转化生长因子-β1对人软骨细胞基质金属蛋白酶-1mRNA及其阻滞剂mRNA表达的影响

目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对人透明软骨细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其阻滞剂T(IMP-1)mRNA表达的作用及相关意义,更好地理解骨关节炎软骨损伤的相关机制。方法TGF-β1作用于传代培养的人软骨细胞12h,浓度分别为1ng/mL、10ngm/L、100ng/mL;上述不同浓度TGF-β1与白介素-1β(IL-1β)10ng/mL组成联合作用组,继续培养12h。应用逆转录PCRR(TP-CR)方法及实时荧光定量方法(FQP-CR),检测TGF-β1及其与IL-1β联合作用于传代培养的人透明软骨细胞MMP-1、TIMP-1mRNA表达的含量。结果正常对照组透明软骨细胞可见MMP-1、TIMP-1mRNA扩增产物,而实验组TGF-β11ng/mL、10ng/mL、100ngm/L作用于透明软骨细胞12h后,MMP-1mRNA表达逐渐降低,TIMP-1mRNA表达逐渐增高;TGF-β1与IL-1β联合作用后,随着TGF-β1浓度的升高,MMP-1mRNA表达逐渐降低,TIMP-1mRNA表达逐渐增高,各组之间差异有显著性意义(P<0.05)。提示TGF-β1与MMP-1、TIMP-1mRNA表达之间存在剂量依赖关系。结论不同浓度TGF-β1按照剂量依赖方式抑制人软骨细胞MMP-1mRNA基因的表达,刺激人软骨细胞TIMP-1mRNA基因表达;TGF-β1具有对抗IL-1β对人软骨细胞MMP-1、TIMP-1mRNA表达的作用,也呈现剂量依赖关系。研究结果对揭示骨关节炎的发病机理,指导其治疗具有积极意义。     

不同浓度IL-1对人的软骨细胞基质金属蛋白酶1mRNA表达的影响

目的 观察不同浓度白介素-β(IL-β)对体外培养人的关节透明软骨细胞基质金属蛋白酶1(MMP-1)mRNA表达的影响。方法 体外培养的人的透明软骨细胞，随机分为4组，A组为空白对照组；B、C、D组分别加入1ng／ml，10ng／ml，100ng／ml IL-1β1作用12h。采用逆转录PCR(RT—PCR)方法及实时荧光定量PCR(FQ—PCR)的方法，观察透明软骨细胞MMP-1mRNA的表达状况，比较不同剂量IL-1β作用下传代培养的人的透明软骨细胞MMP-1基因表达与正常软骨细胞相应基因表达的关系。结果 正常人的软骨细胞均有MMP-1但表达量较低。IL-1β浓度为1ng／ml，10ng／ml，100ng／ml作用12h，对MMP-1mRNA调节作用存在明显的剂量依赖关系，各组之间存在显著性差异，MMP-1的含量分别为正常组的1．6、2．3、4．2倍。结论或研究表明，IL-1β对人的软骨细胞MMP-1表达的调控作用随其浓度的变化而不同。     

不同浓度IL-1对人的软骨细胞基质金属蛋白酶1mRNA表达的影响

目的观察不同浓度白介素-1β(IL-1β)对体外培养人的关节透明软骨细胞基质金属蛋白酶1(MMP-1)mRNA表达的影响.方法体外培养的人的透明软骨细胞,随机分为4组,A组为空白对照组;B、C、D组分别加入1 ng/ml,10 ng/ml,100 ng/ml IL-1β1作用12 h.采用逆转录PCR(RT-PCR)方法及实时荧光定量PCR(FQ-PCR)的方法,观察透明软骨细胞MMP-1 mRNA的表达状况,比较不同剂量IL-1β作用下传代培养的人的透明软骨细胞MMP-1基因表达与正常软骨细胞相应基因表达的关系.结果正常人的软骨细胞均有MMP-1但表达量较低.IL-1β浓度为1 ng/ml,10 ng/ml,100ng/ml作用12 h,对MMP-1 mRNA调节作用存在明显的剂量依赖关系,各组之间存在显著性差异,MMP-1的含量分别为正常组的1.6、2.3、4.2倍.结论研究表明,IL-1β对人的软骨细胞MMP-1表达的调控作用随其浓度的变化而不同.     

