外周血硫氧还蛋白还原酶与血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 在 肺癌筛查中的临床意义

目的 探讨血清细胞角蛋白 １９ 片段抗原 ２１ １（ＣＹＦＲＡ２１ １）、癌胚抗原（ＣＥＡ）及血浆硫氧还蛋白还原酶（ＴｒｘＲ）在肺癌 筛查中的临床价值。方法 选取 ２０１８ 年 ４ 月至 ２０２０ 年 １１ 月南通市肿瘤医院就诊的 １６０ 例肺癌患者（肺癌组）作为研究对 象；同期选取体检健康者 １００ 例作为健康人对照组。采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测各组血浆 ＴｒｘＲ 活性水平，电化学发 光免疫试验（ＥＣＬＩＡ）检测血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 水平；采用 ＲＯＣ 曲线评估血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性水平对早 期肺癌的筛查价值。结果 与健康人对照组相比，肺癌组血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性水平均显著升高（ｔ 分别为 １５．１８０、１３．４５３ 和 １６．０３８，Ｐ均＜０．００１）。与Ⅰ 期＋Ⅱ期肺癌患者相比，Ⅲ期＋Ⅳ期患者血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性 水平均显著升高（ｔ分别为 ５．５３８、５．７４０ 和 ３．３４２，Ｐ均＜０．００１）。ＲＯＣ 曲线结果表明，ＣＹＦＲＡ２１ １筛查早期肺癌的 ＡＵＣＲＯＣ、敏感 性和准确性均低于 ＴｒｘＲ（Ｐ＜０．０５），ＣＥＡ 筛查早期肺癌的 ＡＵＣＲＯＣ、敏感性、准确性、特异性和阴性预测值亦低于 ＴｒｘＲ（Ｐ 均 ＜０．０５）。与治疗后相比，治疗前肺癌患者血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性水平明显升高（ｔ 分别为 １４．８９７、７．８２６ 和 ２９．９８９，Ｐ均＜０．００１）。结论 血清 ＣＹＦＲＡ２１ １、ＣＥＡ 及血浆 ＴｒｘＲ 活性水平对肺癌均具有一定的筛查价值，其中 ＴｒｘＲ 的筛查 效能更好。     

低密度脂蛋白、脂蛋白(a)与冠心病

近年来已有大量临床研究及５项著名的大规模冠心病（ＣＨＤ）一级或二级预防试验（４Ｓ，ＷＯＳ，ＣＡＲＥ，ＬＩＰＩＤ，ＡＦＣＡＰＳ等多中心协作计划）都明确指出强化降脂治疗降低血清总胆固醇（ＴＣ）与低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬＣ）可以预防ＣＨＤ临床事件（如心...     

维甲酸、砷剂及柔红霉素对NB4细胞组织因子表达的影响

目的　探讨全反式维甲酸（ Ａ Ｔ Ｒ Ａ） 、三氧化二砷（ Ａｓ２ Ｏ３） 及柔红霉素（ Ｄ Ｎ Ｒ） 对急性早幼粒细胞白血病（ Ａ Ｐ Ｌ） 细胞株 Ｎ Ｂ４ 细胞组织因子（ Ｔ Ｆ） 表达的影响。方法　用复钙时间检测 Ｎ Ｂ４ 细胞的促凝活性（ Ｐ Ｃ Ａ） ;用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法检测其 Ｔ Ｆ 抗原;用逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测 Ｔ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录水平。结果　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均呈时间依赖的方式下调 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ、 Ｔ Ｆ 抗原水平以及 Ｔ Ｆ ｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录;而 Ｄ Ｎ Ｒ 处理 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ及 Ｔ Ｆ 抗原在早期上调,至２４ ～４８ 小时达到最大值。对 Ｐ Ｃ Ｒ 产物测序,发现 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ 第５ 个外显子缺失的转录本。结论　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均可下调 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ的表达并降低其 Ｐ Ｃ Ａ,改善 Ａ Ｐ Ｌ患者的弥散性血管内凝血（ Ｄ Ｉ Ｃ） 出血症状; Ａｓ２ Ｏ３ 和 Ｄ Ｎ Ｒ 对 Ａ Ｐ Ｌ凝血障碍不同效应的作用机制至少部分与药物对 Ａ Ｐ Ｌ细胞 Ｔ Ｆ 表达和 Ｐ Ｃ Ａ 的不同调节作用有关。     

