卵子第一极体、卵周隙及胞浆形态与ICSI后受精率和胚胎质量的影响

目的从MII期卵子的第一极体、卵周隙和胞浆形态三方面综合探讨卵子质量对卵母细胞浆内单精子注射(ICSI)后的受精率、卵裂率、优胚获得率的影响.方法对ICSI中去除颗粒细胞后的MII期卵子在光镜下从第一极体、卵周隙和胞浆形态三方面综合评价卵子质量并按形态表现分为五级.且分别比较各级卵子的受精率、卵裂率及优胚率.结果Ⅰ级卵子与其他各级含异常形态的卵子比较,受精率、卵裂率和优质胚胎率,均有显著差异(P＜0.01).Ⅰ级卵子有最高的受精率(91.14%)、卵裂率(96.35%)和优质胚胎率(83.91%).形态异常的卵子的受精率、卵裂率和优质胚胎率均有明显的下降趋势.在取卵数≤15个及hCG注射日每个卵泡的血清E2浓度在732～1098pmol/L组中,可获得高比例的Ⅰ级卵子.结论根据MII期卵子的第一极体、卵周隙及胞浆形态三方面综合因素进行的卵子分级是可预测ICSI后受精率、卵裂率及优胚率.     

体外成熟卵母细胞受精方式及发育能力的影响因素

目的 探讨体外成熟卵母细胞的受精方式及影响其胚胎发育的因素.方法 收集本院2008年7月至12月因男性因素需进行卵母细胞胞浆内单精子注射术(ICSI)助孕的135对夫妇未成熟的卵母细胞(DO)354枚,置入P1培养体系中观察培养20～24、26～30、36～40 h后的成熟情况.去除了退化的成熟卵母细胞,随机分为常规体外受精(IVF)和ICSI组,比较2组的正常受精率、卵裂率、第3天优质胚胎率及各组优质胚胎和非优质胚胎的患者年龄、不孕年限、促排时间及卵母细胞体外成熟时间.结果 卵母细胞体外成熟率为82.5%(292/354),IVF组正常受精率56.5%(70/124)低于ICSI组69.9%(107/153)(P<0.05).两组卵裂率和优质胚胎率差异无统计学意义(P>0.05).2组组内优质胚胎的患者年龄、体外成熟时间均小于非优质胚胎(P<0.05);不孕年限及促排时间差异无统计学意义(P>0.05).结论 ICSI能够提高体外成熟卵母细胞的受精率.体外成熟卵母细胞具有常规受精的能力,第3天胚胎质量与ICSI相似.患者年龄和卵母细胞体外成熟时间是体外成熟卵母细胞发育能力的主要影响因素.     

精子DNA碎片对IVF/ICSI结局的影响

目的探讨精子DNA碎片对体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)结局的影响。方法回顾性的分析了行IVF/ICSI治疗的725例不孕夫妇(IVF 502例、ICSI 223例)的临床资料。根据精子DNA碎片指数(DFI)分为正常组(DFI10%)、轻度DFI组(10%≤DFI20%)和重度DFI组(DFI≥20%),分别比较了IVF和ICSI中三组的受精率、卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率和临床妊娠率。结果在IVF周期中,DFI对受精率、卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率和临床妊娠率均无影响(P0.05);在ICSI周期中,DFI对受精率和卵裂率无影响(P0.05),但可用胚胎率和优质胚胎率三组之间有显著性差异(P0.05),临床妊娠率虽然随着DFI的增高而下降,却无显著相关性(P0.05)。结论精子DNA碎片对IVF结局基本无影响,但与ICSI结局中的可用胚胎率和优质胚胎率呈负相关,这可能与受精过程中IVF周期中卵子对精子有自然选择的过程,而ICSI周期中则是人为的选择精子有关。     

