慢性乙型肝炎患者干扰素α受体1基因启动子多态性和干扰素应答的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎患者的Ⅰ型干扰素受体1(IFNAR1)基因启动子多态性和IFN-α治疗应答之间的关系.方法 选择接受IFN-α治疗的慢性乙型肝炎患者61例,采用重组IFN-α2b 500万U,隔天肌内注射,疗程48周,观察应答情况,对入选患者的IFNAR1基因启动子区进行测序,计量资料采用t检验,计数资料采用卡方检验.结果 治疗的慢性乙型肝炎患者中,完全应答22例,部分应答8例,无应答31例.IFNAR1基因启动子区一408C/T、-3C/T、-77GT双核苷酸重复序列[-77(GT),]存在基因多态性,这三个位点基因多态性存在连锁,形成-408C/-77(GT)5/-3C等基因单体型.IFNAR1启动子区基因型为-408C/-77(GT)5/-3C及-408C/-77(GT)5/-3C的,基因型为-408C/-77(GT)5/-3C和非-408C/-77(GT)5/-3C的慢性乙型肝炎患者对IFN-α的应答率为61.0%,高于基因型为非-408C/-77(GT)5/-3C,非-408C/-77(GT)5/-3C患者的25.0%(X2=6.961,P=0.008).结论 IFNAR1启动子基因型为-408C/-77(GT)5/-3C及-408C/-77(GT)5/-3C的,-408C/-77(GT)5/-3C和非-408C/-77(GT)5/-3C的慢性乙型肝炎患者对IFN-α治疗应答较好,IFNAR1基因启动子多态性与慢性乙型肝炎患者的干扰素应答有关.     

核苷(酸)类似物序贯派格宾治疗慢性乙型肝炎实现功能性治愈的预测因素

目的 探究长期核苷(酸)类似物(NUC)抗病毒治疗后序贯派格宾(聚乙二醇干扰素α-2b)治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者实现功能性治愈的独立预测因素。方法 以青岛市多家医院2018年—2021年收治的CHB患者共162例为研究对象,所有患者均应用派格宾治疗至少48周,且在派格宾治疗前经过了1年及以上的NUC治疗。根据派格宾治疗48周时是否实现HBsAg阴转将入组患者分为功能性治愈组(79例)和未治愈组(82例),比较两组患者相关临床指标的差异。定量资料两组间比较采用两独立样本t检验和Mann-Whitney U秩和检验;定性资料两组间比较采用χ²检验。相关性分析采用Spearman检验。单因素和多因素Logistic回归分析实现功能性治愈的独立预测因素。绘制相关变量的受试者工作特征曲线(ROC曲线),以曲线下面积(AUC)评估变量的预测准确度。结果 功能性治愈组患者的基线HBsAg显著低于未治愈组[21.63(3.33～157.60)IU/mL vs 794.70(336.10～1 185.34)IU/mL,Z=-8.869,P<0.001],派格宾治疗12...     

慢性乙型肝炎患者干扰素-α治疗应答与干扰素-α/β受体启动子-408基因多态性的相关性

目的:探讨干扰素(IFN)-α/β受体启动子-408位点的单核苷酸多态性(SNP)与IFN疗效的关系。方法:应用聚合酶链反应(PCR)并基因测序法检测210例慢性乙型肝炎(CHB)患者(轻度38例、中度102例、重度70例)的IFN-α/β受体基因启动子-408位点的SNP。对210例中既往未用过IFN治疗的80例CHB患者给予聚乙二醇化干扰素α-2a or 2b(Peg-IFN-α-2a/2b)治疗48周。比较SNP与Peg-IFN疗效的关系。结果:80例患者中,IFN治疗持久应答(SR)33例(41.3%),非持久应答(NSR)47例(58.7%)。IFN-α/β受体启动子-408位点CT基因型患者干扰素治疗SR为65%(13/20),显著高于CC基因型患者干扰素治疗SR 29.5%(13/44),两者比较差异有显著性意义(χ2=7.166,P=0.007)。干扰素治疗SR组IFN-α/β-408位点等位基因C、T的频率与NSR组的频率比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:IFN-α/β受体启动子-408为CT杂合基因型的CHB患者可能对Pec-IFN治疗效果较好。     

