miR-578调控长链脂酰辅酶A合成酶4表达对胃癌细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨miR-578调控长链脂酰辅酶A合成酶4（ACSL4）对胃癌细胞增殖及侵袭的影响。方法 选取人胃癌细胞MKN-45、SNU-1、MKN-7、KTAO3、N87及人正常胃黏膜细胞GES-1为研究对象,将MKN-45细胞分为对照组、miR-578 NC组、miR-578 mimic组、miR-578 mimic+pc-ACSL4组,测定各组MKN-45细胞活力及凋亡、侵袭、迁移能力,测定细胞中miR-578、ACSL4、凋亡相关蛋白（Bax、Caspase-3、Bcl-2）、侵袭相关蛋白（MMP-9、MMP-2）的表达,验证miR-578与ACSL4的靶向关系。结果 miR-578在人胃癌细胞中低表达;与对照组相比,miR-578 mimic组MKN-45细胞活力、侵袭、迁移能力、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）,凋亡能力、Caspase-3、Bax蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）;与miR-578 mimic组相比,miR-578 mimic+pc-ACSL4组MKN-45细胞活力、侵袭、迁移能力、MMP-2、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平均显著升高（P<0.05）,凋亡能力、Caspase-3、Bax蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）;荧光素酶实验结果显示,miR-578与ACSL4存在靶向调节关系。结论 miR-578可抑制人胃癌细胞MKN-45的增殖及迁移能力,可能是通过抑制ACSL4表达实现的。     

高果糖饮食对大鼠胰岛功能和胰岛葡萄糖调节蛋白78的影响

目的：高果糖饮食所致的胰岛素抵抗大鼠早期胰岛功能和胰岛葡萄糖调节蛋白78( glucose related pro-tein78,GRP78)的变化。方法雄性Wistar大鼠36只随机分为对照组和高果糖组,每组18只,分别给予正常饲料和高果糖饲料喂养8周,测定相关指标,并应用口服葡萄糖耐量试验( OGTT)测定血糖和血胰岛素计算稳态模型胰岛素抵抗指数( HOMA-IR)、稳态模型胰岛素分泌指数( HOMA-β)和口服葡萄糖后30 min胰岛素增量和血糖增量比值(△I30/△G30)评价胰岛功能。分离和纯化大鼠胰岛测定GRP78蛋白水平。结果与对照组相比,高果糖组空腹胰岛素、胰岛素原、血甘油三酯以及HOMA-IR均明显升高(P均<0.01),反映早时相胰岛素分泌功能的△I30/△G30明显降低(P<0．01),但反映基础胰岛素分泌功能的HOMA-β无明显差异(P>0．01)。与对照组相比,高果糖组胰岛GRP78蛋白表达明显增加( P<0．01)。结论高果糖喂养8周导致 Wistar大鼠出现早期胰岛功能的下降和胰岛GRP78蛋白表达增加。其胰岛功能下降可能和内质网应激有关。     

短链脂酰辅酶A脱氢酶与心肌肥大关系的初步探索

目的研究心脏能量代谢脂肪酸β氧化过程中关键脱氢酶之一的短链脂酰辅酶A脱氢酶(short-chain acly-coen-zyme A dehydrogenase,SCAD)与心肌肥大之间的关系,探索治疗心血管疾病的新靶点。方法利用自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rats,SHR)和异丙肾上腺素皮下注射两种心肌肥大动物模型,以及苯肾上腺素(PE)刺激的心肌细胞肥大模型,检测SCAD在蛋白水平和mRNA水平上表达量的改变;并采用siRNA对SCAD进行干扰,观察对肥大分子指标的影响。结果以上动物模型和细胞模型中SCAD的蛋白表达水平都有明显的下降,mRNA水平表达量也有一定程度的下降。针对SCAD的siRNA干扰后可导致心肌细胞SCAD的表达明显下降,而肥大标记因子ANF、BNP的表达明显上调,进一步明确了SCAD与心肌细胞肥大的关系。结论心肌肥大时SCAD的蛋白水平和mRNA水平均明显下降,干扰SCAD后心肌细胞肥大指标上升,说明SCAD的下降可能参与心肌肥大的病理过程,上调SCAD有可能成为干预心肌肥大的重要环节之一。     