短时受精失败和低受精率周期的卵母细胞发育潜能对比观察及对妊娠率的影响研究

目的探讨短时受精失败和低受精率周期的卵母细胞发育潜能对比观察及对妊娠率的影响。方法回顾性分析2016年5月-2017年5月我院收治的100例不孕不育症患者的临床资料,采用常规方案收集卵子和精子,在一定条件下培养受精卵,制定胚胎移植后的分级情况,对比两组患者的异常受精率、优质胚胎率、胚胎利用率、卵裂率以及患者的妊娠率和多个胚胎的妊娠率。结果两组患者的卵裂率和异常受精率无明显差异(P0.05),人工补救卵细胞组中的优质胚胎率、囊胚形成率和胚胎利用率都显著高于自然状态下受精组(P0.05);研究组胚胎移植后妊娠率和多个胚胎妊娠率显著低于对照组(P0.05)。结论若患者出现短时受精失败或者含有低受精率周期的卵母细胞,可以采取及时补救法,体外进行受精卵培养并将胚胎移植入体内,此方法也可以获得与自然状态下相似的发育潜能,值得推广使用。     

单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中生长分化因子-9和骨形成蛋白-15的表达水平与胚胎发育潜能的研究

目的评估单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中GDF9和BMP15的m RNA表达水平对卵母细胞发育潜能的影响。方法采用长方案治疗25例ICSI助孕的女性,取卵当天收集180份单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞,随后提取卵丘颗粒细胞的m RNA,进行实时荧光定量分析,对GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平采用独立样本t检验分析。结果常规长方案CCs 180份,因卵子与收集的卵丘颗粒细胞是一一对应的,根据卵子受精情况将CCs分为正常受精组CCs 129份,异常受精组CCs 51份;正常受精组根据第3日胚胎卵裂情况分为优质卵裂胚形成组CCs 58份,非优质卵裂胚形成组CCs71份;非优质卵裂胚继续培养,根据第5日形成囊胚情况,分为优质囊胚形成组CCs 25份,非优质囊胚形成组CCs 46份。GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平与正常受精率,优质胚胎率显著相关。正常受精组GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平显著高于非正常受精组(P0.01),优质胚胎组显著高于非优质胚胎组(P0.01)。结论单卵母细胞对应的卵丘颗粒细胞中GDF9和BMP15 m RNA基因表达水平与正常受精率,优质胚胎率和优质囊胚形成率呈显著正相关,提示其可以作为预测卵母细胞的发育潜能的指标。     

第二极体排出时间早晚与受精率、胚胎质量的关系

目的探讨第二极体(PB2)排出时间早晚与受精率、胚胎质量的关系。方法选择2012年11月~2013年10月在广东省第二人民医院生殖医学科行常规体外受精周期的患者,于授精后的4h观察PB2排出情况,4h内排出PB2为A组,4h内未排出PB2为B组。比较两组间的受精率、卵裂率、可利用胚胎率和优胚率。结果 1A组的受精率、两原核(two pronuclear,2PN)率显著高于B组(P0.05);但两组间的异常受精率、多精受精率和卵裂率无明显差异。2A组的可利用胚胎率及优质胚胎率显著高于B组(P0.05)。结论受精4h内排出第二极体的卵子的总受精率、正常受精率、可利用胚胎率及优质胚胎率显著高于4h内未排出第二极体的卵子,第二极体排出有助于预测体外受精结局。第二极体排出时间与胚胎质量存在一定关系,有助于预测胚胎的发育潜能。     

