曲马多预先给药对切口痛大鼠背根神经节神经生长因子表达的影响

目的 探讨曲马多预先给药对切口痛大鼠背根神经节神经生长因子(NGF)表达的影响.方法 雄性SD大鼠24只,体重200～250 g,随机分为4组(n=6),对照组(C组)仅给予麻醉及腹腔注射生理盐水5 ml;切口痛组(I组)于术前30 min腹腔注射生理盐水5 ml;曲马多1 mg/kg预先给药组(T1组)和曲马多10 mg/kg预先给药组(T10组)分别于术前30 min腹腔注射曲马多1、10 mg/kg.制备大鼠右后爪切口痛模型,T1组和T10组大鼠苏醒后采用累积疼痛评分法评定痛行为学,于术前30 min和术后2 h测定大鼠机械痛阈、热痛阈及右侧背根神经节NGF的表达水平.结果 与C组比较,I组、T1组术后2 h机械痛阈和热痛阈降低,累积疼痛评分升高,背根神经节NGF表达上调,T10组背根神经节NGF表达上调(P＜0.05或0.01);与I组比较,T1组和T10组术后2 h机械痛阈和热痛阈升高,累积疼痛评分降低,背根神经节NGF表达下调(P＜0.05);与T1组比较,T10组术后2 h机械痛阚和热痛阈升高,累积疼痛评分降低(P＜0.05或0.01),背根神经节NGF表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 曲马多1、10 mg/kg腹腔内预先给药均可下调切口痛大鼠背根神经节NGF表达水平.     

姜黄素对2型糖尿病大鼠神经病理性痛及脊髓背角和背根神经节IRE1α表达的影响

目的 评价姜黄素对2型糖尿病大鼠神经病理性痛及脊髓背角和背根神经节肌醇需求激酶1α(IRE1α)表达的影响.方法 高脂高糖喂养雄性SD大鼠8周诱导胰岛素抵抗,以35 mg/kg链脲佐菌素(STZ)单次腹腔注射,3d后血糖≥16.7 mmol/L大鼠为2型糖尿病大鼠.注射STZ 14 d后机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)低于基础值80％的大鼠为2型糖尿病神经病理性痛大鼠,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=27):2型糖尿病神经病理性痛组(DNP组)、姜黄素组(Cur组)和溶剂对照组(SC组).Cur组和SC组于注射STZ 14 d后腹腔注射姜黄素或玉米油100 mg/kg(25mg/ml),1次/d,连续14d,DNP组不做任何处理.另取27只正常大鼠为对照组(C组),给予普通饲料喂养.给予姜黄素后第3、7和14天时测定MWT和TWL,痛阈测定后用Western blot法检测大鼠脊髓背角和背根神经节IREIα的表达.结果 与C组比较、DNP组、Cur组和SC组MWT降低,TWL缩短,脊髓背角和背根神经节IRE1α表达上H调(P＜0.05);与DNP组比较,Cur组MWT升高,TWL延长,脊髓背角和背根神经节IREIα表达下调(p＜0.05).SC组和DNP组上述指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 姜黄素可减轻2型糖尿病大鼠神经病理性痛,其机制与抑制脊髓背角和背根神经节IRE1α表达有关.     

炎性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化

目的 评价炎性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化.方法 健康成年雄性SD大鼠120只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将其随机分为两组(n=60):对照组(C组)和炎性痛组(F组).F组大鼠左侧后肢趾部皮下注射3％福尔马林0.1 ml,C组注射等容量的生理盐水.于注射后1h、1、2、3和7d时采用yon Frey纤毛测定左侧后爪机械痛阈.于各时点随机取12只大鼠处死后取损伤侧L5背根神经节和L4,5脊髓背角,分别采用免疫荧光标记法和Western blot法检测Nogo-A蛋白的表达.结果 与C组比较,F组大鼠注射后1h、1、2、3和7d时机械痛阈降低,注射后1h、2、3和7d时背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达上调(P＜0.05).结论 背根神经节及脊髓背角Nogo-A蛋白表达上调可能在福尔马林致大鼠炎性痛形成过程中发挥重要作用.     