细胞因子对关节软骨细胞增殖的实验研究

目的探讨细胞因子对关节软骨细胞增殖的影响。方法应用关节软骨细胞体外培养，分别加入IL-1β，TNF-α，TGF-β1，IL-1β和TGF-β1，TNF-β和TGF-β1，采用MTT法观察软骨细胞增殖情况，瑞氏染色观察细胞形态及分裂指数测定。结果细胞因子作用软骨细胞24h，与对照组比较，1ng／ml、10ng／ml TGF-1组，10ng／ml IL-1β和1ng／ml TGF-β1组，高于对照组。细胞因子作用软骨细胞48h，与对照组比较，20ng／ml IL-1β组，1ng／ml、10ng／ml TNF-α组，0．1、1、10ng／ml TGF-β1，10ng／ml IL-1β和1ng／ml TGF-β1组，1ng／ml TNF-α和1ng／ml TGF-β1组，高于对照组。IL-1β，TNF-α作用软骨细胞24h，形态发生改变。培养48h，分裂指数测定10ng／ml TGF-β1组显著高于对照组。结论TGF-岛对体外培养关节软骨细胞有明显促进细胞分裂与增殖作用，IL-1β，TNF-α，作用软骨细胞48h也有促进细胞增殖作用。     

BMP-7对IL-1β作用下软骨细胞合成和分解表型的影响

目的探讨在炎症因子白细胞介素（IL）-1β刺激下,骨形态发生蛋白（BMP）-7对小鼠关节软骨细胞合成表型及分解表型的作用,为 BMP-7用于骨关节炎（OA）治疗提供科学证据。方法将原代培养的小鼠关节软骨细胞分为6组,对照组包括未加处理的空白组、IL-1β（5 ng／ml）组,实验组包括3个浓度梯度（10、50、200 ng／ml）BMP-7分别与 IL-1β（5 ng／ml）共作用组、单独 BMP-7（200 ng／ml）组,作用时间为24 h。用逆转录-定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测Ⅱ型胶原（Col Ⅱ）、聚集蛋白聚糖（aggrecan）、Y 染色体性别决定结构域转录因子（Sox）9等合成基因及基质金属蛋白酶（MMP）-3、MMP-13、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS）-5等分解基因表达变化。再用酶联免疫吸附试验（ELISA）验证 MMP-3、MMP-13蛋白表达水平。结果在 IL-1β作用下,软骨细胞特异合成基因显著下调并表达分解表型。添加 BMP-7后,受抑制的合成基因得到一定程度恢复,MMP-3、MMP-13、ADAMTS-5等蛋白酶表达量明显减少,其中200 ng／ml BMP-7的促合成、抑分解作用最佳。单独 BMP-7作用于软骨细胞会上调 aggrecan 表达,但不影响 Col Ⅱ和Sox9表达。结论BMP-7对 OA 的治疗作用与 BMP-7调控炎症环境中软骨细胞合成表型和分解表型的能力相关。     

基质金属蛋白酶9及TGF-β1 mRNA和蛋白在骨关节炎中的表达

目的 TGF-β1对骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨起保护作用,探讨OA中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、TGF-β1 mRNA和蛋白表达的相关性,为临床治疗OA寻找有效的干预靶点提供理论依据。方法取自愿捐赠的关节软骨及滑膜标本,其中OA患者60例(实验组),外伤截肢、交叉韧带断裂、盘状软骨损伤与半月板损伤患者20例(正常对照组)。行HE染色观察关节软骨与滑膜的病理组织学改变,免疫组织化学染色观测MMP-9及TGF-β1蛋白表达,原位杂交技术检测MMP-9及TGF-β1 mRNA表达;并进行相关性分析。结果 HE染色显示实验组关节软骨细胞固缩、坏死、排列紊乱,细胞外基质断裂,关节滑膜细胞肥大增生、淋巴细胞和单核细胞浸润,多数小血管增生;正常对照组软骨细胞排列整齐、基质染色均匀,滑膜组织无慢性炎症表现、无明显增生。两组均可见MMP-9、TGF-β1 mRNA和蛋白阳性表达,阳性细胞包括软骨细胞、滑膜衬里层细胞及滑膜下层的血管内皮细胞、成纤维细胞、炎性浸润细胞等。实验组MMP-9及TGF-β1 mRNA和蛋白表达均高于正常对照组(P<0.01)。实验组MMP-9 mRNA与蛋白表达成正相关(r=0.924,P=0.000),TGF-β1 mRNA及蛋白表达亦成正相关(r=0.941,P=0.000);实验组MMP-9及TGF-β1蛋白表达成负相关(r=—0.762,P=0.000),MMP-9 mRNA及TGF-β1 mRNA表达成负相关(r=?0.681,P=0.000)。结论 OA中TGF-β1的高表达下调了关节软骨与滑膜中MMP-9的表达,对OA关节软骨起保护作用,从而延缓OA进展。     

