生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠的干预实验

目的：观察生黄合剂对病毒性心肌炎小鼠的治疗作用。方法：实验于2003-10／2004-12在承德医学院中心实验室完成。生脉饮（人参：五味子：麦冬=1：2：1）与总黄酮按不同比例制成1：1、1：2合剂．将180只昆明种小鼠按分层随机方法分为6组：生脉饮治疗组、1：1液治疗组、1：2液治疗组、阳性药物对照组、病毒对照组、正常对照组，每组30只。生脉饮治疗组、1：1液治疗组、1：2液治疗组、阳性药物对照组、病毒对照组腹腔注射1000TCID50／0．1mE的柯萨奇B组病毒0．1mL，正常对照组腹腔注射RPMI 1640维持液0．1mL，1h后生脉饮治疗组、1：1液治疗组、1：2液治疗组灌胃给药，0．2mL／10g，阳性药物对照组利巴韦林0．1mL／10g腹腔注射，正常对照组给予相同剂量的生理盐水灌胃，2次／d，持续给药10d。于第7天每组随机抽取6只小鼠摘眼球取血并分离血清，用AU640全自动生化分析仪测定心肌酶.观察生黄合剂对模型鼠的一般情况、生存率、心肌病理损害及心肌酶的影响。结果：180只小鼠均进入结果分析，中途无脱落。①各组生存率比较：生脉饮治疗组、1：1液治疗组、1：2液治疗组、阳性药物对照组与病毒对照组比较，差异显著（50％，79％，67％，33％，25％，χ^2=40．11，P〈0．005）；生脉饮治疗组与1：1液治疗组比较，差异显著（χ^2=4．46，P〈0．05），1：1液治疗组和1：2液治疗组分别与阳性药物对照组比较，差异均显著（χ^2=10．24，χ^2=5．33，P〈0．05）。②除正常对照组外，其他各组小鼠在感染柯萨奇B组病毒后均出现不同程度的心脏病理改变。生脉饮治疗组与1：1液治疗组小鼠的心肌病理积分低于病毒对照组（0．80&;#177;0．45，0．40&;#177;0．55；2．40&;#177;1．14，P〈0．05）。各治疗组小鼠血清心肌酶明显低于病毒对照组[肌酸磷酸激酶：（16．26&;#177;2．89），（13．41&;#177;1．81），（16．90&;#177;3．42），（17．33&;#177;3．31），（25．03&;#177;3．50）mkat／L，P〈0．05；肌酸磷酸激酶同工酶：（10．72&;#177;2．69），（10．41&;#177;2．03），（10．30&;#177;2．72），（15．14&;#177;2．92），（24．25&;#177;3．28）mkat／L，P〈0．05]，各治疗组之间比较无统计学意义。结论：实验所试药物对柯萨奇B组病毒感染鼠均有保护作用，1：1液治疗组、1：2液治疗组对感染鼠的保护和治疗作用要好于阳性药物利巴韦林对照组，尤其是1：1液治疗组的保护和治疗作用最佳。     

