氨甲酰胆碱和毛果芸香碱对血管内皮细胞M受体基因表达的调节作用

目的: 比较氨甲酰胆碱和毛果芸香碱对血管内皮细胞M受体 基因表达调节作用的异同点。方法: 氨甲酰胆碱和毛果芸香碱分别孵育培养的牛主 动脉内皮细胞10 h后,提取细胞总RNA,R T-PCR方 法测定M受体5个亚型mRNA的表达。结果: M₁ ~M₅受体mRNA在牛主动脉内皮细胞上均有表达,氨甲酰胆碱和毛果芸香碱孵育后 表达量均增加,但二者之间无差异。结论: 氨甲酰胆域和毛果芸香碱对M受体5个亚型的基因表达均发生了相同的影响,两者对M受体可能的作用尚不能解释其对血管张力的影响。     

神经元N受体α4β2亚型在激动剂作用下功能失敏后再激活及宾赛克嗪的拮抗作用

目的: 研究神经元N受体α4β2亚型在激动剂持续作用下,功能失敏后再激活,以及宾赛克嗪的拮抗作用。方法: 在转染后稳定表达神经元N受体α4β2亚型的SH-EP1细胞株上,以烟碱为工具药,通过喷射给药,采用膜片钳全细胞记录技术进行研究。结果: 快速给予1mmol/L浓度的烟碱,可诱发一内向电流,该电流快速激活达到峰值后,在激动剂持续作用下迅速失敏至基线附近。当激动剂去除后可再次记录到一内向电流,该电流可被新型胆碱受体拮抗剂宾赛克嗪所阻断。结论: SH-EP1细胞株转染表达的神经元N受体α4β2亚型在高浓度激动剂持续作用下发生功能失敏,当激动剂去除后可再度激活,此再激活过程可被新型胆碱受体拮抗剂宾赛克嗪所拮抗。     

胆碱对小鼠炎性疼痛影响的实验研究

目的:研究胆碱对炎性疼痛的影响。方法:福尔马林实验和小鼠热板实验, 观察单独给予胆碱及胆碱与阿司匹林或吗啡联合用药时, 对小鼠在福尔马林模型中的舔足时间和热板实验中的疼痛潜伏期的影响。结果:胆碱(4、8、16、32、64 mg°kg^-1, i.v.)可显著抑制福尔马林所致的Ⅱ相痛反应;尾静脉给予胆碱2 mg°kg^-1 或阿司匹林9.4 mg°kg^-1, 对福尔马林模型的Ⅰ 相和Ⅱ相痛反应均无显著的抑制作用, 二者联合应用可显著抑制Ⅱ相反应;联合给予吗啡0.165 mg°kg^-1 和胆碱2 mg°kg^-1对福尔马林模型的Ⅱ 相反应的抑制作用比单独应用吗啡0.165mg°kg^-1好。结论:胆碱对炎症性疼痛镇痛效果显著, 胆碱和阿司匹林、吗啡有协同镇痛作用。     

侧脑室注射东莨菪碱对吗啡依赖大鼠戒断反应的抑制作用

目的 观察非选择性毒蕈碱(M)受体拮抗剂东莨菪碱、选择性M1 受体拮抗剂哌拉唑嗪以及选择性M2受体拮抗剂美索四氨对吗啡戒断反应的影响。方法 采用吗啡依赖大鼠模型侧脑室注射上述药物, 并用腹腔注射纳洛酮诱发戒断反应, 记录60 min 内戒断症状。结果 侧脑室注射东莨菪碱(25, 50 μg)、哌拉唑嗪(20 μg)和美索四氨(25 μg)可明显抑制由纳洛酮诱发戒断反应, 东莨菪碱减轻吗啡戒断症状呈明显量效关系。结论 侧脑室注射东莨菪碱能减轻吗啡戒断反应, 提示中枢胆碱能神经毒蕈碱(M)受体在吗啡依赖和耐受过程中起重要作用。     