罗格列酮对高果糖大鼠胰岛素抵抗的影响

目的 :研究罗格列酮对高果糖大鼠胰岛素抵抗的影响。方法 :选择雄性SD大鼠以高果糖饲喂4周 ,用罗格列酮 (3 0mg/kg·d,n=11)治疗4周 (治疗组 ) ,测定收缩压 (SBP)、空腹血糖 (FBG)、空腹血胰岛素 (FINS)、瘦素 (LP) ,用稳态模型 (HOMA)评估胰岛素抵抗 (IR) ,并与模型组和对照组比较。结果 :模型组大鼠SBP、LP、FINS、IR明显高于对照组 (P<0.01) ;治疗组大鼠LP、FINS、IR明显低于模型组 (P<0.01) ,与对照组相比差别无统计学意义。结论 :罗格列酮能降低胰岛素和瘦素水平 ,改善高果糖饲养大鼠的胰岛素抵抗 ,降低血压     

4-苯基丁酸对高果糖喂养大鼠肝脏脂质沉积及氧化应激的影响

目的：观察内质网应激(ERS)抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)对高果糖饮食喂养大鼠肝脏氧化应激的影响,以探讨ERS在高果糖喂养诱导脂肪肝中的介导作用及其与氧化应激的关系。方法雄性Wistar大鼠分为对照组、高果糖组和4-PBA组[自高果糖喂养4周后给予4-PBA 0.35 g/(kg·d)],8周后处死大鼠并测定肝脏甘油三酯(TG)含量。 PCR法检测ERS标志物葡萄糖调节蛋白78(GRP78)的基因表达。测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及细胞中丙二醛(MDA)的含量。 Western blot法检测肝C/EBP同源蛋白( CHOP)。结果与对照组相比,高果糖组的肝脏TG含量、GRP78基因表达、CHOP蛋白表达显著增加(P<0．01),与高果糖组比较,4-PBA上述指标显著降低(P<0．01)。与对照组相比,高果糖组大鼠的SOD、GSH-Px、CAT活性下降,MDA含量升高(P均<0.01),而4-PBA组的SOD、GSH-Px、CAT活性高于高果糖组,MDA含量低于高果糖组(P均<0.01)。结论长期高果糖喂养可诱导肝脏ERS和氧化应激,ERS抑制剂4-PBA可改善高果糖饮食诱导的肝脏氧化应激。     

胰岛素治疗对糖尿病大鼠骨骼肌内脂肪含量和CPTI-β基因表达的影响

目的：观察胰岛素治疗对糖尿病（DM）大鼠骨骼肌内甘油三酯（TGm）含量和肉碱-软酯酰转移酶I—β（CPTI-β）基因表达的影响。方法：DM大鼠随机分为DM高脂饮食组（DH，n=10）和DM高脂饮食胰岛素治疗组（DHI，n=10），正常Wistar大鼠作为正常饮食对照组（NC，n=10）。10周后检测空腹血浆葡萄糖（FPG）、胰岛素（FPI）、游离脂肪酸（FFAs）、甘油三酯（TG）和TGm，并根据FPG和FPI计算HOMA2-IR。RT—PCR法检测骨骼肌CPTI—β基因表达水平。结果：DH组的HOMA2-IR、TG、FFAs及TGm均较NC组明显增加（P〈0．01），Cirri—β表达减少（P〈0．01）。与DH组相比，DHI组胰岛素抵抗减轻（P〈0．05），FFAs明显降低（P〈0．01），但TG未降低（P〉0．05），且TGm含量进一步增加（P〈0．01），但CP—TI—β表达水平明显增加（P〈0．01）。结论：DM大鼠TCm含量增加并伴有CPTI—β表达降低，胰岛素虽然能增加TGm，但可以增加CPTI—β表达，从而可能改善骨骼肌中的脂肪代谢。     

