRNA表达量的改变密切相关，相关系数分别为0.788、0.708、0.759、0.787(P<0.05)。结论： 心力衰竭大鼠左心室β₃-AR mRNA表达明显增高，β₃-AR激动时不影响衰竭大鼠心室ERP，但明显降低衰竭大鼠心脏VFT，其降低VFT作用与β₃-AR的负性肌力作用及β3-AR mRNA表达量的改变密切相关。     

Smad2/3信号蛋白在大鼠梗阻性肾病肾组织中的表达

目的:探讨Smad2/3信号蛋白在大鼠梗阻性肾病模型肾组织中的表达及可能作用。 方法:采用单侧输尿管结扎（UUO）模型，分别于造模后1、3、7、14、21和28 d取肾组织，用免疫组化法检测TGFβ₁、磷酸化Smad2/3和α-SMA在梗阻肾肾组织中的表达；用原位杂交方法检测梗阻肾组织TGFβ₁ mRNA的表达。结果:正常大鼠肾组织具有基础的TGFβ₁(4.32%±1.72%)和磷酸化Smad2/3［(19.31±5.37）个/mm2］的表达，α-SMA只表达于血管平滑肌，肾小管-间质无表达。UUO术后1 d，TGFβ1的表达无明显增加(5.15%±2.08% vs对照组，P>0.05)，第3 d明显增加(13.55%±6.33% vs 对照组，P<0.01)，第7 d达高峰(26.78%±8.77% vs 对照组，P<0.01)，此后表达减少；磷酸化Smad2/3的表达在UUO术后3 d明显增加［(67.95±13.87）个/mm2 vs 对照组，P<0.01］，并持续增加到第7 d［（150.61±27.34）个/mm² vs 对照组，P<0.01］，此后表达减少；而UUO术后3 d肾组织α-SMA表达亦明显升高（5.58％±1.23％ vs 对照组，P<0.01），7 d达到高峰（13.43％±3.32％ vs 对照组，P<0.01），14 d表达开始下调；UUO术后肾间质细胞外基质的沉积随着疾病的进展而进行性增加，第28 d达到最高峰。梗阻肾肾组织中TGFβ₁、磷酸化Smad2/3以及α-SMA的表达时相一致并呈明显正相关（r₁=0.932, P<0.01；r₂=0.946, P<0.01），并与肾间质区域细胞外基质的积聚密切相关。 结论:磷酸化Smad2/3信号蛋白在大鼠梗阻性肾病肾组织中的表达明显增高，可能在肾间质纤维化的过程中起重要作用。     

内外源性结缔组织生长因子对肾小管上皮细胞胶原合成的比较研究

目的：探讨内外源性结缔组织生长因子（CTGF）对人肾小管上皮细胞（HK2）胶原合成的作用。方法：将HK2细胞分为5组：（1）对照组；（2）TGF-β₁ 5 μg/L刺激组；（3）CTGF 5 μg/L刺激组；（4）TGF-β₁ 5 μg/L刺激＋CTGF反义ODN 3 mmol/L干预组；（5）TGF-β₁ 5 μg/L刺激＋CTGF正义ODN 3 mmol/L干预组。采用 RT-PCR 和Western blotting检测胶原Iα₁（Col Iα₁）、胶原IVα₁（Col IVα₁） mRNA水平和蛋白水平表达。 结果：TGF-β₁刺激可使HK2细胞Col Iα₁、Col IVα₁ mRNA和蛋白表达显著升高，而CTGF刺激则无此作用，CTGF反义ODN可拮抗TGF-β₁刺激引起Col Iα₁、Col IVα₁ mRNA和蛋白表达升高，正义ODN无拮抗作用。 结论：内源性CTGF介导了TGF-β₁刺激引起的HK2细胞胶原合成，外源性CTGF对HK2细胞胶原合成无影响。     

