食管鳞癌和转移淋巴结组织中CDla和CD83的表达及其临床意义

目的:探讨食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)和转移淋巴结组织中CD1a和CD83的表达及其与ESCC临床病理特征间的关系.方法:选取河北医科大学第四医院胸外科2002年5月至2003年12月间手术切除并经病理确诊的78例ESCC石蜡标本,采用流式细胞术检测78例ESCC、24例正常食管黏膜、35例正常淋巴结和32例转移淋巴结组织中CD1a和CD83的表达.结果:(1)ESCC组织中CD1a和CD83的表达量明显低于正常黏膜CD1a和CD83的表达量(均P＜0.05).(2)CD1a表达量与癌组织浸润深度、临床分期、分化程度及淋巴结转移无相关性(均P＞0.05);CD83表达量与ESCC 临床分期及淋巴结转移有关(P＜0.05).(3)转移淋巴结组织中CD1a表达量与正常淋巴结无显著性差异(P＞0.05);转移淋巴结组织中CD83表达量显著低于正常淋巴结组织(P＜0.05).结论:ESCC组织中CD83的表达量反映ESCC局部免疫状态,在ESCC的发生、发展过程中具有重要作用,可作为评价食管癌生物学行为的指标.     

食管鳞癌淋巴结转移与临床病理因素及CD24、CD133表达关系

[目的]探讨食管鳞癌（ESCC）淋巴结转移（LNM）与临床病理因素和CD24、CD133表达的关系。[方法]应用免疫组化SP法检测40例食管鳞癌（LNM阳性组与阴性组各20例）标本中CD24、CD133蛋白表达情况,并分析LNM与相关临床病理资料的关系。[结果]ESCC的LNM与浸润深度、分化程度、TNM分期显著性相关（P均〈0.05）。CD24、CD133的表达与LNM转移也密切相关（P〈0.05）。CD24与CD133在ESCC中的表达呈正相关（r=0.797,P=0.000）。[结论]ESCC的LNM与浸润深度、分化程度及TNM分期密切相关。CD24、CD133可能与ESCC的LNM相关,联合检测两者的表达情况对预测ESCC的LNM及预后有一定意义。     

食管癌组织中上皮钙黏素、CD44v6和血管内皮生长因子C 表达与淋巴结转移的关系

 目的　探讨上皮钙黏素（E-cad）、CD44v6和血管内皮生长因子C（VEGF-C）在食管癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法　应用免疫组织化学EnVision两步法,检测56例食管鳞状细胞癌（鳞癌）组织（区域淋巴结转移组32例,非转移组24例）和12例食管切缘正常黏膜组织中E-cad、CD44v6和VEGF-C的表达情况。结果　E-cad在56例食管鳞癌组织中的阳性表达率为55.4 %（31／56）,显著低于食管切缘正常黏膜组织的100.0 %（12／12）（P＜0.05）;CD44v6和VEGF-C在食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为71.4 %（40／56）和62.5 %（35／56）,显著高于食管切缘正常黏膜组织的25.0 %（3／12）和16.7 %（2／12）（P＜0.05）;E-cad在区域淋巴结转移组阳性表达率为31.3 %（10／32）,明显低于非转移组的87.5 %（21／24）（P＜0.05）;CD44v6和VEGF-C在区域淋巴结转移组阳性表达率分别为84.4 %（27／32）和75.0 %（24／32）明显高于非转移组54.2 %（13／24）和45.8 %（11／24）（P＜0.05）;E-cad表达与食管癌淋巴结转移呈负相关,CD44v6和VEGF-C表达与淋巴结转移呈正相关,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　E-cad、CD44v6、VEGF-C在食管鳞癌淋巴结转移过程中起重要作用,联合检测有助于判断食管癌的生物学行为和预后。     