生长因子对成人关节软骨细胞的促增殖作用

目的观察不同生长因子对成人关节软骨细胞（adult human articular chondrocytes，AHAC）增殖的影响，探索AHAC体外大量扩增的方法。方法以酶消化法从成人关节软骨分离细胞，条件培养基培养；传2代细胞分别用不同浓度成纤维细胞生长因子2（fibroblast growth factor-2，FGF-2）、转化生长因子β1（transforming growth factor β1，TGF—β1）、血小板衍生因子bb（platelet derived growth factor-bb，PDGF-hb）、肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）或其不同组合作用。用MTT法比较细胞增殖情况，用组化和免疫组化检测观察细胞表型变化。结果FGF-2、TGF—β1、PDGF—bb、HGF均有促AHAC增殖的作用，其最大效应剂量分别是50ng/ml、1ng／ml、1ng／ml、20ng／ml。5ng／ml FGF-2＋1ng/ml TGF-β1有最强的促增殖作用，继续加用PDGF—bb和（或）HGF无进一步促进作用；用这一因子组合培养AHAC，可以传10代以上，细胞扩增2000倍以上，且传9代细胞仍弱表达Ⅱ型胶原和aggrecan。结论FGF-2、TGF-β1、PDGF—bb、HGF均对AHAC有一定的促增殖作用；5ng／ml FGF-2＋1ng/ml TGF-β1有最大的促增殖效应，细胞短期内大量扩增，且在大量扩增的同时维持了一定的软骨细胞表型，因此是合适的AHAC体外大量扩增促进剂。     

基质金属蛋白酶9及TGF-β_1 mRNA和蛋白在骨关节炎中的表达

目的 TGF-β1对骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨起保护作用,探讨OA中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、TGF-β1 mRNA和蛋白表达的相关性,为临床治疗OA寻找有效的干预靶点提供理论依据。方法取自愿捐赠的关节软骨及滑膜标本,其中OA患者60例(实验组),外伤截肢、交叉韧带断裂、盘状软骨损伤与半月板损伤患者20例(正常对照组)。行HE染色观察关节软骨与滑膜的病理组织学改变,免疫组织化学染色观测MMP-9及TGF-β1蛋白表达,原位杂交技术检测MMP-9及TGF-β1 mRNA表达;并进行相关性分析。结果 HE染色显示实验组关节软骨细胞固缩、坏死、排列紊乱,细胞外基质断裂,关节滑膜细胞肥大增生、淋巴细胞和单核细胞浸润,多数小血管增生;正常对照组软骨细胞排列整齐、基质染色均匀,滑膜组织无慢性炎症表现、无明显增生。两组均可见MMP-9、TGF-β1 mRNA和蛋白阳性表达,阳性细胞包括软骨细胞、滑膜衬里层细胞及滑膜下层的血管内皮细胞、成纤维细胞、炎性浸润细胞等。实验组MMP-9及TGF-β1 mRNA和蛋白表达均高于正常对照组(P<0....     

IL—1β对人的软骨细胞Bax mRNA表达的作用及意义

目的 探讨白介素—1β(IL—1)对人的透明软骨细胞Bax mRNA基因表达的作用及相关意义。方法 应用逆转录PCR(RT—PCR)方法检测IL—1β作用下传代培养的人的透明软骨细胞Bax mRNA的含量；并且应用实时荧光定量方法，进行Bax mRNA的相对含量。结果 对于传代培养的人的软骨细胞，IL—1β浓度为1ng／ml，10ng／ml，100ng／ml作用12h，其对Bax mRNA调节作用存在剂量依赖关系，各组之间存在显著性差异。结论 IL—1β可以按照剂量依赖方式正向调节软骨细胞Bax mRNA基因的表达，并通过对细胞凋亡的调控参与骨关节炎的发生、发展。     

