参地补肾胶囊对肾小球硬化大鼠MMP-9、TIMP-1及其受体mRNA表达的影响

目的:观察参地补肾胶囊对肾小球硬化大鼠基质金属蛋白酶(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)及其受体mRNA表达的影响,探讨其抗肾小球硬化的机制。方法:采用单侧肾脏切除同时尾静脉注射阿霉素的方法建立肾小球硬化大鼠模型,SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、参地补肾胶囊组、贝那普利组、苏黄泄浊丸组,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血浆蛋白(Alb);免疫组化法检测MMP-9、TIMP-1的表达,计算MMP-9/TIMP-1比值,RT-PCR检测受体TIMP-1mRNA的表达水平。结果:与模型组比较,参地补肾胶囊组能抑制TIMP-1及其受体mRNA的表达(P<0.01),上调MMP-9表达(P<0.01),提高MMP-9/TIMP-1的比值。结论:参地补肾胶囊可抑制TIMP-1及其受体mRNA的表达,改善肾脏病理形态,进而延缓肾小球硬化进展。     

依贝沙坦对阿霉素肾病大鼠肾小管间质的保护作用

目的 探讨依贝沙坦（irbesartan)对阿霉素诱导重复单肾大鼠肾小管及间质的保护作用及其可能的调节机制。方法 将诱导的肾病大鼠分为肾病组和依贝沙坦治疗组，并设假手术组为正常对照。检测依贝沙坦治疗4周后，3组大鼠肾功能和组织病理改变，并用免疫组织化学（组化）或原位杂交的方法检测肾小管间质中转化生长因子β1(TGF-β1），基质金属蛋白酶9（MMP-9）及组织金属蛋白酶抑制剂1（TIMP-1）的表达。结果 治疗组大鼠24h尿蛋白，肾重/体重，肾小球截面积以及病理改变与对照组相比明显减轻，肾小管间质中TGF-β1，MMP-9，TIMP-1表达均有不同程度的减少。结论 通过调节细胞外基质降解作用。依贝沙坦能延缓单侧肾切除加重复阿霉素注射诱导的肾病大鼠肾小管间质的病变。     

黄芪、太子参对大鼠肾小球系膜细胞MMP-2及TIMP-2-mRNA表达的影响

目的：观察黄芪、太子参对大鼠肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）及基质金属蛋白酶抑制剂-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2）-mRNA表达的影响。探讨黄芪、太子参对肾小球硬化的防治作用。方法：（1）应用血清药理学方法,制取中药的药理血清。（2）采用血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）作为刺激因子,培养大鼠肾小球系膜细胞,使其发生增殖。（3）应用反转录多聚酶链反应技术（RT-PCR）观察各组间MMP-2及TIMP-2m-RNA表达的情况。结果：黄芪、太子参对TIMP-2有显著地抑制作用,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。对MMP-2的影响差异无统计学意义。结论：黄芪、太子参通过抑制TIMP-2的基因表达,从而达到延缓肾小球硬化的作用。     

愈肾颗粒小复方对大鼠肾小球系膜细胞MMP-3/TIMP-1 mRNA表达的影响

目的：从基因水平探讨愈肾颗粒不同小复方对肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-3（MMP-3）及基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）mRNA表达的影响,对具有延缓和防治肾小球硬化进程的有效药味探讨其作用机制。方法：将愈肾颗粒折方,并重组为益气活血通络（复方1号）、益气解毒活血（复方2号）、益气活血止血（复方3号）不同小复方。应用血清药理学方法,制取3组中药小复方及正常组的药理血清。采用体外培养法培养大鼠肾小球系膜细胞;应用ELISA法测定10%FBS组及血管紧张素Ⅱ组纤维连接蛋白（FN）、Ⅳ型胶原的含量;采用逆转录-聚合酶链反应技术（RT-PCR）观察各组间MMP-3及TIMP-1的mRNA的表达情况。结果：（1）血管紧张素Ⅱ组FN及Ⅳ型胶原的分泌量显著增加,同时与10%FBS组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）复方1号组对MMP-3有显著的促进作用,与病理组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。其余各组虽有促进MMP-3分泌的趋势,但差异无统计学意义。（3）3组小复方对TIMP-1的影响差异无统计学意义。结论：（1）复方1号组有显著的促进MMP-3基因表达的作用。（2）复方1号组通过促进MMP-3的基因表达,从而发挥延缓和防治肾小球硬化的作用。（3）复方2号组与复方3号组对MMP-3的基因表达有促进趋势。     