快速检测IL-28B rs12979860基因多态性双色荧光PCR法的建立

目的建立一种适合临床常规检测白细胞介素28B(interleukin-28B,IL-28B)rs12979860基因多态性的快速实验方法。方法随机收集我院223例丙型肝炎住院患者外周血标本,设计针对IL-28B rs12979860基因多态性位点的特异性引物和荧光探针,直接通过双色荧光PCR法检测IL-28B rs12979860基因多态性,以基因测序法进行验证,同时初步探讨IL-28B rs12979860不同基因型在本研究人群中的分布频率。结果双色荧光PCR法能很好地鉴别IL-28B rs12979860 3种基因型,与测序法结果一致率为100%。IL-28B rs12979860基因多态性中T/T、C/T和C/C基因型在本研究人群中的分布频率分别为1.79%(4/223)、23.32%(52/223)和74.89%(167/223)。结论根据IL-28B rs12979860单核苷酸多态性基因型特异性探针和引物所建立的双色荧光PCR法能快速有效地进行rs12979860基因多态性分型,方法快速、可靠,为丙型肝炎患者抗病毒个体化治疗效果的预测提供了一种有效的检测方法。     

聚乙二醇干扰素α-2a治疗多种核苷和核苷酸类药物耐药慢性乙型肝炎的效果观察

目的观察聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)α-2a治疗对多种核苷和核苷酸类药物(NAs)耐药的HBe Ag阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者的疗效。方法选取武警上海市总队医院2009年8月-2014年2月住院及门诊的对多种NAs耐药的HBe Ag阳性CHB患者120例,根据治疗方法不同将患者分为2组,每组60例。治疗组患者全部停用NAs,改用PEG-IFNα-2a治疗48周;对照组患者维持原有NAs治疗方案不变,加用PEG-IFNα~(-2)a治疗48周。观察治疗24、48周及停药后24周时乙型肝炎血清学标志物及HBV DNA变化情况。计数资料组间比较采用χ~2检验,计量资料组间比较采用t检验。结果 2组患者均取得了较为满意的疗效,治疗第24、48周及停药后24周时2组的血清HBe Ag阴转率、HBe Ag转换率、HBV DNA阴转率以及HBs Ag阴转率相比,差异均无统计学意义(P值均0.05)。PEG-IFNα-2a治疗过程中出现的不良反应包括发热、头痛、注射部位炎症、腹泻、中性粒细胞减少、贫血及抑郁,情况均不严重。结论 PEG-IFNα-2a治疗对多种NAs耐药的CHB安全有效,并可考虑直接换用PEG-IFNα-2a继续抗病毒治疗。     

重组人干扰素α-2b治疗慢性乙型肝炎引起肾病综合征1例

患者女性,28岁.因"双下肢水肿16d,蛋白尿3 d"于2008年1月19日入院.发现HBV标志物(HBsAg、HBeAg和抗-HBc)阳性6年,其母亲和姐姐HBV标志物均为阳性,母亲2年前死于原发性肝癌.     

白细胞介素-18启动子-137G/C基因多态性和血浆IL-18含量与急性脑梗死的相关性

目的探讨白细胞介素-18( interleukin-18,IL-18)基因启动子- 137G/C多态性及血浆IL-18含量和脑梗死的相关性。方法入选北方地区汉族急性脑梗死患者218例,以年龄和性别相匹配的218名汉族健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血浆IL.-18含量,应用序列特异性引物-聚合酶链反应技术检...     

