URSA 患者外周血免疫细胞特征及其意义的临床研究

 【目的】 探讨不明原因复发性流产(URSA)患者处于难免流产和流产后非孕状态等不同临床情况时外周血免疫细胞特征及其临床意义&#65377; 【方法】 回顾性分析2008-2010年于我院诊疗的自然流产患者184例,就诊时为早期妊娠难免流产的URSA患者55例(URSA难免流产组),同期早期妊娠难免流产的偶发流产患者(sporadic abortion, SA) 23例,作为对照(SA难免流产组)&#65377;此外,就诊时为未孕状态,距最后一次流产3个月以上URSA患者62例(URSA非孕组),同期未孕状态,距流产3个月以上SA患者44例作为对照(SA非孕组)&#65377;记录患者一般情况,包括年龄&#65380;月经周期&#65377;使用流式细胞术检测外周血免疫细胞,包括T淋巴细胞亚群:T细胞比例&#65380;Th细胞比例&#65380;Ts细胞比例&#65380;Th/Ts;其他免疫细胞:白细胞数量&#65380;淋巴细胞总数量(LYM细胞)&#65380;B细胞比例&#65380;自然杀伤细胞(NK细胞)比例&#65377;【结果】 难免流产状态:URSA患者与SA患者Th/Ts均异常升高,前者为2.77 ± 5.16,后者为3.67 ± 6.12,URSA患者与SA患者比较,前者NK细胞比例明显升高,为(15.57 ± 6.45)%,后者仅为(11.38 ± 3.66)%,差异有统计学意义(P < 0.05)&#65377;非孕状态:URSA患者与SA患者比较,URSA患者WBC数量及NK细胞比例高于SA组,前者为(6.27 ± 1.09) × 109&#65380;(18.26 ± 7.88)%,后者为(5.59 ± 1.16) × 109&#65380;(11.0 ± 6.8)%,差异有统计学意义(P < 0.05)&#65377; 【结论】 在发生早期妊娠难免流产时,URSA患者与SA患者均存在一定的免疫紊乱,共同的表现是特异性免疫方面均有Th/Ts异常升高,不同的表现是,URSA患者在非特异性免疫方面存在NK细胞比例增高&#65377;在非孕状态,SA患者免疫紊乱得到调整回复正常,URSA患者仍然存在一定的免疫紊乱,主要表现在非特异性免疫方面,以WBC数量和NK细胞比例增高为主&#65377;临床工作中应注意监测URSA患者的免疫状态&#65377;     

原因不明性复发性流产91例主动免疫治疗效果分析

目的探讨原因不明性复发性流产(URSA)行主动免疫治疗的疗效及免疫细胞含量的变化特征。方法应用荧光染色和流式细胞技术,分别对2011年1月至2012年8月在安徽医科大学第一附属医院产前诊断中心行淋巴细胞主动免疫治疗的91例URSA患者治疗前后淋巴细胞坏死率及CD3、CD4、CD8及NK细胞比率进行测定;并随访其妊娠结局。结果 79例成功妊娠至12周胎盘形成以后,12例在孕12周以前再次流产,成功率86.81%;治疗后CD3、CD4和NK细胞比例明显下降,CD8及淋巴细胞坏死率显著上升,差异具有统计学意义(P0.05)。结论淋巴细胞主动免疫治疗对于URSA具有显著的疗效,NK细胞的降低有利于妊娠成功。     

主动免疫治疗对不明原因反复自然流产患者NK细胞的影响

[目的]探讨主动免疫治疗对不明原因反复自然流产(URSA)患者外周血自然杀伤(NK)细胞的影响。[方法]选取确定的URSA患者34例,通过流式细胞仪测定其在主动免疫治疗前、后外周血中NK细胞亚群百分比。[结果]主动免疫治疗能显著降低URSA患者外周血中CD56 CD16-NK细胞亚群水平(P<0.05)、CD56 CD16 NK细胞亚群水平(P<.05)、CD56 NK细胞水平(P<0.05)。[结论]主动免疫治疗可以调节URSA患者外周血NK细胞的水平,改善URSA患者NK细胞的免疫状态,因而NK细胞的检测可用于指导主动免疫治疗的临床应用。     