蒺藜总皂苷对动脉粥样硬化家兔细胞核因子κB及血清炎症标志物水平的影响

目的:观察蒺藜总皂苷对动脉粥样硬化家兔组织细胞核因子κB、血清炎症标志物水平的影响。方法:实验于2004-12/2005-05在中国中医研究院西苑医院心血管实验室完成。50只健康雄性日本大耳白兔,随机取10只作为正常对照组,喂普通饲料,其余40只给予高脂饮食喂养4周后,再随机分为4组:①模型组10只,继续喂高脂饲料。②小剂量组10只,喂以高脂饲料和蒺藜总皂苷6.3mg/(kg·d)。③大剂量组10只,喂高脂饲料和蒺藜总皂苷12.6mg/(kg·d)。④阳性药物对照组10只,喂以高脂饲料和辛伐他汀2.35mg/(kg·d)。2周后,测定血脂、组织中细胞核因子κB及ELISA法测定血清炎症标志物血清C-反应蛋白、单核细胞趋化蛋白1、血管细胞黏附分子1水平。结果:50只家兔均进入结果分析。①与正常对照组相比,模型组、小剂量组、大剂量组、阳性药物对照组血清胆固醇及三酰甘油均升高[(1.03±0.50),(24.33±6.08),(17.10±1.94),(14.81±5.03),(16.81±2.73)mmol/L,P<0.01;(0.87±0.43),(5.27±0.06),(2.83±0.16),(1.84±0.40),(2.20±0.74)mmol/L,P<0.01];与模型组相比,小剂量组、大剂量组、阳性药物对照组血清胆固醇及三酰甘油水平均明显降低(P<0.05)。②正常对照组细胞核因子κB呈现低表达状态,阳性表达出现在胞浆中;模型组细胞核因子κB活化,表达增强,阳性颗粒出现在胞浆及胞核中,小剂量、大剂量组、阳性药物对照组细胞核因子κB表达的活性较模型组低[(15.47±6.32)%,(8.54±2.67)%,(4.36±3.65)%,(4.70±3.69)%,P<0.05],胞核阳性表达减少。小剂量、大剂量组比较差异不显著。③与模型组比较,小、大剂量组及阳性药物对照组C反应蛋白、血管细胞黏附分子1水平显著降低[(57.09±8.03),(40.07±4.65),(42.04±8.57),(26.07±5.15)ng/L,P<0.01;(51.74±9.29),(43.38±4.09),(36.04±2.57),(35.09±2.49)ng/L,P<0.01],大剂量组血清单核细胞趋化蛋白-1明显降低[(38.77±8.30),(29.47±10.25)ng/L,P<0.05),小剂量组及阳性药物对照组血清单核细胞趋化蛋白-1无明显变化。结论:蒺藜总皂苷能够降低血脂、减少动脉粥样硬化病灶中细胞核因子κB的激活,降低血清中C反应蛋白、单核细胞趋化蛋白1、血管细胞黏附分子1的含量,蒺藜总皂苷具有抗动脉粥样硬化作用。     

连钱草、人参、黄芪等组分的艾克清在小鼠体内抗肿瘤作用

目的:观察由连钱草、人参、黄芪、白术、茯苓、莪术等组成的方剂艾克清在小鼠体内的抗肿瘤作用。方法:实验于2005-06/2005-12在河南中医学院药理毒理学研究室完成。瘤株:小鼠肺癌(Lewis)、小鼠肉瘤(S180)、小鼠肝癌(HepA)、小鼠艾氏癌(Esc),由中国医学科学院实验动物中心引入。艾克清胶囊内容物(由河南中医学院制剂研室提供,批号20041218),配制成含0.5%的羧甲基纤维素纳混悬液0.1g/mL。取C57BL/6雌性小鼠200只,各取50只分别用于小鼠Lewis肺癌、小鼠S180肉瘤、小鼠HepA肝癌、小鼠Esc艾氏癌4种不同癌细胞瘤株的注射。将抽取的小鼠Lewis肺癌、小鼠S180肉瘤、小鼠HepA肝癌、小鼠Esc艾氏癌液体,用生理盐水1∶3稀释成1×107个细胞。在C57BL/6小鼠右腋下分别注入小鼠Lewis肺癌、小鼠S180肉瘤、小鼠HepA肝癌、小鼠Esc艾氏癌细胞悬液0.2mL。均于接种后次日,按随机抽签法分为5组,每组10只。然后给药:①艾克清小剂量组:灌胃艾克清混悬液1.0g/(kg·d)(相当于临床用量8.7倍)。②艾克清中剂量组:灌胃艾克清混悬液2.0g/(kg·d)(相当于临床用量17.4倍)。③艾克清大剂量组:灌胃艾克清混悬液4.0g/(kg·d)(相当于临床用量34.8倍)。④阳性对照组:肌肉注射环磷酰胺20mg/(kg·d)。⑤模型组:灌胃等体积的生理盐水(艾克清给药量均为等体积)。各组连续给药10d,末次给药后1h,每只C57BL/6小鼠腋下肿瘤生长明显,包膜完整,然后处死小鼠,剥离摘取每只小鼠的肿瘤称重,计算抑瘤率。抑瘤率=(对照组-给药组)/对照组×100%。结果:200只小鼠均进入结果分析。艾克清大、中、小剂量组的小鼠Lewis肺癌瘤质量显著低于模型组[(0.74±0.12),(0.89±0.13),(0.94±0.11),(1.32±0.13)g,P<0.01],抑瘤率分别为43.98%、32.32%、29.22%。艾克清大、中剂量组连续用药10d后,小鼠S180肉瘤质量显著低于模型组[(0.87±0.13),(1.06±0.22),(1.55±0.19)g,P<0.05,P<0.01],抑瘤率分别为43.54%、31.52%。艾克清大、中、小剂量组连续用药9d后,小鼠HepA肝癌瘤质量显著低于模型组[(1.05±0.13),(1.35±0.12),(1.43±0.22),(1.78±0.31)g,P<0.05,P<0.01],抑瘤率分别为40.8%、31.13%,19.43%,小鼠Esc艾氏癌瘤质量显著低于模型组[(1.03±0.12),(1.35±0.12),(1.55±0.15),(1.78±0.17)g,P<0.05,P<0.01],抑瘤率分别为42.24%、24.35%,13.1%。结论:口服4.0g/kg艾克清对Lewis、S180、HepA、Esc的抑瘤率均达到40%以上,口服2.0g/kg艾克清对Lewis、S180、HepA的抑瘤率均达到30%以上。     

