微小RNA -128b与-181a和-223在急性白血病患者中的表达

背景：微小RNA是一类内源性非编码RNA。新近研究认为微小RNA可用作肿瘤标记物,对肿瘤进行分类。 目的：分析微小RNA -181a、微小RNA-128b和微小RNA-223在急性白血病患者中的表达差异。 方法：提取初治急性白血病患者及对照受试者骨髓单个核细胞总RNA,经微小RNA特异性引物反转录后,采用实时定量PCR分析各微小RNA的表达。 结果与结论：与对照受试者相比,无论是急性非淋巴细胞白血病还是急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的微小RNA-128b,微小RNA-181a和微小RNA-223表达均降低;统计学分析显示,急性非淋巴细胞白血病和急性白血病患者微小RNA-128b和微小RNA-181a表达与对照受试者比较差异有显著性意义(P < 0.05),但急性淋巴细胞白血病患者与对照受试者比较差异无显著性意义(P > 0.05);微小RNA-128b,-181a和-223的表达在急性非淋巴细胞白血病与急性淋巴细胞白血病患者之间差异无显著性意义(P > 0.05)。结果显示微小RNA-128b,-181a和-223有可能是急性白血病诊断与分型的生物标记物。     

急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达

背景：据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见。 目的：观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义。 方法：50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病。同期选择27例非恶性血液病患者作为对照。取肝素抗凝的骨髓液2~4 mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达。 结果与结论：50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组(P < 0.05),急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病(P < 0.05)。动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达。结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达。     

急性髓细胞性白血病患者外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达

背景：大量研究显示,肿瘤患者外周血T细胞表面共刺激分子CD28蛋白表达存在差异,提示共刺激通路异常可能与恶性肿瘤的发生进展有关。 目的：观察急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞共刺激信号分子CD28 mRNA在中的表达。 方法：急性髓细胞性白血病患者80例,其中M0型7例,M1型6例,M2型18例,M3型15例,M4型17例,M5型9例,M6型8例。并根据急性白血病疗效标准将80例患者分为完全治愈组、缓解组、未缓解组。采用Taqman探针实时荧光定量PCR检测80例患者及76名健康人群外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达。 结果与结论：急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞M1,M3和M4亚型中的CD28 mRNA表达量低于健康人群 (P< 0.05);急性髓细胞性白血病未缓解组中CD28 mRNA低于健康人群 (P < 0.05),完全治愈组和缓解组中CD28 mRNA表达与健康人群差异无显著性意义。说明急性髓细胞白血病患者外周血单个核细胞存在CD28 mRNA表达缺陷,并与临床分期、病情进展及预后有关。     

急性髓系白血病干细胞研究进展

急性髓系白血病干细胞多数亚型的干细胞具有相似的免疫表型(CD34+、Cd38-、CD90-、CD117-、CD123+),表达核因子NF-KB。急性髓系白血病干细胞对化疗和放疗均不敏感,是急性髓系白血病复发的原因之一。选择急性髓系白血病干细胞高表达的抗原CD123或核因子NF-KB,作为清除急性髓系白血病干细胞或诱导急性髓系白血病干细胞凋亡的标记,是探索彻底治愈急性髓系白血病的最佳途径。     

高白细胞性急性白血病临床表现与免疫表型研究

目的分析、比较各型高白细胞性急性白血病患者临床症状和白细胞分化的免疫表型,为该疾病的诊断、预后等提供依据。方法采用流式细胞术,对高白细胞性急性淋巴细胞性白血病(HLALL)和高白细胞性急性骨髓系白血病(HLAML)(共25例)、非高白细胞性急性淋巴细胞性白血病(NHLALL)和非高白细胞性急性髓系白血病(NHLAML)(共85例)的临床表现及免疫表型做比较分析。结果与NHLA比较,HLAL发病呈现急性及髓外发展的临床特征;对白血病细胞表面免疫学标记研究发现CD13和CD33为髓系细胞较特异表型,而HLALL可以同时出现多种免疫表型。结论 HLAL发病呈现急性、髓外发展且预测性差,CD33和CD13在白细胞免疫分型的髓系细胞中为较特异标志。     