原因不明反复流产患者主动免疫治疗前后免疫细胞的变化

目的：探讨主动免疫治疗前后原因不明反复流产（URSA）患者免疫细胞表达水平的变化。方法选择 URSA 患者65例作为实验组,另选择30例健康未孕妇女作为对照组。采用丈夫淋巴细胞对 URSA 患者进行主动免疫治疗,分别于治疗前和治疗后2周采集患者外周血并检测其免疫细胞的标志,检测对照组外周血中免疫细胞的标志作为对照。结果治疗前, URSA 患者的 CD4＋细胞百分比、CD4∶ CD8比值和 NK 细胞百分比明显高于对照组（41.75±4.34vs36.04±3.85,1.75±0.65vs1.44±0.47,17.10±5.43vs9.87±4.76,P ＜0.05）;治疗后,三者均下降,治疗前后比较具有明显差异（41.75±4.34vs35.83±5.72,1.75±0.65vs1.41±0.51,17.10±5.43vs11.27±3.02,P＜0.05）。结论 URSA 患者的免疫系统处于活跃状态,T 细胞和 NK 细胞的变化可能与 URSA 的发生有关。淋巴细胞免疫治疗是治疗 URSA 的有效手段。     

外周血淋巴细胞亚群分布对同种免疫型复发性流产病因及淋巴细胞免疫治疗效果的评估价值

目的:探讨外周血淋巴细胞亚群对同种免疫型复发性流产病因及淋巴细胞主动免疫治疗(LIT)效果的评估价值。方法:选取2015年4月-2018年4月本院收治的自愿接受LIT的同种免疫型复发性流产患者85例作为观察组,以同期正常妊娠者78例作为对照组,比较两组外周血淋巴细胞亚群分布差异。对接受LIT的患者,比较一疗程组与两疗程组患者外周血淋巴细胞亚群分布差异。结果:观察组与对照组的外周血CD3~+T细胞、CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞、Th/Ts、CD19~+B细胞、CD3~-CD56~+NK细胞比例比较,差异均无统计学意义(P0.05);一疗程组治疗前CD4~+CD25~+T细胞比例显著高于两疗程组,差异有统计学意义(P0.05);一疗程组与两疗程组治疗前的CD3~+T细胞、CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞、CD19~+B细胞、CD3~-CD56~+NK细胞、CD3~-CD56~+CD16~-NK细胞比例比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:外周血CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞、Th/Ts、CD19~+B细胞及CD3~-CD56~+NK细胞比例不能对同种免疫型复发性流产进行病因评估,外周血淋巴细胞亚群是否能评估同种免疫型复发性流产的发生仍需多组数据论证。患者外周血CD4~+CD25~+T细胞可在淋巴细胞免疫治疗前预评估封闭抗体转为阳性情况,为评估治疗效果提供参考。     

主动免疫治疗对不明原因反复自然流产患者NK细胞的影响

【目的】探讨主动免疫治疗对不明原因反复自然流产（URSA）患者外周血自然杀伤（NK）细胞的影响。【方法】选取确定的URSA患者34例，通过流式细胞仪测定其在主动免疫治疗前、后外周血中NK细胞亚群百分比。【结果】主动免疫治疗能显著降低URSA患者外周血中CD56^＋CD16-NK细胞亚群水平（P〈0．05）、CD56^＋CD16^＋NK细胞亚群水平（P〈．05）、CD56＋NK细胞水平（P〈0．05）。【结论】主动免疫治疗可以调节URSA患者外周血NK细胞的水平，改善URSA患者NK细胞的免疫状态，因而NK细胞的检测可用于指导主动免疫治疗的临床应用。     