［Ca2+］i对大鼠肺动脉平滑肌细胞膜钙激活氯离子通道的调节作用

目的： 探讨细胞浆内游离钙离子浓度（［Ca²⁺］_i）在常氧、急性和慢性低氧条件下对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜钙激活氯离子通道（Cl_Ca）的调节作用。 方法: 常规离体血管灌流法检测急性低氧时肺动脉环张力变化；钙荧光探针(Fura-2/AM)负载培养PASMCs，观察常氧和慢性低氧条件下［Ca²⁺］_i的变化并由此对Cl_Ca的影响；同时用四唑盐(MTT)比色法观察当［Ca²⁺］_i变化时Cl_Ca对PASMCs增殖的影响。 结果: (1) Cl_Ca阻断剂尼氟灭酸（NFA）和indaryloxyacetic acid (IAA-94)可以舒张急性低氧引起的肺动脉环收缩。(2) 慢性低氧时［Ca²⁺］_i升高：常氧状态下, PASMCs ［Ca²⁺］_i为(123.63±18.98)nmol/L，低氧时为(281.75±16.48)nmol/L (P<0.01)。(3) 常氧时，NFA和IAA-94对［Ca²⁺］_i 无明显影响(P>0.05)。(4) 慢性低氧时, NFA和IAA-94使PASMCs ［Ca²⁺］_i由(281.75±16.48)nmol/L降低到(117.66±15.36)nmol/L (P<0.01)。(5)MTT比色法中，慢性低氧状态下NFA和IAA-94引起升高的吸光度(A)值降低，由0.459±0.058到0.224±0.025 (P<0.01)。 结论: 低氧引起［Ca²⁺］_i升高，这可能激活Cl_Ca，对［Ca²⁺］_i起正反馈作用，Cl_Ca可能在低氧肺动脉高压中起作用；慢性低氧条件下Cl_Ca可能参与促进大鼠PASMCs的增殖。     

大豆异黄酮对I型糖尿病甲基乙二醛水平及白内障并发症的影响

目的：甲基乙二醛（MG）是糖代谢产生的毒性副产物,本研究旨在探讨大豆异黄酮是否通过降低MG的产生而发挥对I型糖尿病的防治作用。方法：链脲佐菌素诱导I型糖尿病大鼠模型,给予含不同剂量大豆异黄酮的大鼠饲料喂养,按大豆异黄酮不同剂量随机分为3组：大豆异黄酮低剂量组（diabetes+LIS）,大豆异黄酮高剂量组（diabetes+HIS）及模型组（diabetes）。治疗8周后处死大鼠,留取血清测定血糖、糖化血红蛋白、还原型谷胱甘肽（GSH）、胰岛素水平,HPLC法测定血清MG水平,免疫组化法检测胰岛β细胞胰岛素表达情况。结果：与模型组或diabetes+LIS组大鼠比较,HIS组大鼠血清胰岛素水平明显上升［(2.46±0.35)μg/L vs (0.55±0.04)μg/L or (0.39±0.04) μg/L, 均P<0.01］,血糖明显下降［(19.50±1.85)mol/L vs (28.24±3.56) mol/L or (26.94±1.82) mmol/L, 均P<0.05］、糖化血红蛋白减低［（13.14±3.00)% vs (17.16±2.60)% or (17.29±4.12)%, 均P<0.05］,血清MG明显降低 ［(0.77±0.09)nmol/L vs (1.57±0.17)nmol/L or (1.91±0.28)nmol/L,均P<0.05］,而血清GSH 水平明显增加［(13.26±1.61)mmol/L vs (7.35±1.55)mmol/L or (5.54±1.10) mmol/L, 均P<0.01］,diabetes+HIS 组大鼠胰岛β细胞中胰岛素表达水平也明显增加。Diabetes+HIS 组大鼠白内障的发生率明显低于模型组（P<0.05）。模型组与diabetes+LIS组比较,上述指标均无显著差异。结论：大豆异黄酮对I型糖尿病具有治疗作用,并能降低I型糖尿病大鼠白内障的发生率,其机制可能与胰岛素水平增加、MG水平降低及抗氧化作用有关。     