天灸对肺癌小鼠骨髓有核细胞和外周白细胞的影响及其抗肿瘤作用

目的:观察天灸籍药物穴位敷贴及药物本身的治疗作用对顺铂化疗Lewis肺癌小鼠骨髓有核细胞的影响,以及肿瘤生长的抑制。方法:实验于2005-02在北京中医药大学针灸学院针灸机理实验室进行。将40只C57BL/6J近交系小鼠随机分为4组:正常组、模型组、化疗组、天灸 化疗组,各10只。正常组:不做肺癌移植肿瘤模型造模,不处理;模型组:只造模,不处理;化疗组:造模4d后,腹腔注射顺铂,0.2mL/只,含顺铂0.05mg,连用5d。天灸 化疗组:在造模化疗的同时,贴天灸膏(药物组成为麝香、淫羊藿、三七、黄芪、辣椒,按1∶20∶20∶20∶40比例调配),8h/次,1次/d,共治疗11次。天灸治疗结束后次日,即第14d统一处死取材。观察天灸后各组小鼠净体质量变化、瘤质量、抑瘤率,以及天灸对化疗小鼠骨髓有核细胞、外周血白细胞的影响。结果:40只小鼠均进入结果分析。①化疗组和天灸 化疗组净体质量与模型组相比,明显降低,而天灸有减轻小鼠体质量下降的趋势[(15.03±0.63),(15.75±0.40),(21.57±0.56)g;t=8.35,6.78,P<0.001]。②化疗组和天灸 化疗组瘤质量与模型组相比,均明显降低,但天灸 化疗组减轻的程度较大[(2.35±0.27),(2.2±0.13),(3.44±0.28)g;t=3.56,4.65,P<0.01];在抑瘤率方面,天灸 化疗组亦比化疗组高(36.0%,31.7%)。③天灸 化疗组外周白细胞数目与模型组相比明显上升[(8.32±0.55),(10.88±0.84)×109L-1,t=2.76,P<0.05],而化疗组外周白细胞数目较正常组明显下降[(7.38±0.56),(9.85±0.93)×109L-1,t=2.51,P<0.05],且天灸 化疗组与化疗组之间有显著性差异(t=3.86,P<0.01)。④化疗组骨髓有核细胞数目与模型组相比明显减少[(3.36±0.72)×106L-1,(1.77±0.33)×106L-1,t=2.96,P<0.05],而天灸 化疗组的骨髓有核细胞数目,比化疗组明显升高[(3.37±0.48)×106L-1,t=2.43,P<0.05]。结论:天灸膏有增强化疗抗肿瘤的作用,减轻化疗的毒副作用。这种辅助治疗效果可能与显著提高化疗处理中肺癌模型小鼠骨髓有核细胞数目,以及提高化疗过程中肺癌小鼠血液白细胞数目有关。     