不明原因复发性流产病人外周血NK细胞的临床意义

目的:探讨不明原因复发性流产(URSA)病人难免流产和成功妊娠后外周血NK细胞的变化及临床意义.方法:选择URSA流产病人44例(URSA流产组)、URSA妊娠病人34例(URSA妊娠组)作为观察组,并选择同期正常妊娠者44例(正常妊娠组)、健康非妊娠者44名(正常非妊娠组)作为对照组.使用流式细胞术检测外周血NK细胞的数量.结果:4组研究对象流产1个月后检测NK细胞占淋巴细胞的比例为(21.18±5.81)％、(16.12±4.1)％、(15.16±3.23)％和(28.16±3.38)％;URSA流产组明显高于URSA妊娠组、正常妊娠组及正常非妊娠组(P<0.01),URSA妊娠组、正常妊娠组及正常非妊娠组之间两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:URSA的发生与NK细胞对胚胎的杀伤增强有关,外周血NK细胞表达水平可作为监测URSA病人的指标.     

不明原因复发性流产母胎界面蜕膜组织NK细胞及T淋巴细胞亚群的变化

目的:研究不明原因复发性流产发生时母胎界面蜕膜组织中(1)CD4~+T细胞及CD8~+T细胞的变化;(2)子宫自然杀伤细胞CD56~+CD16~+NK细胞的变化;(3)CD4~+辅助性T细胞Th1、Th2及其细胞因子的变化,探讨不明原因复发性流产发生机制。方法:采用流式细胞技术分别检测正常早孕实施计划生育手术妇女30例(正常早孕组)和不明原因复发性流产妇女30例(URSA组)母胎界面蜕膜组织中CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD56~+CD16~+NK细胞、Th1及Th2细胞所分泌的细胞因子数量的百分比。结果:(1)URSA组患者CD4~+T细胞、CD56~+CD16~+NK细胞百分比明显高于正常早孕组,CD8~+T细胞百分比明显低于正常早孕组(P<0.05);(2)URSA组Th1细胞、Th1/Th2比率明显高于正常早孕组(P<0.01)。结论:母胎界面局部T淋巴细胞亚群、子宫自然杀伤细胞亚群比例的改变及Th1细胞增多与不明原因复发性流产相关。     

NK 细胞及淋巴细胞坏死率对 URSA 患者免疫治疗疗效的影响

目的：探讨皮下注射淋巴细胞对不明原因性复发性流产(URSA)的临床疗效,回顾性分析免疫治疗前后 CD16+CD56+ NK 细胞与淋巴细胞坏死率(CDC)的变化与妊娠结局的关系。方法应用荧光染色法和流式细胞术对行主动免疫治疗的440例 URSA 患者治疗前后淋巴细胞坏死率和CD16+ CD56+ NK 细胞比率进行测定,并随访妊娠结局。结果353例成功妊娠至孕12周之后,成功妊娠率85．50%;60例在孕12周前再次流产,流产率为14．50%;其它(17例1年以上未孕,10例失访)。妊娠成功组治疗后淋巴细胞坏死率显著上升,CD16+ CD56+ NK 细胞明显下降(P <0．01);失败组治疗后淋巴细胞坏死率升高,而 CD16+ CD56+ NK 细胞下降不明显(P >0．05)。结论主动免疫治疗效果较好, CD16+ CD56+ NK 细胞和淋巴细胞坏死率是 URSA 患者孕前免疫状态的两个独立指标,亦是评价免疫治疗疗效的两个重要参数。     

主动免疫治疗对原因不明复发性流产患者外周血CD56+CD16+NK细胞及CD4+CD25+Treg细胞表达的影响

目的：探讨主动免疫治疗对原因不明复发性流产（URSA）患者外周血CD56＋CD16＋NK细胞及CD4＋CD25＋Treg细胞表达的影响。方法：应用流式细胞仪检测50例URSA患者经主动免疫治疗前后外周血CD56＋CD16＋NK细胞及CD4＋CD25＋Treg细胞,并与正常育龄妇女作对照。结果：与对照组比较,URSA组CD56＋CD16＋NK细胞比例上升而CD4＋CD25＋Treg的表达下降（P〈0．05）。经淋巴细胞主动免疫治疗的患者。治疗后CD56＋CD16＋NK细胞数量较治疗前降低（P〈0．05）;CD4＋CD25＋Treg的表达较治疗前增高（P〈0．05）,差异有统计学意义。结论：URSA的发生与CD4＋CD254-Treg的表达下降及具有杀伤活性的CD564-CD16＋NK细胞数量上升有关,主动免疫治疗可以降低CD56＋CD16＋NK细胞数量,上调CD4＋CD25＋Treg的表达,从而有利于胚胎发育。     