端粒酶在小儿急性白血病中表达的意义

目的 探讨端粒酶在小儿急性白血病中的表达及作为预测病情，判断预后标志物的可能性。方法 采用端粒重复序列扩增-微孔杂交法（TRAP-Kyb)，检测16例急性白血病患儿骨髓和外周血单个核细胞端粒酶活性，对照组为10例非白血病血液病患儿的骨髓及5例正常健康小儿的外周血单个核细胞，结果 16例急性白血病患儿表达阳性率83.1%)；10例非白血病血液病患儿有2例呈低度阳性表达，5例正常健康小儿外周血单个核细胞中未见阳性表达。结论 端粒酶活性在急性白血病患儿骨髓和外周血单个核细胞中明显升高，表明端粒酶的活性与急性白血病的发生可能有着密切关系。检测其活性可能成为一种评估急性白血病病情及预后的有用指标。     

急性髓系白血病干细胞研究进展

急性髓系白血病干细胞多数亚型的干细胞具有相似的免疫表型(CD34 、Cd38-、CD90-、CD117-、CD123 )，表达核因子NF—κB。急性髓系白血病干细胞对化疗和放疗均不敏感，是急性髓系白血病复发的原因之一。选择急性髓系白血病干细胞高表达的抗原CD123或核因子NF—κB，作为清除急性髓系白血病干细胞或诱导急性髓系白血病干细胞凋亡的标记，是探索彻底治愈急性髓系白血病的最佳途径。     

急性髓系白血病细胞血管细胞黏附分子1、CD34和CD117的表达

背景：血管细胞黏附分子1与白血病浸润密切相关,白血病细胞本身是否表达血管细胞黏附分子1,以及与疾病难治是否相关尚无定论。 目的：分析血管细胞黏附分子1、CD34、CD117在急性髓系白血病细胞表面的表达,3者之间的相互关系及与难治性急性髓系白血病的相关性。 方法：采用流式细胞技术检测16例急性髓系白血病细胞中血管细胞黏附分子1、CD34、CD117的表达,其中难治组6例,非难治组10例;同时以正常骨髓单个核细胞标本作对照。 结果与结论：急性髓系白血病细胞CD34、CD117表达高于对照组(P < 0.05)。难治组急性髓系白血病细胞CD34表达明显高于非难治组(P < 0.05)。难治组与非难治组CD117表达差异无显著性意义(P > 0.05)。急性髓系白血病细胞血管细胞黏附分子1表达与对照组比较差异无显著性意义(P > 0.05)。难治组与非难治组血管细胞黏附分子1表达差异无显著性意义(P > 0.05)。表明急性髓系白血病细胞伴CD34表达,为不良预后指标之一,CD117、血管细胞黏附分子1表达与其是否难治无明显相关性。     

预处理不含抗胸腺细胞球蛋白非血缘脐血移植治疗急性髓系白血病和急性淋巴细胞白血病306例随访评价

背景:脐血造血干细胞移植作为急性白血病的根治手段,应用越来越广泛,但是其在不同白血病的治疗效果尚无对比,通过分疾病的疗效对比,可指导不同患者进行移植方式的选择。目的:对比分析脐血造血干细胞移植治疗急性髓系白血病和急性淋巴细胞白血病的疗效差异。方法:回顾性分析接受非血缘脐血造血干细胞移植治疗的306例急性白血病患者的临床资料,其中急性淋巴细胞白血病194例,急性髓系白血病112例。所有患者均接受不含抗胸腺细胞球蛋白的清髓性预处理方案,预防移植物抗宿主病为环孢素联合吗替麦考酚酯。结果与结论:①除了急性淋巴细胞白血病移植后的复发率比急性髓系白血病略高以外,两组患者在接受非血缘脐血移植术后的疗效基本一致;②在青少年和年轻成人组(年龄15-39岁),急性髓细胞白血病的中性粒细胞和血小板植入速率均快于急性淋巴白血病白血病,其中CD34+细胞数和预处理方案是针对中性粒细胞植入的独立影响因素,而CD34+细胞数同时也是针对血小板植入的独立影响因素,在该年龄组,急性淋巴细胞白血病患者移植后的复发率依然高于急性髓系白血病,其中慢性移植物抗宿主病是独立影响因素;③移植后免疫重建检测提示,脐血移植后4个月时急性髓系白血病患者的脐血CD8+T细胞重建要优于急性淋巴细胞白血病患者;④上述数据说明,预处理不含抗胸腺细胞球蛋白的非血缘脐血移植对于急性淋巴细胞白血病和急性髓系白血病均有良好的疗效。中国科学技术大学附属第一医院(安徽省立医院)血液科具有干细胞移植资质。     