雌性小鼠生殖器官衰老与玉米幼芽提取物的干预效应

目的:观察玉米幼芽提取物对雌性衰老小鼠卵巢和子宫抗氧化损伤方面的作用。方法:实验于2006-04/06在西北农林科技大学生理实验室完成。实验分组:选取健康雌性昆明小鼠28只,随机分为4组,每组7只,分别为正常组,衰老组,玉米幼芽提取物30mg/kg组和60mg/kg组。实验干预:正常组每天注射生理盐水,其余3组每天注射D-半乳糖(200mg/kg),连续45d。注射的第11天开始正常组,衰老组每天灌服蒸馏水,玉米幼芽提取物30mg/kg组和60mg/kg组加服30mg/kg和60mg/kg玉米幼芽提取物。末次灌胃禁食,确定间情期后处死,迅速解剖取出卵巢和子宫,低温下匀浆组织。实验评估:考马斯亮蓝法测定总蛋白含量,羟氨法测定超氧化物歧化酶活性、TAB法测定谷胱甘肽过氧化物酶活性,比色法测定丙二醛含量。结果:28只小鼠均进入结果分析。①总蛋白含量:衰老组显著低于正常组[卵巢(24.27±3.40),(50.84±3.65)mg/L,(P<0.01);子宫(38.49±1.71),(47.47±3.43)mg/L,(P<0.01)],玉米幼芽提取物30mg/kg组和60mg/kg组显著高于衰老组[卵巢(38.68±4.51),(38.37±0.55),(24.27±3.40)mg/L,(P<0.01);子宫(41.98±0.92),(42.96±0.84),(38.49±1.71)mg/L,(P<0.01)]。②超氧化物歧化酶活性:衰老组显著低于正常组[卵巢(20.10±3.98),(23.27±1.88)mkat/g,(P<0.05);子宫(85.00±9.70),(113.21±14.34)mkat/g,(P<0.05)],玉米幼芽提取物30mg/kg组和60mg/kg组显著高于衰老组[卵巢(27.52±2.55),(24.17±1.63),(20.10±3.98)mkat/g,(P<0.01,P<0.05);子宫(105.85±7.20),(113.06±5.10),(85.00±9.70)mkat/g,(P<0.05)]。③谷胱甘肽过氧化物酶活性:衰老组显著低于正常组[卵巢(0.0900±0.0050),(0.1050±0.0067)mkat/g,(P<0.01);子宫(0.0300±0.0800),(0.0633±0.1584)mkat/g,(P<0.01)],玉米幼芽提取物30mg/kg组和60mg/kg组显著高于衰老组[卵巢(0.1217±0.0083),(0.1134±0.0067),(0.0900±0.0050)mkat/g,(P<0.01);子宫(0.0817±0.0200),(0.0683±0.0750),(0.0300±0.0800)mkat/g,(P<0.01)]。④丙二醛含量:衰老组显著高于正常组[卵巢(0.894±0.052),(0.183±0.017)mmol/g,(P<0.01);子宫(0.357±0.048),(0.113±0.014)mmol/g,(P<0.01)],玉米幼芽提取物30mg/kg组和60mg/kg组显著低于衰老组[卵巢(0.211±0.046),(0.322±0.077),(0.894±0.052)mmol/g,(P<0.01);子宫(0.103±0.022),(0.134±0.035),(0.357±0.048)mmol/g,(P<0.01)]。结论:玉米幼芽提取物能改善D-半乳糖引起的卵巢和子宫氧化应激,具有良好的抗衰老作用。     