骨髓增生异常综合征T细胞亚群检测的临床观察

目的：探究骨髓增生异常综合征（MDS）患者体内 T细胞分布情况。方法：选取2011－2014年来我院就诊的MDS患者35例作为研究组,另外健康体检10例作为对照组,分别检测其外周血 T 细胞亚群的分布情况。结果：经检测结果发现,研究组患者的Th细胞、Th／Ts比值和NK细胞的表达都比对照组低,而Ts细胞则比对照组表达明显;伴随MDS病情进展,Ts细胞表达逐渐提高,两组间比较差异具有显著性（P＜0．05）;各亚型之间的 Th／Ts值和NK表达没有显著差异（P＞0．05）。结论：Th、Ts、NK等细胞是人体重要的免疫细胞,T细胞亚群发生失调则会引起机体细胞免疫降低,Th、Ts和Th／Ts是机体免疫功能和状态的重要检测指标。     

补肾联合免疫治疗对不同频次URSA先兆流产患者免疫功能的影响

目的观察参芪寿胎丸方联合主动免疫治疗对不同频次原因不明复发性流产(URSA)早期先兆流产患者免疫功能的影响。方法将60例URSA早期先兆流产患者按流产次数分为治疗1组(自然流产2次)与治疗2组(自然流产≥3次),每组30例。观察此方案对不同频次URSA早期先兆流产患者的继续妊娠成功率,比较两组患者治疗前后T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+及CD4/CD8)的变化。结果两组患者治疗后总继续妊娠成功率为91.67%,治疗1组为93.33%,治疗2组为90.00%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者治疗前后,CD3+、CD4+比较差异均无统计学意义(P>0.05),治疗后CD8+显著增高(P<0.05),CD4/CD8降低(P<0.05),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾中药联合主动免疫治疗,可调节不同频次URSA患者早期先兆流产的免疫功能,纠正患者免疫失衡,继而提高继续妊娠成功率。     

同步放化疗对食管癌患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤细胞的影响

目的：观察同步放化疗对食管癌患者T淋巴细胞亚群及自然杀伤（NK）细胞的影响。方法：选取85例食管癌患者设为食管癌组,并随机分为单纯放疗组（单放组）40例和同步放化疗组45例,另随机选取同期健康体检者40例设为对照组。单放组采用单纯放射治疗,同步放化疗组加用顺铂20mg·m-2·d-1＋紫杉醇40mg·m-2·d-1。结果：食管癌组T淋巴细胞总量（T总）、辅助性T细胞（Th）、抑制性T细胞（Ts）比例及Th/Ts与对照组比较,差异均具有统计学意义（P〈0.01）;NK细胞比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。同步放化疗组治疗有效率明显高于单放组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。治疗后两组T总、Th比例及Th/Ts均明显升高,Ts比例明显降低,差异具有统计学意义（P〈0.01）;NK比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;组间比较,同步放化疗组T总、Th比例及Th/Ts均明显高于单放组,差异具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。结论：食管癌患者细胞免疫功能低下,同步放化疗较单纯放疗能明显提高其T总、Th比例及Th/Ts值,改善免疫功能。     