再生障碍性贫血患者细胞免疫功能与造血细胞因子的研究

目的：进一步探讨再生障碍性贫血（再障）的免疫发病机制，阐明细胞免疫、造血细胞因子在再障患者中发生变化的基础与临床意义。方法：用单抗试剂盒，采用改良ＡＰＡＡＰ法及酶联免疫试剂盒，采用ＥＬＩＳＡ法对３８例再障患者及２０名正常人外周血Ｔ细胞亚群，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达以及外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣ）培养上清诱生Ｇ－ＣＳＦ、ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平进行测定。结果：再障患者外周血ＣＤ４细胞减低、ＣＤ８细胞增高、ＣＤ４／ＣＤ８降低或倒置，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达率增高。再障患者ＰＢＭＮＣ培养上清中Ｇ－ＣＳＦ阳性率减低，ＩＬ－６、ＴＮＦα、ＩＦＮα及ＩＬ－８水平增高。相关分析发现Ｇ－ＣＳＦ与ＣＤ４细胞及ＣＤ４／ＣＤ８呈正相关，而与ＩＦＮα呈负相关；ＩＬ－６与白细胞数及ＣＤ４细胞呈负相关；ＴＮＦα与ＣＤ８细胞呈正相关而与ＣＤ４／ＣＤ８呈负相关；ＩＬ－８与ＣＤ８细胞及ＨＬＡ－ＤＲ呈正相关。结论：细胞免疫功能异常及细胞因子网络失调在再障发病中起一定的作用。     

系统性红斑狼疮中抗中性粒细胞胞浆抗体的检测

应用间接免疫荧光技术（ＩＩＦ），对系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者进行了抗中性粒细胞胞浆抗体（ＡＮＣＡ）的检测，并以３５例正常体检者为对照。结果表明在１３１例ＳＬＥ患者中，ＡＮＣＡ阳性为２２例，阳性率为１６．５％，其中Ｃ－ＡＮＣＡ阳性１６例占１２．２％，Ｐ－ＡＮＣＡ阳性６例占４．６％，对ＳＬＥ患者进行ＡＮＣＡ的检测有助于疾病的诊断。     

声学定量硝酸异山梨醇酯试验预测冠心病患者择期经皮冠脉腔内成形术后左心功能

目的　检验声学定量－ 硝酸异山梨醇酯试验（ ＡＱＩＳＤＮ） 能否在术前预测择期经皮冠脉腔内成形术（ＰＴＣＡ） 后心功能。方法　随机对择期ＰＴＣＡ ３０ 例患者在介入前应用声学定量技术（ ＡＱ） 测定经口吸入硝酸异山梨醇酯（ＩＳＤＮ）２ ．５ ｍ ｇ 之前及吸入后５ ｍｉｎ 的左心功能参数的改变。并与介入后ＡＱ 左心功能测值相对照。结果　介入前吸入ＩＳＤＮ 后５ ｍｉｎ 峰值射血率（ＰＥＲ） 的改变与介入后ＰＥＲ 的改变相关,相关系数ｒ ＝ ０ ．７２（Ｐ ＝ ０ ．００１） ;也与介入后峰值充盈率（ＰＦＲ） 的改变相关,相关系数ｒ ＝ ０ ．５６（ Ｐ ＝ ０ ．００１） 。回归分析介入后ＰＦＲ值,能由介入前ＡＱＩＳＤＮ 的ＰＥＲ、ＰＦＲ 值代入公式推算：ＰＦＲ ＝ ＰＦＲ１ － ０ ．０８ ＋ ０ ．９０ ×（ ＰＥＲ２ － ＰＥＲ１） 。其中ＰＦＲ 为介入后预测值,ＰＥＲ１ 、ＰＦＲ１ 为静息时测值,ＰＥＲ２ 为吸入ＩＳＤＮ 后５ ｍｉｎ 时的测值（ 单位：ＥＤＶ／Ｓ,Ｓｉｇ ＝０ ．００１４） 。把ＡＱＩＳＤＮ 吸入后５ ｍｉｎ 的ＰＥＲ 大于等于吸入前和小于吸入前作为预测介入后心功能改善和恶化的标准,预测结果与实测值对比,本标准对介入后ＥＦ、ＰＦＲ、ＰＥＲ 的     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式［ＨＣ非编码区（５′ＮＣＲ）与ＮＳ５联合］ＰＣＲ技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献血员及３７例输血后丙型肝患者的血清ＨＣＶＲＮＡ。结果１０例抗ＨＣＶ阳性献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物及套式ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物扩增时，其ＲＮＡ检出率分别为５／１０、６／１０、７／１０、８／１０和９／１０；而３７例输血后丙型肝炎患者中３５例ＲＮＡ阳性，检出率为９５％，其中１８例１ｂ型和１９例２ａ型样品的检出率分别为１００％和８９％。结论ＨＣＶＮＳ５区的ＲＮＡ检出率与引物的选择有关     