聚集体对ICSI周期胚胎发育及临床妊娠结局的影响

目的探讨在卵胞浆内单精子显微注射(intracytoplasmicsperminjection,ICSI)周期中,滑面内质网聚集体(smoothendoplasmicreticulumaggregate,SERa)对胚胎发育潜能及早期临床结局的影响。方法回顾性分析2018年1月至2018年12月期间的232个ICSI周期的临床资料。拆除颗粒细胞后根据MII卵母细胞是否出现SERa分为A组(所得卵母细胞均未出现SERa,n=184)和B组(至少一个卵母细胞出现SERa,n=48)。分析A、B两组患者的临床情况,包括Gn使用总量、Gn使用时间、基础和hCG注射日雌激素(E_2)、黄体酮(P)、黄体生成素(LH)水平、子宫内膜厚度、周期种植率、临床妊娠率、早期流产率,实验室指标包括平均获卵数、受精率、D3优质胚胎率、优质囊胚形成率、可冻囊胚形成率;将B组分为SERa-(n=365)和SERa+(n=91)卵母细胞组,比较两组实验室指标;再根据移植胚胎的卵子来源情况将B组分为两个亚组:SERa-来源组(移植的胚胎均为非SERa卵子来源,n=26)和SERa+来源组(移植的胚胎至少有一个为SERa卵子来源,n=13),比较临床结局。结果 A、B两组的临床基本情况、2PN受精率、D3优质胚胎率、优质囊胚形成率、种植率、临床妊娠率、早期流产率无统计学差异(P0.05);相对于SERa-卵母细胞组,SERa+组的2PN受精率显著降低(P0.05),1PN受精率显著增高(P0.05),多PN受精率、D3优质胚胎率、优质囊胚形成率、可冻囊胚形成率、种植率、临床妊娠率、早期流产率无显著差异(P0.05)。结论卵母细胞滑面内质网聚集体显著影响ICSI周期正常受精率,但对胚胎发育参数及临床妊娠结局并无影响。     

Diff-Quik染色法评估精子形态与体外受精胚胎质量的关系

目的探讨Diff-Quik染色法评估精子形态与体外受精胚胎质量的关系。方法在76个IVF周期中,采用Diff-Quik染色后评估精子畸形率,并分析其与IVF受精率、卵裂率、优质胚胎率之间的关系。结果Diff-Quik染色后精子畸形率与卵母细胞受精率呈负相关(P0.05),与卵裂率、优质胚胎率之间关系不显著(P0.05)。结论Diff-Quik染色后精子畸形率越高,受精率越低,但精子形态与胚胎早期卵裂速度及胚胎形态间无明显相关。     

使用不同来源精子对卵胞浆内单精子注射结局的影响

目的研究使用不同来源精子对卵胞浆内单精子注射结局的影响。方法选择2015年1月至12月在本中心接受卵泡浆内单精子显微注射(ICSI)治疗的夫妇,根据使用精子的来源不同分成5组,A组睾丸精子组,B组附睾精子组,C组严重少、弱、畸形精子组,D组冷冻复苏精子组,E组不明原因前次IVF受精失败或受精率小于30%组,比较ICSI后2PN率、2PN卵裂率、优质胚胎率的差异。结果 E组2PN卵裂率与A组、B组、C组比较,差异有统计学意义,D组优质胚胎率与A组、B组、C组比较差异有统计学意义。其他指标采用两个独立样本t检验分析,两两比较,差异均无统计学意义。结论在临床中可以根据患者具体情况和实验室技术条件选择不同来源的精子进行ICSI治疗。     

早期补救卵胞浆内单精子注射在常规体外受精中的临床应用价值探讨

目的探讨早期补救卵泡浆内单精子注射(ICSI)在常规体外受精(IVF)中完全不受精或低受精的临床应用价值。方法回顾性分析2013年3月~2015年5月在本院生殖中心常规IVF治疗受精6h后判断为完全不受精或低受精而行早期补救ICSI的52周期患者,统计其实验室培养指标及临床结局,并与同期因男方因素而直接进行ICSI的127周期进行比较。结果早补救ICSI组的受精率、卵裂率、临床妊娠率及种植率和直接ICSI组比较差异无统计学意义(P0.05),而优胚率、胚胎利用率及囊胚形成率显著低于直接ICSI组,两组差异有统计学意义(P0.05)。结论早补救ICSI可作为常规IVF受精失败的补救措施具有较高的临床应用价值,但由于卵母细胞在体外的培养时间延长导致卵子老化,甚至会影响胚胎的发育潜能。建议对高度怀疑受精障碍尤其高龄(≥37岁)、获卵数≥8患者采用Half-ICSI以提高胚胎利用率和累积妊娠率。     