原因不明性复发性流产淋巴细胞免疫治疗的剂量及疗效研究

目的：探讨原因不明性复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA）患者再次妊娠结局及治疗前后患者外周血调节性T细胞水平的变化。方法对165例URSA患者进行主动免疫治疗,观察患者治疗后再次妊娠结局。同时检测和分析治疗前后患者外周血的CD4＋CD25＋Tr水平。将试验过程中供体血浆析出较少致使分离得到的淋巴细胞较少的患者37例作为低剂量组,较多者84例作为高剂量组。结果165例患者中,再次妊娠121例,仍在治疗中44例。再次妊娠的患者中成功分娩87例,再次发生早期流产14例,继续妊娠20例,主动免疫治疗成功率88.5%。其中低剂量组成功分娩29例,再次早期流产8例,主动免疫治疗成功率（72.4%）显著低于高剂量组（92.3%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。所有患者治疗后CD4＋CD25brightT表达水平均显著高于治疗前（P＜0.05）;妊娠成功患者外周血CD4＋CD25＋Tr及CD4＋CD25brightT均较妊娠失败者显著升高（P＜0.05）。结论主动免疫治疗对 URSA 患者有效,治疗时应注射高剂量淋巴细胞,主动免疫治疗可显著提高患者 CD4＋CD25brightT 的表达水平, CD4＋CD25brightT可能是调控母胎界面局部免疫耐受形成的一个重要因素。     

黄体酮保胎治疗对不明原因复发性流产患者外周血辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞免疫失衡的影响研究

目的 评价不明原因复发性流产（URSA）患者黄体酮保胎治疗前后外周血辅助性T淋巴细胞17（Th17）/调节性T淋巴细胞（Treg）变化及其与妊娠结局的关系。方法 选取2013年1月-2014年1月重庆医科大学附属第一医院妇产科门诊诊治的URSA患者30例为URSA组,给予黄体酮20 mg/d肌肉注射治疗,孕56 d行B超检查确定有无胎心,根据妊娠结局分为保胎成功组22例和保胎失败组8例。同时选择同时期本院妇产科门诊手术室收治的妊娠12周以内要求人工流产的正常早孕妇女15例作为对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞（PBMC）中Th17和Treg数量;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测外周血清中白介素（IL）-4、IL-10、IL-17水平;采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测PBMC中Th17、Treg转录因子维甲酸相关孤儿受体γt（RORγt）、叉头翼状螺旋转录因子3（FoxP3） mRNA表达水平。结果 治疗前,保胎成功组、保胎失败组患者PBMC中Th17/CD4+细胞及Th17/Treg高于对照组,Treg/CD4+细胞低于对照组（P＜0.05）;治疗后,保胎失败组患者PBMC中Th17/CD4+细胞及Th17/Treg高于保胎成功组,Treg/CD4+细胞低于保胎成功组（P＜0.05）。治疗前,保胎成功组、保胎失败组患者外周血清中IL-4、IL-10水平低于对照组,IL-17水平及IL-17/IL-4、IL-17/IL-10高于对照组（P＜0.05）;治疗后,保胎失败组患者外周血清中IL-4、IL-10水平低于保胎成功组,IL-17水平及IL-17/IL-4、IL-17/IL-10高于保胎成功组（P＜0.05）。治疗前,保胎成功组、保胎失败组患者PBMC中RORγt mRNA表达水平高于对照组,FoxP3 mRNA表达水平低于对照组（P＜0.05）;治疗后,保胎失败组患者PBMC中RORγt mRNA表达水平高于保胎成功组,FoxP3 mRNA表达水平低于保胎成功组（P＜0.05）。结论 URSA与Th17/Treg免疫平衡异常密切相关,黄体酮保胎治疗可通过下调Th17/Treg及相应细胞因子水平,改善URSA患者的Th17/Treg免疫失衡而改善妊娠结局。     

NK细胞在不明原因复发性流产诊治研究中的意义

目的：探究NK细胞与复发性流产的相关性。方法将我院68例复发性流产患者随机分为观察组与对照组,观察组为48例,对照组为20例,观察组行淋巴主动免疫治疗,对照组予常规保胎指导,比较两组患者外周血NK细胞的数量及妊娠结果。结果治疗前检测CD3／CD16＋CD56组间比较无显著差异（ P＞0．05）;经淋巴主动免疫治疗后两组比较,观察组CD3／CD16＋CD56较对照组显著下降（ P＜0．05）,观察组妊娠成功率（妊娠至12周）66．7％,显著高于对照组25．0％;观察组流产率（妊娠12周内流产）14．6％与对照组55．0％比较显著较低,两组治疗一年内未成功妊娠率比较,观察组18．8％较对照组20．0％稍低,差异不大。组间比较有统计学意义（ P＝0．001）。结论通过监测NK细胞在淋巴细胞中的比例,可有效指导淋巴细胞主动免疫治疗不明原因复发性流产,可改善妊娠结局,具有一定的临床推广价值。     