肾络宁对IgA肾病大鼠肾小管间质损害的实验研究

目的：探讨IgA肾病大鼠肾小管间质损害及中药复方肾络宁的干预作用。方法：SD大鼠随机分为正常组、模型组、肾络宁组、肾炎康复片组。采用牛血清白蛋白和葡萄球菌肠毒素B复合感染的方法建立大鼠IgA肾病模型；实验共16周，药物干预后常规检测尿红细胞、尿蛋白、血尿素氮、肌酐、尿NAG酶，以及免疫荧光观察肾组织病理；原住杂交，免疫组化及计算机图像分析系统观察大鼠肾小管间质损害的病理变化，以及Ⅲ型胶原（Col-Ⅲ）、转化生长因子β1（TGF-β1）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的表达情况。结果：模型组出现肾小管上皮细胞变性，线粒体结构消失，数量减少，间质成纤维细胞增生及胶原纤维形成；尿红细胞、尿蛋白、NAG酶、血肌酐、尿素氮明显增高，Col—Ⅲ、TGF-β1、PAI-1、TIMP-1表达明显增高，MMP-1表达明显降低。肾络宁及肾炎康复片组小管间质损害明显减轻；血尿、蛋白尿、血肌酐、尿素氮、尿NAG明显降低，Col—Ⅲ、TGF-β1、PAI—1、TIMP—1表达明显降低，MMP—1表达明显升高。结论：肾络宁可明显减轻IgA肾病大鼠肾小管间质损害，改善肾功能，延缓间质纤维化及肾衰竭的进程。     

基质金属蛋白酶9、3和金属蛋白酶组织抑制物1在原发性膜性肾病肾小球内的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）、基质金属蛋白酶3（MMP-3）和金属蛋白酶组织抑制物1（TIMP-1）在原发性膜性肾病（IMN）患者肾小球内的表达变化及其与蛋白尿、Scr的关系。方法用免疫组织化学技术分别检测44例IMN患者（IMN组）与6例正常对照者（对照组）肾小球内MMP-9、MMP-3和TIMP-1的表达。结果MMP-9及MMP-3在对照组正常肾组织的肾小管上皮细胞、肾间质和肾小球足细胞有少量表达；在IMN组肾小球足细胞、系膜细胞、肾小球基底膜及肾小管上皮细胞有表达。IMN组肾小球内MMP-9及MMP-3的表达均较对照组显著增强（P〈0．05）。TIMP-1在对照组正常肾组织的肾小管上皮细胞有少量表达，肾小球内无表达；在IMN组肾小球足细胞、肾小管上皮细胞有表达。IMN组肾小球内TIMP-1的表达较对照组显著增强（P〈0．01）。IMN组24h尿蛋白定量显著高于对照组（P〈0．01）。Ⅱ期MN组肾小球MMP-9／TIMP-1及MMP-3／TIMP-1比值较Ⅰ期MN组明显下降（P〈0．01）。IMN组肾小球内MMP-9的表达与Scr呈负相关（r=-0．02，P〈0．05）；TIMP-1的表达与Scr呈正相关（r=0．34，P〈0．05）。结论MMP-9与TIMP-1从正反两方面影响IMN患者肾功能的改变。MMP-9、MMP-3的异常表达与IMN患者蛋白尿之间可能相关；IMN患者肾小球MMP／TIMP比值失衡可能与IMN患者肾小球基底膜增厚相关。     