胰岛素样生长因子Ⅰ基因启动子区CA重复序列多态性与2型糖尿病的相关性

目的 研究胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因启动子区CA重复序列多态性与2型糖尿病发病的相关性.方法 采用口服葡萄糖耐量试验筛选出性别、年龄匹配的新诊2型糖尿病患者147例,正常糖耐量者159例,将抽提的基因组DNA应用聚合酶链反应扩增,再通过选择不同长度的纯合子样本测序确定CA重复的次数,以确定等位基因,分析其与2型糖尿病发病的相关性.结果 CA重复各基因型分布在2型糖尿病组及正常糖耐量组无显著差异.携带≥(CA)20等位基因的受试者较不携带该种等位基因的受试者具有显著低的血尿酸[(4.18±1.25对4.63±1.36)mg/dl,P=0.03].结论 携带CA重复次数≥20的等位基因可能是2型糖尿病的保护因子.     

干扰素α-2b与聚乙二醇干扰素α-2a治疗低病毒载量慢性丙型肝炎快速及早期病毒学应答临床观察

目的研究干扰素类型在低病毒载量慢性丙型肝炎抗病毒治疗应答的影响。方法选择120例慢性丙型肝炎患者为研究对象,将120例患者分为聚乙二醇干扰素α-2a(派罗欣,Peg-IFN)组58例和普通干扰素α2b(凯因益生)组62例。所有患者用干扰素联合利巴韦林抗病毒治疗。Peg-IFN组选用180μg每周注射1次,普通干扰素组为600MU隔日注射1次。利巴韦林使用剂量900~1 200mg/d。疗程:达RVR之后再应用24周;达EVR之后再应用36周;对于12周未达EVR者再应用48周。对抗病毒治疗的应答情况与干扰素类型及丙肝病毒载量的关系进行回顾性分析。结果两组中,普通干扰素组RVR获得率为79%,EVR获得率为85.4%,派罗欣组的RVR获得率为81%,EVR获得率为89.6%。对于RVR的获得,x~2=0.009,P0.05,对于EVR的获得,x~2=0.036,P0.05,对于SVR的获得,x~2=0.010,P0.05,组间比较差异无统计学意义。结论在病毒载量较低的情况下,聚乙二醇干扰素α-2a与普通干扰素α-2b抗病毒治疗的RVR、EVR、SVR获得率差异无统计学意义。     

丙型肝炎肝硬化的“分级”及聚乙二醇干扰素α-2a联合利巴韦林的抗病毒治疗

目的观察丙型肝炎肝硬化不同条件下抗病毒治疗的临床效果,拟定丙型肝炎肝硬化的分级规范治疗标准。方法选择确诊为丙型肝炎肝硬化的患者82例,以32例慢性丙型肝炎（CHC）患者为对照,根据肝硬化程度、脾功能亢进情况以及抗病毒治疗的耐受分为不同抗病毒治疗组：在采取造血因子刺激、脾栓塞或脾切除治疗后,观察患者脾功能亢进的缓解情况,解决脾功能亢进后,以标准治疗方案为基础,采取＂分级＂抗病毒治疗策略,可以实施更为主动的个体化治疗方案;分析不同组别的抗病毒治疗效果,并随访患者肝功能恢复状况。结果经过治疗后,各组患者白细胞及血小板计数显著升高,在给予抗病毒治疗后,脾栓塞及脾切除治疗组均有约60%患者获得早期病毒学应答（EVR）,而其持续病毒学应答（SVR）比率分别为59.3%与63.6%,丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平显著下降。结论丙型肝炎肝硬化＂分级＂抗病毒治疗策略,通过采取不同的抗病毒治疗方案,可以延缓病情进展,提高患者生活质量。     

聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎的随机对照临床研究

目的评价小剂量聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型病毒性肝炎的疗效和安全性.方法192例慢性丙型肝炎患者随机分为两组：聚乙二醇干扰素α-2b 0.5μg/kg每周一次联合利巴韦林750～1050 mg/d,或普通干扰素α-2b 3 MIU每周3次联合利巴韦林750～1050 mg/d.疗程48周,治疗结束后随访24周.结果聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗的持续病毒学应答率为53.8%,而普通干扰素α-2b联合利巴韦林治疗的持续病毒学应答率为58.1%,两组持续病毒学应答率相当（P=0.966）.聚乙二醇干扰素α-2b治疗组的药物相关性不良反应发生率为100%,而普通干扰素α-2b治疗组的不良反应发生率为95.2%,两组间差异有统计学意义（P=0.033）.但是没有与干扰素α-2b聚乙二醇化相关的特有的新的不良反应发生.结论小剂量聚乙二醇干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎的疗效和安全性与普通干扰素α-2b联合利巴韦林治疗的疗效和安全性相当.     

线粒体解耦联蛋白2基因启动子-866G＞A多态性与2型糖尿病缺血性脑卒中的相关性研究

目的 探讨线粒体解耦联蛋白2 (UcP-2)基因启动子-866G＞A变异与2型糖尿病患者合并缺血性脑卒中(IS)发生风险的相关性.方法 对844例2型糖尿病患者(伴IS组404例,不伴IS组440例)进行为期4年的前瞻性队列研究,提取所有受试者的基因组全血DNA,用TaqMan MGB探针对UCP-2基因启动子-866G＞A进行基因分型,分析不同基因型与2型糖尿病合并IS发生风险的关联性.结果 无论在基线时还是在4年随访过程中,携带A等位基因的2型糖尿病女性患者IS发生风险明显高于GG野生型(P＜0.05),但男性患者3种基因型之间差异无统计学意义.结论 UCP-2基因启动子-866G＞A变异增加中国女性2型糖尿病并发IS的风险.     

环氧合酶-2基因启动子区单核苷酸多态性与非酒精性脂肪肝遗传易感性的关系

目的 通过检测环氧合酶-2(COX-2)基因启动子区单核苷酸的多态性,以探讨其与非酒精性脂肪肝(NAFLD)遗传易感性的关系.方法 对200例NAFLD患者和206名正常对照,采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对COX-2基因启动子区-765G＞C和-1195G＞A多态性进行基因型分析.计量资料结果用均数±标准差((-x)±s)表示,经方差齐性检验后,行t检验;性别、基因型及等位基因频率的比较行x2检验.结果 正常对照中,COX-2基因启动子区-765G＞C和-1195G＞A等位基因的分布频率分别为48%和2%,NAFLD患者组二者分别为54%和5%.多变量Logistic回归分析显示:-765GC基因携带者与-765GG基因携带者相比较,前者发生NAFLD的比值比(OR)=2.35 (95% CI为1.17～3.65);-1195AA基因携带者与-1195GG基因携带者相比较,前者发生NAFLD的OR=1.13 (95% CI为1.01～2.46).与单体型G-1195-G765相比较,含有A1195的A-1195-C-765、A1195-G765两种单体型发生NAFLD的相对风险明显升高,OR分别为1.42 (95% CI为1.11～1.63,P＜0.05)和4.24(95% CI为1.72～14.22,P＜0.01).且A-1195-C765发生NAFLD的OR值高于A-1195-G-765、G-1195-C765的单体型.这一结果提示在同一单体型内-1195A与-765C之间存在交互作用.结论 COX-2基因启动子区的-1195G＞A和-765G＞C单核苷酸存在多态性,与NAFLD发生相关,是决定NAFLD个体遗传易感性的重要因素.     