rhTGF-β1及转染TGF-β1基因对兔角膜内皮细胞增殖的影响

目的： 探讨不同浓度的重组人转化生长因子-β₁(rhTGF-β₁)及TGF-β₁基因转染对体外培养兔角膜内皮细胞增殖的影响。方法: 用MTT法检测不同浓度rhTGF-β₁作用下角膜内皮细胞的增殖。用脂质体介导转染方法，将TGF-β₁基因转移入培养的兔角膜内皮细胞，HE染色法观察细胞组织形态学变化；ELISA法检测转染细胞培养上清中TGF-β₁表达量；流式细胞仪检测细胞生长周期变化；DNA电泳法检测转染细胞凋亡情况。结果: MTT检测示5-20 μg/L rhTGF-β1抑制角膜内皮细胞增殖；0.5-1 μg/L组对增殖无影响；0.05~0.1 μg/L组促进细胞增殖。TGF-β₁基因转染细胞形态无明显异常，细胞培养上清中TGF-β₁的浓度约为(98±3)ng/L。流式细胞仪检测示，基因转染组S期和G₂/M期细胞比例减少、PI值降低，但加入EGF后细胞生长基本正常。DNA电泳检测示基因转染组未见凋亡带。结论: rhTGF-β₁对角膜内皮细胞增殖的影响具有剂量依赖性；TGF-β₁基因转染影响角膜内皮细胞增殖、但不诱发凋亡，其抑制作用可被外源性EGF拮抗。     

TGF-β1 对肌成纤维细胞MMP-2激活的影响

目的：观察转化生长因子β1(TGF-β1)对鼠肌成纤维细胞（C2C12细胞）分泌基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其激活的影响,探讨其内在机制。 方法：用不同浓度的TGF-β1（0、1、5、10 μg/L）干预C2C12细胞24 h,200 pmol/L Smad3基因短干扰RNA（siRNA-Smad3）转染C2C12细胞24 h,用ELISA 方法测定MMP-2及其活性型MMP-2。结果：(1) 0、1、5、10 μg/L TGF-β1干预C2C12细胞24 h,ELISA检测总MMP-2的结果（μg/L）分别为177±20、180±15、171±18、179±28,方差分析无显著差异(P>0.05);活性型MMP-2分别为23.09±4.37、14.42±2.30、9.50±1.18、4.48±0.69,比较差异显著(P<0.01)。(2) 5 μg/L TGF-β1干预C2C12细胞4 h、12 h和24 h,总MMP-2 ELISA值分别为160±16(对照组)/157±17（干预组）、174±6/174±16、187±12/189±18, 不同时点干预组总MMP-2 值比较无差异,P>0.05;活性型MMP-2 值分别为：16.92±1.26(对照组) /16.53±2.56（干预组）、22.70±3.03/8.00±2.02、23.15±2.66/9.39±2.60,干预组活性型MMP-2值比较有差异,P<0.01。（3）200 pmol/L siRNA-Smad3转染C2C12细胞24 h,再用5 μg/L TGF-β1干预C2C12细胞24 h, 活性型MMP-2值分别是20.80±1.53（siRNA-control,空白对照组)、9.82±2.18（siRNA-control+5 μg/L TGF-β1,内对照组）、20.09±2.27（siRNA-Smad3+5 μg/L TGF-β1,实验组）;实验组和内对照组比较差异显著（P<0.01),实验组和空白对照组比较无显著差异（P>0.05)。结论：TGF-β1并不影响C2C12细胞分泌MMP2,但显著抑制MMP-2的活化;siRNA-Smad3阻断Smad3信号转导可以消除TGF-β1对MMP-2活化的抑制作用。     