CD1a与CD83标记肿瘤浸润性树突状细胞在乳腺癌中的表达及相关性研究

目的 探讨CD1a和CD83标记的肿瘤浸润性树突状细胞（TIDC）在乳腺组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法 采用免疫组织化学法检测85例乳腺癌组织中CD1a、CD83的表达情况,探讨其与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。结果 在85例乳腺癌组织中,77例CD1a阳性,大多数表达CD1a的TIDC分布在肿瘤组织中,肿瘤间质及周边组织中表达较少;44例CD83阳性,表达CD83的TIDC多分布在肿瘤周边及间质组织,呈散点状分布。CD1a、CD83均为阳性表达（双阳性）35例。CD1a、CD83双阳性表达与淋巴结转移、孕激素受体（PR）、中性粒细胞-淋巴细胞比值（NLR）无关（P＞0.05）,而与雌激素受体（ER）、表皮生长因子受体（HER-2）、TNM分期有关（P＜0.05）。CD1a、CD83双阳性表达和非双阳性表达患者的中位无病生存期（DFS）均未达。Cox多因素回归分析显示, CD1a、CD83非双阳性表达是影响DFS的独立因素（HR=2.216,95％CI：1.682～3.431;P＜0.05）。结论 乳腺癌组织中TIDC的特征性标记物CD83、CD1a表达是影响DFS的独立因素,这可能与肿瘤免疫逃逸机制有关,可以作为乳腺癌预后的参考指标。     

食管鳞癌中CD151、ERK1/2及血管生成拟态的表达及临床意义

摘 要：［目的］ 研究组织分化抗原151（CD151）及细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）在食管鳞状细胞癌（ESCC）中的表达情况,分析两者表达与血管生成拟态（VM）的相关性。［方法］ 选取100例存档石蜡包埋ESCC组织标本作为观察组和50例癌旁（≥5cm）正常食管组织作为对照组,采用免疫组织化学ElivisionTM plus法检测ESCC中CD151及ERK1/2的表达,运用CD34/PAS双染检测食管癌中VM存在情况;并用Kaplan-Meier法分析VM与预后的关系。［结果］ 观察组CD151（82%）、ERK1/2（75%）蛋白阳性表达率及VM存在率（29%）均明显高于对照组（10%、36%、8%）（P均＜0.05）。CD151蛋白表达与ESCC的浸润深度、淋巴结转移、临床分期、分化程度有关（P均＜0.05）;ERK1/2蛋白表达与ESCC 的淋巴结转移、临床分期、分化程度有关（P均＜0.05）;ERK1/2在CD151阳性组的表达明显高于CD151阴性组,且两者表达呈正相关（r=0.451,P<0.001）;CD151和ERK1/2表达均与VM存在呈正相关（r=0.299,P=0.002;r=0.318,P=0.001）。Kaplan-Meier生存分析显示有VM组与无VM组5年生存率分别为10.3%和50.7%（P＜0.05）。Cox多因素回归分析显示：浸润深度、临床分期、VM存在是食管鳞癌患者术后5年生存率的独立影响因素（P均＜0.05）。［结论］ CD151、ERK1/2在食管鳞癌的发生及发展中具有重要作用,可能通过VM的形成,影响食管鳞癌的发生发展、转移及预后。     

CD44v6和MMP-9蛋白在食管鳞癌组织中的表达和在侵袭转移中的作用

目的探讨CD44v6和MMP-9蛋白在食管鳞癌发生、发展、浸润和转移过程中的表达、作用及两者相关性。方法采用免疫组化法检测73例食管鳞癌组织和其癌旁正常食管黏膜组织中CD44v6和MMP-9蛋白的表达,探讨两者与食管鳞癌临床病理特征的关系。结果 CD44v6和MMP-9蛋白在73例食管鳞癌组织中呈明显高表达,在正常食管黏膜组织中低表达,差异有统计学意义（P〈0.05）;CD44v6和MMP-9蛋白表达与食管鳞癌的分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关（P〈0.05）;食管鳞癌癌组织中CD44v6和MMP-9蛋白的表达呈正相关（r=0.397,P〈0.05）。结论 CD44v6和MMP-9蛋白在食管鳞癌组织中呈高表达,两者可能共同参与了食管鳞癌的发生、发展、浸润和转移过程。     