姜黄素对大鼠糖尿病神经病理性痛的效应

目的 评价姜黄素对大鼠糖尿病神经病理性痛(DNP)的效应.方法 雄性SD大鼠48只,随机分为6组(n=8):正常对照组(C组)、DNP组(D组)、DNP+二甲基亚砜组(DD组)和DNP+姜黄素50、100、200 mg/kg组(DC50组、DC100组和DC200组).D组、DD组、DC50组、DC100组和DC200组采用腹腔注射链唑霉素75 mg/kg的方法 制备糖尿病神经病理性痛模型,注射链唑霉素后14 d开始腹腔注射二甲基亚砜(姜黄素的溶媒)或相应剂量姜黄素,1次/d,连续2周.分别造模前2 d、注射链唑霉素后14 d、姜黄素给药1、3、7、14 d时测定机械缩足痛阚(MWT)和热缩足潜伏期(TWL),最后一次测定痛阈后处死大鼠,测定脊髓背角和背根神经节细胞核磷酸化JNK(p-JNK)和NF-кB p65的表达水平.结果 与C组相比,D组各时点MWT降低,TWL缩短,脊髓背角和背根神经节细胞核p-JNK和NF-кB p65表达上调(P<0.05).与D组相比,DC50组、DC100组和DC200组姜黄素给药期间MWT升高,TWL延长,且与剂量有关,脊髓背角和背根神经节细胞核p-JNK和NF-кB p65表达下调(P<0.05).结论 姜黄素可减轻大鼠糖尿病神经病理性痛,其机制可能与抑制脊髓背角和背根神经节JNK和NF-кB的激活有关.     

大鼠神经病理性痛早期脊髓背角Homer-1a基因的表达

目的 探讨大鼠神经病理性痛早期脊髓背角Homer-1a基因的表达.方法 健康雄性SD大鼠60只,体重200～220 g,随机分为3组(n=20):正常对照组(C组)、假手术组(S组)和慢性背根神经节压迫组(CCD组).CCD组制备CCD诱导神经病理性痛模型,分别于术前48 h(基础状态)、术后4、8、24 h时取5只大鼠,测定热痛阈,然后取术侧L4,5节段脊髓,采用实时定量PCR技术测定脊髓背角Homer-1a基因的表达水平.结果 与基础值相比,CCD组术后4、8 h时脊髓背角Homer-1a基因表达上调(P<0.01),术后24 h时降至基础值水平(P0.05),术后24 h时热痛阈降低(P<0.01).与C组和S组比较,CCD组术后4、8 h时脊髓背角Homer-1a基因表达上调,术后24 h时热痛阈降低(P<0.01).结论 大鼠神经病理性痛早期脊髓背角Homer-1a表达水平迅速而短暂的上调,可能抑制早期痛敏的发生.     

人神经生长因子β基因转染对糖尿病大鼠神经病理性痛的影响

目的 探讨皮下转染重组腺病毒介导的人神经生长因子β(Ad-hNGFβ)基因对糖尿病大鼠神经病理性痛的影响及其可能机制.方法 采用腹腔注射佐脲霉菌素(STZ)75 mg/kg的方法制备大鼠糖尿病模型.健康雄性SD大鼠,体重180～220 g,随机取10只大鼠作为对照组(C组)不制备糖尿病模型;取模型制备成功的大鼠75只随机分为3组(n=25):糖尿病神经病理性痛组(DNP组)、Ad-hNGFβ基因治疗组(NGF组)和Ad-LacZ基因治疗组(LacZ组).NGF组和LacZ组分别于STZ注射后21d且痛阈测定结束后双侧腹股沟皮下脂肪接种1.12×1011 PFU Ad-hNGFβ 10 μl和1.12 x 1011 PFUAd-LacZ 10 μl,C组和DNP组不作任何处理.于STZ注射前(基础状态)、注射后21、35、49 d时测定机械痛阈和热痛阈.于注射后49 d且痛阈测定结束后测定血清hNGFβ浓度和背根神经节降钙素基因相关肽(CGRP)的表达.结果 与基础值和C组比较,DNP组、NGF组和LacZ组STZ注射后机械痛阈和热痛阚均降低.DNP组和LacZ组血清hNGFβ浓度和背根神经节CGRP表达下降,NGF组血清hNGFβ浓度和背根神经节CGRP表达升高(P＜0.05);与DPN组比较,NGF组STZ注射后49 d时热痛阈升高,血清hNGFβ浓度和背根神经节CGRP表达升高(P＜0.01),LacZ组各项指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Ad-hNGFβ基因转染可在一定程度上减轻糖尿病大鼠神经病理性痛,其机制与上调背根神经节CGRP表达有关.     