女性护骨素基因启动子区G209A与T245G多态性和骨密度及骨转换的关系

研究护骨素基因启动子区G209A与T245G多态性和女性骨密度及骨转换生化指标的关系，结果显示G209A与T245G多态性和骨密度及骨转换生化指标无关。     

新疆维汉民族CD14基因C(-260)→T多态性与冠心病、血脂的关系

目的研究新疆地区维汉民族患者CD14基因启动子C（-260）→T位点多态性的分布特点及其与冠心病（CHD）、血脂的相关关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术的分析方法，检测了390例新疆地区维汉患者CD14基因启动子C（-260）→T多态性，同时检测其血脂水平；以冠状动脉造影为“金标准”，区分CHD组及对照组。结果新疆地区汉族患者中CD14基因启动子-260位点CC、CT和TT基因型频率在CHD组和对照组分别为20．33％、52．70％、26．97％和37．58％、43．63％、18．79％，等位基因C、T频率分别为46．68％、53．32％和59．40％、40．60％。该基因多态性的分布在维汉民族间差异均无统计学意义；与国外不同种族相比，仅与捷克人群差异有统计学意义（P〈0．05）。同时该位点多态性与血脂水平间不存在相关关系（P〉0．05）。结论CD14基因C（-260）→T位点多态性与新疆地区维汉人群CHD发病具有相关性，T等位基因可能是CHD的遗传易感基因；该位点多态性在维汉民族间的分布差异无统计学意义；与捷克、德国、日本、美国等不同种族人群进行比较，该位点多态性仅与捷克人群差异有统计学意义。该多态性不同基因型间血脂水平差异无统计学意义，其致CHD机制可能与血脂代谢无关。     

福建汉族脑梗死患者氯吡格雷抵抗的影响因素及与CYP2C19基因多态性的关系

目的探讨影响福建汉族脑梗死患者氯吡格雷抵抗的发生率、相关危险因素、与CYP2C19基因多态性的关系及其对白细胞介素6(IL-6)的影响。方法前瞻性纳入福建汉族脑梗死恢复期(≥3个月)患者102例。入院后给予氯吡格雷75 mg/d,于用药后第8天,采用血栓弹力图检测血小板聚集抑制率,其中≥40%为氯吡格雷敏感组,40%为氯吡格雷抵抗组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测CYP2C19*2和*3位点的基因型;酶联免疫吸附法检测治疗前后的血清IL-6水平。结果 102例患者中,氯吡格雷抵抗组27例,氯吡格雷抵抗发生率为26.5%。(1)氯吡格雷抵抗组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平高于氯吡格雷敏感组[分别为(3.6±0.9)、(3.2±0.8)mmol/L,P0.05];而性别、高血压病、糖尿病、总胆固醇、三酰甘油及高密度脂蛋白胆固醇的差异均无统计学意义(P均0.05)。(2)两组患者的CYP2C19*2和CYP2C19*3位点等位基因频率和基因型总体分布不一致(P0.01)。氯吡格雷抵抗组的*1等位基因频率和*1/*1基因型频率明显低于氯吡格雷敏感组(分别为40.7%对比80.0%,18.5%对比61.3%,均P0.01),而*2等位基因频率和*2/*2基因型频率明显高于氯吡格雷敏感组(分别为53.7%对比18.7%,29.6%对比1.3%,P均0.01)。(3)治疗后氯吡格雷抵抗组IL-6浓度明显高于氯吡格雷敏感组[(18.4±1.8)ng/L对比(12.9±1.8)ng/L,P0.01]。与治疗前比较,氯吡格雷抵抗组血清IL-6水平下降(5.1±2.6)ng/L,低于氯吡格雷敏感组的(10.3±2.7)ng/L,P0.01。结论福建汉族脑梗死患者氯吡格雷抵抗发生率较高。氯吡格雷抵抗不仅与CYP2C19的突变型基因相关,而且与LDL-C增高有关。氯吡格雷抵抗削弱了药物的抗炎作用。     