大黄酸对转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞血小板反应蛋白1表达的影响

目的探讨大黄酸对转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF-β1）诱导的人肾小管上皮细胞（HK-2）血小板反应蛋白1（thrombospondin-1,TSP1）表达的影响。方法体外培养细胞,观察TGF-β1（4ng／ml）诱导下低、中、高浓度的大黄酸（10μg／ml、20μg／ml和40μg／ml）对HK-2细胞TSP1 mRNA和蛋白表达的影响。Real Time PCR检测TSP1 mRNA表达,Western Blot检测TSPI蛋白表达。结果与空白对照组比较,TGF-β1（4ng／ml）明显上调HK-2细胞TSP1 mRNA和蛋白表达。与TGF-β1（4ng／ml）阳性对照组比较,中浓度和高浓度大黄酸明显抑制了TSP1 mRNA和蛋白表达。结论大黄酸能抑制TGF-β1诱导的HK-2TSP1 mRNA和蛋白表达。     

腺病毒介导TGF-β1基因感染兔软骨细胞修复关节软骨缺损

[目的]探讨腺病毒介导转化生长因子β1（TGF-β1）基因感染对兔关节软骨细胞增殖和分化的影响，观察其构建组织工程化软骨对关节软骨缺损的修复质量。[方法]以腺病毒Adeno-X^TM为基因转移载体，制备携带TGF-β1基因的高滴度腺病毒液感染兔关节软骨细胞，通过光电镜、免疫细胞化学、Northern杂交及流式细胞仪分析细胞周期等方法观察软骨细胞形态、增殖及外源基因的表达。再将其与骨基质明胶（BMG）支架相复合移植修复同种异体关节软骨缺损。[结果]腺病毒感染软骨细胞后免疫细胞化学染色可检测出外源基因编码蛋白的表达，Northern杂交显示Ⅱ型胶原表达水平增加，TGF-β1的表达显著增加了原代软骨细胞S／G2／M期细胞比例。将其复合于骨基质明胶上，经组织染色和电镜观察可见软骨细胞贴附于BMG表面和孔隙内大量增殖，在体移植修复实验组新生组织为透明软骨，关节面平整，软骨下骨完全重建再生。[结论]软骨细胞经携带TGF-β1基因的腺病毒感染后，能促进软骨细胞的增殖，可用于制备组织工程化软骨。     

TGF-β_1影响人牙周膜成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1的初步研究

目的：研究转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）在体外对人牙周膜成纤维细胞（human peri-odontal ligament fibroblasts,HPDLFs）分泌基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）的影响,进而探讨TGF-β1对HPDLFs分泌MMP-1的调控作用,以期为通过生物学途径建立防治正畸过程中牙根吸收的有效方法提供理论依据。方法：原代培养HPDLFs,取传代至第5代HPDLFs实验。设立TGF-β1工作浓度梯度：0.03ng/ml、0.05ng/ml、0.07ng/ml、0.09ng/ml;0ng/mlTGF-β1为空白对照组;选取4h、8h、12h、24h、48h5个时间点收获上清液。双抗体夹心酶联免疫吸附实验（enzyme-linked-immunosorbent serologic assay,ELISA）法检测各样本中MMP-1含量。采用多元线性回归方法分析实验结果。结果：MMP-1分泌量与TGF-β1作用时间总体上存在时间依赖性,具有统计学差异,P＆lt;0.05。但各作用时间下MMP-1分泌量与TGF-β1工作浓度并没有表现出一致的剂量依赖关系;4h时各实验组MMP-1分泌量随TGF-β1浓度的递增而下降;8h、12h、24h时,各实验组MMP-1分泌量与TGF-β1工作浓度基本呈正相关;48h时各组MMP-1含量变化较大没有明显趋势。结论：MMP-1分泌量与TGF-β1作用时间存在显著时间依赖性,TGF-β1可通过促进MMP-1分泌参与正畸过程中牙根吸收的发生和发展。     

TGF-β1对UVA照射人皮肤成纤维细胞MMP-1和MMP-3 mRNA表达的影响

目的：研究转化生长因子-β1（tansforming gowth fctot-beta1,TGF-β1）对长波紫外线（ultrayiolet A,UVA）照射人皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinase-1,MMP-1）和基质金属蛋白酶-3（matrix metalloprotein ase-3,MMP-3）mRNA表达的影响,探讨TGF-D,对皮肤成纤维细胞的光保护机制。方法：通过体外培养人皮肤成纤维细胞,加入不同浓度TGF-β1（0．1、1、10ng／m1）预处理细胞后UVA15J／cm^2照射诱导细胞光老化,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测成纤维细胞增殖活性,半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定MMP-1、MMP-3 mRNA表达。结果：UVAI5J／cm^2照射前给予不同剂量TGF-β1预处理,随TGF-β1剂量增加成纤维细胞增殖活性明显提高,MMP-1、MMP-3 mRNA表达随着TGF-β1剂量增加而降低。结论：TGF-β1可提高UVA照射体外培养成纤维细胞增殖活性,减少UVA照射体外培养的皮肤成纤维细胞MMP-1、MMP-3 mRNA表达,减少其对胶原的降解,对UVA照射皮肤成纤维细胞起保护作用。     