极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症16例临床及基因型分析

[摘要]目的：探讨极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症(VLCADD)的临床表现、实验室检查、诊治转归以及临床类型与基因型之间的关系。方法：选取2013年6月至2019年6月在我院通过新生儿筛查与临床确诊的VLCADD患儿共16例,回顾性分析患儿临床表现、实验室检查和基因型。结果：16例患儿中男5例,女11例,年龄7个月~10岁。临床类型：心肌型3例（18.75%）,肝型5例（31.25%）,肌型7例（43.75%）,1例失访。心肌型患儿3例均死亡,肝型患儿2例死亡,肌型目前无死亡病例。16例患儿共检出28种不同的基因型,12种为未报道新突变。28种基因型中点突变24种,小片段缺失3种,单碱基插入1种。结论：VLCADD重型患儿起病早而危重,即使新生儿筛查早期诊断也难以扭转结局。基因型中至少带一个无效等位基因或引起框移的突变提示临床类型可能偏重。     

慢性应激对大鼠脑内乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的观察慢性应激对大鼠脑内乙酰胆碱酯酶(AchE)活性的影响,以期探明慢性应激对乙酰胆碱代谢的影响.方法采用组织化学方法研究了大鼠在应激6天和15天内AchE的活性.结果大鼠脑内的尾状核(ca)、内侧隔核(ms)和小脑内AchE活性随应激时间延长而升高,而海马(hi)、缰核(h)、中央灰质(cg)和下丘脑(ic)内AchE活性随应激时间的延长而降低.结论慢性应激对大鼠脑内乙酰胆碱代谢的影响,因部位不同而有所差异.     

瘦素对L-02肝细胞甘油三酯沉积及乙酰辅酶A羧化酶表达的影响

目的观察瘦素对人L-02脂肪变肝细胞甘油三酯合成的影响,探讨瘦素在非酒精性脂肪性肝病发生、发展中的作用。方法人肝L-02细胞在50%胎牛血清1640培养基中造模24 h。设立正常组、模型组、处理组,处理组分为3个亚组,分别应用瘦素10-7 mol/L、10-6 mol/L、10-5 mol/L处理24 h。均行油红"O"染色,观察脂肪化情况,RT-PCR测CA羧化酶mRNA表达。结果油红"O"染色显示,50%胎牛血清的1640培养基24 h能成功制造肝细胞脂肪变性模型;加入瘦素处理后,脂肪化程度减轻,且与瘦素呈剂量依赖性关系;RT-PCR显示,肝细胞脂肪变性后,乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达增强,加入瘦素处理后,乙酰辅酶A羧化酶mRNA表达明显减弱,与瘦素呈剂量依赖性关系。结论肝细胞脂肪变性时,瘦素能使肝细胞脂肪化程度减轻,能减少肝细胞甘油三酯的合成,对脂肪肝防治有一定的作用。     

吡格列酮对高脂喂养大鼠骨骼肌组织脂质异位沉积的影响

目的:观察吡格列酮(Pio)对高脂喂养大鼠骨骼肌组织脂质异位沉积的影响。方法:30只Wistar大鼠平均分为对照组、胰岛素抵抗组和吡格列酮干预组,对照组给予基础饲料,其余2组均给予高脂饲料喂养,其中吡格列酮干预组同时给予吡格列酮20 mg·kg^-1·d^-1灌胃,各组均喂养16周后检测各组大鼠血游离脂肪酸(FFA)水平及骨骼肌组织中三酰甘油(TG)含量,同时应用蛋白免疫印迹法检测骨骼肌组织一磷酸腺苷活化蛋白激酶α(AMPKα)磷酸化水平。结果:与对照组比较,胰岛素抵抗组大鼠胰岛素敏感性显著降低,血FFA水平及骨骼肌组织TG含量增高,骨骼肌组织中AMPKα磷酸化水平降至对照组水平的52.9%;与胰岛素抵抗组比较,吡格列酮干预组大鼠胰岛素敏感性明显提高,血FFA水平及骨骼肌组织TG含量显著下降,骨骼肌组织中AMPKα磷酸化水平显著提高至对照组的81.3%。但是与对照组比较,吡格列酮干预组大鼠血FFA水平及骨骼肌组织TG含量仍然较高,而且胰岛素敏感性及骨骼肌组织中AMPKα磷酸化水平仍然显著降低。结论:高脂饮食诱导胰岛素抵抗,吡格列酮干预可以通过降低血FFA水平及减轻骨骼肌组织脂质异位沉积改善其胰岛素抵抗。     