基质金属蛋白酶对大鼠慢性阻塞性肺病模型气道细胞外基质重塑的作用及影响因素

目的研究基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMP-1)在慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠模型气道细胞外基质重塑中的作用及N-乙酰半胱氨酸(NAC)、蛋白激酶C抑制剂H7及转移生长因子(TGF-β)单抗干预的影响.方法Wistar大鼠随机分为(1)对照组;(2)COPD模型组,采用熏香烟加气管注小量内毒素法复制COPD模型;(3)NAC干预组(NAC组);(4)H7干预组(H7组);(5)TGF-β单抗干预组.观察各组病理形态学改变;生化法测定支气管肺组织羟脯氨酸含量;免疫组化法和RT-PCR法测支气管肺组织MMP-9、2及TIMP-1,以及TGF-βⅠ、Ⅱ受体的表达;SDA-PAGE明胶酶谱学测定支气管肺组织MMPs酶活性.结果模型组气道壁以Ⅰ型胶原为主的细胞外基质及羟脯氨酸含量较对照组显著增多,NAC组及TGF-β单抗组较模型组显著减少,H7组羟脯氨酸含量较模型组显著增多.模型组MMP-9、2及TIMP-1,以及TGF-βⅠ、Ⅱ受体在气道上皮、肺泡巨噬细胞、肺血管内皮细胞等细胞中蛋白和(或)mRNA表达显著增强,72 kdMMP-2及92 kdMMP-9酶原活性显著增高,三个干预组MMP-2、9及TIMP-1的蛋白及mRNA表达较模型组显著减弱,72 kdMMP-2及92 kdMMP-9酶原活性显著减低,三个干预组TGF-βⅠ、Ⅱ受体亦较模型组有不同程度减弱.结论以Ⅰ型胶原为主的细胞外基质显著增生是COPD气道重塑的重要病理改变.COPD气道细胞外基质降解及合成代谢异常活跃与气道细胞外基质重塑密切相关;NAC可对MMP-9/TIMP-1的失衡起调节作用,其表达及功能在一定程度上依赖PKC信号传导途径.抑制TGF-β传导通路可能使胶原等细胞外基质降解及合成减少.     

β1转化生长因子对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌相关的基质金属蛋白酶的影响

目的探讨β1转化生长因子(TGF-β1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的调节作用,及TGF-β1与瘢痕的关系。方法培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞经TGF-β1处理,采用酶联免疫法(ELISA)测定瘢痕疙瘩成纤维细胞上清液中MMP-1、MMP-2和TIMP-1的水平。结果瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1、MMP-2和TIMP-1的生成量显著高于正常皮肤(P<0.01);加TGF-β1处理后,瘢痕疙瘩中成纤维细胞MMP-1的分泌量显著降低(P<0.01),MMP-2的分泌量显著升高(P<0.01),而TIMP-1的分泌量无显著改变(P>0.05)。结论培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞显示MMP-1、MMP-2和TIMP-1增加,TGF-β1在生成调节过程中起重要作用。     

己酮可可碱对大鼠胰腺纤维化及TGF-β1、α-SMA、MMP-1、TIMP-1表达的影响

目的探讨己酮可可碱(PTX)对大鼠胰腺纤维化及TGF-β1、α-SMA、MMP-1、TIMP-1表达的影响。方法通过胰管内注射2%三硝基苯磺酸的方法制备大鼠胰腺纤维化模型。随机分为对照组、模型组、PTX干预组。PTX干预组于术后第2天给予PTX腹腔注射,6mg/(kg·d),4周后收集各组胰腺标本。免疫组化SABC法检测各组胰腺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的表达同时做组织胶原纤维染色。部分胰腺组织液氮冻存,以Westernblot方法检测α-SMA的表达。结果模型组发生胰腺纤维化,PTX干预组有轻度纤维化。PTX干预组α-SMA、TGF-β1、TIMP-1的表达均低于模型组(P<0.01)。MMP-1的表达无明显差异。PTX干预组胶原面积百分比明显低于模型组(P<0.01)。结论PTX抗大鼠胰腺纤维化的作用可能与其降低TGF-β1、α-SMA、TIMP-1表达有关。     