急性淋巴细胞白血病患者GLUT3、TSLC1的表达及临床意义

目的:探讨急性淋巴细胞白血病患者葡萄糖转运蛋白-3(Glucose transporter 3,GLUT3)、肿瘤抑制物1(Tumor suppressor in lung cancer 1,TSLC1)的表达及临床意义.方法:选取2018年4月至2020年4月期间我院诊治的59例急性淋巴细胞白血病患者作为研究对象的研究组,另选取53例同期非急性淋巴细胞白血病患者作为研究对象的对照组.比较两组患者骨髓单个核细胞中GLUT3、TSLC1的表达情况,以及患者的不同临床病理特征对骨髓单个核细胞中GLUT3、TSLC1表达的影响.结果:研究组GLUT3阳性表达率高于对照组、TSLC1阳性表达率低于对照组(P<0.05);血红蛋白(异常)、白细胞计数(异常)者GLUT3阳性率明显高于血红蛋白(正常)、白细胞计数(正常)者(P<0.05).白细胞计数(异常)者TSLC1阳性率明显高于白细胞计数(正常)者(P<0.05).结论:在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞中GLUT3阳性表达率高、TSLC1阴性表达率高.     

自体外周血造血干细胞移植后序贯CIK细胞治疗急性髓系白血病

背景：细胞因子诱导的杀伤细胞作为一种有效的过继免疫治疗方法,成为治疗急性髓系白血病的一种新的手段,目前关于急性髓系白血病自体移植后序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗的报道尚少,值得进一步研究。 目的：观察急性髓系白血病M2患者自体外周血造血干细胞移植后序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗的临床疗效和不良反应。 方法：入选45例低、中危急性髓系白血病M2患者,其中19例在自体外周血造血干细胞移植后序贯了细胞因子诱导的杀伤细胞治疗,另26例未序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗,比较两组患者的复发率、无病生存率、总生存率,观察细胞因子诱导的杀伤细胞治疗的安全性。 结果与结论：①序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗组的复发率低于未序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗组(21.05%,38.46%,P < 0.05);序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗组患者的2年无病生存率和2年总生存率均高于未序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗组,差异均有显著性意义(P < 0.05)。②19例接受细胞因子诱导的杀伤细胞治疗的患者均顺利完成治疗方案,治疗过程中除4例出现寒战、发热外,无其他不良反应。结果显示低、中危急性髓系白血病M2患者自体外周血造血干细胞移植后序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗可降低原发病的复发率,提高患者的无病生存率及总生存率,且无明显不良反应,是一种安全、有效、可行的治疗方法。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

Chronic myelogenous leukemia maintains specific CD8+ T cells through IL‐7 signaling

Chronic myelogenous leukemia (CML) is a malignant myeloproliferative disease of hematopoietic stem cells. The disease progresses after several years from an initial chronic phase to a blast phase. Leukemia‐specific T cells are regularly detected in CML patients and may be involved in the immunological control of the disease. Here, we analyzed the role of leukemia‐specific CD8⁺ T cells in CML disease control and the mechanism that maintains CD8⁺ T‐cell immunosurveillance in a retroviral‐induced murine CML model. To study antigen‐specific immune responses, the glycoprotein of the lymphocytic choriomeningitis virus was used as model leukemia antigen. Leukemia‐specific CTL activity was detectable in vivo in CML mice and depletion of CD8⁺ T cells rapidly led to disease progression. CML‐specific CTL were characterized by the expression of the IL‐7 receptor α‐chain. In addition, leukemia cells produced IL‐7 that was crucial for the maintenance of leukemia‐specific CTL and for disease control. Therefore, CML cells maintain the specific CD8⁺ T‐cell‐mediated immune control by IL‐7 secretion. This results in prolonged control of disease and probably contributes to the characteristic chronic phase of the disease.     

急性髓系白血病干细胞NOD/SCID小鼠白血病模型的建立

目的探讨用非肥胖型糖尿病/严重联合免疫缺陷（NOD/SCID）小鼠和经流式细胞仪分选出的KG1a中CD34＋CD38-的干细胞亚群建立白血病干细胞（LSCs）动物模型,为靶向治疗LSCs的药物筛选奠定体内实验基础。方法 18只雌性NOD/SCID小鼠,体质量18～20 g,鼠龄6～8周龄。实验组12只,应用流式细胞仪分选KG1a细胞中具有LSCs特性的CD34＋CD38-亚群,以2×106个/只尾静脉注射经全身X射线照射2Gy的NOD/SCID小鼠;正常对照组6只,只注射磷酸盐缓冲溶液。观察两组小鼠的一般情况和白血病发生情况,应用形态学、组织病理检查、流式细胞术、骨髓染色体检查等检测实验组小鼠的外周血、骨髓、肝脏、脾脏的白血病细胞标志。结果接种2周后实验组小鼠外周血可见白血病细胞,接种30 d实验组小鼠的白血病发病率为100%,无自发缓解;外周血、骨髓、肝、脾中均可发现大量的白血病细胞浸润;实验组小鼠骨髓细胞中CD13抗原阳性率15.47%～23.66%,并可见KG1a细胞的核型特征。结论尾静脉接种流式细胞仪分选后的CD34＋CD38-KG1a细胞于全身亚致死量X射线照射后的NOD/SCID小鼠,能成功建成全身播散的白血病模型,为进一步研究LSCs的靶向治疗药物奠定实验基础。     