蛇床子素对青年大鼠骨代谢的影响研究

目的 探讨蛇床子素对青年大鼠骨代谢的影响.方法 30只雌性wistar大鼠按体重随机分为A、B、C组,A组为正常对照组给予等体积蒸馏水灌胃,B组给予雌二醇灌胃,C组给予蛇床子素灌胃.3组分别在灌胃后4、8、12周分别测定全身骨密度,并在12周后检测左侧股骨和腰椎骨密度及右侧股骨和第4腰椎生物力学性能;检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRAP-5b)和骨钙素(0C)含量,分析右侧胫骨骨形态计量学.结果 B、C组灌胃12周后全身骨密度及离体骨密度均高于A组,但C组低于B组(P＜0.01).B、C组生物力学性能指标均高于A组,C组股骨弹性模量和腰椎最大载荷低于B组(P＜0.05).B、C组TRAP-5b水平均低于A组,OC水平高于A组(P＜0.01);C组TRAP-5b水平高于B组,OC水平低于B组(P＜0.01).B、C组胫骨骨组织中骨小梁数量密集,骨小梁分离度低于A组,B组骨小梁数量高于C组,骨小梁分离度低于C组.结论 蛇床子素能够提高青年大鼠骨密度、生物力学性能及骨组织微结构,增加青年大鼠骨质量,但其作用效果略低于雌激素.     

益气化浊胶囊对KKAy小鼠骨骼肌组织中葡萄糖转运蛋白4表达的影响

目的通过研究益气化浊胶囊对KKAy糖尿病小鼠骨骼肌组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)蛋白表达的影响,探讨其改善胰岛素抵抗的作用机制。方法选用自发型2型糖尿病KKAy小鼠作为动物模型,喂以高脂饲料。以益气化浊胶囊高剂量(2g·kg-1·d-1)、低剂量(1g·kg-1·d-1)灌胃动物,设吡格列酮(2.5mg·kg-1·d-1)为阳性对照组,空白对照组选取与KKAy小鼠同源的C57BL/6J小鼠,喂以普通饲料。给药10周后处死小鼠,取骨骼肌组织,用蛋白印迹法检测GLUT-4蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,模型组中骨骼肌GLUT-4蛋白表达水平显著降低;与模型对照组相比,益气化浊胶囊高、低剂量组、阳性对照组GLUT-4蛋白表达水平均有不同程度升高。结论益气化浊胶囊能够改善KKAy小鼠胰岛素抵抗情况,其作用机制之一可能与其上调骨骼肌中GLUT-4蛋白表达水平,加强外周组织对葡萄糖的转运有关。     

替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠的治疗作用

目的：观察替米沙坦对胰岛素抵抗大鼠的治疗作用。方法-SD大鼠，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。模型对照组、低剂量组、高剂量组和卡托普利组动物均给予高脂肪饲料，正常对照组给普通饲料。4周后，检测各组血脂、空腹血糖（FBG）、空腹血清胰岛素（FINS），计算胰岛素敏感性指数（ISI），评估胰岛素抵抗。正常对照组仍继续给普通饲料，其他各组继续高脂肪饲料同时，低剂量给药组灌胃替米沙坦10mg&#183;kg^-1&#183;d^-1&#215;28d，高剂量给药组灌胃替米沙坦50mg&#183;kg^-1&#183;d^-1&#215;28d，卡托普利组灌胃卡托普利70mg&#183;kg^-1&#183;d^-1&#215;28d；正常对照组和模型对照组灌胃等体积0．9％氯化钠溶液。8周后检测血脂、FBG和FINS的变化，计算ISI。结果：造模阶段：造模各组FINS升高（P〈0．01），ISI下降（P〈0．01），但FBG无明显变化；用药阶段：替米沙坦可降低FINS，升高ISI，降低甘油三酯，均有显著差别。结论：替米沙坦对胰岛素抵抗有一定的治疗作用。     

