酶免法检测乙肝表面抗原实验精密度研究

目的 探讨酶免法检测HBsAg实验精密度的影响因素及实验精密度对检验结果的影响.方法 检测卫生部临检中心0.5ng/ml质控血清,计算精密度;比较手工操作与全自动酶免分析仪法检测的精密度;检测不同效价的阳性血清,比较精密度,并作统计学分析.结果 临界值附近的标本可能引起误判,手工操作与全自动酶免分析仪法检测实验精密度差异有统计学意义(t=4.72,P<0.01).结论 实验精密度的高低对酶免法检测HBsAg实验存在影响,检验结果的判定应设置灰区并进行复检或进一步检测.     

HBsAg定性测定室内质控物浓度的选择

目的探讨定性ELISA测定的室内质控血清浓度的选择方法。方法根据系列HBsAg质控血清的浓度与其测定S／CO值的关系，得到线性回归直线方程Y=a＋bX及其相关系数r。选择计算得到的S／CO值减去3倍批间CV与该S／CO值的乘积仍大于1的质控物作为判断实验室测定重复性室内质控用。结果质控血清0～2ng／ml与其检测的S／CO值之间呈高度相关。1ng／ml质控血清可作为测定重复性使用，0．5ng／ml质控血清作为监测试剂下限使用。结论定性ELISA试剂本身的阴性、阳性对照只能检测其实验的有效性，无法监测灵敏性及测定下限的变化，必须使用弱阳性质控血清进行室内质控，并依据统计学直线回归与相关分析，科学地选用质控物浓度，保证实验的准确性。     

Cobas500与Olympus640检测系统血清酶测定值可比性研究

目的通过对不同实验室不同检测系统血清酶测定结果进行偏倚评估和方法比对,研究不同检测系统间血清酶测定结果是否具有可比性,为不同实验室检验结果的互认提供依据。方法以美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件指南的规定对不同检测系统进行比对。将罗氏Cobas500生化分析仪、罗氏原装试剂、C.f.a.s校准品和质控品组成的检测系统作为目标系统(比较方法 ),Olympus640生化分析仪作为待评系统(实验方法 )。分别在两个不同检测系统测定罗氏质控血清PNU(生理值)、PPU(病理值)和45份新鲜血清的血清酶,评估两个检测系统的精密度,计算实验方法与比较方法间的相对偏差,以CLIA′88规定的室间质评允许误差范围的1/2为标准,判断不同检测系统之间血清酶测定结果的可比性。结果两个系统间血清酶测定结果经配对t检验分析差异无统计学意义,5项血清酶检测结果的系统误差临床可以接受。结论两个检测系统5种血清酶测定结果除丙氨酸氨基转移酶高值外均具有可比性,临床可接受性能可以接受。     

酶免法检测乙肝表面抗原实验精密度研究

目的探讨酶免法检测HBsAg实验精密度的影响因素及实验精密度对检验结果的影响。方法检测卫生部临检中心0.5ng/ml质控血清,计算精密度;比较手工操作与全自动酶免分析仪法检测的精密度;检测不同效价的阳性血清,比较精密度,并作统计学分析。结果临界值附近的标本可能引起误判,手工操作与全自动酶免分析仪法检测实验精密度差异有统计学意义（t=4.72,P〈0.01）。结论实验精密度的高低对酶免法检测HBsAg实验存在影响,检验结果的判定应设置灰区并进行复检或进一步检测。     

回归分析在乙型肝炎表面抗原免疫检测质量控制图中的应用

目的 探讨不同批号HBsAg酶免试剂盒室内质控图连续性使用的方法.方法 两种不同批号HBsAg酶免试剂盒同时测定同一质控血清,建立不同批号的HBsAg酶免试剂盒浓度与s/CO的回归方程,求得系数关系,即可在原质控图上连续描点,并对方程进行统计学检验.结果 应用回归分析建立不同批号的HBsAg酶免试剂盒浓度与s/CO的回归方程,并将求得的计算值与测量值比较,经检验差异无统计学意义（t=0.169,P〉0.05）.结论 应用回归分析可解决因不同批号HBsAg酶免试剂盒的更换而需重新修订质控图的问题,保证室内质控图的连续性使用.     

抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度的选择和批间连续质控延续方法的建立

目的建立抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度的选择方法和批间连续质控的延续方法。方法选择系列质控血清中S/CO值减去精密度测定中得到的3倍批间CV与该S/CO值的乘积仍大于1.0者用来监测试验重复性,选择S/CO处于1.5左右的质控血清以判断试剂盒测定下限的有效性。使用新旧两个批号试剂盒同时检测系列质控血清得到线性回归的直线方程,计算得到换算因子,用以将新批号试剂测定值换算至原批号试剂测定值,继续使用原质控图。结果通过实验能够选择合适浓度的质控物用以判断检测重复性和试剂盒测定下限的有效性。能够得到不同批号间质控测定的换算因子用以有效延续质控图。结论通过上述方法能够有效选择抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度,并建立批间连续质控的延续方法。     

抗核抗体检测质控血清的研制与评价

目的 为了进一步提高临床实验室抗核抗体检测结果的重复性和可比性,探索可靠的制备方法,并且研制满足抗核抗体常规检测需要的质控血清.方法 按照入选要求选择本室检测抗核抗体之后的患者血清制备质控血清;通过无菌实验、防腐实验、冻存、复温、浓度水平的设置等的研究,初步确定制备质控血清的方法和条件;通过对制备血清的外观、无菌性、批内及批间均匀性、稳定性等指标的评价,进一步优化制备方法和条件,确认制备的质控血清的性能.结果 制备的质控血清在-20℃可以稳定保存270 d,室温复温后稳定8h以上.冻存复温后批内及批间均匀性、稳定性与商品化质控性能无明显区别,与冻存前检测结果一致.结论 探索出了抗核抗体检测质控物制备的合适方法和实验条件;制备的各个批号质控物具有良好的均匀性、稳定性;制备出的质控血清满足抗核抗体检测需求和质控要求.     

HBsAg室内质控物的制备及其应用

目的 以制备HBsAg酶联免疫吸附试验(ELISA)室内质控物,对其应用效果进行评价.方法 以复检HBsAg阳性的报废全血作为原料,制备0.5、4、8 U/mL室内质控血清,使用上海科华和意大利DiaSorin公司HBsAg诊断试剂盒对其进行检测,并比较其结果 .结果 科华和DiaSorin HBsAg诊断试剂检测室内质控血清比较,t值分别为0.058、0.049,差异无统计学意义(P>0.05),使用两种不同的试剂连续检测不同浓度的质控物20次,检测的CV范围分别为6.75%～11.65%、4.82%～10.30%;使用两种不同的试剂检测不同浓度的质控物30 d,检测的CV范围分别为7.37%～12.50%、4.84%～13.92%.结论 ELISA法进行HBsAg检测的质控物制备简单,稳定性良好,质控图操作方便,适合临床实验室应用和推广.     

4项目混合酶联免疫吸附试验室内质控品的应用探讨

目的探讨4项混合酶联免疫吸附试验(ELISA)质控品的应用可行性及优势。方法 ELISA每板加入一孔室内质控品,对4项混合质控品与单项浓度质控品检测的结果进行比较和分析,以选择更适合该实验室的质控品类别。结果 4项混合质控品的每个项目检测结果变异系数(CV)值浮动范围均低于单项浓度质控品检测的CV值浮动范围,4项混合质控品比单项浓度质控品检测的结果更稳定。结论选择4项混合质控品更适合该实验室血液筛查4项的室内质量控制。     

AP22 Speedy型全自动酶免分析系统性能验证

目的评价AP22Speedy型全自动酶免分析系统的主要性能,以期用于实验室管理机构的相关认证及认可工作,同时为仪器故障的诊断及处理提供依据。方法按照YZB/ITA 1679-2009标准,选定TORCH优生项目,对AP22Speedy全自动酶免分析系统加样精密度和准确性、携带污染率、测光值稳定性、批内测量重复性进行验证。结果 AP22Speedy全自动酶免分析系统检测TORCH优生项目质控血清的加样精密度和准确性、携带污染率、测光值稳定性、批内测量重复性均满足厂商声明范围。结论 AP22Speedy全自动酶免分析系统在加样精密度和准确性、携带污染率、测光值稳定性、批内测量重复性4个方面性能验证合格。     

