中华绒螯蟹消化道组织学及扫描电镜研究

对中华绒螯蟹成蟹消化道各段进行了光镜组织学结构的观察;应用扫描电镜技术,观察了中华绒螯蟹消化道各段黏膜上皮表面超微结构特征。结果表明：除中肠及后盲囊外,整个消化道黏膜上皮表面均有较厚的分泌物层和较发达的纤毛层。纤毛形态结构各异;以食道和后肠分布最密,胃和肠球次之。消化道各段黏膜上皮细胞表面均形成大小不一、形态各异的多级皱褶和嵴。仅中肠表面具典型微绒毛结构。各消化道段黏膜上皮表面均未见杯状细胞,上皮下基膜发达,黏膜下层明显,消化腺分布其间。整个消化道壁的肌层均为横纹肌,且排列疏松,外膜多为浆膜。     

中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹两地理亚种的线粒体DNA序列变异

根据线粒体16SrDNA的PCR／RFLP鉴定和对Cyt b基因全序列的分析对中国大陆7水系绒螯蟹地理种群的遗传分化进行探讨。结果表明：中华绒螯蟹与合浦绒螯蟹两亚种在17条Cyt b全序列上以40个固定的碱基变异位点相区别。前者分布在瓯江及其以北的水系;后者主要分布在瓯江及其以南的水系。发现了4种在鸭绿江以南的北方水系中生活的合浦亚种单元型,对这些单元型的形成提出了3种可能的解释[动物学报51（5）：862—866,2005]。     

脉红螺神经细胞和胶质细胞光镜及电镜观察

脉红螺(Rapana venosa)神经节存在三种细胞,它们是神经细胞、星形胶质细胞和无突胶质细胞。从结构上看,神经细胞与后鳃类软体动物海兔(Aplysia)的神经细胞不尽相同。电镜观察表明,脉红螺右足神经节细胞体区的星形胶质细胞与海兔腹神经节内包围神经细胞体的星形胶质细胞很相似。但在脉红螺,星形胶质细胞的突起与神经细胞之间的拓朴学关系尚不清楚。无突胶质细胞在脉红螺神经节内广泛存在,它的核类似于海兔神经细胞的核。这类细胞的功能尚不清楚。     

中华绒螯蟹肝胰腺R和F细胞及其脂类储存的电镜研究

电镜下研究了中华绒螯蟹不同生长发育时期（９月份卵巢处于快速发育阶段,１２月成熟阶段,胚胎发育４－１４天和卵孵出以后）肝胰腺Ｒ和Ｆ细胞的结构及其脂类储存。肝胰腺的脂类主苛以脂肪滴（Ｌ）的形式存在于Ｒ细胞中。Ｒ细胞在不同阶段Ｌ的存在形式和脂类的储存量不同,细胞数量也有所不同,显示Ｒ细胞对不同生长时期的敏感性。Ｆ细胞的结构特征是胞质中的发达的粗面内质网系统。细胞中几乎没有脂肪滴的储存。     

中华绒螯蟹亲蟹的饥饿代谢研究

1998年 10～ 12月 ,对体重为 5 4 .5 9(± 2 .37) g的亲蟹在 2 0 (± 0 .5 )℃温度条件下进行饥饿实验 ,研究了饥饿对中华绒螯蟹亲蟹代谢的影响 .结果表明 ,经过 30d的饥饿处理 ,亲蟹的耗氧率降低为摄食状态的 5 0 .0 % ;CO2 排出率减小为摄食状态的 6 3.4 % ;NH3 N排泄率减小为 5 9.1% .耗氧率和CO2 排出率、NH3 N排泄率的变化差别较大 ,耗氧率的减小可分为 4个阶段 ,而CO2 排出率和NH3 N排泄率的减小仅可分 3个阶段 .与此同时 ,亲蟹的标准代谢水平同样受到饥饿的影响 ,饥饿 30d后 ,由 4 .4 5J·g-1·h-1减小为 2 .36J·g-1·h-1;在饥饿亲蟹的代谢中 ,脂肪消耗最多 ,其次是碳水化合物 .     

中华绒螯蟹胸神经团神经分泌细胞的显微和超显微结构观察

应用光学显微镜和电子显微镜技术,研究了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)胸神经团的神经分泌细胞,描述了其显微和超显微结构。依据细胞形态、细胞核、内分泌颗粒和细胞质的特征将胸神经团神经分泌细胞分为3种类型:Ⅰ型细胞最大,胞质中存在许多大小不同的空泡,分泌颗粒数量很少;Ⅱ型细胞中等大小,细胞器发达,分泌颗粒数量较多,形态多样;Ⅲ型细胞最小,分泌颗粒数量最多,细胞器很少。     

中华绒螯蟹同工酶的研究

中华绒鳌蟹[(Eriocheir sinensis)(Milne,Edwards)]俗称河蟹,是我国重要的经济蟹类,有关河蟹同工酶的研究迄今为止国内外尚无报道,为了弥补这一空白,作者对中华绒鳌蟹的醋酶(EST)、谷氨酸草酞乙酸转氨酶(GOT)、苹果酸脱氢酶(MDH)三种同工酶进行了电泳分析,研究了同工酶的组织特异性并探讨其基因表达特点,以期为中华绒鳌蟹的种群遗传结构分析,品种的定向选育等提供生物化学指标.     