黄体中期长方案及拮抗剂方案对IVF患者卵母细胞质量的影响

目的比较两种控制性超排卵方案对卵母细胞质量的影响。方法回顾性分析2012年1月至2014年7月在北京妇产医院生殖医学科接受黄体中期长方案317例(326个周期)及拮抗剂方案218例(220个周期)治疗的患者,对其卵母细胞质量进行评级,比较两组卵母细胞质量、成熟率、受精率、卵裂率及优质胚胎率等。结果两组患者年龄、不孕年限、BMI、基础FSH、LH、E2水平、Gn总量均无统计学差异(P0.05)。黄体中期长方案组获卵数、成熟卵子数,3级卵子数显著高于拮抗剂组(P0.05);受精数、正常受精数、卵裂数、优胚数均显著高于拮抗剂组(P0.05)。两组的卵母细胞成熟率及各级成熟率、正常受精率、卵裂率、优胚率差异无统计学意义(P0.05)。结论黄体中期长方案组的获卵数、优卵数及优胚数均高于拮抗剂方案组,但两组间成熟卵子率、卵裂率、及优胚率均无差异,两种方案对患者卵母细胞质量影响差异不明显。     

常规IVF受精失败补救ICSI后行冻融胚胎移植的临床价值

目的探讨冻融胚胎移植在常规体外受精(IVF)失败后补救卵胞浆内单精子注射(L-ICSI)中的应用价值。方法在12个常规体外受精失败周期中应用ICSI对未受精的MⅡ期卵子进行显微授精,将获得的优质胚胎进行冷冻,再择期行冻融胚胎移植。结果对93个未受精的MⅡ卵子接受L-ICSI,受精63枚,受精率为67.7%(63/93),异常受精3枚(2枚1PN,1枚3PN),57个正常受精卵发生卵裂,卵裂率为95.0%(57/60),优质胚胎率为43.9%(25/57),10例患者冷冻胚胎25枚,其中4例采用程序化冷冻,6例采用玻璃化冷冻。9个患者行冻融胚胎移植,共移植胚胎18枚(其中解冻后胚胎碎裂死亡5枚),其中1个周期因冻融后2个胚胎碎裂放弃移植,2例获得临床妊娠,1例分娩出正常婴儿,1例正在妊娠中,临床妊娠率为22.2%。结论 ICSI可使常规体外受精失败的卵子再受精,冻融胚胎移植可以解决胚胎与子宫内膜不同步的问题,获得相对满意的临床结局,具有一定的应用价值。     

睾丸与附睾精子对梗阻性无精子症ICSI助孕结局的影响

目的比较睾丸精子与附睾精子对梗阻性无精子症(obstructive azoospermia,OA)患者行卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗结局的影响。方法收集2014年1月至2016年12月在海南医学院第一附属医院生殖医学中心因梗阻性无精子症行ICSI助孕治疗患者的临床资料,共163个周期。根据精子来源分为两组,TESA组:采用睾丸精子抽吸术(testicular sperm aspiration,TESA)取精,共137个周期;PESA组:采用经皮附睾精子抽吸术(percutaneous epididymal sperm aspiration,PESA)取精,共26个周期。比较两组的正常受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率、胚胎种植率、临床妊娠率、流产率及活产率之间有无差异。结果 TESA组的胚胎种植率、临床妊娠率及活产率高于PESA组,但差异均无统计学意义(P0.05);TESA组的正常受精率、2PN卵裂率、优质胚胎率、胚胎利用率及流产率均低于PESA组,但差异亦无统计学意义(P0.05)。结论对梗阻性无精子症患者,睾丸精子和附睾精子ICSI后可达到相似的助孕结局。     