川芎嗪注射液对离体豚鼠气管平滑肌作用机制探讨

目的 研究川芎嗪对离体豚鼠气管平滑肌的作用及机制。 方法 取豚鼠气管制成气管片, 用体外实验方法分别记录川芎嗪对豚鼠气管平滑肌的作用以及在钙通道和不同受体阻断剂孵育的条件下对豚鼠气管平滑肌的作用的变化。 结果 川芎嗪对离体豚鼠气管平滑肌有明显的舒张作用(P <0.01), 呈剂量依赖性(10_-5.5 ~ 10_-3 mol·L_-1), 其作用可以被普萘洛尔(心得安) 所拮抗;其与硝苯地平有协同舒张气管平滑肌的作用;M 受体阻滞剂阿托品对川芎嗪的作用无明显影响。 结论 川芎嗪对离体豚鼠气管平滑肌有明显的舒张作用, 其机制很可能是通过作用于气管平滑肌上的β₂ 受体, 抑制细胞外Ca₂₊的内流而导致气管平滑肌的舒张。     

蟛蜞菊内酯对脂多糖诱导RAW264.7细胞环氧化酶2、NO及TNF-α的影响

目的: 研究蟛蜞菊内酯对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞环氧化酶2(COX-2)、NO及TNF-α的作用。方法: ELISA方法检测 0.2、2、20 μmol/L 不同浓度蟛蜞菊内酯对终浓度为10 μg/mL LPS诱导RAW264.7细胞产生TNF-α、NO及前列腺素E₂(PGE₂)的影响,Western blot方法检测蟛蜞菊内酯对LPS诱导COX-2 酶蛋白表达的影响。结果: LPS能够明显诱导小鼠RAW264.7细胞产生的COX-2酶蛋白,蟛蜞菊内酯低中高3个浓度均能抑制LPS诱导产生的COX-2酶蛋白表达。PGE₂可以被 LPS诱导增加,与空白组比有显著差异。蟛蜞菊内酯低中高3个浓度均能抑制LPS诱导产生的PGE₂、NO和TNF-α,呈现剂量依赖性。结论: 蟛蜞菊内酯抗炎的作用机制可能为抑制COX-2的蛋白表达,进而抑制PGE₂的生成,也可能与抑制NO和TNF-α生成有关。     

中华眼镜蛇毒活性组分体外抑制三维血管生成的实验研究

目的: 研究中华眼镜蛇毒活性组分的抗血管生成作用。方法: 采用拟血管生成三维培养法, 观察活性组分对体外血管生成的抑制效应。结果: 活性组分可抑制内皮细胞在培养基质中生成血管网状三维结构的反应, 0. 6 、1. 2 、2. 4 μg·ml^-1的不同浓度组分抑制程度不同。在0. 6 μg·ml^-1 浓度组, 培养基质Matrigel 中的内皮细胞团只形成局部的、不完整的空间网状结构;在1. 2 μg·ml^-1 浓度组, 悬浮于凝胶中的细胞团所形成的管芽不能相互连接而形成空间网状结构;在2. 4 μg·ml^-1 浓度组, 细胞散在悬浮于胶层中大部分不能粘聚, 且随培养时间的延长无明显的结构变化。结论: 中华眼镜蛇毒活性组分具有体外抑制血管生成的生物活性。     

金叶女贞果实花青素的镇痛作用初探

目的: 研究金叶女贞果实花青素的镇痛作用及其可能机制。方法: 实验动物分为5组:生理盐水对照组,阿司匹林对照组,花青素高、中、低剂量组。通过小鼠热板法和醋酸扭体法,观察不同浓度花青素的镇痛作用;同时测定小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、NO和前列腺素E₂(PGE₂)水平,初步分析花青素可能的镇痛机制。结果: 中、高浓度的花青素能提高小鼠痛阈,减少扭体次数;花青素处理组小鼠血清SOD活性增高,NO和PGE₂含量降低。结论: 金叶女贞花青素具有镇痛作用,其机制可能与提高小鼠抗氧化能力增强血清SOD活性,减少NO和炎性因子PGE₂的生成有关。     