巨幼细胞贫血、骨髓增生异常综合征及白血病患者叶酸结合蛋白的研究

为研究叶酸结合蛋白特性，用放射受体结合技术及ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和同位素扫描结合的方法，分析了巨幼细胞贫血（ＭＡ）、骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）和白血病患者血清可溶性叶酸受体（ｓＦＲ）及骨髓单核细胞膜叶酸受体（ＦＲ）的分子量。发现白血病细胞膜上有两种叶酸结合蛋白：分子量为３．５万的ＦＲ以及分子量为４．５万的还原叶酸载体（ＲＦＣ）。ＭＤＳ组中５例ＲＡＥＢ、ＲＡＥＢ－ｔ患者骨髓单个核细胞膜上亦出现ＦＲ和ＲＦＣ；７例ＲＡＳ和ＲＡ以及ＭＡ患者骨髓单核细胞膜叶酸结合蛋白仅为ＦＲ。ＲＦＣ是一种幼稚型蛋白，在ＭＤＳ患者骨髓细胞膜上出现，可能是白血病前期表现。     

二维多普勒超声对缺血性心肌病左室重构变化的研究

目的对缺血性心肌病（ＩＣＭ）患者的左室重构（ＬＶＲ）病理生理变化进行分析研究。方法应用ＨＰ ７７０２０ＡＣ型彩色多普勒血流显像仪（探头频率３．５ＭＨｚ）分别对５６例ＩＣＭ患者和５０例正常对照组进行分析评价。结果显示ＩＣＭ组的各项指标与正常组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１～０．００１）。ＩＣＭ组的ＬＶＥＤｄ、ＥＤＶ、ＥＳＶ、ＥＳＳ、ＰＶＡ、ＬＡＴ、ＬＡＦ显著增大，ＥＦ、ＣＯ、ＬＶＳＣＩ、ＭＶＣＦ、ＰＶＥ、ＰＦＲ及ＰＶＡ／ＰＶＥ显著降低（Ｐ＜０．０１～０．００１）。结论认为ＩＣＭ病人ＬＶＲ的主要病因与心肌缺血引起的梗塞区膨展、左室扩张、容量负荷及室壁应力的增加有关，而ＥＳＶ、ＥＤＶ及ＥＦ可作为了解ＩＣＭ远期预后的最佳指标     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，建立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式「ＨＣＶ非编码区（５ＮＣＲ）与ＮＳ５联合」技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献赠及３７例输血后丙型肝炎患 血清ＨＣＸＶＲＮＡ。结果 １０例抗ＨＣＶ阳性一献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ     

L—精氨酸对实验性急性肾功能衰竭大鼠的治疗作用观察

目的：探讨Ｌ精氨酸（ＬＡｒｇ）对实验性急性肾功能衰竭（ＡＲＦ）大鼠的治疗作用。方法：ＳＤ大鼠随机分为３组，即蒸馏水组（Ｃ组）、顺铂组（ＣＰ组）和ＬＡｒｇ加顺铂组（Ａ组），静脉给药，观察一氧化氮（ＮＯ）合成底物ＬＡｒｇ对顺铂所致ＡＲＦ大鼠肾功能及肾组织形态学的影响。结果：①Ａ组用药后第４日、６日、８日和１０日的血肌酐（ＳＣｒ）及血尿素氮（ＢＵＮ）均显著低于同期ＣＰ组的ＳＣｒ和ＢＵＮ（Ｐ均＜０．０５）；②Ａ组肾组织形态学改变较ＣＰ组明显改善。结论：ＬＡｒｇ对实验性ＡＲＦ有明显保护作用，可能主要与其促使ＮＯ合成增加、改善肾血流动力学有关。     