The cell of origin and the leukemia stem cell in acute myeloid leukemia

There is experimental and observational evidence that the cells of the leukemic clone in acute myeloid leukemia (AML) have different phenotypes even though they share the same somatic mutations. The organization of the malignant clone in AML has many similarities to normal hematopoiesis, with leukemia stem cells (LSCs) that sustain leukemia and give rise to more differentiated cells. LSCs, similar to normal hematopoietic stem cells (HSCs), are those cells that are able to give rise to a new leukemic clone when transplanted into a recipient. The cell of origin of leukemia (COL) is defined as the normal cell that is able to transform into a leukemia cell. Current evidence suggests that the COL is distinct from the LSC. Here, we will review the current knowledge about LSCs and the COL in AML.     

CD317 is over-expressed in B-cell chronic lymphocytic leukemia,but not B-cell acute lymphoblastic leukemia

CD317 was first identified as a multiple myeloma-associated antigen. Here we report the expression of CD317 in normal B cells and B-cell malignancies. In normal bone marrow, CD317 demonstrates a biphasic expression pattern, with higher expression on stage 1 and stage 3 hematogones, but not on stage 2 hematogones. CD317 is over-expressed in B-cell chronic lymphocytic leukemia, and appears associated with negative CD38 expression. Moreover, CD317 is barely detectable in B-cell acute lymphoblastic leukemia. Our results suggest that CD317 expression might be of prognostic significance for B-CLL, and CD317 could be used as a new marker for minimal residual disease detection in B-ALL.     

The use of PCR technology for detecting minimal residual disease in patients with leukemia

The study of minimal residual disease (MRD) aims to understand the biology and clinical significance of leukemia that persists in patients who are in complete pathologic remission. The detection of MRD most consistently has been associated with subsequent relapse in childhood acute lymphoblastic leukemia (ALL), t(15;17) acute myeloid leukemia (AML) and chronic myeloid leukemia (CML) following marrow transplantation. However, in several settings, MRD has been detected in patients enjoying long-term remission. The study of MRD is thus evolving from identifying patients at high risk of relapse to explaining how leukemia can persist for years in an otherwise "cured" patient.     

Comprehensive flow cytometry phenotype in acute leukemia at diagnosis and at relapse

Li X, Du W, Liu W, Li X, Li H, Huang S‐A. Comprehensive flow cytometry phenotype in acute leukemia at diagnostic and at relapse. APMIS 2010; 118: 353–59. Multiparameter flow cytometry (MFC) plays a vital role in the detection of minimal residual disease (MRD) and diagnosis of relapse in acute leukemia. However, application of a limited panel of antibodies in MFC leads to high rates of false‐negative and false‐positive results. Thirteen patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL) and 12 patients with acute myeloid leukemia (AML) were immunophenotyped by MFC at diagnosis and at relapse using a comprehensive panel of monoclonal antibodies (McAbs) to 27 antigens and CD45/SSC gating. In 23 of 25 patients (92.3%), changes in at least one of progenitor‐associated, myeloid and lymphoid antigens between diagnosis and relapse were observed. Antigen changes were observed in 92 of 239 antigens (38.5%) expressed in 25 patients, in 49 of 117 antigens (41.9%) expressed in 13 ALL patients, and in 43 of 122 antigens (35.2%) expressed in 12 AML patients. Phenotypic changes were characterized by the expression of cross‐lineage antigens. The intralineage change was observed in the majority of patients. However, myeloid lineage shift was identified by MFC in two patients with T‐ALL. Multiple panels of three or more McAbs are likely to be required in the monitoring of MRD and diagnosis of relapse in acute leukemia by MFC.     