温育时间对酶联免疫吸附试验结果的影响

目的 探讨温育时间对FAME全自动酶免分析系统(以下简称FAME)进行酶联免疫吸附试验(ELISA)结果的影响,从而提高ELISA法检测结果的准确性.方法 根据FAME孵育巢温度变化曲线,延长ELISA温育时间,选择不同实验参数条件进行对照实验,再根据实验结果选择合适的补偿时间进行实验,所得数据采用SPSS 13.0 for Windows进行双变量相关分析.结果 乙型肝炎表面抗原阳性标本、阳性对照、0.5 ng/ml质控对照和1 ng/ml质控对照的吸光度(OD)值与温育时间延长呈正相关,阴性标本和阴性对照的OD值与温育时间延长无统计学意义.结论 适当延长ELISA温育时间,可提高FAME结果的准确性.     

"即刻法"质控在艾滋病初筛实验室室内质控中的应用

目的 建立一种简单、易行、实用、科学的艾滋病初筛实验室质控方法,以更好地对小批量低频次艾滋病抗体检测进行质控.方法 对外部质控血清检测3个点以上数据,并用其结果绘制质控图.结果 通过小批量低频次检测外部质控血清,绘制"即刻法"质控图,可用于艾滋病抗体初筛的室内质控.结论 该质控图具有较高的检出分析误差能力,能及时、快速监控实验操作的一致性及判断结果的有效性,对检测频次较低的初筛实验室更有实用价值.     

输血相容性试验室内质控品的研制

目的研制出简易可行,可在一般实验室使用的质控品。方法选择10人份健康献血者的浓缩红细胞(O/AB型RhD阳性)制备红细胞质控品,取新鲜血浆(O/AB型RhD阳性)和抗-D(IgG)人血清配制血浆质控品。对制备好的质控品进行性能评价,包括重复性、稳定性、最佳条件与常规条件下测定比较以及微柱凝胶法与凝聚胺法测定比较。结果质控品的批内重复性CV均10%,批间重复性差异无统计学意义(P0.05)。在不同保存时间,条件及方法的条件下,质控品检测结果均无明显变化(P0.05)。统计分析6个月的室内质控结果,在控率为100%。结论成功研制出输血相容性试验室内质控品,该质控品具有较好的重复性,稳定性及实用性。     

小型血站实验室设备性能比对方法探讨

目的探讨小型血站血液检测实验室设备性能比对的方法。方法比较2台不同型号的全自动加样仪、2台同系列全自动酶免后处理系统检测性能的一致性:使用4种ELISA检测试剂,分别检测HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、梅毒定值质控品和20份常规献血者标本,应用χ2检验和Kappa检验,比较上述2组设备检测结果的一致性。结果1)2台全自动加样仪抗-HCV、抗-HIV定性检测加样的一致性较好。2)2台同系列全自动酶免后处理系统,4种试剂一致性均为100%(40/40),经χ2检验一致性无统计学差异(P0.05)。结论小型血站实验室可以通过对定值质控品,和常规献血者标本的检测结果进行处理分析,比对酶免检测设备之间的性能是否一致。     

乙肝病毒五项血清标志物定值质控血清的制备及临床应用

目的 探讨乙肝病毒五项血清标志物(即HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb)定值质控血清的制备方法及在临床免疫实验室室内质控中的应用.方法 收集一年用量的乙肝病毒五项血清标志物检测全部阴性的混合血清,分别加入适量试剂厂家提供的阳性对照血清配比成所需浓度,置-30℃保存.最终浓度由卫生部临床检验中心提供的定值质控血清标定.结果 经过长期实验观察,自制质控血清复融后能稳定3～5 d,-30℃保存能稳定6 mo.结论 自制乙肝病毒五项血清标志物定值质控血清经济、便捷、稳定,可以满足临床免疫实验室室内质控的要求.     