COX-2抑制剂通过非COX依赖性途径对抗心肌氧化损伤

目的： 研究环加氧酶2（COX-2）抑制剂尼美舒利和COX-1抑制剂比罗昔康在对抗心肌氧化应激损伤中的作用及其机制。方法: 离体大鼠心脏行Langendorff灌流，分别给予H₂O₂、pyrogallol（可产生超氧阴离子）或Vit C+Fe2+（可产生羟自由基），观察心脏收缩功能、心肌LDH和MDA含量。心肌COX的活性用PGI₂的稳定产物6-Keto-PGF_1α的含量表示。结果: 尼美舒利（3 mg/kg）可明显减轻H₂O₂引起的收缩功能下降（10 min 应激时LVDP为72%±10% vs 61%±11%，P<0.05），减少LDH释放［（5.5±2.5）U/L vs （8.0±2.1）U/L，P<0.05）］。而比罗昔康（3 mg/kg）虽然能抑制H2O2应激时LVDP的下降（73%±10% vs 61%±11%，P<0.05），却加重LVEDP的上抬［（29.00±5.61）mmHg vs（23.16±3.57） mmHg，P<0.01］。尼美舒利亦能减轻超氧阴离子和羟自由基引起的心肌损伤作用。尼美舒利和比罗昔康预处理对H₂O₂应激心肌6-Keto-PGF_1α含量无明显影响。线粒体ATP敏感性钾通道（mitochondrial ATP sensitive potassium channel，mitoK_ATP）的阻断剂5-HD可取消尼美舒利减轻H₂O₂引起的LVDP和±dp/dt_max降低作用（分别为53%±12% vs 69%±3%、58%±11% vs 72%±7%和37%±8% vs 51%±4%，P<0.01）。结论: COX-2抑制剂尼美舒利可以对抗心肌氧化损伤，其机制通过非COX依赖性途径发挥作用，而mitoK_ATP可能参与尼美舒利的保护作用。     

羟胺对慢性低氧高二氧化碳大鼠肺动脉高压的影响

目的: 探讨羟胺(HA)对慢性低氧(O₂)高二氧化碳(CO₂)大鼠肺动脉压的影响。方法: 24只清洁级雄性SD大鼠随机分为3组(每组8只):正常对照组(NC)、低O₂高CO₂+生理盐水组(NS)和低O₂高CO₂+HA组(HA),NS组和HA组置于常压低O₂高CO₂舱内(舱内O₂浓度维持在9%-11%,CO₂浓度为5%-6%),每天8 h,每周6 d,共4周。入舱前,HA组腹腔注射HA溶液(12.5 mg/kg)1 mL,NS组腹腔注射1 mL生理盐水。4周后,戊巴比妥钠(35 mg/kg)腹腔注射麻醉,以右心导管测定大鼠肺动脉平均压(mPAP),分离右心室(RV) 和左心室加室间隔(LV+ S),计算右心室重量与左心室加室间隔重量的比值 ,以光学显微镜观测肺血管结构变化,用分光光度计测定血浆中硫化氢(H₂S)的水平,用免疫组织化学方法及RT-PCR技术观察肺小动脉及支气管胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的表达。结果: (1)与NC组相比:NS组和HA组的mPAP、RV/(LV+S)、肺细小动脉管壁面积/管总面积比值(WA/TA) 和肺细小动脉中膜厚度(PAMT)明显升高(P<0.05);NS组的血浆中H₂S水平、肺小动脉及支气管CSE的含量和CSE mRNA的表达显著降低(P<0.05)。(2)与NS组相比:HA组的mPAP、RV/(LV+S)、肺小动脉管壁面积/管总面积比值(WA/TA) 和肺小动脉中膜厚度(PAMT)明显降低(P<0.05);血浆中H₂S水平、肺小动脉及支气管CSE的含量和CSE mRNA的表达显著升高(P<0.05)。结论: 羟胺通过提高血浆中H₂S的水平、肺小动脉及支气管CSE的含量和CSE mRNA的表达和改善肺部血管重构,降低慢性低O₂和高CO₂所致的大鼠肺动脉高压。     

间歇缺氧对血管性痴呆大鼠认知能力的影响及其可能机制

目的： 研究间歇缺氧（IH）对血管性痴呆（VD）大鼠认知能力的影响及其可能机制。方法: 48只Wistar大鼠分为假手术组(对照组)、IH组、VD组和VD+IH组。双侧颈总动脉结扎法制备VD模型,4周后,IH组、VD+IH组给予IH处理4周;通过生物化学法检测海马超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）的含量,TUNEL法检测海马神经元凋亡,RT-PCR检测bcl-2和bax mRNA,Y形迷宫测试大鼠学习、记忆能力。结果: 与对照组相比,IH组海马MDA含量增多而SOD活性降低;VD组bcl-2和bax mRNA表达增加;IH组和VD组均出现明显的CA1区神经元凋亡和迷宫测试中大鼠电击次数的增加（P<0.05）。VD+IH组与其它3组相比,海马MDA增多及SOD减少更为明显,bcl-2/bax mRNA比值显著降低,海马CA1区神经元的凋亡比例（32.83%±6.13%）高于IH组（9.91%±3.17%）、VD组（15.28%±3.71%）和对照组（2.03%±1.42%）,迷宫测试中大鼠电击次数增加（P<0.05）。结论: IH通过加重大鼠海马氧化应激损伤,促进VD大鼠海马凋亡相关基因的表达,加重了海马神经元的迟发性死亡和VD大鼠的认知损害。这可能是慢性脑缺血病人伴随睡眠呼吸暂停低通气综合征后,认知损害加剧的重要机制之一。     