人神经生长因子β基因转染对糖尿病神经病理性痛大鼠背根神经节P物质表达的影响

目的 评价皮下转染重组腺病毒介导的人神经生长因子β(Ad-hNGFβ)基因对糖尿病神经病理性痛大鼠背根神经节P物质表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠,体重180 ～ 220 g,采用腹腔注射链脲霉素(STZ) 75 mg/kg的方法制备大鼠糖尿病模型.取10只大鼠作为对照组(C组),不制备糖尿病模型;取75只糖尿病模型制备成功的大鼠,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=25):糖尿病神经病理性痛组(DNP组)、Ad-hNGFβ基因治疗组(Ad-NGF组)和LacZ重组复制缺陷性腺病毒基因治疗组(Ad-LacZ组).Ad-NGF组和Ad-LacZ组分别于STZ注射后21 d且痛阈测定结束后双侧腹股沟皮下脂肪接种1.12× 1010 PFU Ad-hNGFβ 10μl和1.12× 1010 PFU Ad-LacZ 10μl.分别于STZ注射前、注射后21、35和49d时测定机械痛阈和热痛阈.于注射后49d时痛阈测定结束后采用免疫组化法测定背根神经节P物质的表达.结果 与C组比较,DNP组、Ad-NGF组和Ad-LacZ组注射后各时点机械痛阈和热痛阈降低,DNP组和Ad-LacZ组背根神经节P物质表达下调(P＜0.05);与DNP组比较,Ad-NGF组注射后49d时热痛阈升高,背根神经节P物质表达上调(P＜0.01),Ad-LacZ组各时点机械痛阈、热痛阈和背根神经节P物质表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Ad-hNGF基因转染可能通过上调背根神经节P物质的表达在一定程度上减轻糖尿病大鼠神经病理性痛.     

急性吗啡耐受或炎性痛大鼠脊髓背角和背根神经节嘌呤受体P2X4表达的变化

目的 评价急性吗啡耐受或炎性痛大鼠脊髓背角和背根神经节嘌呤受体P2Y4 (P2X4R)表达的变化.方法 雄性SD大鼠30只,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组:生理盐水组(NS组,n=5)、急性吗啡耐受组(M组,n=5)和炎性痛组(F组,n=20).F组建立福尔马林炎性痛模型,M组和NS组鞘内注射吗啡或生理盐水,10 μg(10 μl)/次,2 h/次,连续6次,最后1次给药后2h处死取脊髓背角和背根神经节.NS组和M组分别于每次给药后(T1-6)测定热刺激缩足反射潜伏期(PWL),F组于致炎后4、7、10和14d时随机取5只大鼠测定PWL后处死取脊髓背角和背根神经节,采用免疫组化法检测P2X4R表达.结果 与基础值比较,F组致炎后4～14 d PWL明显降低,M组T1-5时PWL升高,T6时PWL差异无统计学意义(P＞0.05).与NS组比较,M组脊髓背角和背根神经节P2X4R表达上调,F组在致炎后第4天脊髓背角和背根神经节P2X4R表达上调,于第7天时P2X4R表达至峰值,第10天和第14天时P2X4R表达逐渐下调(P＜0.01).结论 急性吗啡耐受或炎性痛大鼠脊髓背角和背根神经节P2X4R表达上调,该变化可能与急性吗啡耐受和炎性痛的形成有关.     

慢性神经病理性疼痛大鼠背根神经节和脊髓背角pCREB表达的变化

目的 探讨背根神经节和脊髓背角磷酸化cAMP反应元件结合蛋白（pCREB）表达在慢性压迫性神经损伤（CCI）致神经病理性疼痛大鼠痛觉过敏中的作用。方法 成年雌性SD大鼠32只，体重230-270g，随机分为4组（n=8）：空白组、sham组、CCI 2w组和CCI 4w组。CCI前测定痛阈[机械缩足反射阈值（MWT）和热缩足反射潜伏期（TWL）]基础值，CCI后（空白组、sham组和CCI 2w组于CCI 14d；CCI 4w组于CCI28d）再次测定痛阈。最后一次测定痛阈后次日，取I4-5脊髓和I5背根神经节，免疫组织化学染色，计数pCREB免疫反应阳性（pCREB-IR）神经细胞数量。结果 MWT：CCI后sham组、CCI2w组、CCI 4w组均低于基础值，CCI后sham组低于空白组，CCI2w组低于sham组（P〈0．01）；1wL：CCI2w组短于基础值，CCI2w组短于sham组，CCI后CCI4w组长于CCI2w组（P〈0．01）。sham组背根神经节pCREB-IR神经细胞数量多于空白组，CCI2w组背根神经节及脊髓背角pCREB-IR神经细胞数量多于sham组，CCI4w组背根神经节及脊髓背角pCREB-IR神经细胞数量少于CCI2w组（P〈0．05或0．01）。结论 CCI致慢性神经病理性疼痛大鼠背根神经节和脊髓背角pCREB表达增加，这可能是外周神经损伤后中枢和外周敏感化的分子机制。     