狼疮肾炎与基质金属蛋白酶-9表达的相关分析

目的探讨狼疮肾炎（LN）与基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达的相互关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测17例LN患者和22例无明显肾损害（24h尿蛋白定量〈500mg）的系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血单个核细胞MMP-9mRNA和TIMP-1mRNA的表达水平。结果17例LN患者MMP-9／β-actin与TIMP-1／β-actin比值分别为（0．94±0．16）和（0．78±0．49），与22例无明显肾损害（24h尿蛋白定量〈500mg）的SLE患者比较，其MMP-9 mRNA表达水平显著升高，具有统计学差异（P〈0．01），但TIMP-1 mRNA表达水平无明显差异（P〉0．05）。结论LN患者MMP-9的异常表达可能与其肾脏病理损伤有关。     

吡格列酮对系膜细胞基质合成和降解的影响

目的观察吡格列酮对高糖状态下系膜细胞（MCs）增殖、细胞外基质合成和降解的影响。方法以大鼠MCs为研究对象,给予吡格列酮干预,并以苯那普利作为阳性对照。MTT法观察细胞增殖情况,ELISA法测定细胞上清液中转化生长因子-β1（TGF-β1）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）、Ⅳ型胶原以及肝细胞生长因子（HGF）的含量,RT-PCR法检测细胞TGF-β1、MMP-9、TIMP-1及HGFmRNA的表达。结果①高糖可刺激MCs增殖,吡格列酮呈剂量和时间依赖性抑制该增殖作用。②高糖促进MCsⅣ型胶原分泌,吡格列酮则显著抑制Ⅳ型胶原分泌。③高糖状态下,MCsMMP-9分泌减少,TIMP-1分泌增加。吡格列酮则促进MMP-9分泌及其mRNA的表达,抑制TIMP-1分泌。④高糖可促进MCsTGF-β1分泌,抑制HGF分泌。吡格列酮则抑制TGF-β1分泌,促进HGF分泌及其mRNA的表达。结论吡格列酮可抑制高糖诱导的MCs增殖,促进MMP9分泌,抑制TIMP-1分泌,抑制TGF-β1分泌,促进HGF分泌,从而抑制胶原合成、促进其降解,发挥抗糖尿病肾小球硬化作用。     

补肾强督方对强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞产生MMP-9和TIMP-1的影响

目的：为探讨基质金属蛋白酶在强直性脊柱炎炎性骨破坏中的作用和补肾强督方治疗强直性脊柱炎的作用机制,比较强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞（PBMC）产生基质金属蛋白酶9（MMP-9）及基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）与健康对照者之间的差别,并研究补肾强督方治疗前后两者的变化。方法：2005年3月至2006年3月活动期强直性脊柱炎患者30例,其中男27例,女3例;年龄16～45岁,平均（30．8±8．8）岁;病程0．5-10年。经补肾强督方治疗3个月后,做自身前后对照,并设立健康对照组20例,常规分离血清和PBMC,将PBMC用PHA／PMA刺激后收集上清,应用RT-PCR检测PBMC的MMP-9和TIMP-1的mRNA表达水平,应用ELISA检测血清和细胞上清中MMP-9和TIMP-的含量。结果：与健康对照组相比,患者治疗前血清中MMP-9和TIMP—1浓度明显升高,患者治疗后与治疗前相比MMP-9和TIMP-1浓度显著降低：经PHA／PMA刺激后,患者治疗前的PBMC表达MMP-9和TIMP-1mRNA水平明显上调,细胞上清液中MMP-9和TIMP-1量明显升高,与健康对照组相比差异有统计学意义。患者治疗后PBMC表达MMP-9和TIMP-1mRNA水平明显下调,细胞上清液中MMP-9和TIMP-1含量均显著下降,与治疗前相比差异有统计学意义。结论：强直性脊柱炎活动期患者的PBMC表达和释放MMP-9和TIMP—1增强：补肾强督方可以显著降低强直性脊柱炎活动期患者MMP-9和TIMP-1的产生。     