盐酸埃他卡林对H2O2所致PC12细胞损伤的保护

目的: 研究 K_ATP 通道开放剂盐酸埃他卡林(iptakalim hydrochloride, Ipt) 对 H₂O₂ 所致 PC12 细胞损伤的保护作用及其作用机制。方法: 采用培养的PC12细胞, MTT 法测定细胞存活率, HPLC 法测定细胞培养液中谷氨酸(Glu) 的含量, 荧光法测定胞内钙离子([Ca²⁺]_i) 浓度。结果: Ipt 可浓度依赖性的拮抗H₂O₂ 介导的细胞毒性, 提高细胞生存率, 降低胞外Glu的释放以及胞内 Ca²⁺ 浓度。该保护作用可被200 μmol°L^-1 5-HD(线粒体K ATP 通道阻断剂) 部分拮抗。结论: Ipt 可拮抗 H₂O₂ 介导的细胞损伤作用, 该保护作用可能与线粒体ATP 敏感性钾通道相关。     

黄连素对HepG2细胞CYP3A4和P-gp的影响和作用机制研究

目的: 阐明黄连素即盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BBR)对人肝癌细胞HepG2中细胞色素P450 3A4(CYP3A4)、多药耐药基因(MDR1)在mRNA和蛋白水平表达的影响,初步探讨黄连素对CYP3A4和P-糖蛋白(P-gp)的影响及其作用机制。方法: 采用MTT法检测不同浓度的BBR(1~100 μg/mL)对HepG2细胞活力的影响;并在BBR对HepG2细胞毒性较小的浓度范围进行实验,实验分为空白对照组、不同浓度BBR组、诱导剂利福平(Rif)组以及不同浓度BBR和Rif共同给药组,与对数期HepG2细胞孵育48 h后,提取细胞RNA和总蛋白,分别采用荧光定量PCR法(QRT-PCR)、Western blot法检测HepG2细胞中CYP3A4、MDR1、孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)、视黄醛X受体(retinoid X receptor,RXR)在mRNA水平的表达和CYP3A4、P-gp在蛋白水平的表达。结果: BBR在1~40 μg/mL 浓度范围内对HepG2细胞毒性小,细胞活力大于80%,超过 40 μg/mL 时对细胞毒性大,细胞存活率低。Western blot结果表明,与空白对照组比较, 0.1、0.5 和 2 μg/mL BBR对HepG2细胞CYP3A4和P-gp蛋白的表达有诱导作用(P<0.05),但10、40 μg/mL BBR对HepG2细胞CYP3A4和P-gp蛋白的表达有显著性抑制作用(P<0.01)。QRT-PCR结果表明,与空白对照组比较,10、20和 40 μg/mL BBR均对HepG2细胞PXR、CYP3A4、MDR1 mRNA的表达有显著抑制作用(P<0.05);但 10 μg/mL BBR对RXR mRNA无显著性影响(P>0.05),20、40 μg/mL BBR对RXR mRNA有显著的抑制作用(P<0.05)。结论: 黄连素对CYP3A4和P-gp有双向作用,低剂量时诱导,高剂量时抑制,并且其作用很有可能通过PXR信号通路实现。     

血液灌流抢救超大剂量地高辛中毒

目的: 观察1例血液灌流抢救超大剂量( 50mg)地高辛中毒的效果。方法: 使用HA 330 ml 灌流器和YT-160 灌流器, 血管通路为股静脉单针双腔导管。入院后共进行了4 次血液灌流( HP) 治疗。结果: 第1 次HP 前后检测地高辛血药浓度均16 μg·L^-1。第2 次HP 血药浓度9. 22 μg·L^-1。第3 次HP 前血药浓度12. 4 μg·L^-1, HP 后为10. 45 μg·L^-1。第4 次HP 前3. 22 μg·L^-1, HP 后为2. 84 μg·L^-1。结论: 采用间隔一定的时间HP, 多次进行, 可阶梯式降低药物浓度。     