神经肽Y2受体在大鼠神经病理性痛中的作用

目的 探讨神经肽Y2受体(NPY2R)在大鼠神经病理性痛中的作用.方法 SPF级雄性SD大鼠36只,8周龄,体重190～ 210 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=12):假手术组(S组)、神经病理性痛组(NP组)和NPY2R反义寡核苷酸组(ODN组).NP组和ODN组采用坐骨神经慢性压迫法制备神经病理性痛模型.术后7d时ODN组鞘内注射5μg/μlNPY2R反义寡聚核苷酸30 m.分别于术前3 d(T0,基础状态)、术后7 d(T1)、鞘内给药后15 min、1.5、3.0、4.5、6.0 h(T2-6)时测定机械痛阈和冷痛阈,然后处死大鼠,取L4-6脊髓组织,采用免疫荧光法测定脊髓背角神经元NPY2R、降钙素基因相关肽(CGRP)的表达和二者共表达(NPY2R/CGRP)水平.结果 与S组比较,NP组和ODN组T1.时机械痛阈降低,冷痛阈升高,脊髓背角神经元NPY2R、CGRP表达上调(P＜0.05);与NP组比较,ODN组T3-5时机械痛阈升高,脊髓背角神经元NPY2R和NPY2R/CGRP表达下调(P＜0.05),冷痛敏和脊髓背角神经元CGRP表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脊髓背角神经元NPY2R参与了大鼠神经病理性痛的机械痛觉过敏维持,而未参与冷痛觉过敏维持.     

丙戊茶碱对糖尿病痛性周围神经病变大鼠脊髓星形胶质细胞活化的影响

目的 评价丙戊茶碱对糖尿病痛性周围神经病变大鼠脊髓星形胶质细胞活化的影响.方法 清洁级SD大鼠40只,月龄2月,雌雄不拘,体重180-200 g,腹腔注射1%链脲佐菌素60 mg/kg以制备大鼠糖尿病痛性周围神经病变模型.取模型制备成功的大鼠20只,随机分为糖尿病组(DM组)和丙戊茶碱组(PP组),每组10只;另取10只同月龄D大鼠作为对照组(NC组).PP组和DM组在注射链脲佐菌素后第28天开始,每天分别腹腔注射丙戊茶碱10 mg/kg和等容量生理盐水,注射1周.于注射链脲佐菌素前(TI)、注射链脲佐菌素后2、7、14、21、28、35 d(T2-7)时取尾静脉血样0.1 ml测定血糖水平;于T1、T3-7,时测定大鼠右后爪机械缩足反应阈值(PWT);T7时处死大鼠,取L4,s脊髓制备切片.采用免疫组化法检测神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达.结果 与TI时比较,DM组和PP组L2-7时血糖水平升高,T4-7时PWT降低(P<0.01);与NC组比较,DM组和PP组T2-7时血糖水平升高,T6,7时PWT降低,T7时GFAP表达上调(P<0.01);与DM组比较,T7时PWT升高,GFAP表达下调(P<0.05).结论 丙戊茶碱可能通过抑制脊髓星形胶质细胞活化减轻大鼠糖尿病神经病理性痛.     

未损伤背根神经节GABAA受体在大鼠神经病理性痛中的作用

目的 评价未损伤背根神经节(L4 背根神经节)γ氨基丁酸A受体(GABAA受体)在大鼠神经病理性痛中的作用.方法 成年雌性SD大鼠30只,体重200～250 g,随机分为3组(n=10):对照组(C组)、蝇蕈醇组(M组)和荷包牡丹碱组(B组).采用结扎L5脊神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型.C组于L4 背根神经节局部注射生理盐水50μl;M组于L4背根神经节局部注射GABAA受体激动剂蝇蕈醇50μl;B组于L4背根神经节局部注射GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱50μl;各组注射时间均大于1 min.于术前1 d至术后10 d,每天测定大鼠的热痛阈和机械痛阈.结果 与C组比较,M组热痛阈差异无统计学意义(P＞0.05),机械痛阈升高,B组热痛阈和机械痛阈均降低(P＜0.05).结论 未损伤背根神经节GABAA受体激活参与了神经病理性痛大鼠机械痛敏的发生发展,对热痛敏的发生发展可能不起主导作用.     