食管癌组织及其区域淋巴结中树突细胞CD1a、CD80、CD86的表达

背景与目的:树突细胞(dendriticcell,DC)是重要的抗原提呈细胞,参与抗肿瘤免疫。本研究通过检测人食管癌组织及其区域淋巴结中树突细胞CD1a(特异性标志)、CD80、CD86(共刺激分子)的表达,探讨食管癌发生及其免疫逃逸的机制。方法:采用流式细胞术检测58例食管癌病例(Ⅰ-Ⅱ期27例,Ⅲ-Ⅳ期31例;G1-237例,G321例;鳞癌49例,腺癌9例;有淋巴结癌转移者37例,无淋巴结癌转移者21例)的癌组织及癌旁组织、11例食管炎性组织、12例正常食管组织、31枚有癌转移的区域淋巴结、34枚无癌转移的区域淋巴结中树突细胞CD1a及CD80、CD86的表达。结果:(1)树突细胞CD1a、CD80、CD86的表达在食管癌组织中(6.18±1.47,5.37±1.13,37.35±7.42)明显低于正常食管组织(10.28±2.11,9.67±1.94,48.76±10.23)、食管炎性组织(11.89±2.65,10.46±1.79,51.55±10.60)及癌旁组织(11.79±2.41,10.49±1.89,9.78±12.31)中的表达(P<0.01);(2)树突细胞CD1a、CD80、CD86的表达在食管癌患者有癌转移的区域淋巴结中的表达(8.34±1.66,6.78±1.42,41.70±8.71)明显低于无癌转移的淋巴结中的表达(12.23±2.14,10.82±2.11,59.63±12.52)(P<0.01);(3)癌旁组织及食管炎性组织中树突细胞CD1a、CD80、CD86的表达与正常食管组织中的表达的差异无统计学     

CD44和CD8^＋T细胞在膀胱癌的表达及其临床病理意义

目的：探讨膀胱癌组织中CD44蛋白和CD8阳性T细胞表达与膀胱癌病理分级和临床分期的关系。方法：应用免疫组织化学sP法检测10例正常膀胱组织、10例炎症膀胱组织和67例不同级别膀胱癌组织中CIM4蛋白和CD8阳性T细胞的表达。结果：CD44在正常黏膜的基底细胞层表达,强度中等,CD8在正常黏膜基底细胞层弱表达;CD44和CD8阳性T细胞在膀胱炎症中高表达,与正常组织差异明显（P〈0．05）。在膀胱癌中,CD44和CD8的表达均与分化程度和肿瘤分期有关（P〈0．05）,CD8的表达与CD44的表达呈正相关（P〈0．01）。结论：CD8与CD44在膀胱癌的发生发展、浸润转移中密切相关,同步检测二者在膀胱癌组织中的表达并综合分析两者之间的关系对评价膀胱癌的侵袭转移能力判断具有一定价值。     

VEGF和CD44表达与乳腺癌分期的相关性研究

目的：研究血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和CD44在不同分期乳腺癌中的表达及其相互关系。方法：共收集79例手术标本和12例正常乳腺组织,用免疫组织化学法（S-P法）检测,用免疫组化图象分析系统进行结果处理。结果：乳腺癌中VEGF和CD44的表达水平与正常乳腺组织相比差异具有显著性（P〈0.05）;Ⅰ期与Ⅱ期及Ⅲ期之间相比,VEGF和CD44的表达水平差异同样具有显著性,并且随分期越晚表达越强（P〈0.05）;不同细胞类型之间的差异无显著性（P〉0.05）,而与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移、远处器官转移以及肿瘤的TNM分期密切相关（P〈0.05）。结论：VEGF与CD44的表达水平与乳癌分期成正相关,在排除创伤和炎症的前提下,可能提示肿瘤的活跃生长以及潜在转移。     

食管鳞癌组织和淋巴结中Paxillin 和survivin的表达及其意义

 目的 研究Paxillin和survivin在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌细胞发生发展与转移的关系。方法 应用免疫组化SP法检测24例正常食管黏膜、94例食管鳞癌和83例淋巴结组织中sur-vivin和Paxillin的表达情况。结果 原发癌组织中Paxillin表达率与淋巴结转移（P〈0.05）、浸润深度（P〈0.01）和临床分期（P〈0.01）等因素有关;原发癌组织中survivin与浸润深度有关（P〈0.01）;原发癌组织和转移淋巴结组织中Paxillin和survivin表达率均高于无转移淋巴结组织（P〈0.05）;Paxillin和survivin在淋巴结中表达成正相关性（P〈0.05）。结论 Paxillin和survivin在食管鳞癌组织和转移淋巴结中高表达,在食管鳞癌的发生发展过程中具有重要作用,可作为评价食管鳞癌生物学行为的指标。     