第二极体排出时间早晚与胚胎发育潜能相关性的研究

目的 探讨第二极体排出时间早晚与胚胎质量及发育潜能之间的关系.方法 以本生殖医学中心2009年6月～8月IVF-ET周期患者受精卵子为研究对象,共计1170枚卵子.以受精5 h为时间界限将受精胚胎分为第二极体正常排出组(正常组)和延迟排出组(延迟组).分别观察两组卵子正常/异常受精率(2PN率,1PN和3PN率)和优质胚胎率;同时统计阳性妊娠结局所移植胚胎中,正常组和延迟组的胚胎比例各占多少.采用卡方检验对数据进行统计学处理.结果 ①两组正常受精卵数目之间以及异常受精卵数目之间均有显著性差异(P<0.05);两组总受精卵数目之间有非常显著差异(P<0.001).②两组的优质胚胎率之间显著性差异(P<0.05).③统计阳性妊娠结局所移植的97个胚胎中,来自于正常组的胚胎有92个(94.9%),仅5个是来自于延迟组(5.1%).结论 受精5 h内排出第二极体的卵子其总受精率、正常受精率以及所发育的胚胎质量均显著高于第二极体出现晚的卵子,而且有着较高的胚胎植入率.对受精5 h的卵子进行第二极体观察有助于早期预测患者本次IVF-ET周期胚胎的发育潜能以及妊娠结局;还可以作为决定是否行早补救ICSI的判定指标之一.     

获单卵周期体外受精和单精子胞浆内注射对IVF-ET结局的影响

目的取卵日仅获单卵周期常规体外受精（IVF）和单精子胞浆内注射（ICSI）两种受精方式对的IVF—ET结局的影响。方法本研究对92个获单卵周期进行比较，分析了在年龄、激素和子宫内膜厚度无差别的情况下ICSI和IVF的结局。就不同年龄段及不同精液质量时，ICSI和IVF受精率、卵裂率及妊娠率进行比较。结果年龄、激素和子宫内膜厚度无差别时，ICSI的受精率和妊娠率分别为81．6％和12.2％，明显高于IVF组的69．8％和4．7％。不同年龄组，当精子正常时，ICSI组和IVF组受精率和卵裂率无统计学差别，但妊娠率在前者高；精子未达正常标准时，ICSI组的受精率、卵裂率及妊娠率均显著高于IVF组。结论精子质量对选用ICSI还是IVF是重要影响因素，未迭正常标准的精子选用ICSI更好。总体说来，对于获单卵周期，ICSI似乎是更好的受精方式。这次结果也为我们在自然周期选择何种受精方式提供了参考。     

精液优化后置时间与受精时间对胚胎质量的作用评价

目的探讨精液优化后置时间与体外受精时间对胚胎质量评价。方法 61个IVF周期,共获卵610枚:实验组:200枚卵子,精液优化后2h制作精子微滴加入培养后卵子,待2h后将拆除部分颗粒细胞的受精卵转移至新鲜的受精微滴皿中,培养14h-16h;对照组:410枚卵子,常规精液优化后2h,制作精子微滴加入培养后卵子,培养受精16h-18h。两组均在次日拆蛋,观察原核及受精情况,受精66h-72h观察其卵裂,并进行胚胎评分,比较两组的受精率、卵裂率、可利用胚胎率、优质胚胎率。结果实验组的受精率、卵裂率、可利用胚胎率分别为:77%、96.1%、59.5%;对照组为:74.6%、94.1%、53.4%;两组受精率、卵裂率、可利用胚胎率比较结果无统计学差异,P0.05。但实验组中可利用胚胎率较高于对照组;实验组的优质胚胎率为:53.4%较对照组43.4%高,统计学比较有显著性差异P0.05。结论降低精液优化后置时间和缩短受精时间不仅不影响胚胎的受精率、卵裂率;且会提高胚胎的可利用胚胎率、优质率,延伸临床的种植潜能,增加患者周期妊娠率。     

不同来源精子对ICSI助孕结局的影响

研究不同来源的精子对于ICSI辅助生殖助孕结局的影响。对本中心115例卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）治疗周期进行回顾性分析,比较分别使用射出精液来源精子以及睾丸、附睾穿刺来源精子行ICSI后,受精率、卵裂率、优质胚胎率以及妊娠率、种植率等各项指标。精子来源的不同造成了受精率的显著差异,一旦受精完成,随后胚胎的发育及种植将更多的依赖于患者的年龄。     