全自动凝血分析仪检测 ２ 种诱导剂诱导的血小板聚集 试验参考区间的建立

摘要：目的 基于全自动凝血分析仪血小板聚集试验通道，建立表观健康人群血小板最大聚集率（ＭＰＡＲ）的参考区间。方法 募集表观健康人 １３４ 例，采用 Ｓｙｓｍｅｘ ＣＮ３０００ 和 Ｓｙｓｍｅｘ ＣＳ５１００ 全自动凝血分析仪进行不同终浓度二磷酸腺苷（ＡＤＰ）和花 生四烯酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集试验检测。根据美国临床和实验室标准协会（ＣＬＳＩ）ＥＰ２８ Ａ３ｃ 文件，按照非参数法计算 ＭＰＡＲ 的参考区间。结果 不同终浓度 ＡＤＰ 和 ＡＡ 诱导的 ＭＰＡＲ 重复性为 ２．０３％ ～ ４．９２％。不同终浓度 ＡＤＰ 和 ＡＡ 诱导的 ＭＰＡＲ 在不同性别和年龄组之间差异均无统计学意义（Ｐ 均＞０．０５）。２ 个检测系统各自 ＡＤＰ 终浓度 ２ 和 ５ μｍｏｌ ／ Ｌ 之间、ＣＳ 系列 ＡＡ 终浓度 ０．５ 和 １．０ ｍｍｏｌ ／ Ｌ 之间 ＭＰＡＲ 差异均有统计学意义（Ｐ 均＜０．０５）。除 ＡＡ 终浓度 １．０ ｍｍｏｌ ／ Ｌ（Ｚ ＝ －２．３１９，Ｐ ＝ ０．０２０），余不同终浓度诱导的 ＭＰＡＲ 在 ２ 个系统间差异均无统计学意义（Ｐ 均＞０．０５）。ＡＤＰ 终浓度 ２、５ 和 １０ μｍｏｌ ／ Ｌ 诱导的 ＭＰＡＲ 生物参考区间在 ＣＮ３０００ 分别为 ４５．４％ ～ ９５．７％、７２．０％ ～ ９４．３％和 ７６．３％ ～ ９５．１％，在 ＣＳ５１００ 分别为 ４５．３％ ～ ９３．７％、 ７３．１％ ～ ９９．１％和 ７５．９％ ～ ９７．６％；ＡＡ 终浓度 ０．５ 和 １．０ ｍｍｏｌ ／ Ｌ 诱导的 ＭＰＡＲ 参考区间在 ＣＮ３０００ 分别为 ７２．１％ ～ ９５．７％和 ８１．０％ ～ ９５．９％，在 ＣＳ５１００ 分别为 ７７．１％ ～ ９６．９％和 ８１．１％ ～ ９９．５％。结论 本研究初步建立了 ＣＮ３０００ 和 ＣＳ５１００ 不同终浓度 ＡＤＰ 和 ＡＡ 诱导的血小板聚集试验 ＭＰＡＲ 参考区间。     