黄芪对人肾小管上皮细胞细胞外基质分泌的影响及其机制探讨

目的：探讨黄芪对人肾小管上皮细胞细胞外基质分泌的影响及甚可能机制。方法：将体外培养的人肾小管上皮（HK-2）细胞株转板至细胞融合并同步后,分为空白对照组、转化生长因子-β（TGF-β1）刺激组（5ng／ml）、TGF-β1加黄芪100μg／ml组、TGF-β1加黄芪1mg／ml组。作用24h后半定量逆转录多聚酶链反应（RT—PCR）检测纤维连接蛋白（FN）及纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）mRNA;酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测上清液中FN的含量;westernblot检测PAI-1的表达。结果：（1）HK-2细胞表达少量FN和PAI-1;（2）HK-2细胞在5ng／ml TGF-β1．刺激下分泌FN、PAI—1mRNA及FN、PAI-1蛋白表达明显增加,与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;（3）HK-2细胞在TGF-β1和不同浓度的黄芪作用后,可使FN、PAI-1mRNA及蛋白表达减少,与TGF-β1组比较差异有统计学意义（P〈0．01）,尤以黄芪1mg／mi组为甚。结论：TGF—β1可促进HK-2细胞分泌FN和PAI—1,黄芪可部分拮抗TGF-β1的上述效应。这可能是黄芪预防或改善肾小管间质病变的作用机制之一。     

TGF-β1和TGF-α在膀胱癌侵袭和转移中的作用

目的 探讨转化生长因子-β（TGF-β1）和转化生长因子－α（TGF-α）对膀胱癌细胞株（EJ）生长的影响以及促进膀胱癌侵袭和转移的可能途径。方法 采用MTT、Western Blot和RT－PCR方法,观察TGF－β1和TGF－α对DJ细胞株生长以及在mRNA和蛋白水平上对金属基质蛋白酶（MMPs)和组织特异性金属蛋白酶抑制剂－2（TIMP－2）表达的影响。结果 （1）TGF-β1和TGF－α对EJ细胞生长存在抑制趋势,但差别无显著性意义。（2）TGF－β1和TGF－α作用于EJ细胞48h时 ,MMP－2、TIMP－2、MT1－MMP mRNA表达降低;TGF－β1组MMP-9 mRNA表达增加,而对照组和TGF－α组无MP－9mRNA表达。（3）当TGF－β1浓度为0．1、1．0ng/ml时,增加细胞培养上清液中MMP－2蛋白含量对TIMP－2蛋白水平无影响。当浓度为5．0、10．0ng/ml时对MMP－2无影响而降低TIMP－2表达;TGF－α在浓度为1.0、5.0、10.0ng/ml时,对MMP－2蛋白表达无影响而降低TIMP－2表达;在100．0ng/ml时增加MMP－2蛋白表达而对TIMP－2表达无影响;无论在对照组和实验组均未检测到MMP－9。结论 TGF-β1、TGF-α不能抑制EJ细胞生长,参与肿瘤侵袭和转移作用可能与调节MMPs、TIMP－2表达途径有关。     

IGF-Ⅰ对培养兔关节软骨细胞作用的实验研究

目的 了解胰岛素样生长因子I（ICF－I）对培养关节软骨细胞增残及代谢的影响。方法 体外单层培养兔关节软骨细胞,实验组以10,100,200ng/mlICF-I作用细胞2,4,6天,对照组不加IGF－I作用培养细胞。检测细胞DNA及基质中糖醛酸含量,用流式细胞仪分析在100ng/mlIGF-I作用下细胞周期亚时相。结果 IGF－I在10－100mg/ml浓度范围内,对培养软骨细胞增残和代谢有促进作用,以100ng/ml浓度作用效果最佳,细胞周期分析,实验组DNA合成前期（G1期）较对照组缩短。结论 IGF－I促进软骨细胞的增殖与代谢,且通过缩短细胞G1期而缩短的细胞周期。     