高果糖喂养致小鼠脂肪肝与肝脏氧化应激的时程变化

目的：观察高果糖饮食诱导的小鼠脂肪肝和肝脏氧化应激的发生时程变化,并探讨高果糖饮食致小鼠脂肪肝与氧化应激的关系。方法60只雄性C57BL/J6小鼠随机分为对照组、高果糖组,分别在喂养3 d、8周后测定小鼠空腹血糖( FBG)、空腹血清胰岛素( FINS)及肝脏甘油三酯( TG)含量,并测定各组小鼠肝脏氧化应激相关指标即丙二醛( MDA)、超氧化物歧化酶( SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-Px)及过氧化氢酶( CAT)水平的变化。结果喂养3 d后,与对照组相比,高果糖组小鼠的FBG、FINS无明显变化( P>0．05),而肝脏TG显著增加( P<0．01);喂养8周后,与对照组相比,高果糖组FBG、FINS、TG均显著增加( P<0．01);喂养3 d后,与对照组相比,高果糖组的MDA、SOD、GSH-Px以及CAT水平均无明显变化(P>0．05);喂养8周后,高果糖组的肝内MDA明显增加(P<0．01),SOD、GSH-Px及CAT活性均显著降低(P<0．01)。结论短期和长期高果糖喂养均可引起肝内脂质沉积,但短期高果糖喂养引起的肝脏脂质沉积不伴有氧化应激;长期高果糖喂养引起的肝脏脂质沉积伴有氧化应激,提示氧化应激与高果糖饮食诱导的脂肪肝发生发展有关,但介导机制有待进一步研究。     

模拟高原缺氧环境对大鼠血液学相关指标的影响

目的：探讨大鼠在模拟海拔8000 m高原缺氧环境下不同时间点血液学相关指标的变化情况。方法将60只雄性大鼠随机分为正常组、缺氧12 h组、缺氧1 d组、缺氧3 d组、缺氧5 d组和缺氧10 d组,每组10只。采用大型低压氧舱模拟海拔8000 m高原环境,测定大鼠血气、血生化全项和血常规指标。结果与正常组相比,缺氧后不同时间血氧饱和度、血氧分压、二氧化碳分压、pH、氧合血红蛋白降低,K+、Na+浓度、乳酸、总胆红素、丙氨酸转氨酶、白蛋白、总蛋白、尿酸、肌酐、尿素、白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、红细胞分布宽度、红细胞、红细胞平均血红蛋白量、总血红蛋白升高(P<0．05,P<0．01)。结论模拟急性高原缺氧不同时间大鼠的各项血液学指标均发生明显改变,并严重影响了大鼠正常的生理代谢,进而使机体的结构与功能发生改变。     

急性减压缺氧对大鼠肺组织损伤的研究

目的：观察氧化应激相关指标在模拟急进高原缺氧大鼠肺组织的变化情况。方法成年健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、缺氧1、3、5 d组,每组10只。观察缺氧不同时间大鼠肺组织病理学的改变情况,检测肺组织相关生化指标水平。结果缺氧各组大鼠肺组织均有明显损伤,且以缺氧3d组大鼠损伤尤为严重。与正常对照组比较,缺氧各组大鼠肺组织总抗氧化能力( total antioxidant capacity, TAOC)、还原型谷胱甘肽( reduced glutathione, GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase, GSH-PX)、总一氧化氮合酶( total nitric oxide synthase, TNOS)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)在缺氧3 d组显著降低(P<0．05,P<0．01),丙二醛(maleic dialde-hyde, MDA)、乳酸( lactate, LD)含量显著升高( P<0．01),且随缺氧时间的延长逐渐增加;总超氧化物歧化酶( total superoxide dismutase, TSOD)、Na+K+-ATP酶活力显著降低(P<0．05,P<0．01),一氧化氮(nitric oxide, NO)含量在缺氧1、3 d组明显降低(P<0．01)。结论急进高原缺氧大鼠肺损伤机制与氧化应激反应有关,机体抗氧化能力降低、自由基增加是导致肺组织损伤的重要因素,且损伤程度与缺氧暴露时间有关。     