运动、巯甲丙脯酸与巯甲丙脯酸运动肾显像检测原发性高血压的肾功能

目的：观察和分析运动（ＥＸ）、巯甲丙脯酸（ＣＡＰ）及巯甲丙脯酸运动（ＣＡＰ－ＥＸ）介入对轻中度原发性高血压（ＥＨ）患者肾功能的影响。方法：１０例正常志愿者和１５例轻中度原发性高血压患者,在１个月内完成基础双核素肾显像（ＢＳ－ＲＳ）、运动双核素肾显像（ＥＸ－ＲＳ）、巯甲丙脯酸双核素肾显像（ＣＡＰ－ＲＳ）及巯甲丙脯酸运动双核素肾显像（ＣＡＰ－ＥＸ－ＲＳ）４次检查。图像均按ＡＤＡＣ公司提供的计算机软件进行处理。结果：ＥＸ和ＣＡＰ－ＥＸ介入,ＧＦＲ,ＥＲＰＦ均明显降低（Ｐ＜００１）;而ＣＡＰ介入未见明显变化。ＥＨ组与对照组相应方法间ＧＦＲ,ＥＲＰＦ不存在显著差异（Ｐ＞００５）。１５例ＥＨ患者中,基础肾显像及巯甲丙脯酸肾显像结果均正常,而４０％（６／１５）的患者出现异常运动肾图,３０％（５／１５）出现异常巯甲丙脯酸运动肾图,二者同时异常的有５例,其中１例于ＣＡＰ－ＥＸ－ＲＳ介入时,异常更加明显,均表现为对称性的１３１Ｉ－ＯＩＨ和９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ排泄延迟,１３１Ｉ－ＯＩＨ肾图和９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ肾图曲线宽大,排泄段抬高。上述异常变化在１３１Ｉ－ＯＩＨ和９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ肾图曲线中,以９９ｍＴｃ－ＤＴＰＡ肾图     

血小板第4因子及四肽AcSDKP的造血保护作用研究

目的了解血小板第４因子（ＰＦ４）和四肽Ｎ乙酰丝天赖脯（ＡｃＳＤＫＰ）对５氟尿嘧啶（５ＦＵ）处理后小鼠体内造血的作用。方法实验鼠用ＰＦ４（４０μｇ／ｋｇ）或ＡｃＳＤＫＰ（４μｇ／ｋｇ）注射２次,间隔６小时,第２次注射后２０小时再注射５ＦＵ（１５０ｍｇ／ｋｇ）。第６,８和１３天时,检查高增殖潜能的集落形成细胞（ＨＰＰＣＦＣ）、红系爆式集落形成单位（ＢＦＵＥ）、粒巨噬系集落形成单位（ＣＦＵＧＭ）、巨核系集落形成单位（ＣＦＵＭＫ）及巨核细胞（ＭＫ）。结果ＰＦ４或ＡｃＳＤＫＰ可促使６～８天的ＨＰＰＣＦＣ以及８天的ＢＦＵＥ和ＣＦＵＧＭ明显增加;ＰＦ４还能促进８天的ＣＦＵＭＫ和ＭＫ增加,但ＡｃＳＤＫＰ则无此作用。结论ＰＦ４和ＡｃＳＤＫＰ虽然对巨核祖细胞的作用不同,但它们均能加速体内ＨＰＰＣＦＣ、ＣＦＵＧＭ和ＢＦＵＥ的恢复,这两种分子有可能具有保护造血细胞抵抗化疗药物杀伤的作用。     

205例儿童急性淋巴细胞白血病疗效分析

报告２０５例小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ），诱导缓解期采用强烈ＣＯＤＰ＋Ｌ－ＡＳＰ和ＣＯＡＰ＋Ｌ－ＡＳＰ方案，联合大剂量氨甲喋呤（ＨＤ－ＭＴＸ）及头颅放疗（１８Ｇｙ）进行庇护所预防。使５年无病生存率（ＥＦＳ）达到７４．４％，中枢神经系统白血病复发率降至１．５％，睾丸白血病复发率降至３．４％。治疗效果表明：早期强烈化疗及有效的庇护所预防是减少骨髓及髓外复发，提高ＥＦＳ的关键。     