电化学发光免疫测定25-羟基维生素D_3在疾病预防控制中心的应用

目的在疾病预防控制中心使用电化学发光免疫分析仪测定血清中25-羟基维生素D_3。方法使用E-170电化学发光免疫分析仪测定25-羟基维生素D_3并与使用酶免检测的数据进行比较。结果 E-170电化学发光免疫分析仪测定25-羟基维生素D_3质控血清检测结果均在1个标准差内;与酶免检测数据比较差异有统计学意义(P0.05),相关性差(r=0.568)。结论 25-羟基维生素D_3室内质控结果良好,可以使用E-170电化学发光免疫分析仪在疾病预防控制中心开展25-羟基维生素D_3的检测工作,两种方法检测结果差异较大,在进行干预比较性实验时要注意使用的检测方法。     

两种仪器产前筛查hAFP、总β-HCG结果的可比性研究

目的了解不同型号仪器产前筛查人血清甲胎蛋白(hAFP)、总β-人绒毛膜促性腺激素(-βHCG)结果的可比性。方法随机抽取妊娠15～20周妇女血清标本94例和3批号伯乐质控血清各分作两份,一份用美国雅培AXSYM型微粒子酶免分析法(MEIA)进行检测,并以此仪器为参考仪器;另一份用德普IMMULITE 1000型全自动发光免疫分析仪进行检测,并比较两种仪器测定结果的差异及唐氏综合征(Down′s)和神经管缺陷(NTD)高风险检出情况,并对结果进行相关统计分析。结果经随机分组设计资料的方差分析,不同厂家、不同水平的质控物和不同浓度患者新鲜血清的测定结果在两种检测系统间差异有统计学意义(P<0.01),两种仪器分别检测94例血清标本,均检出Down′s高风险2例和NTD高风险1例,两种仪器检测结果差异无统计学意义(P=1.000)。结论 IMMULITE 1000用于产前筛查时,筛查结果符合临床要求,但与Abbott AXSYM相比还存在一定的系统误差,需要加强对各种影响因素的控制。     

两种乙型肝炎病毒表面抗原质控血清的比较

血站实验室在对献血者的标本作各项检测时，必须将室内质控品和标本一起在相同的条件下进行实验，以判断该实验是否成功的标志之一。而质控品的选择，是以该试剂盒临界值的2～3倍为宜。不同厂家试剂的灵敏度不同，同样浓度的质控品实验得出的结果也有所不同，所以选择合适的室内质控品就成了实验结果是否可信的关键之一。笔者对乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）进行检测时，对比了两种不同浓度的质控血清，判定出更适用于临床检验的质控物，报道如下。     

室温对ELISA定性测定HBsAg检测能力的影响

目的 研究显色温度对酶免实验结果的影响.方法对18℃～30℃范围内不同显色温度时,HBsAg试剂盒阳性检出能力进行测试.结果显色温度低于21℃时试剂盒对于质控物的检出能力下降.结论显色温度对酶免实验结果有明显的影响,应严格控制检测条件,满足质量需求.     

两种免疫分析系统检测泌乳素的偏倚评估与可比性研究

目的通过对泌乳素(PRL)在不同检测系统的测定结果进行方法比对和偏倚评估,探讨不同检测系统间PRL测定结果是否具有可比性或检测结果偏倚是否在允许范围内,以确保不同免疫分析系统检测结果的准确性和一致性。方法按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A文件的要求,取雅培不同水平的质控物以及30例患者不同浓度的新鲜血清,用美国雅培I2000SR分析仪和雅培AXSYM免疫检测系统及其配套的校准物和试剂进行PRL检测,以澳大利亚室间质量评价标准为标准,对两个分析系统间的偏倚进行评估。结果两个检测系统间不同水平的质控物和不同浓度的患者新鲜血清PRL测定结果差异无统计学意义(P0.05),PRL测定结果的信度系数均接近1;偏倚在方法线性范围内均可以接受。结论雅培I2000SR分析仪和雅培AXSYM免疫检测系统具有很好的相关性,两个免疫测定系统所测PRL结果具有可比性。当同一实验室同一检验项目存在两个以上的检测系统时,应进行方法比对和偏差评估,以保证检验结果的可比性。