反复体外受精方法失败者卵胞浆内单精于注射预后分析

目的 探讨反复常规体外受精—胚胎移植(IVF—ET)方法失败伴受精不良者行卵胞浆内单精子注射(ICSI)预后。方法 收集1999年10月到2002年8月在我院生殖中心接受常规IVF技术治疗至少1个周期以上失败伴受精率低于50％的23例(31个周期)女性不育患者为研究对象，在以后的治疗周期采用ICSI治疗方法。同时选择2001年10月到2002年8月因男性因素不育而行ICSI的30例(32个周期)患者为对照组，对比两组的临床结果。采用常规超排卵治疗长方案治疗，成熟的卵母细胞行单精子显微注射。结果 两组平均获卵数和受精率、四、六细胞卵裂率无显著差异。但八细胞卵裂率、种植率、临床妊娠率，IVF失败组分别为：26．6％、7．5％、21．4％，男性因素不孕组分别为：35.8％、18％、47.2％。两组有显著性差异。同时比较失败组自身前后两种不同受精方法的实验室情况。IVF的受精率，四、六细胞卵裂率无显著差异。但八细胞卵裂率、种植率、临床妊娠率，IVF失败组分别为：26．6％、7．5％、2l、4％，男性因素不孕组分别为：35．8％、18％、47.2％。两组有显著性差异。同时比较失败组自身前后两种不同受精方法的实验情况。IVF的受精率，四、六、八细胞卵裂率分别为48．1％、35.4％、29．9％、26.8％。ICSI的分别为68.9％、53．7％、29．9％、26.6％。其受精率及四细胞卵裂率有显著差异，六、八细胞卵裂率无差异。结论 ICSI可提高反复IVF-ET失败件受精不良患者受精率，并使部分患者妊娠，但其优质胚胎率、种植率及临床妊娠率相对单纯男性因素行ICSI者较低。提示反复IVF-ET失败伴受精不良者可能存在某种配子异常，显然ICSI可使卵子受精，但配子的异常使胚胎的发育受到损害，降低了种植率和临床妊娠率。     

常规体外受精失败后行补救性卵胞质内单精子注射的临床总结

目的回顾分析常规IVF受精完全失败在临床中的发生情况及受精失败后应用补救性卵母细胞内单精子注射（ICSI）的临床结局。方法总结1999年5月-2009年5月,在我中心行常规IVF患者中,受精完全失败的发生情况。回顾性分析了2004年1月-2009年5月,因受精完全失败行补救性ICSI后的临床结局。结果1999年至2009年5月,我中心共行常规IVF8359个周期,其中,受精完全失败232个周期,发生率为2．78％。2004年1月至2009年5月,共184个周期受精完全失败,资料完整,对其中115个周期共838个MII期卵子行补救性ICSI,其受精率、卵裂率与优质胚胎率分别为71.0％、93．78％和51．79％;临床妊娠率为11％,获得活产儿5个。结论补救性ICSI能获得较高的受精率和卵裂率,降低周期取消率,但并没有明显增加活产儿出生数,改善妊娠结局。     

冷冻复苏的睾丸精子对ICSI助孕结局的影响

目的探讨冷冻复苏的睾丸精子对ICSI助孕结局的影响。方法回顾性分析2014年3月至2017年5月因男方梗阻性无精子症(OA)或非梗阻性无精子症(NOA)在我院采用细针睾丸穿刺抽吸精子行ICSI助孕的209个周期的临床资料,新鲜睾丸精子(新鲜睾丸精子组)用于174个周期,冷冻复苏的睾丸精子(冻精组)用于35个周期。比较两组的一般资料、受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率以及种植率。结果两组的一般资料比较无统计学差异(P0.05)。冻精组与新鲜睾丸精子组行ICSI助孕后的受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率及种植率比较均无统计学差异(P0.05)。结论冷冻复苏的睾丸精子对ICSI助孕结局并无显著影响。