以化学成分指纹图谱表征的丹参炮制及其汤剂成分研究

目的 以化学成分指纹图谱为检测手段,探索丹参的常用炮制方法对其化学成分变化的影响,以及丹参饮片在汤剂中不同提取次数下化学成分的溶出特点.方法 采用HPLC色谱指纹图谱技术和标准化学对照品对比分析的方法,研究丹参炮制前后化学成分的变化及汤剂可溶出成分与药材成分的差异.结果 丹参药材及净制饮片中只有原儿茶醛,未发现原儿茶酸,而在酒炙饮片中发现了原儿茶酸,且原儿茶醛相对含量下降;丹参饮片的脂溶性成分在汤剂中不宜溶出,水溶性成分提取2次,即可大部分提取出来.结论 丹参饮片中的脂溶性成分难以进入到汤剂中,说明丹参在汤剂中使用、产生疗效的物质基础化学成分应该是水溶性成分.     

川芎药材化学成分HPLC指纹图谱研究

目的通过川芎药材化学成分指纹图谱的研究,进一步研究川芎有效物质基础成分。方法采用反相高效液相色谱法,以梯度洗脱的方式,60 m in内在同一谱中同时完成水溶性成分和脂溶性成分的指纹图谱建立。结果通过四川省4个地区20批川芎药材的化学成分指纹图谱的分析,以平均数法模拟了具有18个共有峰的川芎药材化学成分指纹图谱;并进行了不同等级、不同产地川芎化学成分指纹图谱的分析。结论本方法不但可以用于川芎药材质量控制,还可以作为探索中药川芎有效物质基础研究的有效手段。     

丹参药材化学成分HPLC指纹图谱研究

目的通过丹参药材化学成分指纹图谱的研究,进一步研究丹参有效物质基础成分。方法采用反相高效液相色谱法,以梯度洗脱的方式,60min内在同一谱中同时完成水溶性成分和脂溶性成分的指纹图谱建立。结果通过6个省30批丹参药材的化学成分指纹图谱的分析,以平均数法模拟了具有18个共有峰的丹参药材化学成分指纹图谱;并进行了不同等级、不同产地丹参化学成分指纹图谱的分析。结论本方法不但可以用于丹参药材质量控制,还可以作为探索中药丹参有效物质基础研究的有力手段。     

不同产地丹参水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱测定及相关性研究

目的 分析不同产地丹参水溶性成分和脂溶性成分指纹图谱的变化情况，研究丹参脂溶性成分含量与水溶性成分含量之间的相关性。方法 采用HPLC法测定不同产地丹参水溶性成分、脂溶性成分的指纹图谱以及主要成分的含量，运用SPSS统计软件分析丹参成分变化情况。结果 丹参脂溶性成分和水溶性成分指纹图谱随产地不同而变化，丹参脂溶性成分含量与水溶性成分含量高低无内在关系。结论 建议制订丹参丹酚酸类成分含量，作为适用于丹参类注射液用的丹参药材标准，以区别于供复方丹参片等制剂用的丹参。     

口服川芎饮片煎液大鼠体液化学成分变化研究

目的通过研究口服川芎饮片大鼠体内化学成分的指纹图谱,探索川芎饮片口服产生疗效时有效物质基础成分的动态变化过程。方法按照中药有效物质基础研究方法学路线,采用HPLC色谱指纹图谱技术和体内药物分析方法。结果川芎饮片水煎口服后,发现10种以色谱峰代表的化学成分通过消化道吸收入血,其中9种为原型成分入血,1种为肠代谢后转化的新成分;肝代谢使3种原型入血的成分和1种肠代谢后转化的成分消失;经过肾代谢的尿液中有与血液中相同的成分;心脏和脑组织中未发现成分进入。结论按照中药有效物质基础研究方法学路线,川芎饮片口服用药产生疗效的有效物质基础化学成分动态变化过程得到了揭示。     

白芍原药材与不同炮制加工品的高效液相色谱对比研究

目的:考察白芍原药材与不同炮制加工品中化学成分的差异性,为稳定白芍的炮制工艺提供依据.方法:采用高效液相色谱法分别分析白芍原药材、白芍饮片、麸炒白芍、酒白芍、发酵白芍中的化学成分,以芍药苷为主,对其含量进行对比研究,并对整体化学成分进行指纹图谱对比研究.Agilent C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相(含量测定等度洗脱,指纹图谱梯度洗脱);检测波长为230 nm(含量测定)和210 nm(指纹图谱);柱温:30℃.结果:炮制加工后化学成分及含量有一定的差异,酒白芍、发酵白芍中芍药苷的含量有一定程度的增加,并且发酵白芍在含量测定和指纹图谱中各种成分含量较高.结论:在白芍的炮制方法中,发酵法是比较好的方法.     

