乙型肝炎携带者卵巢颗粒细胞中HBV DNA的检测

目的 探讨乙型肝炎病毒在女性乙肝携带者卵巢颗粒细胞中的感染情况.方法 6例女性乙肝携带者(HBsAg+、HBeAg+、HBcAb+)的卵泡液提取颗粒细胞,制成涂片.应用特异性的经地高辛标记的乙肝病毒DNA探针,利用原位杂交检测颗粒细胞涂片.显色反应采用碱性磷酸酶系统,阳性信号呈紫蓝色.结果 6例患者的颗粒细胞中有3例检测到HBV DNA阳性信号,位于细胞核.结论 乙型肝炎携带的卵巢颗粒细胞内存在HBV DNA.女性乙型肝炎携带者存在经生殖细胞向子代传播乙型肝炎的可能性.     

HBV在卵巢组织及卵细胞中复制的实验研究

目的:寻找寻找卵细胞感染HBV的直接证据及影响因素。方法:检测卵巢及卵细胞中HBcAg、HBV DNA和HBV mRNA的分布情况。研究血清中HBeAg阳性和HBV DNA水平与HBV感染卵巢及卵细胞的关系。结果:在卵巢颗粒细胞和卵细胞内发现了HBcAg、HBV DNA、HBV mRNA分布。血清HBeAg与否和HBV DNA水平高低与卵巢及卵细胞中HBcAg、HBV DNA、HBV mRNA阳性率无关。结论:HBV可以在卵巢和卵细胞内复制,这意味着被感染的卵细胞一旦受精成功就很有可能将HBV带入胚胎发生垂直传播。血清HBeAg与否和HBV DNA水平与卵巢及卵细胞感染HBV无关。     

乙型肝炎病毒在卵巢组织中的表达、定位及临床意义

目的 通过对乙型肝炎病毒(HBV)感染者卵巢组织中HBsAg、HBcAg和HBV DNA的检测来观察HBV在卵巢组织中表达与定位情况.方法 对26例血清学HBV标志阳性的卵巢肿瘤患者用免疫组化方法检测卵巢活检组织HBsAg、HBcAg的表达;应用PCR技术对免疫组化阳性病例进一步检测卵巢组织HBVDNA.结果 26例卵巢组织中HBsAg阳性9例,HBcAg阳性9例,阳性率均为34.6%.总阳性率为46.2%(12/26);其中HBsAg和HBcAg同时阳性6人,占23.1%.阳性信号呈棕褐色细颗粒状弥漫分布.HBV血清学标志多项阳性者卵巢组织中HBsAg、HBcAg的检出率与HBV血清学标志单项阳性者差异无显著性.12例免疫组化阳性患者检出卵巢HBV DNA的有7例,阳性率为58.3%.结论 HBV感染者卵巢组织中可检出HB-sAg、HBcAg和HBV DNA,卵巢组织中HBsAg、HBcAg受血清HBV的变化影响小,与肝炎病变不呈平行关系.说明HBV可以感染与定位到卵巢组织,卵巢组织中检出HBV丰富和扩充了经典的母婴传播机制.     

慢性肝病,肝癌及癌旁组织的免疫组织化学和组织化学研究

作者应用PAP组织化学法和组织化学染色法,对39例慢性肝病(CLD)、8例肝癌(HCC)和癌旁组织HBsAg、HBcAg表达和分布与CLD病变活动性的关系,以及乙肝病毒(HBV)与HCC发生的关系进行了探讨,并观察了CLD中网状纤维和胶原纤维的改变。发现慢活肝和活动性肝硬变以浆膜HBcAg和胞膜HBsAg表达为主,与活动性病变关系密切,观察到网状纤维较早出现于碎屑状坏死区。同时发现癌旁肝组织HBsAg和HBcAg检出数较高,且常见于双核肝细胞内,而肝癌为阴性。结果提示:浆膜HBcAg和胞膜HBsAg可能为CLD肝细胞免疫损伤的主要靶抗原,是引起CLD病变反复活动、呈慢性化的主要原因之一。结果也提示:HBV感染与HCC发生的关系极为密切。     

HBV-经胎盘感染胎儿的机理研究

目的 研究HBV经胎盘感染胎儿机理。方法 应用PCR技术检测59例HBsAg( )孕妇血清、胎盘及新生儿脐血清中HBV DNA。采用免疫组化ABC染色法检测胎盘中HBsAg及HBcAg。结果 新生儿宫内感染率为45．8％(27／59)；胎盘HBV DNA( )者宫内感染率达78．8％(26／33)，均显著高于其HBV DNA(-)者。免疫组化染色HBsAg阳性率为81．4％(48／59)，HBcAg阳性率达61．6％(36／59)。HBsAg及HBcAg在胎盘中分布由蜕膜细胞、滋养层细胞、绒毛间质细胞，绒毛毛细血管内皮细胞依次递减，羊膜上皮细胞中可检出HBsAg及HBcAg。结论 HBV经胎盘感染胎儿机理可能是HBV经母血和／或细胞直接蔓延感染胎儿，或HBV经母血和／或细胞蔓延至羊膜，经羊水感染胎儿。     

肝硬变组织内HBV DNA和HBsAg的分布及意义

作者用原位杂交和免疫组织化学PAP法双标记,在51例人肝硬变石蜡组织切片中检测HBV DNA和HBsAg.共检出HBV DNA 21例(41.2％),HBsAg 43例(84.3％),二者同时检出共19例(37.3％).HBVDNA阳性颗粒主要分布于肝细胞的胞浆或同时分布于胞核及胞浆内,少数仅位于核内或沿胞膜内侧分布.51例肝硬变患者中,活动性肝硬变与静止性肝硬变组织中HBV DNA的阳性检出率分别为52.8％和13.3％,HBV DNA和HBsAg二者均阳性的检出率分别为47.2％和13.3％,均以活动性肝硬变为高(P<0.05).结果说明,HBV的感染以及HBV DNA在肝组织中的存在和持续活动是肝硬变发生发展的重要因素之一.     