双色荧光定量聚合酶链反应诊断生殖器溃疡性疾病病因的实验研究及临床应用评价

目的 建立检测梅毒螺旋体(TP)、单纯疱疹病毒(HSV)和杜克雷嗜血杆菌(HD)的双色荧光定量聚合酶链反应(DC-FQ-PCR)方法,并评价其在诊断生殖器溃疡性疾病(GUD)病因中的临床价值.方法 根据TP、HSV和HD的基因库序列设计引物,对3株参考株进行扩增,证实其特异性;再设计探针做三种参考株的双色荧光定量PCR;以10倍稀释不同浓度模板扩增测定其敏感度.同时检测320份生殖器溃疡处分泌物标本,每份标本同时进行暗视野显微镜(D-F)、梅毒血清学试验(STS)、HD培养和酶免疫法(EIA)检查HSV抗原.结果 用FQ-M-PCR检测TP、HSV和HD 3株参考株均出现特异性扩增片段,扩增片段大小分别为227bp、233bp和238bp;其敏感度为10拷贝/μl.将DC-FQ-PCR用于检测320例生殖器溃疡分泌物标本,与D-F、TPHA、EIA法比较,有较好的一致性(Kappa值分别为0.758、0.797、0.703).结论 DC-FQ-PCR是一种高灵敏度、高特异性和高精确性的检测生殖器溃疡标本中TP、HSV、HD的方法,可用于临床GUD的病因诊断.     

Allele-specific oligonucleotide polymerase chain reaction for the determination of Rh C/c and Rh E/e antigens in thalassaemic patients

Background

Thalassaemia is a genetic disease in which there is a relative or complete lack of alpha or beta globin chains. Patients with moderate to severe forms of thalassaemia need transfusions from the early years of life. Antibody production against blood group antigens may cause many problems in preparing compatible blood units for transfusion. The identification of definite blood group phenotypes by the haemagglutination method can be difficult because of the mixed population of red blood cells from the donor and recipient.

Materials and methods

Forty multiply transfused thalassaemic patients and ten healthy controls with no history of blood transfusion were enrolled in this study. Allele-specific oligonucleotide polymerase chain reaction (ASO-PCR) and haemagglutination methods were used to determine the presence of Rhesus (Rh) C, c, E and e antigens.

Results

In this study four primer sets were used for ASO-PCR amplification of RhC/c and RhE/e. Although PCR assays for RhC/c and RHE/e genotyping have been described previously, in this study we used a new condition for PCR by decreasing the annealing temperature from 63 °C to 58 °C in order to amplify all four genes in the same condition. In order to evaluate this single run molecular method, we used the haemagglutination test as the standard method and compared the results from the two methods. We found discrepancies between phenotype and genotype results among patients with beta thalassaemia, but complete agreement between phenotype and genotype in the control group.

Conclusions

The advantage of this new ASO-PCR method compared to a restriction fragment length polymorphism (RFLP) PCR method is that with the former all four genes can be amplified at the same time by PCR, and electrophoresis can be performed immediately to determine individual antigen profiles. The simplicity of the ASO-PCR method makes it suitable for routine use in medical centres and it is also cheaper than RFLP-PCR. Furthermore, as shown by previous studies, the results of haemagglutination and PCR tests often differ because the existence of donor red blood cells in the patient’s circulation can interfere with the interpretation of the haemagglutination test.     

解偶联蛋白2基因-866G／A多态性与2型糖尿病代谢表型相关性的核心家系研究

目的探讨解偶联蛋白2（UCP2）基因-866G／A多态性与2型糖尿病及相关代谢异常性状的关系。方法2005年5月至2007年9月,通过先证者引荐法在北京市房山区农村社区共募集287个2型糖尿病家系。应用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性方法进行UCP2基因-866（3／A多态性鉴定。采用非参数同胞对连锁分析和以家庭为基础的关联分析进行基因多态性与表型的相关性检验。结果2型糖尿病家系人群中UCP2基因-866G／A多态性AA、GA和GG三种基因型频率分别为19．7％、52．9％和27．4％,A、G等位基因频率分别为0．461和0．539;非参数连锁分析未发现阳性结果;以家庭为基础的关联分析发现G等位基因具有传递优势,与代谢综合征和中心性肥胖两表型相关（Z=2．28、2．01,均P〈0．05）,AA基因型也与上述两表型相关（Z=-2．22、-2．01,均P〈0．05）。结论UCP2基因-866G／A多态性与2型糖尿病家系人群的代谢综合征和中心性肥胖相关,与2型糖尿病及血脂异常无关。