舒利迭联合孟鲁司特治疗咳嗽变异性哮喘患者气道炎症的影响分析

目的 探讨舒利迭联合孟鲁司特治疗咳嗽变异性哮喘患者气道炎症的影响.方法 选择2015年3月至2016年3月我院诊治的咳嗽变异性哮喘患者70例作为研究对象.按随机数表法分为观察组和对照组各35例.对照组采用舒利迭进行治疗,观察组在对照组的基础上联合孟鲁司特进行治疗.比较两组患者的症状改善用时情况、肺通气功能、促炎症细胞因子水平、嗜酸性粒细胞(Eosinophil,Eos)及呼出气一氧化氮(Fractional exhaled nitric oxide,FeNO)水平.结果 治疗后,观察组症状缓解和消失用时均短于对照组[(6.05±1.44)d比(7.21±1.52)d,(7.63±1.75)d比(8.74±1.58)d](P<0.05);观察组患者肺通气功能中第1秒用力呼气容积(FEV 1)、第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV 1/pred)、第1秒用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV 1/FVC)及呼气峰流速占预计值百分比(PEF/pred)均高于对照组(P<0.05);观察组的白细胞介素(interleukin,IL)-12高于对照组[(84.26±10.97)ng/L比(68.13±9.82)ng/L](P<0.05),肿瘤坏死因子 α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)及IL-6均低于对照组[(0.65±0.13)ng/L比(0.94±0.16)ng/L,(14.11±3.78)ng/L比(20.43±4.14)ng/L](P<0.05);观察组患者的Eos及FeNO均低于对照组[(2.61±1.75)%比(5.34±2.03)%,(45.68±11.43)ppb比(78.46±18.42)ppb](P<0.05).结论 舒利迭联合孟鲁司特治疗咳嗽变异性哮喘能有效改善患者肺通气功能,缩短治疗时间,缓解患者气道炎症并改善患者的炎症反应状态,效果显著,值得推广.     

整合素α2对神经母细胞瘤细胞粘附于胶原蛋白的调节作用

目的：探讨两价阳离子和针对整合素α2的 特异性阻断性单克隆抗体对神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞粘附于胶原蛋白（Col）的影响，探讨整合素α2β1对该细胞粘附反应的调节作用。方法:将含有不同M g2+、Ca2+浓度和有或无抗α2单克隆抗体6F1的SK-N-SH细胞混悬液。加入96孔 平底非细胞培养板，此反应板已包被Ⅰ型大鼠尾Col（4 μg/well），所粘附的细胞用BCA方 法测定，以吸光度（A570）代表粘附细胞的数量。结果:Mg 2+能明显增加SK-N-SH细胞Ⅰ型Col的粘附反应；Mg2+浓度为1 mmol/L时，细胞 粘附的反应已接近高峰,与对照组相比A570分别为0.59±0.03和0.2 5±0.0 1 (P＜0.01），而Ca2+对细胞的粘附无明显影响；抗α2单克隆抗体6F1（10 mL /L）能显著阻断SK-N-SH细胞粘附于胶原蛋白(A=0.27±0.01)，其粘附水平接近无Mg 2+的粘附反应水平（A=0.32±0.01）。 结论:整合素α2介导 SK-N-SH细胞对胶原蛋白粘附反应，提示整合素α2可能参与调节神经母细胞瘤的转移。     