中华绒螯蟹窦腺神经末梢及X-器官神经分泌细胞的类型

在电子显微镜下观察了性未成熟的中华绒螯蟹黄蟹的窦腺及X－器官的超微结构。X－器官位于眼柄神经节终髓的腹外侧,与窦腺位置斜相对,窦腺主要由神经分泌细胞的末梢和胶质细胞组成。神经末梢含有大量的膜结构包围的颗粒、线粒体、粗面内质网和许多电子透明的小泡,末梢外周有时可见指状突起。依据颗粒的大小、形状、电子致密度以及胞质特征,可区分出6种类型的窦腺神经末梢及7种X－器官神经分泌细胞。观察了末梢中神经分泌颗粒的胞吐作用方式的释放过程,并且尝试对窦腺不同末梢中的颗粒及X－器官神经分泌细胞中的颗粒作了比较,发现二者之间具有较好的对应性,即电子致密度无大的变化,形态特征相似,只是大小稍有增加。     

中华绒螯蟹遗传变异的RAPD分析

用31个可重复性好的随机引物对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)的辽河、瓯江和长江种群进行了RAPD分析。121个扩增片段中有27个多态片段。遗传距离指数（D）表明中华绒螯蟹种内遗传变异较低(D=0.004～0.063)。3个种群中,辽河种群(D=0.018)和瓯江种群(D=0.025)遗传变异较高,而长江种群遗传变异较低(D=0.013);辽河种群和瓯江种群间遗传距离(D=0.023)小于它们与长江种群间的遗传距离(D值分别为0.028和0.032)。提示人类经济活动可能已使这2个种群发生了基因交流。     

钙离子浓度对暗适应时的中华绒螯蟹光感受器超微结构的影响

用透射电镜研究了暗适应时中华绒螯蟹的光感受器超微结构与外界钙离子浓度的关系,结果显示出与培育在生理溶液中的光感受器相比,细胞外钙离子浓度升高,使得感杆束的直径急剧缩小,感杆束周围胞质增厚,胞饮泡增加,膜下猪泡囊极度减小。胞质中多囊体的数量和直径减小,而板模体和溶酶体的数量增加,同时细胞内的色素颗粒增多。分布在小网膜细胞的远端。细胞的结构表现为类似光适应状态,与之相反,细胞外钙离子浓度降低时小眼的感     

体外培养的鸡胚神经元迁移的光镜和扫描电镜的研究

用鸡胚神经细胞为材料,建立神经细胞体外培养技术,相差显微镜观察到鸡胚神经元可以沿着神经胶质细胞纤维运动。扫描电子显微镜揭示体外培养神经元与胶质细胞的关系。     

中华绒螯蟹蜕壳过程中肌肉的组织学、超微结构及主要蛋白质含量的变化

为探讨中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)蜕壳前后肌肉组织的形态特征变化, 采用石蜡切片、电镜及生物化学方法, 研究了中华绒螯蟹蜕皮过程中步行足和腹部肌肉的组织学、超微结构及主要蛋白质含量的变化。结果显示: 相对于蜕皮间期, 步行足在蜕皮前后组织学形态特征无明显变化; 超微结构在蜕皮前无明显变化, 蜕皮后可见肌原纤维纵裂及肌小节横裂现象, 表明蜕皮后外骨骼硬化的过程伴随着肌肉的生长。相对于蜕皮间期, 腹部肌肉在蜕皮前后组织学特征变化明显: 蜕皮前肌束间隙增大, 蜕皮后肌束内肌纤维间隙增大。电子显微镜观察显示, 蜕皮前肌原纤维在内部降解, 出现空洞, 肌原纤维边缘降解, 导致肌原纤维间隙增大; 蜕皮后肌原纤维重新组装、重建, 恢复到间期正常形态。生物化学研究发现, 蜕皮前后步行足和腹部肌肉中肌原纤维蛋白和可溶性蛋白含量的变化同其结构特征的变化相一致。以上研究结果表明, 中华绒螯蟹肌肉组织的结构特征同蜕皮周期密切相关。     

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)雄性生殖系统的组织学研究

中华绒螯蟹雄性生殖系统的组织学研究表明:生精小管一侧为管壁上皮,另一侧为生发区,生殖细胞由生发区基底部同管腔增殖。输精管分为输精细管和贮精囊,管壁上皮具分泌功能,贮精囊有肌肉层。射精管壁肌肉层较厚,粘膜形成纵行皱襞。副性腺内壁为单层立方上皮。生殖系统发育有明显的季节性,8月开始发育加速,10月进入高峰,4月开始发育停滞。     