老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4+CD25+调节性T细胞的表达

背景：研究证实,很多恶性肿瘤患者体内CD4⁺CD25⁺调节性T细胞存在高表达,近期也有研究发现,急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺调节性T细胞同样表现出高比例表达。 目的：分析老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞的表达特点。 方法：纳入初诊急性髓细胞白血病患者92例,将年龄在60岁以下者设为中青年组(n=22),年龄在60岁以上者设为老年观察组(n=70)。在老年观察组中,32例经规范化疗后完全缓解,设为完全缓解组;将余下38例设为老年组,依据FAB分型标准,分为M2 6例、M3 19例、M4 7例、M5 6例。另选择同期体检健康人群42名作为正常对照组。抽取受试者外周静脉血,检测CD4⁺CD25⁺调节性T细胞表达情况。 结果与结论：老年组、完全缓解组CD4⁺CD25^highFOXP3⁺调节性T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组、完全缓解组CD4⁺FOXP3⁺T细胞比例高于正常对照组(P < 0.01),并且老年组CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于完全缓解组(P < 0.01)。老年组CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞与CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例高于中青年组(P < 0.01)。老年组不同分型间CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例比较差异均无显著性意义(P > 0.05)。Pearson相关性检验结果显示,老年初诊急性髓细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25^high FOXP3⁺调节性T细胞比例和CD4⁺ FOXP3⁺T细胞比例呈正相关(r=0.87,P=0.019)。表明老年初诊急性髓细胞白血病患者CD4⁺CD25⁺调节性T细胞比例高于健康人群和中青年急性髓细胞白血病患者。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

单倍体相合异基因造血干细胞移植治疗白血病

背景：对于无HLA全相合同胞供者的患者,采用单倍体相合造血干细胞移植面临移植物抗宿主病重、移植相关死亡率高的风险,但通过不同的移植模式,将有可能获取相近的疗效。 目的：观察亲缘HLA单倍体相合异基因造血干细胞移植治疗白血病的疗效,并与亲缘HLA全相合异基因造血干细胞移植相比较。 方法：45例白血病患者分为2组。单倍体组移植方式为外周血或联合骨髓干细胞移植,预处理方案为改良白消安与环磷酰胺或加抗胸腺细胞球蛋白,移植物抗宿主病的预防采用环孢素A+甲氨蝶呤+霉酚酸脂;全相合组移植方式为外周血干细胞移植,预处理方案为BuCY,移植物抗宿主病的预防采用环孢素A+甲氨蝶呤。 结果与结论：两组均获得造血重建时间差异无显著性意义。单倍体及全相合组急性移植物抗宿主病的累积发病率分别为73%对52%(P > 0.05);慢性移植物抗宿主病的累积发病率分别为56%对45%(P > 0.05);移植相关死亡率分别为36%对17%(P > 0.05);单倍体组无复发,全相合组复发2例;两组的预计3年累积无病生存率分别为61%对60%(P > 0.05)。结果提示,亲缘单倍体异基因造血干细胞移植的总体疗效与亲缘全相合异基因造血干细胞移植相似,但中重度急性移植物抗宿主病的发生率较后者为高。     

荧光原位杂交技术检测慢性粒细胞白血病微小残留病

目的 研究应用荧光原位杂交技术(FISH)检测慢性粒细胞白血病微小残留病，及用FISH技术对缓解期慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血进行检测，评价其体内微小残留病的意义。方法 应用CG和I-FI舛对30例CML(13例给予化疗、17例移植后)患者初发和／或缓解期的骨髓及外周血标本进行分析，分别检测Ph染色体和BCR/ABL融合基因的存在。结果 对13例临床给予化疗的患者初发期的外周血和骨髓进行CG分析，Ph检出率分别为15％(2／13)、100％(13／13)。同时进行I-FISH分析，均可检出BCR/ABL融合基因。对初发期骨髓的CG、I-FISH分析结果进行统计学分析，两组无显著差异；对外周血的CG、I-FISH分析结果进行统计学分析，两组有显著差异。对其缓解期骨髓CG、I-FISH分析结果进行统计学分析，两组有显著差异；对缓解期外周血CG、I-FISH结果进行统计学分析，两组有显著差异；对缓解期外周血I-FISH和骨髓I-FISH结果进行统计学分析，两组呈显著相关。对17例移植后患者CG、I-FISH结果进行统计学分析，两组有显著差异。结论 FISH技术检测慢性粒细胞白血病微小残留病敏感性大大高于常规细胞遗传学分析；采集缓解期外周血进行荧光原位杂交分析，可作为一种方便易行的手段评价微小残留病。