通络方剂抗氧化作用及对大血管内皮细胞的保护

目的:观察通络方剂对1型糖尿病大鼠血清抗氧化指标和大血管内皮细胞损害的影响,并与抗氧化剂α-硫辛酸作用效果进行比较。方法:实验于2005-09/11在解放军第二军医大学动物实验中心及免疫研究所完成。①选用雄性SD大鼠23只,4～6周龄。随机抽取5只作为正常对照组大鼠(只注射等体积枸橼酸钠缓冲液),其余大鼠按60mg/kg剂量应用链脲佐菌素溶液,3d后,以空腹血糖持续≥16.7mmol/L,尿糖"者为造模成功,造模成功15只,将其按随机数字表法分为3组,每组5只:模型组,通络方剂组,α-硫辛酸组。通络方剂组:每天上午灌胃通络方剂水溶液1g/kg,通络方剂超微颗粒由人参、水蛭、全蝎、蜈蚣、土鳖虫、赤芍等药物组成,由以岭药业提供;α-硫辛酸组:每天上午灌胃α-硫辛酸(江苏常熟诚希化工有限公司)100mg/kg;其余2组均灌胃等体积的体积分数0.02的乙醇稀释液。②连续处理6周后,采用葡萄糖氧化酶法测血糖,采用可见光法检测过氧化氢酶活力,用TBA法测定丙二醛,用DTNB法定量测定谷胱甘肽过氧化物酶活力,比色法测超氧化物歧化酶活力与总抗氧化能力。透射电镜下观察胸主动脉内皮细胞的结构改变。结果:因造模失败脱失3只,其余均进入结果分析。①血清抗氧化指标:模型组血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶活力和总抗氧化能力明显低于正常对照组[(0.883±0.243)mkat/L,(2.056±0.219)mkat/L,(223.21±28.84)μkat/L,(5.25±0.84)kU/L;(2.826±0.199)mkat/L,(4.890±0.358)mkat/L,(387.91±13.00)μkat/L,(9.81±1.28)kU/L,P<0.05],丙二醛水平明显高于正常对照组[(9.99±1.7),(2.42±0.89)μmol/L,P<0.05]。通络方剂组和α-硫辛酸组血清超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力明显高于模型组[通络方剂组:(1.665±0.140),(3.771±0.258)mkat/L;α-硫辛酸组:(1.851±0.132),(4.141±0.186)mkat/L,P<0.05],低于正常对照组(P<0.05)。②胸主动脉血管内皮结构透射电镜观察结果:模型组内皮细胞发生明显损害,通络方剂和α-硫辛酸组内皮细胞病变程度则明显改善。结论:通络方剂能提高糖尿病大鼠机体抗氧化能力,对糖尿病所致的大鼠血管内皮损害具有一定的保护作用。     

柯萨奇病毒致小鼠心肌损害的组织形态学变化

目的:观察柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌组织的病理特点及胶原蛋白的表达情况。方法:实验于2004-10/2006-04在广西医科大学医学科学实验中心完成。①实验分组:选择80只Balb/c纯种雄性小鼠,鼠龄4￣6周,随机分为对照组20只和模型组60只。②实验方法:模型组小鼠腹腔注射柯萨奇B3Nancy株悬液0.1mL,对照组腹腔注射不含病毒的Hep-2细胞冻存液0.1mL。模型组小鼠分别于接种柯萨奇B3后第7,14,28和42天麻醉后断颈处死10只,10只,10只和9只,颈动脉采血0.8￣1.0mL,保存血清;摘取心脏,浸泡于4%多聚甲醛溶液中;对照组20只小鼠于42d后采用上述方法处死,并留取血清及心脏。③实验评估:检测血清CVB3中和抗体滴度;心肌组织切片苏木精-伊红染色后,光镜下观察组织形态学改变;免疫组化法检测心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达情况。结果:①行为学变化及死亡情况:模型组于接种后第3天出现行为学改变,第12天后症状逐渐缓解;从第4天开始发生死亡,第7￣10天为死亡高峰期,第12天后无死亡,总死亡率为35%(21/60)。②血清柯萨奇B3中和抗体滴度:模型组各时间点血清柯萨奇B3中和抗体滴度均高于对照组(P<0.01),以第7天滴度为最高。③心肌组织形态学特点:接种病毒后7d,心肌组织出现多灶性凝固性坏死,大量炎细胞浸润;28d后,坏死灶周围的炎细胞已近消失,代之以增殖的成纤维细胞。④心肌组织病理积分:模型组各时间点心肌病理积分均明显高于对照组,其中第7天增高最为显著(P<0.05)。⑤心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达:模型组各时间点心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均明显增加,以第42天最为显著(P<0.01);第7天和第14天小鼠心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原比值与对照组之间无显著性差别(P>0.05),而第28天和第42天则显著高于对照组(P<0.05)。结论:采用腹腔注射柯萨奇B3Nancy株悬液的方法可以成功构建病毒性心肌炎小鼠模型。病理表现为急性期心肌细胞大量坏死,伴多种炎细胞浸润,胶原蛋白表达活跃;缓解期,成纤维细胞大量增殖,胶原蛋白表达持续增高,最终导致心肌间质重构。     