祛毒颗粒对5/6肾切除大鼠肾脏皮质MMP-2、TIMP-2、ECM及足细胞超微结构的影响

目的：观察祛毒颗粒对5/6肾切除大鼠肾皮质基质金属蛋白-2（matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制物-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2）蛋白表达、细胞外基质（extracellular matrix,ECM）积聚和足细胞超微结构的影响。方法：将55只Wistar大鼠随机取10只为正常对照组,余用5/6肾切除法建立慢性肾衰竭（CRF）动物模型,将造模成功后的大鼠随机分为模型组、尿毒清颗粒组（简称对照组）、祛毒颗粒低剂量组（简称低剂量组）、祛毒颗粒高剂量组（简称高剂量组）,每组10只,分别给与相应浓度和剂量的药物,实验期间测定大鼠的尿蛋白、肾功能,治疗12周后观察其肾脏病理改变,PAS染色评价肾小球硬化程度,免疫组化法检测肾小球Ⅳ型胶原（ColⅣ）、纤连蛋白（FN）和MMP-2、TIMP-2蛋白表达,电镜观察足细胞超微结构。结果：祛毒颗粒能明显减少5/6肾切除大鼠尿蛋白量（P〈0.05）,改善肾功能;减轻肾脏病理损害;PAS染色显示,祛毒颗粒治疗后肾小球阳性面积与肾小球总面积比值、肾小球硬化指数明显下降（P〈0.01）;免疫组化检查显示祛毒颗粒能抑制了FN、ColⅣ在肾组织的表达（P〈0.01）,下调TIMP-2蛋白表达,增加MMP-2活性,减轻ECM积聚;电镜观察显示,祛毒颗粒能减少足细胞脱落,减轻足突融合,保护足细胞形态。结论：祛毒颗粒通过调整5/6肾切除大鼠肾皮质MMP-2、TIMP-2的表达,促进ECM降解,减轻ECM集聚,保护足细胞,起到减轻肾小球硬化的作用。     

塞来昔布对Han：SPRD大鼠肾细胞外基质重塑的影响

目的 研究塞来昔布（CXB）对Han：SPRD大鼠肾细胞外基质（ECM）重塑的影响,探讨其抑制多囊肾肾间质纤维化的作用机制。 方法 选取杂合（cy/+）交配后第4代雄性、3周龄、体质量（68.5±16.6） g的Han：SPRD大鼠共57只,随机分成对照组（CXB：0 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1）、CXB小剂量组（CBX：3 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1）、CXB大剂量组（CBX：10 mg&#8226;kg-1&#8226;d-1）,每组19只。另选19只SD大鼠作为正常对照。饲料中加入CXB喂食13周后,处死动物。倒置显微镜下分析肾组织纤维化指数;实时荧光定量PCR检测肾组织胶原Ⅳ（COLⅣ）、基质金属蛋白酶（MMP）2、金属蛋白酶2组织抑制剂（TIMP）和转化生长因子（TGF）β1 mRNA的表达;免疫荧光共聚焦扫描法检测COLⅣ、MMP-2、TIMP-2、TGF-β1与PCNA共染的蛋白丰度;蛋白免疫印迹法检测TGF-β1的表达。 结果 与对照组相比,小剂量组和大剂量组均能显著减少肾囊肿指数（42.90±6.56和47.10±7.28比64.80±62.71,均P < 0.05）、纤维化指数（11.20±2.63和10.10±3.30比16.30±4.16,均P < 0.05）和间质炎性细胞的浸润（2.60±0.26和2.80±0.31比3.70±0.33,均P < 0.05）。小剂量组和大剂量组COLⅣ、TIMP-2和TGF-β1 mRNA的表达量显著低于对照组（均P < 0.05 ）,而MMP-2 mRNA的表达量显著高于对照组（均P < 0.05）。小剂量组和大剂量组COLⅣ荧光强度较对照组显著减弱,差异有统计学意义（20.30±5.11比61.40±4.51,P < 0.01;27.50±6.73比61.40±4.51,P < 0.05）。小剂量组和大剂量组MMP-2/TIMP-2比值较对照组增高,差异有统计学意义（4.88±1.52 和3.63±1.67比0.35±0.13,均P < 0.05）。小剂量组和大剂量组TGF-β1蛋白表达比对照组均显著减少。 结论 塞来昔布可能通过下调TGF-β1、增加MMP-2/TIMP-2比值、促进胶原Ⅳ的降解来抑制肾小管间质的纤维化。     