淋巴细胞主动免疫治疗对封闭抗体阴性复发性流产后患者外周血Th1/Th2/Th17细胞因子表达水平变化

目的:研究封闭抗体阴性复发性流产患者发病机制及复发性流产患者外周血中Th1/Th2/Th17细胞因子水平变化,探讨其在复发性流产发病机制中的作用及淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产患者分子机制。方法:选取封闭抗体阴性复发性流产患者50例作为治疗组,既往无不良妊娠史,至少一胎正常分娩史的健康育龄女性44例作为对照组。采用酶联免疫法(ELISA)检测复发性流产患者的封闭抗体,比较封闭抗体阴性与阳性复发性流产患者妊娠结局差异性;采用ELISA检测对照组、治疗组治疗前及治疗后外周血中Th1/Th2/Th17细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-17、IL-4、IL-10含量,并比较对照组与治疗组,治疗组治疗前后外周血中Th1/Th2/Th17细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-17、IL-4、IL-10含量的差异性。结论:主动免疫疗法可下调RSA患者Th1/Th17细胞因子IL-2、IL-17表达水平,上调Th2细胞因子IL-4表达水平,使Th1/Th2/Th17处于平衡模式;同时刺激免疫应答,产生封闭抗体,二者协同调节Th1/Th2/Th17细胞平衡,增强RSA患者免疫耐受作用,为正常妊娠提供适宜的内环境,从而提高妊娠成功率。     

淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白治疗复发性流产临床效果分析

目的 分析淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白治疗原因不明性复发性流产（URSA）的临床效果.方法 选取URSA患者144例,随机分为两组,均采用丙种球蛋白静脉滴注治疗,观察组再进行淋巴细胞主动免疫治疗,治疗后观察两组患者的临床效果.结果 治疗前两组患者CD3＋、CD4＋、IL-10及NK水平无统计学差异（P＞0.05）;治疗后两组患者CD3＋及IL-10水平均较治疗前升高（P＜0.01）,观察组升高幅度大于对照组（P＜0.01）;治疗后两组患者CD4＋及NK水平均较治疗前降低（P＜0.01）,观察组降低幅度大于对照组（P＜0.01）.观察组妊娠成功率为87.5％,高于对照组的62.5％（P＜0.01）.结论 淋巴细胞主动免疫联合丙种球蛋白治疗URSA临床效果满意.     

丙种球蛋白联合淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的效果探讨

目的分析丙种球蛋白联合淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的临床效果。方法将我院收治的64例复发性流产患者作为研究对象,按照抽签法将其分为治疗组和常规组,各32例。常规组给予丙种球蛋白治疗,治疗组给予丙种球蛋白联合淋巴细胞主动免疫治疗。对比两组的治疗效果。结果治疗后,治疗组的T淋巴细胞亚型变化优于常规组(P0.05);治疗组的IL-2、NK细胞水平低于常规组(P0.05)。结论丙种球蛋白联合淋巴细胞主动免疫治疗复发性流产的效果良好,可以改善母体的免疫细胞,从而提高妊娠率,值得推广。     

原因不明复发性流产患者蜕膜组织中Th17/Treg免疫失衡研究

目的 探讨原因不明复发性流产(URSA)患者蜕膜组织中Th17/Treg免疫平衡情况.方法 应用流式细胞技术检测URSA患者和正常早孕者蜕膜组织中Th17和Treg细胞频率,应用real-time PCR方法检测转录因子RORc和Foxp3 mRNA水平.结果 URSA患者蜕膜组织中Th17细胞在淋巴细胞和CD4+T细...