拟黑多刺蚁乙醇提取物改善KKAy糖尿病小鼠糖代谢的活性效应

目的:观察拟黑多刺蚁乙醇提取物对KKAy糖尿病小鼠葡萄糖代谢的影响及其活性有效作用部位。方法:实验于2003-09/10在解放军总医院动物中心实验室进行。①KKAy糖尿病小鼠34只,按空腹血糖随机分成实验组和对照组,每组17只。拟黑多刺蚁的处理和实验饲料的配制:活拟黑多刺蚁溺水处死后捞出,滤去水分,晾干,研成粉末。实验组饲料为黑多刺蚁粉末与标准饲料混合,对照组饲料为纤维素加标准饲料,比例均为1∶9。饲养3周后进行糖耐量实验,测定灌胃给予淀粉3g/kg后0,1,2h血糖;喂养4周后不禁食,测定随机血糖;喂养5周后禁食15h,测定空腹血糖;喂养6周后禁食15h,测定空腹血糖,灌胃给予L-丙氨酸5g/kg2h后检测血糖。②选用NIH雄性小鼠和昆明雌性小鼠各26只,NIH雄性小鼠和昆明雌性小鼠均各自分为实验组和对照组,各13只。拟黑多刺蚁体积分数为0.5、体积分数为0.95的乙醇提取方法:取2份蚂蚁粉750g,分别加入体积分数为0.5和0.95的乙醇,超声提取3次,合并滤液,用旋转蒸发器浓缩、除去乙醇。残液冰冻干燥,分别得到褐色粉末和红褐色油状物。取粉末提取物0.5g,加水10mL,按10mL/kg灌胃;取油状物,按1∶9比例用水稀释后,按10mL/kg剂量灌胃。实验组分别给予体积分数为0.5、0.95的乙醇蚂蚁提取物、淀粉3g/kg灌胃。对照组仅给予淀粉3g/kg灌胃,检测灌胃给予淀粉后1,2h的血糖。结果:86只小鼠全部进入结果分析,中途无脱落。①KKAy糖尿病小鼠食用拟黑多刺蚁3周后,给予淀粉后1h、2h血糖明显低于对照组[(7.02±1.31),(8.53±1.81)mmol/L;(6.11±0.97),(7.68±1.48)mmol/L,P<0.01];喂养4周后,随机血糖明显低于对照组[(5.89±1.80),(7.57±2.13)mmol/L,P<0.05];喂养5周后,空腹血糖明显降低[(3.93±0.63),(4.33±0.66)mmol/L,P<0.01];喂养6周后,灌胃给予L-丙氨酸2h的血糖明显低于对照组[(4.44±1.72),(6.03±2.01)mmol/L,P<0.05]。②拟黑多刺蚁50%乙醇提取物能有效抑制NIH雄性小鼠给予淀粉1h引起的血糖上升[(8.41±1.76),(10.45±2.26)mmol/L,P<0.05]。③拟黑多刺蚁50%乙醇提取物也能抑制昆明雌性小鼠给予淀粉后1h的血糖上升[(8.28±1.67),(9.85±1.87)mmol/L,P<0.05]。④拟黑多刺蚁95%乙醇提取物能抑制NIH雄性小鼠给予淀粉后1h血糖的上升[(7.18±1.14),(9.18±1.02)mmol/L,P<0.01]。⑤拟黑多刺蚁95%乙醇提取物能抑制昆明雌性小鼠给予淀粉1h和2h后血糖的上升[(6.32±0.53),(9.43±2.32)mmol/L;(5.16±0.61),(5.88±0.62)mmol/L,P<0.01]。结论:拟黑多刺蚁能明显改善KKAy糖尿病小鼠的糖耐量.拟黑多刺蚁的50%和95%乙醇提取物均能明显改善不同性别的NIH和昆明小鼠的糖耐量,拟黑多刺蚁的乙醇提取物可能是拟黑多刺蚁的改善糖代谢的有效部位。     