血清HBV标志或HBsAg阴性慢性肝炎患者肝内HBV DNA原位杂交分析

本文采用原位杂交及免疫组化方法对23例血清HBV标志或HBsAg阴性慢性肝炎患者的HBV感染状态进行了研究。发现肝内乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA),HBsAg,HBcAg的检出率分别为43.48％、38.89％.16.67％;肝内有HBV感染依据者占65.22％,表明半数以上的血清HBV标志或HBsAg阴性患者肝内仍然存在HBV复制或基因表达。含HBV DNA的肝细胞及表达HBsAg,HBcAg的肝细胞大多毗邻灶状坏死和(或)碎屑样坏死灶,提示HBV复制及其产物表达与患者的慢性化、活动性坏死性炎症密切相关。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织病理及免疫组化水平的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝组织病理及免疫组化水平的关系。方法检测76例慢性乙型肝患者血清及肝组织外周血HBsAg，如BeAg和HBV DNA水平，常规病理和肝组织内的HBsAg，HBcAg。结果外周血中HBeAg阳性的患者中有91．49％HBV DNA阳性，而在如BeAg阴性的患者中，有58．62％的患者HBV DNA阳性，只有慢性乙型肝炎轻度患者的血清HBV DNA水平与其他各组差异有显著性（P〈0．05），而其余各组之间HBV DNA的复制水平均无明显差异，中度以上的血清HBV DNA多呈高水平分布。所有样本肝组织的HBsAg均为阳性，从肝组织不同HBsAg表达强度下，HBcAg表达的趋势来看，HBcAg有随着HBV DNA量的增加而表达增强的趋势。结论患者血清HBV DNA水平的变化可以反映HBV的复制水平而不能反应肝脏损伤程度。同时肝组织内的HBsAg检测更适合于低水平HBV感染的患者。     

胎盘组织人白介素-6受体与胎盘HBV感染的关系

目的 初步探讨胎盘组织人白介素-6受体与胎盘HBV感染关系.方法 选取用免疫组化法检测HBsAg阳性的67例胎盘组织为研究对象,采用免疫荧光双标记方法结合激光共聚焦技术检测胎盘组织中hIL-6R和HBsAg/hIL-6R的分布情况.结果 hIL-6R散在分布于胎盘滋养层细胞、绒毛间质细胞和绒毛毛细血管内皮细胞的胞浆和胞膜.HBsAg阳性的胎盘组织中HBsAg /hIL-6R在同一位置,有共存现象. 结论 HBV宫内感染可能存在经胎盘细胞表面hIL-6R介导的感染途径.     

慢性乙型肝炎患者肝组织中HBsAg、HBcAg的表达与血清HBV-DNA含量的关系

目的探讨慢性乙型肝炎患者肝组织中HBsAg和HBcAg的表达与血清HBV—DNA含量的关系。方法选择慢性乙肝患者51例，在抽取血液做HBV—DNA检测时，并行肝穿刺取肝组织。应用PCR法检测乙肝患者血清HBV—DNA的含量，应用免疫组化法检测乙肝患者肝组织中HBsAg和HBcAg的表达。结果肝组织中HBcAg的表达强度与血清HBV—DNA含量有明显正相关，肝组织中HBsAg的表达强度与血清中HBV—DNA含量只表现较弱的相关性。结论将肝组织中HBsAg和HBcAg的表达程度结合血清HBV—DNA含量作为抗病毒治疗比单一指标更可靠。     

Solid and liquid state characterization of tetrahydrocurcumin using XRPD,FT-IR,DSC, TGA,LC-MS,GC-MS,and NMR and its biological activities

Tetrahydrocurcumin (THC) is one of the major metabolites of curcumin (CUR), an ancient bioactive natural polyphenolic compound. This research article describes both the solid and liquid state characterization of THC using advanced spectroscopic and thermo-analytical techniques. Anti-inflammatory, anti-oxidant, and neuroprotective activities of THC were investigated using in vitro cell lines. Liquid chromatography-mass spectrometry analysis revealed that our sample comprised 95.15% THC, 0.51% tetrahydrodemethoxycurcumin (THDC), 3.40% hexahydrocurcumin, and 0.94% octahydrocurcumin. Gas chromatography-mass spectrometry analysis indicated the presence of 96.68% THC and 3.32% THDC. THC in solution existed as keto-enol tautomers in three different forms at different retention time, but the enol form was found to be dominant, which was also supported by nuclear magnetic resonance analysis. THC was thermally stable up to 335.55 °C. THC exhibited more suppression of cytokines (TNF-α, IL-1β, and MIP-1α) than CUR in a concentration-dependent manner in mouse splenocytes, while NK-cell and phagocytosis activity was increased in macrophages. THC showed a significant reduction of free radicals (LPO) along with improved antioxidant enzymes (SOD and catalase) and increased free radical scavenging activity against ABTS⁺ radicals in HepG2 cells. THC displayed higher protection capability than CUR from oxidative stress and neuronal damage by improving cell viability against H₂O₂ induced HepG2 cells and MPP⁺ induced SH-SY5Y cells, respectively, in a concentration-dependent manner. Thus, a variation of the biological activities of THC might rely on its keto-enol form and the presence of other THC analogs as impurities. The present study could be advantageous for further research on THC for better understanding its physicochemical properties and biological variation.