糖尿病神经病理性痛大鼠脊髓背角γ-氨基丁酸B1受体表达的变化

目的 探讨糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠脊髓背角γ-氨基丁酸B1(GABAB1)受体表达的变化.方法 SD雄性大鼠60只,随机分为2组(n=30),DNP组(D组)腹腔注射链脲佐菌素50 mg/kg制备糖尿病模型,正常对照组(C组)给予等容量生理盐水.分别于给予链脲佐菌素或生理盐水后3、5、7周时取10只大鼠,采集静脉血样,测定空腹血糖浓度,然后测定机械缩足阈值,取脊髓组织,分别采用免疫组化法和Western blot法测定脊髓背角GABAB1受体表达水平,采用RT-PCR法测定脊髓背角GABAB1受体mRNA表达水平.结果 与C组比较,D组血糖升高,机械缩足阈值降低,GABAB1受体及GABAB1受体mRNA表达下调(P＜0.05).结论 DNP大鼠脊髓背角GABAB1受体表达下调.     

背根神经节Nav1.7在大鼠糖尿病神经病理性痛中的作用

目的 评价背根神经节(DRG) Nav1.7在大鼠糖尿病神经病理性痛中的作用.方法 雌性Wistar大鼠32只,月龄3个月,体重180～220 g.采用腹腔注射链脲菌素65 mg/kg的方法制备糖尿病神经病理性痛模型.模型制备成功后第10天鞘内置管.采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n＝8),正常对照组(C组):不做任何处理;假手术组(S组):仅鞘内置管;糖尿病神经病理性痛(DNP组):制备糖尿病神经病理性痛模型,并鞘内置管;Nav1.7阻断剂组(E组):制备糖尿病神经病理性痛模型,鞘内置管后第4天鞘内注射Nav1.7阻断剂ProTx-Ⅱ10 μg/kg,DNP组和S组注射等容量生理盐水.于鞘内注射后1h测定机械缩足阈值(MWT)和神经传导速度(NCV),随后处死大鼠,取L4-6 DRG,采用免疫组化法和Western blot法测定DRG Nav1.7蛋白的表达水平,采用RT-PCR法测定Nav1.7mRNA的表达水平.结果 与C组比较,DNP组和E组MWT和NCV明显下降,DRGNav1.7 mRNA及其蛋白表达上调(P＜0.05),S组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与DNP组比较,E组MWT升高(P<0.05),NCV、DRG Nav1.7 mRNA及其蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DRG Nav1.7参与了大鼠糖尿病神经病理性痛的维持.     

Protein kinase Cbeta selective inhibitor LY333531 attenuates diabetic hyperalgesia through ameliorating cGMP level of dorsal root ganglion neurons

Streptozocin (STZ)-induced diabetic rats show hyperalgesia that is partially attributed to altered protein kinase C (PKC) activity. Both attenuated neuronal nitric oxide synthase (nNOS)-cGMP system and tetrodotoxin-resistant (TTX-R) Na channels in dorsal root ganglion neurons may be involved in diabetic hyperalgesia. We examined whether PKCbeta inhibition ameliorates diabetic hyperalgesia and, if so, whether the effect is obtained through action on neurons by testing nociceptive threshold in normal and STZ-induced diabetic rats treated with or without PKCbeta-selective inhibitor LY333531 (LY) and by assessing the implication of LY in either nNOS-cGMP system or TTX-R Na channels of isolated dorsal root ganglion neurons. The decreased nociceptive threshold in diabetic rats was improved either after 4 weeks of LY treatment or with a single intradermal injection into the footpads. The treatment of LY for 6 weeks significantly decreased p-PKCbeta and ameliorated a decrease in cGMP content in dorsal root ganglia of diabetic rats. The latter effect was confirmed in ex vivo condition. The treatment with NO donor for 4 weeks also normalized both diabetic hyperalgesia and decreased cGMP content in dorsal root ganglions. The expressions of nNOS and TTX-R Na channels were not changed with LY treatment. These results suggest that LY is effective for treating diabetic hyperalgesia through ameliorating the decrease in the nNOS-cGMP system.     