转化生长因子β1对大鼠原代肾小球系膜细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的：探讨原代培养的大鼠肾小球系膜细胞血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达及转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）对其表达的影响。方法：采用RT-PCR和Westernblot方法检测大鼠原代培养的肾小球系膜细胞VEGF表达及不同浓度、不同时间的TGF-β1刺激对VEGF表达的作用。结果：原代培养的大鼠肾小球系膜细胞表达VEGF164、120mRNA，TGF-β1呈时间依赖性增加其表达，在12h表达最高，分别为刺激前3．17、2．925倍，有统计学差异（P〈0．001）。在剂量反应曲线上，2ng／ml TGF-β1刺激作用最强，VEGF164、120mRNA表达分别为未刺激组的2．82、2．45倍，有统计学差异（P〈0．001）。与VEGF mRNA表达一致，大鼠原代肾小球系膜细胞仅见VEGF164蛋白表达，2ng／ml TGF-β1呈时间依赖性的增加VEGF 164蛋白表达，24h达高峰，为刺激前的2．37倍。结论：促进肾小球系膜细胞VEGF表达可能是TGF-β1介导肾脏损害发生、发展的机制之一。     

大骨节病患者与健康人软骨细胞转化生长因子-β mRNA的表达差异

目的测定成人大骨节病（kaschin-beck disease,KBD）患者和正常健康成人关节软骨中转化生长因子-beta（transform growth factor-beta,TGF-β）在mRNA水平表达的差异,为进一步探讨大骨节病的发病机制奠定基础。方法提取成人大骨节病患者和健康人关节软骨细胞总RNA,逆转录得到cDNA;设计针对TGF-β基因的特异引物,通过RT-PCR技术检测该目的基因在mRNA水平表达差异。结果成人大骨节病患者的关节软骨细胞TGF-βmRNA表达低于健康成人。经统计学分析（t=11.1732,P〈0.001）,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论成人大骨节病患者软骨细胞中TGF-β基因的表达低于健康成人,为进一步探讨大骨节病的发病机制和防治奠定了基础。     

降钙素在体内体外实验中对兔关节炎关节软骨退变及软骨下骨骨代谢的影响

[目的]研究降钙素(calcitonin, CT)对骨性关节炎关节软骨退变和软骨下骨骨代谢的影响.[方法]30只3个月龄雌性日本大耳白兔随机分为三组,其中两组行右膝关节前交叉韧带切断术(anterior cruciate ligament transaction,ACLT),分为ACLT+CT组和ACLT+NS组,第3组为Sham组.ACLT+CT给予每日1次皮下注射降钙素5 IU/(kg·d),持续8周,ACLT+NS组给予同样剂量生理盐水.术后8周后处死所有动物.取股骨髁制成切片行MMP-13和Ⅱ型胶原免疫组化染色.取胫骨近端制成硬组织切片行骨形态计量学检测.体外实验中,取兔膝关节软骨,经消化、培养,将第3代软骨细胞分三组:向IL-1β组加入人重组IL-1β(10 ng/ml). IL-1β+CT组加入人重组IL-1β (10 ng/ml)2 d后,再向培养液中加入CT(50 ng/ml).正常组不加任何诱导剂和干扰剂培养.然后行MMP-13、Ⅱ型胶原免疫组化检测和Realtime RT-PCR法检测.[结果]Sham组和ACLT+CT组软骨下骨骨小梁相对体积和厚度等均显著高于ACLT+NS组.Sham组和ACLT+CT组的Ⅱ型胶原的光密度值均显著高于ACLT+NS组,而MMP-13的光密度值显著低于ACLT+NS组(P<0.05).正常组和IL-1β+CT组的Ⅱ型胶原光密度值均显著高于IL-1β组而MMP-13的光密度值都显著低于IL-1β组(P<0.05).在正常组和IL-1β+CT组中Ⅱ型胶原的mRNA含量均显著高于IL-1β组而MMP-13的mRNA含量均显著低于IL-1β组(P<0.05).[结论]降钙素5 IU/(kg·d)皮下注射能够增加ACLT兔膝关节软骨Ⅱ型胶原的分泌和抑制MMP-13的表达,并可能通过调节软骨下骨的骨代谢和微结构来保护关节软骨; CT(50 ng/ml)能增加体外培养的含有IL-1β(10 ng/ml)的软骨细胞中Ⅱ型胶原的含量和抑制MMP-13分泌.