CD19和CD22双靶点CAR-T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用

目的：设计并制备一种分别靶向B细胞表面抗原CD19和CD22的CAR-T细胞,检测其对肿瘤细胞的体内外杀伤效果。方法：将含有人源化 CD19 ScFv的二代CAR分子和带有CD3ε链作为共刺激结构域的CD22 ScFv CAR分子以P2A自剪切肽连接,序列连接于慢病毒载体pLTR-CMV-MCS中,以HEK-293T细胞包装相应的慢病毒载体,感染健康志愿者提供的T细胞制备CAR-19-22-T细胞,同时以相同二代结构分别构建单靶向CAR-T细胞作为参照。构建表达荧光素酶、CD19和/或CD22的前列腺癌3M细胞（靶细胞）。将各种CAR-T细胞与靶细胞共同培养,采用荧光素酶化学发光法和ELISA法检测其对靶细胞的杀伤能力和细胞因子的分泌水平。通过尾静脉注射Raji-Luc细胞构建NOD-SCID免疫缺陷小鼠白血病模型,分别注射各组CAR-T细胞进行治疗并评估其疗效。结果：培养7 d的CAR-19-22-T细胞的CAR-19表达率为13.7%,CAR-22表达率为14.3%。CAR-19-22-T细胞在10∶1效靶比时,对3M-CD19-Luc、3M-CD22-Luc和3M-CD19-CD22-Luc细胞的杀伤率均显著高于T细胞（[ 78.1±14.4）% vs（11.1±4.3）%、（46.7±10.7）% vs（12.4±2.7）%、（90.5±4.3）%vs（14.3±3.7）%,均P<0.01];与3M-CD19-Luc、3M-CD22-Luc、3M-CD19-CD22-Luc靶细胞共培养后,CAR-19-22-T 细胞 IFN-γ、TNF-α 和 IL-2 水平均显著低于 CAR-19-T 和 CAR-22-T 细胞（P<0.05 或P<0.01）。CAR-19-22-T细胞对移植 Raji-Luc细胞模型小鼠治疗效果明显,其生存期显著长于T细胞组（P<0.01）,与CAR-19-T组和CAR-22-T组荷瘤小鼠比较差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论：成功设计并制备了一种双靶点CAR-19-22-T细胞,其能够有效杀伤表达CD19和/或CD22抗原的肿瘤细胞,对Raji-Luc细胞的白血病模型小鼠有显著的治疗效果。     

CD146与肿瘤的关系

CD146是一种Ca^2＋非依赖性细胞黏附分子的膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族（immunoglobulin superfamily, Igsf）成员,介导细胞与细胞之间或细胞与细胞外基质之间的相互作用,有助于局部黏连聚集、细胞骨架重组、细胞间相互作用、细胞形态的维持及细胞游走和增殖的调控.近来研究发现,CD146在许多恶性肿瘤组织中高表达,提示CD146可能在肿瘤发生发展及转移中起重要作用,可作为肿瘤预后判断的参考指标.     

Ex vivo isolation,expansion and bioengineering of CCR7+CD95-/or CD62L+CD45RA+ tumor infiltrating lymphocytes from acute myeloid leukemia patients’ bone marrow

T cell based immunotherapies can be applicable to acute myeloid leukemia (AML). Therefore, the selection of optimal T cells, cell manufacturing, and therapeutic T cell engineering are essential for the development of effective adoptive T cell therapies for AML. Autologous tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) have been in clinical trials to treat solid malignancies. Herein, we assessed whether TILs can be isolated from the bone marrow (BM) of AML patients, expanded ex vivo and utilized as a novel therapeutic strategy for AML. To this end, firstly we analyzed the immunophenotypes of a series of primary BM samples from AML patients (N = 10) by flow cytometry. We observed a variable amount of CD3+ TILs (range ∼2.3–∼32.6% of mononuclear cells) among BM samples. We then developed a novel protocol that produced a three-log ex vivo expansion of TILs isolated from AML patient BM (N = 10) and peripheral blood (PB) (N = 10), including from patients with a low number of CD3+ T cells, within 3, 4 weeks. Further, we identified previously described naïve T cells (CCR7+CD95-/or CD62L+CD45RA+) in AML BM and PB samples, which seemed to be required for a successful TILs ex vivo expansion. Finally, we showed that the expanded TILs could: (1) cause cytotoxicity to autologous AML blasts ex vivo (90.6% in control without T cell treatment vs. 1.89% in experimental groups with PB derived T cells and 1.77% in experimental groups with BM derived TILs, p < 0.01), (2) be genetically engineered to express CYP27B1 gene, and (3) infiltrate the BM and reside in close proximity to pre-injected autologous AML blasts of engrafted immunodeficiency mice. Altogether, these results provide a rationale for further studies of the therapeutic use of TILs in AML.     