糖尿病大鼠痛性周围神经病变时脊髓小胶质细胞的活化

目的 评价糖尿病大鼠痛性周围神经病变时脊髓小胶质细胞的活化.方法 SD大鼠25只,2月龄,雌雄不限,腹腔注射1%链脲佐菌素60 mg/kg以制备大鼠糖尿病痛性周围神经病变模型,取造模成功的10只SD大鼠作为糖尿病痛性周围神经病变组(DM组),另取10只同月龄SD大鼠作为对照组(NC组).分别于注射前(T1)、注射后2、7、14、21、28 d(T2～6)时称量体重,取尾静脉血0.1 ml测定血糖水平,于T1、T3～6时测定大鼠右后爪机械缩足反应阈值;注射28 d时麻醉大鼠,取L4.5脊髓制备切片,采用免疫组化法检测脊髓小胶质细胞补体受体3(CR3)的表达.结果 与NC组比较,DM组T2～6时血糖升高、体重下降,T4～6时机械缩足反应阈值降低,T6时小胶质细胞CR3表达上调(P<0.05或0.01);与T1时比较,DM组T2～6时血糖升高、体重下降,T6时机械缩足反应阈值降低(P<0.01).结论 脊髓小胶质细胞的活化与大鼠糖尿病痛性周围神经病变的发病有关.     

姜黄素对糖尿病神经病理性痛大鼠脊髓和背根神经节神经细胞凋亡的影响

目的 探讨姜黄素对糖尿病神经病理性痛(DNP)大鼠脊髓和背根神经节(DRG)神经细胞凋亡的影响.方法雄性SD大鼠108只,体重200～230 g,采用腹腔注射链唑霉素70 mg/kg的方法建立大鼠DNP模型.采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=27),正常对照组(C组):不制备DNP模型;DNP组;溶剂对照组(SC组)和姜黄素组(Cur组):于腹腔注射链唑霉素后14 d分别腹腔注射玉米油或姜黄素100 mg/kg(25 mg/ml),1次/d,连续2周.于链唑霉素给药前2 d、给药后14 d、姜黄素给药后3、7、14 d时测定机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(TWL);于姜黄素给药后3、7、14 d时分别采用免疫组化法和Western blot法测定脊髓和DRG caspase-3和Bcl-2的表达水平,并测定神经细胞的凋亡率.结果 与C组比较,DNP组、SC组和Cur组MWT降低,TWL缩短,脊髓和DRG神经细胞凋亡率升高,caspase-3表达上调,Bcl-2表达下调(P＜0.05);与DNP组比较,Cur组MWT升高,TWL延长,脊髓和DBG神经细胞凋亡率降低,caspase-3表达下调,Bcl-2表达上调(P＜0.05),SC组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 姜黄素可通过抑制脊髓和DRG神经细胞凋亡,从而减轻大鼠DNP,其机制与抑制caspase-3水平、增强Bcl-2水平有关.

Abstract：

Objective To investigate the effect of curcumin on the apoptosis in spinal cord and dorsal root ganglion neurons in a rat model of diabetic neuropathic pain (DNP) . Methods One hundred and eight male SD rats weighing 200-230 g were randomly divided into 4 groups ( n = 27 each): control group (group C), DNP group, solvent control group (group SC) and curcumin group (group Cur) . Diabetes was induced with intraperitoneal streptozocin 70 mg/kg. Successful induction of diabetes was defined as blood glucose ＞ 16.7 mmol/L. Curcumin and com oil 100 mg/kg (23 mg/ml) were given intraperitoneally once a day for 14 consecutive days starting from 14 days after administration of streptozocin in Cur and SC groups respectively. Mechanical paw withdrawal threshold (MWT) and thermal paw withdrawal latency (TWL) were measured 2 d before and 14 d after streptozocin injection and 3, 7 and 14 d after curcumin injection. The pain threshold measured at 14 d after administration of streptozocin decreased by more than 15% of the baseline in all the rats. The expression of caspase-3 and Bcl-2 in spinal cord and dorsal root ganglion was determined at 3, 7 and 14 d after curcumin injection by immuno-histochemistry and Western blot, and the neuronal apoptosis rate was determined by TUNEL. Results Compared with group C, MWT and Bcl-2 expression were significantly decreased, TWL was significantly shortened, the neurona lapoptosis rate and caspase-3 expression were significantly increased in DNP, SC and Cur groups ( P ＜ 0.05).Compared with group DNP, MWT and Bcl-2 expression were significantly increased, TWL was significantly prolonged, the neuronal apoptosis rate and caspase-3 expression were significantly decreased in Cur group ( P ＜0.05) . There was no significant difference in the parameters mentioned above between DNP and SC groups ( P ＞0.05). Conclusion Curcumin can attenuate DNP by inhibiting the apoptosis in spinal dorsal hom and dorsal root ganglion neurons in rats, and the inhibition of caspase-3 expression and increase in Bcl-2 expression are involved in the mechanism.     