GC-MS法建立都江堰产川芎挥发油的指纹图谱

目的建立川芎挥发油特征指纹图谱,以科学评价和有效地控制川芎药材内在质量。方法采用GC-MS法分析10批川芎挥发油化学成分,标定共有峰和确定特征指纹峰。结果鉴定出13个共有峰,确定其中8个共有峰为其特征指纹峰。以特征指纹峰作为评价指标,方法的精密度、稳定性、重现性良好。结论采用GC-MS法建立川芎挥发油特征指纹图谱,其特征性和专属性强,可作为川芎药材质量控制的有效手段。     

葛根芩连方超微饮片与传统饮片总生物碱溶出量对比分析

目的 对比葛根琴连方超微饮片与传统饮片总生物碱溶出量,为中药复方超微饮片临床应用提供科学依据.方法 采用水溶性浸出物定量测定,薄层层析定性鉴别,紫外分光光度法定量分析,测定葛根芩连方超微饮片与传统饮片水溶性浸出物及总生物碱含量.结果 葛根芩连汤超微饮片水溶性浸出物含量是传统饮片的1.5倍;总生物碱含量是传统汤剂的1.74倍.结论 超微饮片细胞破壁后,化学成分溶出量较传统饮片增加,并快速溶出.     

川芎配方颗粒的制备及量值传递研究

[目的] 研究川芎配方颗粒的制备工艺及量值传递过程,确定川芎饮片、标准汤剂、配方颗粒的相关性,保证配方颗粒与标准汤剂的等效性。[方法] 制备18批川芎标准汤剂,测定出膏率。建立特征图谱,标定特征峰,对特征峰进行归属。测定原料饮片和标准汤剂中阿魏酸的含量,计算转移率。以标准汤剂所得的质量指标为依据,进行制备工艺研究,制备川芎配方颗粒。以出膏率、阿魏酸含量及转移率、特征峰传递数量为指标,进行川芎配方颗粒量值传递研究。[结果] 通过对18批川芎饮片的标准汤剂进行研究,最终确定出膏率范围为26%~37%。特征图谱共标定8个特征峰,对其中3个成分进行指认,分别为阿魏酸、洋川芎内酯A和藁本内酯。阿魏酸含量范围为0.28%~0.52%,平均转移率为37.7%。[结论] 川芎饮片、标准汤剂及配方颗粒中的阿魏酸转移稳定,均呈现8个特征峰,说明川芎饮片中化学成分基本全部转移至配方颗粒,川芎配方颗粒与标准汤剂基本等效。     

丹参药材超高效液相色谱指纹图谱研究

[目的]建立丹参药材中水溶性成分丹酚酸类和脂溶性成分丹参酮类的超高效液相(UPLC)指纹图谱方法,为丹参的质量控制提供快速、科学的方法.[方法]以Acquity C18 BEH(2.1mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,乙腈(A)-体积分数0.4%甲酸溶液(B)梯度洗脱,90%～50%A,0～10 min;75%A,15 min.检测波长280nm,柱温30℃,流速0.5mL/min.[结果]在15 min内得到丹参药材水溶性和脂溶性成分的指纹图谱,峰容量85.并采用液质连用技术(HPLC-DAD-ESI/MSn)鉴定了其中的20个特征峰.[结论]UPLC指纹图谱方法具有灵敏、快速、简便、准确等特点,适合于丹参药材及其制剂的指纹图谱研究和质量控制.     

生化汤谱效关系初探

目的研究生化汤不同配伍组方的药效与其化学成分指纹图谱间的关系,阐述生化汤配伍机理。方法按照君臣佐使中医组方原理,采用撤药分析法对生化汤进行拆方研究,观察比较各配伍组方对急性血瘀大鼠血液流变学和血浆血栓素B2（TXB2）、前列环素F1α（PGF1α）的药效作用的不同,并从整体上考察各配伍组方化学成分指纹图谱间的差异。结果缺桃仁组方对急性血瘀大鼠的全血黏度、血浆黏度、TXB2水平和TXB2/PGF1α的值的影响与生化汤全方比较均有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）;缺川芎组方对红细胞聚集指数、红细胞压积、红细胞电泳指数、血沉方程K值的影响与全方比较亦有显著性差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论生化汤全方对急性血瘀大鼠的治疗作用优于其他缺药组方,而上述13种物质均有可能是生化汤药效物质基础的重要组成部分。     