硝基酪氨酸和诱导型一氧化氮合酶在大鼠胎粪吸入性肺损伤中表达的研究

目的：观察大鼠胎粪诱导肺损伤时肺组织硝基化酪氨酸和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的改变，探讨两者在此种损伤中的作用。 方法： 16只雄性SD大鼠，随机分为对照组和胎粪组，分别由气管插管注入生理盐水或20%胎粪生理盐水混悬液1 mL/kg。24 h后取材，观察支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数，比色法检测肺组织匀浆髓过氧化物酶（MPO）活性、一氧化氮（NO）含量，Western blot法测定硝基酪氨酸和iNOS蛋白表达改变。 结果： 胎粪组BALF细胞计数、肺组织MPO活性、NO含量分别为(4.04±1.01)×109cells/L、(1.49±0.22)U/g wet lung tissue、(12.77±5.00)mmol/g protein，对照组BALF细胞计数、肺组织MPO活性、NO含量分别为(0.53±0.19)×109cells/L、(0.62±0.16)U/g wet lung tissue、(4.89±1.32)mmol/g protein，两组比较差异显著（均P<0.01）；Western blot结果显示胎粪组肺组织硝基酪氨酸和iNOS蛋白表达明显强于对照组，分别为0.46±0.19和1.49±0.60，与对照组（0.15±0.04和0.09±0.04）比较, 差异显著（均P<0.01）。 结论： 胎粪可诱导iNOS表达增强并产生过量的硝基酪氨酸，两者可能在胎粪性肺损伤发病机制中发挥重要作用。     

VEGF receptors on PC12 cells mediate transient activation of ERK1/2 and Akt: comparison of nerve growth factor and vascular endothelial growth factor

Background

Soy isoflavones show structural and functional similarities to estradiol. Available data indicate that estradiol and estradiol-like components may interact with gut "satiety hormones" such as peptide YY (PYY) and ghrelin, and thus influence body weight. In a randomized, double-blind, placebo-controlled, cross-over trial with 34 healthy postmenopausal women (59 ± 6 years, BMI: 24.7 ± 2.8 kg/m²), isoflavone-enriched cereal bars (50 mg isoflavones/day; genistein to daidzein ratio 2:1) or non-isoflavone-enriched control bars were consumed for 8 weeks (wash-out period: 8-weeks). Seventeen of the subjects were classified as equol producers. Plasma concentrations of ghrelin and PYY, as well as energy intake and body weight were measured at baseline and after four and eight weeks of each intervention arm.

Results

Body weight increased in both treatment periods (isoflavone: 0.40 ± 0.94 kg, P < 0.001; placebo: 0.66 ± 0.87 kg, P = 0.018), with no significant difference between treatments. No significant differences in energy intake were observed (P = 0.634). PYY significantly increased during isoflavone treatment (51 ± 2 pmol/L vs. 55 ± 2 pmol/L), but not during placebo (52 ± 3 pmol/L vs. 50 ± 2 pmol/L), (P = 0.010 for treatment differences, independent of equol production). Baseline plasma ghrelin was significantly lower in equol producers (110 ± 16 pmol/L) than in equol non-producers (162 ± 17 pmol/L; P = 0.025).

Conclusion

Soy isoflavone supplementation for eight weeks did not significantly reduce energy intake or body weight, even though plasma PYY increased during isoflavone treatment. Ghrelin remained unaffected by isoflavone treatment. A larger and more rigorous appetite experiment might detect smaller differences in energy intake after isoflavone consumption. However, the results of the present study do not indicate that increased PYY has a major role in the regulation of body weight, at least in healthy postmenopausal women.     