国产重组人粒细胞集落刺激因子在妇科恶性肿瘤化疗中的应用

目的: 探讨不同剂量国产重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF)在妇科恶性肿瘤化疗中的疗效,并与进口 rhG-CSF比较。方法: 98例卵巢癌、宫体癌和宫颈癌患者随机分成3组,分别按75 μg·d^-1和150 μg·d^-1剂量皮下注射国产rhG-CSF和进口75 μg·d^-1 rhG-CSF,直到白细胞或中性粒细胞绝对数升至正常水平以上。结果: 不同剂量国产或进口rhG-CSF均能使3组患者血WBC和ANC水平在用药d4后升至正常水平以上;在初次化疗时,用不同剂量（75 μg 和 150 μg）国产和进口（75 μg) rhG-CSF升WBC至正常水平的天数无显著差异（P>0.05),但重复化疗期间150μg国产rhG-CSF升白细胞的疗效显著优于75μg国产或进口 rhG-CSF;同等剂量国产AG-CSF与进口 rhG-CSF升WBC效果一致。结论: 75μg小剂量国产rhG-CSF在妇科恶性肿瘤初期化疗中升WBC的疗效肯定,重复化疗时较大剂量(150μg）rhG-CSF升WBC的效果优于小剂量rhG-CSF。同等剂量国产rhG-CSF与进口 rhG-CSF的疗效无明显差异。     

利鲁唑片在健康男性人体内生物等效性研究

目的: 建立利鲁唑片生物浓度的固相萃取后HPLC-UV 检测方法, 研究其在健康男性人体内药代动力学和相对生物利用度。方法: 20 名健康男性志愿者单剂量随机交叉口服150 mg 利鲁唑片剂和进口参比制剂后于不同时间点静脉取血, 血浆经固相萃取, 甲醇洗脱吹干后用少量甲醇溶解后, 采用高效液相色谱-紫外检测器, 应用内标法计算利鲁唑浓度。结果: 利鲁唑片与参比制剂的主要药动学参数C_max 分别为930 ±321 和798 ±306 μg·L^-1, t_max 分别为0. 8 ±0. 5 和1. 2 ±0. 7 h, AUC_{0 ～ t} 分别为3361 ±890和3301 ±886 μg·h^-1·L^-1,AUC_{0 ～ ∞}分别为3661 ±886和3614 ±885 μg·h^-1·L^-1, t_1/2 分别为8. 2 ±2. 8 和8. 1 ±2. 6 h 。AUC_{0 ～ t} 和C_max 的90 %置信区间为:96. 11 %～ 107. 77 %和101. 6 % ±135. 9 %。AUC_{0～ t} 相对生物利用度为102. 8 %±15. 5 %。结论: 国产利鲁唑片剂和进口片两种制剂生物等效。     

不同剂量右旋美托咪啶对七氟醚吸入麻醉诱导的影响

目的: 观察不同剂量右旋美托咪啶对七氟醚吸入麻醉诱导和气管插管过程中血流动力学和脑电双频指数(BIS)的影响。方法: 选择择期妇科腹腔镜手术全麻患者45例,随机分为3组,每组15例,A组为单纯吸入七氟醚麻醉诱导组,B组和C组为吸入七氟醚麻醉诱导前分别静脉泵注右旋美托咪啶 0.5 μg/kg 和 1.0 μg/kg 组,观察3组患者的血流动力学和BIS的变化,并记录患者入睡时间、BIS值达到60时间、可以实施气管插管时间、手术和麻醉时间、入睡前实施肺活量次数和整个过程发生的不良反应事件。结果: 与麻醉诱导前(T₀)相比,麻醉后插管前(T₁)血压、心率和BIS明显下降(P<0.05),围插管期(T₂)A组血压较诱导前插管前增高(P<0.05);与A组相比,围诱导期(T₁和T₂)B组和C组血压、心率和BIS值较低(P<0.05),围拔管期(T₃)B组和C组血压和心率较诱导前增加较低(P<0.05);与A组相比,B组和C组患者的意识消失时间、BIS值小于或等于60时间、气管插管时间较短(P<0.05),以C组缩短明显;B组和C组吸入过程中N次肺活量较A组少。结论: 右旋美托咪啶 0.5、1.0 μg/kg 均可产生明显镇静效应,缩短诱导时间;抑制七氟醚吸入诱导气管插管时的应激反应,以右旋美托咪啶 1.0 μg/kg 的作用更理想,但要注意防止围麻醉期出现的严重心动过缓和低血压。     