积雪草对TGF-β1诱导的体外培养的肾小管上皮细胞MMP-2、TIMP-2表达的实验研究

也页目的：积雪草颗粒对TGF-β1诱导的体外培养的肾小管上皮细胞MMP-2、TIMP-2 mRNA及蛋白表达的影响。方法：将体外培养的大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK52E）随机分为6组：正常对照组（DZ组）、TGF-β1诱导组（T组）、积雪草小（ JX组）、中（ JZ组）、大剂量（ JD组）组及蒙诺组（ M组）。培养48 h后取出,应用实时荧光定量PCR（ RTFQ PCR）技术和western-blot技术检测细胞MMP-2、TIMP-2的mRNA及蛋白表达。结果：与DZ相比,T、JX、JZ、JD、M组细胞MMP-2、TIMP-2的mRNA及蛋白表达明显升高（P0.05）。结论：积雪草抗TIF作用可能通过抑制MMP-2、TIMP-2的高表达,调节MMP-2/TIMP-2的平衡而实现,且与其剂量呈正相关。     

三七总皂苷对5/6肾切除大鼠肾脏皮质细胞外基质积聚的影响

目的：观察三七总皂苷（PNS）对5/6肾切除大鼠肾皮质细胞外基质（ECM）积聚的影响,并探讨其肾脏保护机制。方法：将45只Wistar大鼠按体重随机取8只为正常对照组,余用5/6肾切除法建立慢性肾衰竭（CRF）动物模型。将造模成功后的大鼠随机分为模型组、百令胶囊组（简称对照组）、PNS低剂量组（低剂量组）、PNS高剂量组（高剂量组）,分别给与相应浓度和剂量的药物,实验期间测定大鼠的尿蛋白、肾功能,治疗12周后观察其肾脏病理改变,用半定量方法计算肾小球硬化指数（GSI）和肾小管损伤指数,免疫组化法检测肾小球Ⅳ型胶原（ColⅣ）、纤连蛋白（FN）和肾皮质基质金属蛋白（MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制物（TIMP-2）蛋白表达。结果：PNS能明显减少CRF大鼠尿蛋白的排出（P〈0.05）,有一定改善肾功能的作用;PNS能减轻肾脏病理损害,减轻肾小球硬化、肾小管损伤程度;PNS能下调TIMP-2蛋白表达,增加MMP-2活性,抑制了FN、ColⅣ在肾组织的表达（P〈0.01）,减轻ECM积聚。结论：PNS可能通过减少5/6肾切除大鼠尿蛋白的排出,增加肾脏MMP-2活性,降低TIMP-2表达,增加ECM降解,减轻肾小球硬化,从而起到治疗作用。     