腰椎PLF术后空腹血糖变化研究

目的 观察腰椎管狭窄症伴糖尿病患者术后21 d内的血糖变化,以探讨腰椎管狭窄症伴糖尿病患者术后血糖变化规律及影响因素。方法 前瞻性收集开滦总医院自2015年7月~2017年7月腰椎管狭窄症椎板切除减压植骨融合术患者49例,按照前瞻性队列研究,根据患者是否患2型糖尿病分为糖尿病组21例和非糖尿病组28例,空腹静脉采血监测手术前和术后3周内（1 d、3 d、7 d、14 d、21 d）患者空腹血糖变化情况。结果 糖尿病组和非糖尿病组在术后第1天血糖值分别为（12.22±1.35）mmol/L、（5.60±0.29）mmol/L,3 d血糖下降至（11.03±1.27）mmol/L、（5.26±0.29）mmol/L,7~14 d恢复到术前水平,为（7.82±1.08）mmol/L、（4.77±0.31）mmol/L,21 d为（7.04±1.08）mmol/L、（4.67±0.31）mmol/L。两组时间点、组别以及时间点和组别交互作用对血糖的影响均有统计学意义（P＜0.05）。结论 腰椎管狭窄症伴糖尿病患者,术后空腹血糖波动较大,手术的应激和患者本身运动消耗等原因是造成血糖波动的主要原因。     

Impact of continuous veno-venous hemofiltration on acid-base balance

BACKGROUND: Continuous veno-venous hemofiltration (CVVH) appears to have a significant and variable impact on acid-base balance. However, the pathogenesis of these acid-base effects remains poorly understood. The aim of this study was to understand the nature of acid-base changes in critically ill patients with acute renal failure during continuous veno-venous hemofiltration by applying quantitative methods of biophysical analysis (Stewart-Figge methodology). METHODS: We studied forty patients with ARF receiving CVVH in the intensive care unit. We retrieved the biochemical data from computerized records and conducted quantitative biophysical analysis. We measured serum Na+, K+, Mg2+, Cl-, HCO3-, phosphate, ionized Ca2+, albumin, lactate and arterial blood gases and calculated the following Stewart-Figge variables: Strong Ion Difference apparent (SIDa), Strong Ion Difference Effective (SIDe) and Strong Ion Gap (SIG). RESULTS: Before treatment, patients had mild acidemia (pH: 7.31) secondary to metabolic acidosis (bicarbonate: 19.8 mmol/L and base excess: -5.9 mEq/L). This acidosis was due to increased unmeasured anions (SIG: 12.3 mEq/L), hyperphosphatemia (1.86 mmol/L) and hyperlactatemia (2.08 mmol/L). It was attenuated by the alkalinizing effect of hypoalbuminemia (22.5 g/L). After commencing CVVH, the acidemia was corrected within 24 hours (pH 7.31 vs 7.41, p<0.0001). This correction was associated with a decreased strong ion gap (SIG) (12.3 vs. 8.8 mEq/L, p<0.0001), phosphate concentration (1.86 vs. 1.49 mmol/L, p<0.0001) and serum chloride concentration (102 vs. 98.5 mmol/L, p<0.0001). After 3 days of CVVH, however, patients developed alkalemia (pH: 7.46) secondary to metabolic alkalosis (bicarbonate: 29.8 mmol/L, base excess: 6.7 mEq/L). This alkalemia appeared secondary to a further decrease in SIG to 6.7 mEq/L (p<0.0001) and a further decrease in serum phosphate to 0.77 mmol/L (p<0.0001) in the setting of persistent hypoalbuminemia (21.0 g/L; p=0.56). CONCLUSIONS: CVVH corrects metabolic acidosis in acute renal failure patients through its effect on unmeasured anions, phosphate and chloride. Such correction coupled with the effect of hypoalbuminemia, results in the development of a metabolic alkalosis after 72 hours of treatment.     

Genistein下调肝癌细胞survivin基因表达和诱导细胞凋亡的实验研究

目的： 探讨三磷酸肌醇(IP3)和survivin蛋白表达变化在genistein诱导肝癌细胞凋亡中的作用。 方法： 以肝癌HepG2细胞培养72 h为对照组，实验各组以60 μmol/L的genistein作用于HepG2细胞不同时间后，应用同位素试剂盒检测细胞IP3含量，Western blotting分析细胞survivin蛋白表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率。 结果： 对照组IP3含量为(29.2±0.6) pmol/106cells， survivin蛋白与内参β-actin蛋白灰度和面积之积的比值V-survivin/ V-β-actin为0.63±0.06；细胞凋亡率为（2.6±0.1）%。Genistein作用于肝癌HepG2细胞12 h、24 h、48 h、72 h后IP3分别为（12.0±1.4）pmol/106cells、（7.5±0.8）pmol/106cells、（5.6±0.5）pmol/106cells、（3.3±0.6）pmol/106cells，与对照组(29.2±0.6)pmol/106cells比，P＜0.01。V-survivin/ V-β-actin分别为0.36±0.13、0.33±0.03、0.23±0.04、0.18±0.04，与对照组(0.63±0.06)比，P＜0.01。细胞凋亡率分别为（2.7±0.2）%、（7.4±0.5）%、（20.5±2.0）%、（30.7±1.6）%，与对照组(2.6±0.1)%比，P＜0.01。 结论： Genistein能减少IP3生成，下调survivin基因表达，诱导肝癌细胞凋亡。     