脂质营养对中华绒螯蟹幼体肝胰腺超微结构的影响

采用透射电镜技术研究了中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis)各期幼体肝胰腺的超微结构,结果表明,蟹的肝胰腺腺管上皮由Ｅ,Ｆ,Ｂ和Ｒ４种细胞组成,其中Ｅ细胞为胚胎细胞,能分化成其他３种细胞;Ｂ,Ｒ和Ｆ细胞均呈,高柱状,腔面有发达的微绒毛,基底部有基膜,呈明显的极性分布;Ｂ细胞粗面内质网丰富,胞质中有１－２个大液泡,起分泌作用,属分泌液;Ｆ细胞内含发达的粗面内质网,还可见酶原颗粒;Ｒ细胞胞质中有丰富的滑面内质网、游离的核糖体和脂肪滴,主要起贮存养人的作用。细胞的连接有紧密连接和中间连接２种方式。与脂质营养缺乏时相比,脂质营养充足的幼体其肝胰腺超微结构有如下特点：Ｒ细胞质中有连多的脂肪滴,线粒体呈饱满的圆形或椭圆形,且膜未见有内陷或萎缩,滑面内质网膨胀成小泡状结构。     

中华绒螯蟹成熟卵形态和超微结构的研究

中华绒螯蟹的成熟卵仅有初级卵膜,无次级和三级卵巢,质膜初期厚而多层,且具皱褶,卵核在卵的发育过程中变化很大,未发见中心粒,内质网和高尔基体均始见于蟹卵发育的初期,皮层颗粒先出现于蟹卵深部,随后移到卵的表层,无滋养细胞,蟹卵由卵泡细胞提供物质,形成卵黄,此外,还可直接从血淋巴内摄取卵黄前身物质。     

中华绒螯蟹不同生理阶段腹肢的结构变化及粘液腺的发育特征

用显微及亚显微方法研究了中华绒螯蟹雌体不同生理阶段(幼蟹、未成熟蟹、成熟蟹、抱卵蟹和流产蟹)腹肢的体壁结构变化和粘液腺发育特征。体壁的上皮细胞层常与粘液腺相连,粘液腺分泌物经导管穿过各层角膜排出。不同生理状况下中华绒螯蟹的腹肢体壁各角膜层结构的比例及致密度有明显的差异,粘液腺细胞及导管的数量不同,粘液腺与上皮细胞的连接程度也不同。粘液腺是否正常分泌、刚毛囊的开闭均与中华绒螯蟹的胚胎附着有关。比较研究发现,太湖抱卵蟹腹肢体腔内腺体比温州本地抱卵蟹腹肢内腺体发达,分泌的粘液也特别多。分析认为中华绒螯蟹腹肢组织结构、粘液腺的发育和分泌状况与胚胎流产有密切的关系。     

Zn2+对中华绒螯蟹溞状幼体肝胰腺超微结构的影响

研究了不同Zn2+浓度对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)()状幼体肝胰腺细胞超微结构的影响.当Zn2+浓度超过200 μg/L时,与对照组相比,肝胰腺结构受到了显著的影响.成熟和正在形成的B细胞的空泡中有很多含有金属的电子致密颗粒(EDG,可能为金属蛋白复合体),随着B细胞的成熟和B细胞从肝胰腺管壁上脱落,这些EDG也被释放到管腔中,因此肝胰腺的管腔中常有许多此类颗粒存在.B细胞空泡或管腔中的EDG与环境中Zn 2+浓度高低呈正相关.E细胞质中也出现了很多空泡,与正常E细胞的结构明显不同.R细胞的细胞质常解体形成大的空泡,被破坏的程度较为严重.在Zn2+浓度>1 000 μg /L时,肝胰腺遭到严重破坏,细胞结构几乎不存在.研究结果表明,肝胰腺的B细胞在Zn 2+的解毒方面起重要作用,但当Zn2+浓度超过了肝胰腺B细胞的解毒能力时,就会引起肝胰腺细胞(如R和E细胞)结构异常,甚至破坏整个肝胰腺细胞结构,从而影响幼体的生长,甚至造成死亡.     

河蟹MTXO细胞的离体培养和细胞学研究

对河蟹眼柄神经分泌细胞的细胞学进行了研究,建立了河蟹眼柄视神经节终髓Ｘ器官（ＭＴＸＯ）细胞原代培养的实用方法。ＭＴＸＯ神经分泌细胞在添加了谷氨酰胺和常量抗菌素的Ｌ－１５培养基中表现出快速的再生生长,细胞生长可保持３～５天,维持存少约８天。在ＰＨ６．８～７．８,温度２０℃～２８℃及渗适压９５０～１１００ｍＯｓｍ条件下,均能存活和生长,但在无Ｃａ＾２＋或添加Ｃａ＾２＋通道阻ｄＣｌ２的培养基中不能生长