载脂蛋白E基因多态性检测技术的对比性研究

目的建立并比较载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因多态性检测技术,为ＡｐｏＥ基因分型提供良好的方法。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）和ＰＣＲ单链构象多态性（ＳＳＣＰ）检测技术对１１０例患者及相同人数的正常人进行ＡｐｏＥ基因型检测和分析。结果应用ＲＦＬＰ、ＳＳＣＰ技术测得正常对照组：ε２／２（０,０．０２０）,ε３／３（０．７００,０．７６０）,ε４／４（０,０．０４０）,ε２／３（０．１００,０．０６０）,ε２／４（０,０．０２０）,ε３／４（０．２００,０．１００）,ε２（０．０５０,０．０６０）,ε３（０．８５０,０．８４０）,ε４（０．１００,０．１００）。经χ２检验,ＡｐｏＥ基因型频率和等位基因频率的差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。上两种检测技术与既往两种检测技术（ＩＥＦ,ＷｅｓｔｅｒｐＢｌｏｔｉｎｇ）的结果经χ２检验,其ＡｐｏＥ等位基因频率的差异也无显著意义（Ｐ＞０．０５）,均符合中国汉族人ＡｐｏＥ基因频率分布。结论ＰＣＲＲＦＬＰ方法是一种稳定可靠的ＡｐｏＥ基因多态性分析方法,多重ＰＣＲＳＳＣＰ技术更加简便有效,使ＡｐｏＥ基因多态性的研究更加完善。     

抗PML—RARα反义核酸对NB4细胞形态,PML—RARα mRNA及蛋白质？…

目的 探讨抗ＰＭＬ－ＲＡＲα反义核酸（ＦＵＡＳ）对ＮＢ４细胞的分化、ＰＭＬ－ＲＡＲα ｍＲＮＡ表达及ＰＭＬ／ＰＭＬ－ＲＡＲα蛋白细胞内定位的影响。方法 以ＮＢ４细胞为研究对象，细胞形态观察采用Ｗｒｉｇｈｔ染以法；ＰＭＬ－ＲＡＲαｍＲＮＡ表达采用ＲＴ－ＰＣＲ法；ＰＭＬ／ＰＭＬ－ＲＡＲα蛋白细胞内定位采用免疫荧光技术。结果 ＦＵＡＳ处理后第５天，细胞出现部分分化。处理后２４，７２，１２０小时，ＰＭＬ－     

应用 ＬＡＳＳＯ 交叉验证算法筛选临床实验室指标并构 建结直肠癌风险预测模型

摘要：目的 建立结直肠癌风险预测模型用于结直肠癌的辅助诊断。方法 依据纳入与排除标准，收集结直肠癌患者 ９９ 例和 健康人对照受试者 １ ４６４ 例的血常规、血清生化和血清肿瘤标志物的结果。将数据集分为训练集和验证集，７０％数据用于训 练构建模型，３０％数据用于验证模型。利用 ＬＡＳＳＯ 交叉验证算法筛选指标建立风险预测模型，绘制 ＲＯＣ 曲线评估诊断效能。 结果 比较健康人对照和结直肠癌患者手术前检查的血常规、血清生化和肿瘤标志物结果，统计分析发现中性粒细胞百分比 （ＮＥＵ％）、淋巴细胞百分比（ＬＹＭ％）、单核细胞百分比（ＭＯＮ％）、嗜碱性粒细胞百分比（ＢＡＳ％）、中性粒细胞计数（ＮＥＵ）、淋 巴细胞计数（ＬＹＭ）、嗜碱性粒细胞计数（ＢＡＳ）、平均红细胞血红蛋白浓度（ＭＣＨＣ）、平均血小板体积（ＭＰＶ）、血小板分布宽度 （ＰＤＷ）、大型血小板比率（Ｐ．ＬＣＲ）、尿素（Ｕｒｅａ）、肌酐（Ｃｒ）、尿酸（ＵＡ）、钾（Ｋ）、钠（Ｎａ）、钙（Ｃａ）、磷（Ｐ）、镁（Ｍｇ）、三酰甘油 （ＴＧ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ Ｃ）、总胆红素（Ｔ Ｂｉｌ）、直接胆红素（Ｄ Ｂｉｌ）、总蛋白（ＴＰ）、清蛋白（Ａｌｂ）、清球比（Ａ／ Ｇ）、 γ－谷氨酰转肽酶（ＧＧＴ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、淀粉酶（ＡＭＳ）、天冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ）、糖化清蛋白比例（ＧＡ％）、糖化清蛋 白（ＧＡ）、清蛋白 ２（Ａｌｂ２）、癌胚抗原（ＣＥＡ）、糖链抗原 １２５（ＣＡ１２５）、糖链抗原 ＣＡ１５ ３、糖链抗原 １９ ９（ＣＡ１９ ９）和甲胎蛋白 （ＡＦＰ）在结直肠癌和健康人对照组间的差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。相关性分析结果显示，ＷＢＣ、ＰＣＴ、ＢＡＳ、ＲＢＣ 和 ＭＣＨ 水 平之间，以及 Ｄ Ｂｉｌ、Ｋ 和 Ｍｇ 之间呈正相关。血清 Ｎａ 与 Ｐ、Ａｌｂ２、Ｕｒｅａ、Ｇｌｕ 呈负相关，同样血清 Ｃｌ 与 ＡＧ、ＢＡＳ 和 Ｍｇ 水平之间 也呈负相关。利用 ＬＡＳＳＯ 交叉验证算法筛选确定 ＬＹＭ、Ｐ．ＬＣＲ、ＨＤＬ、Ａｌｂ２、ＣＥＡ 和 ＡＦＰ ６ 个特征参数入选，回归系数分别为 ０．４２、－０．０２５、０．０７１、０．４、－０．１９ 和－０．０７１，将此模型命名为 Ｍ６。ＲＯＣ 曲线评估 Ｍ６ 模型诊断效能，结果显示训练集中诊断模型 的 ＡＵＣＲＯＣ 、敏感性和特异性分别为 ０．９２、８５．９２％和 ８６．２３％，诊断效能高于常规结直肠癌标志物。验证集的 ＡＵＣＲＯＣ 、敏感性和 特异性分别为０．９２、８５．７１％和 ９０．６８％，诊断效能与训练集一致（Ｐ ＝ ０．９８）。采用验证集评估训练集模型效果，错分误差为 ０．０５３，能够较好地鉴别结直肠癌。结论 采用 ＬＡＳＳＯ 交叉验证算法建立的 Ｍ６ 风险预测模型可显著提高结直肠癌诊断效能。     