DDPH对多种介质所致豚鼠离体肠道平滑肌收缩的影响

目的 研究1-(2, 6-二甲基苯氧基)-2-(3, 4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对多种介质引起的豚鼠离体肠道平滑肌收缩的影响。方法 肠道平滑肌实验法。结果 不同剂量的DDPH 可非竞争性抑制磷酸组胺、氯化乙酰胆碱及Ca²⁺的作用, 使量效曲线非平行右移, 最大反应压低, 其pD₂'值分别为4.0、3.8、3.9。DDPH 还可抑制K⁺所致肠道平滑肌收缩, 但作用较维拉帕米弱, IC₅₀ 值分别为2.7μmol·L^-1 和0.7 μmol·L^-1。结论 DDPH通过非竞争性Ca²⁺拮抗作用使豚鼠回肠平滑肌松弛。     

单硝酸异山梨酯对尼索地平在大鼠体内药代动力学的影响

目的: 考察单硝酸异山梨酯对尼索地平在大鼠体内药代动力学的影响。方法: 12只健康雄性SD大鼠随机分成2组(分别为单独和联合给药组),用LC-MS/MS法测定血浆中尼索地平的浓度。结果: 大鼠单独给予尼索地平和联合给予单硝酸异山梨酯后,尼索地平主要药动学参数如下:C_max分别为(8.67±3.97) μg/L 和(9.21±5.02) μg/L,AUC_0t分别为(19.6±9.9) μg·h·L^-1和(25.7±13.7) μg·h·L^-1,t_1/2分别为(2.26±0.66) h 和(3.17±1.41) h,AUC_0∞分别为(23.7±9.7) μg·h·L^-1和(32.4±12.3) μg·h·L^-1。统计学分析显示,单独用药与联合用药组药动学参数无统计学差异(P＞0.05)。结论: 单硝酸异山梨酯不影响尼索地平在大鼠体内药动学过程,为临床安全有效地联用单硝酸异山梨酯和尼索地平提供了实验依据。     

布洛芬缓释胶囊在健康人体的相对生物利用度研究

目的: 研究两种国产布洛芬的相对生物利用度。方法: 采用双周期随机交叉试验设计。分别给予24名男性健康受试者试验制剂或参比制剂布洛芬 300 mg,采用HPLC法测定给药后不同时间的血药浓度。结果: 参比制剂与试验制剂单剂量给药主要药代动力学参数C_max、t_max、AUC_0-24和AUC_0-∞分别为:(13.5±5.9)和(12.7±5.4) μg/mL;(5.1±1.0)和(5.5±1.5) h;(100.2±45.4)和(98.5±44.8) μg·h·mL^-1;(105.7±47.3)和(103.8±47.0) μg·h·mL^-1。参比制剂与试验制剂多剂量给药主要药代动力学参数C_max、C_av、t_max、AUC_ss分别为:(14.1±5.3)和(14.9±6.4) μg/mL;(8.2±3.4)和(8.6±4.3) μg/mL;(4.8±1.0)和(4.6±0.9) h;(99.0±40.4)和(103.3±51.3) μg·h·mL^-1。结论: 经统计学分析,布洛芬参比制剂与试验制剂具有生物等效性。     

三种阿尔茨海默症治疗药物促体外培养小鼠皮层神经元活性的比较

目的:观察并比较3 种阿尔茨海默症治疗药物盐酸美金刚胺、美曲磷酯及白藜芦醇对体外培养小鼠皮层神经元活性的影响, 为寻找作用机理更优的先导化合物提供理论依据。方法:采用体外培养皮层神经元细胞的方法, 解剖分离15 d 胚胎小鼠皮层神经细胞, 接种于96 孔板, 48 h 后加药并培养72 h, 相差显微镜及免疫组织细胞化学方法进行形态学观察, 并以MTT 法观察3 种药物对小鼠皮层神经元活性的影响。结果:盐酸美金刚胺显著促进小鼠皮层神经元活性, 并呈现出一定的量效关系;美曲磷酯10 pmol·L^-1, 0.1, 1, 10 nmol·L^-1 剂量组对皮层神经元细胞活性没有影响, 而美曲磷酯0.1,1 μmol·L^-1剂量组显著抑制皮层神经元细胞活性;0.1 nmol·L^-1白藜芦醇显著促进皮层神经元细胞活性, 而白藜芦醇0.1, 1, 10 μmol·L^-1剂量组显著抑制皮层神经元细胞活性。结论:盐酸美金刚胺促小鼠皮层神经元活性较高, 故以其为先导化合物设计药效更高的阿尔茨海默症治疗药物的方案是可行的。