心脏基因工程研究对一级康复的干预作用:构建柯萨奇B2病毒毒粒蛋白候选基因疫苗诱导体液免疫的评估

目的:探讨心脏基因工程研究中构建柯萨奇B2病毒毒粒蛋白侯选基因疫苗,并评价其诱导体液免疫的效果。方法:实验于2003-05/12在中国农业科学院国家生物重点实验室哈尔滨兽医研究所生物二室完成。采用反转录聚合酶链反应技术扩增柯萨奇B2病毒的主要中和抗原毒粒蛋白基因,通过分子克隆构建pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白基因免疫质粒。选择3周龄BALB/c雄性小鼠30只,随机分成3组,pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白组:对小鼠进行pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白免疫;空载体对照组对小鼠进行pcDNA3免疫;磷酸盐缓冲液组:对小鼠进行磷酸盐缓冲液免疫,每组10只。每组免疫时间和接种量、接种方法相同。采用酶联免疫吸附法测定pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白、pcDNA3、磷酸盐缓冲液免疫小鼠后2,4,6,8周柯萨奇B2病毒特异性抗体免疫球蛋白G水平。结果:①获得pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白基因免疫质粒,可在HeLa细胞中表达。②免疫后6,8周pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白组柯萨奇B2病毒特异性抗体免疫球蛋白G水平明显高于免疫后4周(A450:0.153±0.013,0.150±0.011,0.142±0.014,P<0.01,0.05);免疫后4周pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白组柯萨奇B2病毒特异性抗体免疫球蛋白G水平明显高于空载体对照组和磷酸盐缓冲液组(0.120±0.007,0.119±0.009,P<0.01)。结论:pcDNA3-柯萨奇B2病毒毒粒蛋白可诱导小鼠产生体液免疫,做为候选基因疫苗,以基因免疫的角度参与心脏基因工程研究,有望为该病毒性心肌炎的发生起到一级预防作用。     

地高辛抗血清对老龄大鼠心肌缺氧复氧损伤影响的体外实验

目的:观察内洋地黄素水平在老龄大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的变化以及地高辛抗血清的保护作用。方法:实验于2005-04/05在皖南医学院病理生理教研室完成。取10只24月龄和10只6月龄雄性普通级SD大鼠,分别制备青年和老龄大鼠心肌细胞匀浆,老龄和成年大鼠为两大组,每组分为7小组,即每只大鼠心肌随机分到各小组中,共计14小组,每组10支试管。正常对照组:给予CO2和O2的混合气体(1∶19)通气40min;缺氧复氧组:CO2,O2,N2混合气体(5∶4∶91)通气20min后换成CO2和O2的混合气体(1∶19)通气20min;阴性对照组:同缺氧复氧组,但于再给氧前加入0.1mL的非特异性灭活兔血清;地高辛抗血清组:同缺氧复氧组,但于再给氧前加入0.1mL的非特异性地高辛抗血清(分别为1∶90000,60000,30000,10000)。观察大鼠心肌细胞钠-钾-三磷酸腺苷酶活性和线粒体内钙聚集程度,分析其剂量-效应关系。结果:①缺氧复氧时,青年组和老龄组大鼠心肌分泌内洋地黄素均显著升高,但老龄组显著低于青年组[(0.081±0.03),(0.153±0.06);(0.074±0.04),(0.125±0.05)ng/g;P<0.05]。②缺氧复氧时,老龄组与青年组心肌细胞钠-钾-三磷酸腺苷酶活性显著受抑制[(0.239±0.015),(0.778±0.050);(0.350±0.047),(0.836±0.044)μkat/g;P<0.05],老龄组与青年组相比,其抑制效应显著增强(P<0.05)。③缺氧复氧时,老龄组线粒体内钙与青年组比较明显增强[(0.082±0.011),(0.495±0.095);(0.075±0.008),(0.412±0.084)mmol/L,P<0.05]。④老龄组和青年组相比,地高辛抗血清呈剂量依赖性的恢复钠-钾-三磷酸腺苷酶活性(r=0.695,0.797,n=5,P<0.05),减轻线粒体内钙聚集(r=-0.565,-0.649,n=5,P<0.05);经直线回归分析发现,老龄鼠回归系数大于青年组(酶活性抑制K=1.50,0.94,线粒体内钙K=-7.43,-6.46)。结论:心肌细胞缺氧复氧时,老龄鼠损伤较青年大鼠更显著,其机制与老龄大鼠心肌细胞钠-钾-三磷酸腺苷酶对内洋地黄素敏感性增加有关,地高辛抗血清对老龄大鼠心肌细胞缺氧复氧保护作用更有效。     