少精不育症患者精细胞可疑DNA片段的筛查

目的　筛选与少精不育发生相关的新分子标记。方法　利用现代分子生物学的技术： Ｒ Ａ Ｐ Ｄ、 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 印迹分析（ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ） 、 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交、 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹、克隆、亚克隆及测序对精细胞 Ｄ Ｎ Ａ 作综合分析。结果　在从 Ｒ Ａ Ｐ Ｄ 回收的１２ 条可能与少精不育发生相关的 Ｄ Ｎ Ａ 片段中，有１１ 条被克隆到ｐ Ｃ Ａ Ｐｓ 载体上。在这些克隆片段中８０ ％ 的插入片段是重复顺序，少部分是单拷贝序列。其中一重复顺序在精细胞基因组中具 Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ 现象，经 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹分析，发现并无杂交带，说明此片段并非某一表达基因。经对此片段的序列结构进行分析，发现其是含“ Ａ Ａ Ｔ”和“ Ｇ Ｃ Ｇ”密码子重复的中度重复顺序，并且内含有一真核生物顺式作用的启动子序列 Ｔ Ａ Ｔ Ａ 盒“ Ｔ Ａ Ｔ Ａ Ａ Ａ Ａ”，和一个真核生物基因调控的组织特异性增强子序列“ Ｔ Ａ Ｇ Ｃ Ａ Ａ Ａ Ｔ”（ 其反向序列为“ Ａ Ｔ Ｔ Ｔ Ｇ Ｃ Ａ Ｔ”） 。经 Ｉ Ｎ Ｔ Ｅ Ｒ Ｎ Ｅ Ｔ 核酸数据库查寻并未发现有此段序列的报道。结论　此具有 Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ 现象的中度重复顺序是与精子发生相关的某一基因的表达调控部分，因其易在基因组中发生变异从而影响到精子     

肾综合征出血热病人T淋巴细胞亚群及sIL—2R变化的研究

应用ＡＰＡＡＰ法及双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法对３５例肾综合征出血热病检测了外周血Ｔ淋巴细胞亚群及ｓＩＬＦ－２Ｒ水平。结果表明：肾综合征出血热病人ＣＤ４＋细胞减少，ＣＤ８＋细胞增高。提示肾综合征出血热瓣发产现机理与细胞免疫功能紊乱有关。