人CD46、CD55和CD59与肿瘤免疫逃逸及免疫治疗

膜结合补体调节蛋白CD46、CD55和CD59在肿瘤细胞膜上表达或过表达,保护肿瘤细胞免受免疫系统的攻击,成为肿瘤细胞免疫逃逸的途径之一.如何下调肿瘤细胞表面三者表达或抑制其功能以增强其对补体依赖的细胞毒作用的敏感性备受关注.     

Programmed cell death ligand-1 (PD-L1) expression combined with CD8 tumor infiltrating lymphocytes density in non-small cell lung cancer patients

Cancer immunotherapy targeting programmed cell death-1/programmed cell death ligand-1 (PD-1/PD-L1) pathway has shown promising results in treatment of non-small cell lung cancer (NSCLC) patients. T cells play a major role in tumor-associated immune response. This study aimed to investigate PD-L1 expression alone and combined with CD8 tumor infiltrating lymphocytes (TILs) density in relation to clinicopathologic parameters and survival in NSCLC patients. Immunohistochemical analysis was used to evaluate PD-L1 expression and CD8 TILs density in 55 NSCLC patients. PD-L1 immunopositivity was detected in 36 (65.5%) of NSCLC cases. PD-L1 expression was significantly related to high tumor grade (p value?=?0.038) and low CD8 TILs density (p value?=?0.004), whereas no significant relations were detected between PD-L1 expression and tumor stage (p value?=?0.121), overall survival (OS) (p value?=?0.428) and progression-free survival (PFS) (p value?=?0.439). Among PD-L1/CD8 TILs density groups, PD-L1⁺/CD8^Low group was significantly associated with high tumor grade compared to PD-L1^?/CD8^high group (pairwise p?=?0.016). PD-L1⁺/CD8^Low group was significantly related to advanced tumor stage compared to PD-L1⁺/CD8^high and PD-L1^?/CD8^Low groups (pairwise p?=?0.001 and 0.013 respectively). PD-L1^?/CD8^high group exhibited the best OS and PFS whereas PD-L1⁺/CD8^low group had the poorest OS and PFS (p value?=?0.032 and 0.001 respectively). Assessment of PD-L1 combined with CD8 TILs density, instead of PD-L1 alone, suggested important prognostic relevance in NSCLC patients.     

A distinct subpopulation within CD133 positive brain tumor cells shares characteristics with endothelial progenitor cells

The cell surface marker CD133 has been proposed as a brain tumor stem cell marker. However, there have been substantial controversies regarding the necessity and role of CD133 in tumorigenesis. This study aimed to characterize CD133(+) cells in brain tumors. Human brain tumor specimens and whole blood were collected from the same patients (N=12). We carried out dual FACS staining for CD133/CD34 and functional tumorigenesis and angiogenesis analyses of CD133(+) cells from different origins. We also investigated the in vivo tumorigenic potential and histological characteristics of four distinct groups on the basis of expression of CD133/CD34 markers (CD133(+), CD133(+)/CD34(+), CD133(+)/CD34(-), and CD133(-)). CD133(+) brain tumor cells coexpressed significantly higher positivity for CD34 (70.7±5.2% in CD133(+) vs. 12.3±4.2% in CD133(-) cells, P<0.001). CD133(+) brain tumor cells formed neurosphere-like spheroids and differentiated into multiple nervous system lineages unlike CD133(+) blood cells. They showed biological characteristics of endothelial cells, including vWF expression, LDL uptake and tube formation in vitro, unlike CD133(-) brain tumors cells. Pathologic analysis of brains implanted with CD133(+) cells showed large, markedly hypervascular tumors with well-demarcated boundary. CD133(+)/CD34(-) cells produced smaller but highly infiltrative tumors. Notably, pure angiogenic cell fractions (CD133(+)/CD34(+)) and CD133(-) tumor cells did not generate tumors in vivo. Our data suggest the presence of a distinct subpopulation of CD133(+) cells isolated from human brain tumors, with characteristics of endothelial progenitor cells (EPCs).