甲基强的松龙治疗毛细支气管炎疗效观察

在常规治疗基础上采用甲基强的松龙治疗毛细支气管炎28例,结果疗效与常规治疗的28例相比,有显著差异(P<0.05)。     

护士对护士长期望的调查分析

护士长是护理工作的直接组织者、指挥者、管理者。护士长在医院护理管理中起承上启下的作用。医院护理质量的关键在护士长的素质与管理能力。护士长的职业素质对护理工作必将产生直接影响。我们对三级医院102名护士对护士长期望进行问卷调查,并将调查结果进行分析。现介绍如下。1对象与方法1.1对象调查对象为三级医院102名护理人员,年龄22岁～52岁,平均30.16岁。其中中专52名,大专25名,本科25名。高级职称14名,中级职称42名,初级职称46名。在被调查者工作年限16年24人,占总人数23.52%;工作年限11年48人,占总人数47.06%;工作年限6年15人,占总…     

头部围针对偏瘫的康复效果观察

目的探讨头部围针结合体针在偏瘫康复中的作用。方法90例患者分为头部围针体针结合康复组（实验组），焦氏头针体针结合康复组（对照组1），及康复组（对照组2）。判定标准为上田敏功能评价、日常生活活动能力（ADL）评定；头部围针组还进行汉密尔顿抑郁量表治疗前后评定。结果3组治疗前后功能评分有显著性差异，组间比较实验组ADL及下肢功能的恢复优于其他两组，上肢功能恢复无显著性差异。实验组治疗前后抑郁量表评分有显著性差异。结论头部围针是有效的疗法之一。     

基于德尔菲法构建急性脑卒中护理质量指标的研究

目的建立一套科学、客观、系统的急性脑卒中护理质量指标,为我国急性脑卒中管理的研究和实践提供参考依据。方法制定严密的文献检索策略,采用美国霍普金斯证据等级与质量评价方法评定检索到的文献质量,在借鉴国内外有关急性脑卒中护理质量指标研究成果的基础上,拟定急性脑卒中护理质量指标37条,利用专家小组讨论和德尔菲专家咨询法,对指标重要性、公式合理性及可行性进行评价。结果构建了一套包括17个指标在内的急性脑卒中护理质量指标。2轮专家咨询的有效回收率分别是92.00%和95.24%,专家的权威系数分别为0.84和0.85,2轮专家咨询后各项指标重要性的变异系数为0.09~0.23,计算公式合理性变异系数为0.08~0.21,收集资料方法可行性变异系数为0.10~0.24,均小于0.3。结论基于德尔菲法构建的急性脑卒中护理质量指标科学性强,可为我国急性脑卒中管理研究和实践提供参考依据。     

供应室质量监测管理

供应室是控制院内感染的重点科室 ,其消毒灭菌效果直接影响着临床医疗质量和病人的安全 ,因此 ,做好消毒灭菌的监测管理 ,保证无菌物品的质量尤为重要[1] 。1　树立质量第一观念　　供应室是给临床、医技科室提供无菌医疗器材的单位 ,所供应的各种医疗用品直接用于病人 ,必须达到无菌、无热源的标准。由于工作性质决定了供应室工作人员必须树立全员性参与全流程控制质量的观念 ,发挥内在监控作用 ,使供应的每件医疗用品达到指定的标准。2　实施全方位质量监测　　按照供应室质量标准化要求 ,制订和完善各项规章制度、各班护士职责、各类工作…     

索他洛尔治疗心律失常疗效观察

应用索他洛尔治疗房、室性心律失常59例。用药前、后分别测血压、心率、心电图QTc、24小时动态心电图及肝、肾功能等血生化指标。结果房性心律失常者有效率为60%,室性心律失常者有效率为87.2%,总有效率78.0%。用药过程中仅有心率减慢、QTc延长及早期收缩压下降。索他洛尔治疗房、室性心律失常安全、有效,剂量以160mg/d为宜。