三七总皂苷对大鼠肾小球系膜细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的：观察三七总皂苷（total panax notoginseng saponins,tPNS）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）介导的体外培养SD大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells,MCs）结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响,探讨tPNS抗肾小球纤维化可能的分子机制。方法：分离培养SD大鼠MCs,用10-6mol/LAngⅡ刺激MCs,将培养的大鼠MCs分为5组（n=8）：空白对照组、AngⅡ刺激组、AngⅡ和3种不同浓度的tPNS干预组。分别采用RT-PCR、Western Blot、ELISA、RIA法,检测大鼠MCs CTGF mRNA及CTGF蛋白表达及培养细胞上清TGF-β1、FN、LN及Ⅳ型胶原含量。结果：tPNS呈量效依赖性下调AngⅡ介导的大鼠MCsC TGF mRNA及蛋白表达;减少培养细胞上清TGF-β1、FN、LN及Ⅳ型胶原含量。结论：三七总皂苷可通过抑制CTGF mRNA及蛋白的表达,减少细胞外基质沉积,防止肾小球纤维化的产生。     

糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及MMP-9表达的影响

目的：研究糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2、MMP-9及Ⅳ型胶原表达的影响,探讨糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护机制。方法：50只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、蒙诺组（0．833mg／kg）、糖肾方大剂量组（2．67g／kg）、糖肾方小剂量组（1．33g／kg）,每组10只,利用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病肾病大鼠模型,连续给药20周。动态检测血糖和尿蛋白／肌酐水平;取肾组织进行病理组织学观察并对肾小球硬化和肾小管间质纤维化程度进行评分;RT-PCR方法检测TGF-β1、MMP-2及MMP-9 mRNA表达,免疫组化方法检测肾组织TGF-β1及Ⅳ型胶原表达。结果：大剂量糖肾方能显著降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白／肌酐（P〈0．05）,降低肾小球硬化指数（P〈0．01）和肾小管间质纤维化指数（P〈0．01）,减少TGF-β1mRNA与蛋白表达（P〈0．05）,增加MMP-9mRNA表达（P〈0．05）,减少Ⅳ型胶原蛋白表达（P〈0．05）。结论：糖肾方可减轻实验大鼠肾小球硬化和肾小管间质纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达和提高MMP-9mRNA水平有关。     

NPWT促进糖尿病足溃疡创面愈合分子机制的初步研究

目的通过检测与创面愈合进程相关的组织基因表达,探讨采用负压创面治疗(nagetive pressure wound therapy,NPWT),促进糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer, DFU)愈合的作用机制。方法将纳入的50例DFU患者随机分成NPWT组(25例)和对照组(25例)。对照组接受局部湿敷治疗。两组患者治疗前后10 d均取创面肉芽行组织活检,利用RT-PCR检测转移生长因子-β1(transforminggrowth factor beta 1, TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1, MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9, MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1, TIMP-1)的mRNA表达,并进行对比分析。结果治疗后10 d,NPWT组患者创面肉芽组织中VEGF、TGF-β1和TIMP-1 mRNA的表达较治疗前显著增加,IL-1β、TNF-α、MMP-1和MMP-9 mRNA的表达显著下降(P<0.05);而对照组上述各项指标的mRNA表达,治疗前后均无显著变化(P>0.05)。结论 NPWT可能通过影响生长因子、炎症细胞因子和基质金属蛋白酶的表达来促进DFU愈合。     

苯那普利对肾小球硬化大鼠TGF-β1和TIMP-1表达的影响

目的探讨苯那普利对肾小球硬化大鼠TGF-β1和TIMP-1表达的影响.方法建立单侧肾切除术合并阿霉素静脉双次注射的大鼠肾小球硬化模型,设正常组、模型组和西药组,进行尿蛋白、肾功能、血脂检测和肾组织病理学检查,图像分析肾小球细胞外基质、转化生长因子β1(TGF-β1)和金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-1)的变化.结果苯那普利组TC、TG和尿蛋白较模型组明显降低,肾脏病理提示系膜细胞和ECM明显减少,TGF-β1、和TIMP-1的表达降低(P＜0.05).结论苯那普利可以降低24h尿蛋白排出量、血脂,抑制系膜细胞增生,下调肾内TGF-β1和TIMP-1的表达,抑制ECM的沉积,从而防治肾小球硬化.