青藤碱对胶原诱导性关节炎小Toll样受体4/髓样分化因子88通路的影响

目的 探讨青藤碱(sinomenine,SN)对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)信号通路诱导炎症的影响.方法 6周龄DBA/1小30只,随机分为正常对照组、CIA组及SN组,每组10只.其中CIA组及SN组小鼠尾根部初次免疫及加强免疫Ⅱ型胶原乳剂诱导CIA模型.小鼠初次免疫d28开始灌胃给药,SN组予SN治疗,正常对照组和CIA组予生理盐水作为对照.连续治疗20 d后处死小鼠,观察药物对小鼠关节肿胀的影响,收集膝关节滑膜及血清.Western blot法检测滑膜TLR4及MyD88蛋白表达,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测血清炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平.结果 经治疗后,SN组小鼠关节肿胀情况较CIA组改善明显,差异有统计学意义[d41(5.50±1.38)比(9.67±2.34),P<0.05;d48(1.67±0.52)比(3.33±1.21),均P<0.05];TLR4、MyD88蛋白表达及血清炎性因子TNF-α均较CIA组下降,差异有统计学意义[TLR4/β-actin:(0.33±0.05)]比(0.62±0.05)];MyD88/β-actin:(0.10±0.02)比(0.33±0.03);TNF-α:(169.16±10.68)比(347.97±13.45),均P<0.05].结论 SN可改善CIA小鼠的关节炎症,该作用可能与其抑制TLR4/MyD88信号通路有关.     

丝瓜降血脂及抗氧化作用的实验研究

目的： 观察丝瓜（LC）多酚的抗氧化作用及丝瓜对实验性高脂血症小鼠的影响。方法: 利用丙酮提取丝瓜多酚类物质，用福林法测定其含量并观察丝瓜多酚粗提液抑制羟自由基生成的能力。用高脂饲料喂养昆明小鼠建立高脂血症模型，以血脂康作为阳性对照观察饲料中补充丝瓜冻干品喂养对小鼠血清胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、超氧化物歧化酶（SOD）及肝组织中丙二醛（MDA）的影响。结果: （1）新鲜丝瓜多酚含量为0.3 g/kg±0.1 g/kg。（2）新鲜丝瓜多酚粗提液具有较强的抑制羟自由基生成的能力。(3)与高脂模型组比较，低剂量丝瓜组、高剂量丝瓜组小鼠体重增加趋势明显减轻。(4)低剂量丝瓜组TC（4.19±0.37）mmol/L和LDL-C（2.77±0.79）mmol/L、高剂量丝瓜组TC（3.56±0.55）mmol/L和LDL（2.34±0.41）mmol/L、血脂康阳性对照组TC（4.59±0.96）mmol/L和LDL-C（3.25±0.67）mmol/L均低于高脂模型组TC(7.20±0.87)mmol/L和LDL-C(4.92±0.52)mmol/L（P＜0.01），其中高剂量丝瓜组TC、LDL-C下降最为明显。(5)低剂量丝瓜组和高剂量丝瓜组小鼠血清SOD分别为（337.00±29.73） U/mL和(349.00±9.99)U/mL，均高于高脂模型组和空白对照组，其中高剂量丝瓜组SOD活性明显高于高脂模型组（P＜0.01）。结论: 丝瓜多酚具有较强的抗氧化作用，丝瓜能明显降低高脂血症小鼠的体重、肝指数及血脂水平。