模拟海拔8000m高原缺氧环境对大鼠脑组织线粒体自噬的影响

目的：研究大型低压氧舱模拟海拔8000 m 高原缺氧环境对大鼠线粒体自噬的影响。方法取30只Wistar 大鼠,随机分为正常、缺氧6 h、12 h、24 h 和48 h 组,每组6只,在大型低压氧舱中模拟海拔8000 m 高原缺氧环境,采集实验大鼠的脑组织进行电镜观察并对线粒体自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）、Beclin1以及凋亡相关蛋白细胞色素 C（CytC）、Caspase3、Bcl-2相关 X 蛋白（Bax）进行测定。结果电镜结果显示,不同时间缺氧组与正常组相比较,大鼠脑组织空泡增多,细胞间隙增大,细胞膜部分破碎,细胞受损,并且不同缺氧时间自噬发生程度较正常组均增多,缺氧24 h 组自噬程度最强,自噬体数量最多。各缺氧组凋亡相关蛋白 CytC、Caspase3和 Bax 表达水平随着缺氧时间的延长均上调,缺氧24 h 和48 h 组显著高于正常组（ P ﹤0.01）。自噬相关蛋白 LC3和 Beclin1表达随着缺氧时间增加呈现从升高到下降的趋势,其中 LC3在缺氧24 h 组表达程度最高（P ﹤0.05）,Beclin1蛋白在缺氧6 h 组表达升高,缺氧12 h 组表达最高（P ﹤0.01）。结论模拟海拔8000 m 缺氧环境会对大鼠造成损伤,促进凋亡相关蛋白的表达,同时促进了大鼠脑组织线粒体自噬的发生。     

胎盘多肽注射液对大鼠放射性肠炎防护作用的研究

目的：探讨胎盘多肽注射液对大鼠放射性肠炎的防护作用及机制。方法选择Wistar大鼠36只,随机分为4组,每组9只,A组为空白对照组,B组为生理盐水组、C组为地塞米松组(1.425 mg/kg)、D组为胎盘多肽组(0.08 ml/kg)。首先对各组大鼠进行药物预防灌胃,每日1次,每次灌6 ml。灌胃7 d后B、C、D组行下腹部一次性X-射线照射(剂量20 Gy),后继续灌胃7 d。应用血清超氧化物歧化酶( superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( glutathione peroxidase, GSH-Px)和丙二醛( malondialdehyde, MDA)评估氧化应激水平,应用血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1, ICAM-1)、E选择素(E-selectin)和基质金属蛋白酶-9(matrix metallo protein-9, MMP-9)水平评估血管内皮细胞功能,并对各组大鼠进行整体状况和肠道评估。结果与A组相比,照射后B、C和D组大鼠均出现体重下降,且B和C组较D组下降更明显(P<0．05)。 B、C和D组大鼠照射后出现不同程度的肠道症状和肠道病理学改变,且B和C组大鼠改变较D组更明显。与A组相比,照射后B和C组SOD和GSH-Px水平明显下降( P<0．05), MDA、ICAM-1、VCAM-1、E-seletin和MMP-9水平明显升高(P<0．05);D组大鼠SOD和GSH-Px水平高于B和C组,MDA、ICAM-1、VCAM-1、E-seletin和MMP-9水平低于B组和C组(P<0．05)。结论胎盘多肽注射液对放射性肠炎具有明确的防护作用,其可能是通过有效减少放射性肠炎过程中的氧化应激水平和改善血管功能产生作用。