口服丹参饮片煎液大鼠体液化学成分变化研究

目的通过口服丹参饮片大鼠体内化学成分指纹图谱的研究,探索丹参饮片口服产生疗效时有效物质基础成分的动态变化过程。方法按照中药有效物质基础研究方法学路线,采用HPLC色谱指纹图谱技术和体内药物分析方法。结果丹参饮片水煎口服后,发现16种以色谱峰代表的化学成分通过消化道吸收入血,其中4种为原型入血成分,12种为肠代谢后转化的新成分;血液中运载成分与入血成分相比,入血成分经过肝代谢后中有4种含量降低;经过肾代谢的尿液中有与血液运载相同的成分;心脏和脑组织中未发现成分进入。结论按照中药有效物质基础研究方法学路线,丹参饮片口服用药产生疗效的有效物质基础化学成分动态变化过程得到了揭示。     

延胡索炮制前后脂溶性成分的GC-MS分析

目的:比较炮制前后延胡索中的脂溶性成分含量及其成分的变化。方法:用索氏提取法提取脂溶性成分,用2%硫酸-甲醇在70℃下甲酯化,用GC-MS联用技术分离鉴定其组成和含量。结果:从延胡索中得到7种脂肪酸,含量为81.685%,含量较高的为反亚油酸(45.881%)和十六酸(12.437%);而从醋制延胡索中也得到7种脂肪酸,含量为59.505%,含量较高的为反亚油酸(22.296%)、二十二酸(10.004%)和(Z)-9-十八烯酸(9.692%)。结论:炮制前后的延胡索中脂溶性成分主要是脂肪酸,其中不饱和脂肪酸占优势;未炮制和炮制延胡索的脂溶性成分组成存在一定差异,其含量差异较大。     

大黄5种饮片化学成分的变化规律

目的 比较大黄不同饮片中各色谱峰峰面积的变化情况,探讨饮片炮制过程中化学成分的变化规律.方法 运用HPLC指纹图谱法,以甲醇-1.0%冰醋酸为流动相梯度洗脱,柱温30 ℃,流速1.0 mL/min,检测波长280nm.对大黄5种饮片各10批次样品进行分析,比较同一成分在不同饮片中峰面积的变化情况.结果 在已归属的24个色谱峰中没食子酸(1)在熟大黄中含量最高,5种游离蒽醌,即芦荟大黄素(20)、大黄酸(21)、大黄素(22)、大黄酚(23)、大黄素甲醚(24)在熟大黄中含量最高,4'-羟基苯基-2-丁酮-4'-0-β-D-(6"-没食子酰基)-葡萄糖苷(6)、大黄素8-O-葡萄糖苷(17)及芦荟大黄素-3-CH2-O-β-D-葡萄糖苷(18)在生片中较高,其余成分均以酒大黄含量最高.结论 辅料的种类、炮制时加热的温度和时间,是不同大黄饮片炮制前后化学成分变化的主要因素.高温或长时间加热会导致大黄中蒽醌苷类成分含量的不同程度的降低而游离蒽醌含量均有不同程度的升高.     

川芎通过多成分、多靶点、多信号通路和多生物学功能发挥抗肺癌脑转移作用

目的 利用网络药理学方法和分子对接技术研究川芎治疗肺癌脑转移的潜在分子机制。方法 通过中药系统药理学分析平台TCMSP数据库获取川芎的化学成分和作用靶点；通过GeneCards数据库筛选肺癌脑转移的相关靶点；借助Clusterpro-filerR包进行GO和KEGG富集分析；利用Cytoscape及STRING数据库构建川芎“活性成分-靶点-疾病”网络、蛋白相互作用网络，根据拓扑学参数筛选川芎治疗肺癌脑转移的核心成分及作用靶点，并将两者进行分子对接；最后，通过川芎处理人肺癌细胞PC9，运用Western blot法检测相关蛋白表达对核心靶点进行初步验证。结果 本研究共筛选出（Z）-藁本内酯、丁苯酞、油酸、杨梅酮等48个有效成分；INS、BDNF、FOS、VEGFA、PTGS2、ESR1、MAPK14、PTGS1等49个靶点蛋白；核受体活性、配体激活、转录因子活性等57个生物学功能；Prolactin signaling pathway、Breastcancer、Etrogen signaling pathway等40条信号通路。分子对接结果显示，杨梅酮、丁苯酞、4-羟基-3丁基苯酞、（Z）藁本内酯、洋川芎内酯-E等成分与BDNF、FOS、PTGS2、MAPK14等7个核心靶点有较强亲和能力。Western blot结果显示，0.1 mol/L和1 mol/L川芎处理肺癌细胞PC9后PI3K的磷酸化水平分别为（86.51±13.09）%、（71.58±5.56）%，AKT的磷酸化水平分别为（87.49±13.09）%、（71.47±13.02）%，VEGF的水平分别为（84.39± 8.95）%、（80.65±10.07）%，且差异均具有统计学意义（P<0.01）。结论 川芎通过多成分、多靶点、多信号通路和多生物学功能发挥抗肺癌脑转移的作用。