开胸术后慢性痛大鼠脊髓背角神经元ATP敏感型钾通道表达的变化

目的 评价开胸术后慢性痛大鼠脊髓背角神经元ATP敏感型钾通道(KATP通道)表达的变化.方法 雄性SD大鼠20只,体重250～350 g,采用随机数字表法,将其随机分为假手术组和开胸术后慢性痛组,每组10只.于术前1 d、术后1、5、10、15、20、25、30 d时分别测定机械痛阈,并行冷丙酮实验,记录1 min内大鼠后爪抓挠皮区次数;于术后30d时处死大鼠,取颈至上胸段脊髓,免疫组化法检测KATP通道的表达水平.结果 与假手术组比较,开胸术后慢性痛组大鼠术后5～如d时机械痛阈降低,术后20～30d时后爪抓挠皮区次数增加,术后30 d时胸段脊髓背角神经元KATP通道表达下调(P＜0.05).结论 开胸术后慢性痛大鼠脊髓背角神经元KATP通道表达下调,该变化可能参与了开胸术后慢性痛的病理生理机制.

Abstract：

Objective To evaluate the change in the expression of ATP-sensitive potassium (KATP) channels in spinal dorsal horn neurons in rats with chronic post-thoracotomy pain (CPTP). Methods Twenty male SD rats, weighing 250-350 g, were randomly divided into 2 groups ( n = 10 each): sham operation group and CPTP group. The animals were anesthetized with 10% chloral hydrate 300 mg/kg, tracheostomized and mechanically ventilated. At 1 d before operation, and at 1, 5, 10, 15, 20, 25 and 30 d after operation, paw withdrawal threshold to yon Frey filament stimulation was measured and the acetone test was performed. The responses of the hindpaw to the acetone test within 1 min were recorded. The rats were sacrificed at 30 d after operation, and the cervical and upper thoracic segments of the spinal cord were removed to detect the expression of KATP channels in spinal dorsal horn neurons by immuno-histochemistry. Results Compared with sham operation group, mechanical pain threshold was significantly decreased at 5-30 d after operation, the response frequency was significantly increased at 20-30 d after operstion, and the expression of KATP channels in spinal dorsal horn neurons in the thoracic segments was down-regulsted at 30 d after operation in CPTP group ( P ＜ 0.05). Conclusion The expression of KATP channels in spinal dorsal horn neurons is down-regulated in rots with CPTP,which may be involved in the pathophsiology mechanism of CPTP.     

炎性痛-吗啡耐受大鼠背根神经节兴奋性氨基酸载体1的表达

目的探讨兴奋性氨基酸载体1(EAAC1)在吗啡耐受形成机制中的作用。方法将30只雄性SD大鼠行鞘内置管,随机均分为六组。其中的四组于左后肢制成佐剂性关节炎模型,分别经鞘内给予生理盐水(C组)、吗啡10μg(M10组)、吗啡20μg(M20组)、吗啡10μg+纳洛酮10μg(MN组);另外两组未致炎大鼠分别经鞘内给予生理盐水(C0组)、吗啡20μg(M0组)。各组给药均为1日2次,连续7 d。动态检测大鼠左后肢50%缩爪阈值,于给药后第8天测定痛阈后将大鼠处死,取左侧L3~4、L4~5节段背根神经节(DRG)进行免疫组织化学染色,检测DRG中EAAC1的表达。结果M10、M20两组在鞘内给予吗啡第8天形成较稳定的吗啡耐受,其DRG内EAAC1表达下调。结论DRG EAAC1参与炎性痛大鼠慢性吗啡耐受的形成机制。