腺苷A2A受体：机体免疫调节的重要分子

腺苷A2A受体是目前已知的四种腺苷受体（A1、A2A、A2B和A3）之一,其在免疫细胞上呈高水平表达,活化后可通过对免疫细胞功能的调控而密切参与炎性反应、免疫耐受等免疫调节。但在不同的病理条件下,A2A受体活化的免疫调节作用方向不同、产生的效应不同。因此,对该受体产生不同免疫调节作用原因及机制进行深入的研究,以有效发挥其保护作用,而避免损伤效应,将为在临床疾病的免疫治疗中合理利用A2A受体调节剂奠定基础。     

奥氮平对淀粉样β蛋白25-35诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

目的探讨奥氮平对淀粉样β蛋白25-35（Aβ25-35）诱导的PC12细胞凋亡的保护作用机制。方法以Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡，采用MTT比色分析测定细胞存活率，应用Western blot检测Aβ25-35以及奥氮平对PC12细胞Bax、Caspase-3表达的影响，结果10^-14～10^-5mol／L的Aβ25-35减低PC12细胞存活率，50μmol／L及100μmol／I。奥氮平预处理24h可提高PC12细胞存活率，相同浓度Aβ25-35奥氮平预处理组与非处理组比较差异显著（P〈0．05）；0．01、2、20μmol／L Aβ25-35处理的PC12细胞Bax表达增加，50μmol／L奥氮平预处理使0．01μmol／L和20μmol／L Aβ25-35诱导的PC12细胞Bax的表达减低（P〈O．05）；2μmol／L及20μmol／L Aβ25-35处理的PC12细胞Caspase-3的表达增高，5μmol／L奥氮平预处理能抑制其表达升高，与非预处理比较差异显著（P〈O．05）。结论奥氮平可对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用，其机制可能与抑制Bax、Caspase-3的表达有关。     

多黏菌素B拮抗内毒素活性的实验研究

目的 探讨多黏菌素B（PMB）拮抗内毒素（LPS）生物学活性的机制。方法 观察PMB（1mg／kg）对LPS（20mg／kg）攻击的脓毒症模型小鼠的保护作用；应用生物传感器技术检测PMB与LPS和活性中心类脂A（lipid A）的亲和力，动态浊度法鲎试验观察PMB对LPS（2ng／ml）的中和能力，酶联免疫吸附分析（ELISA）法检测PMB对LPS（100ng／ml）刺激的小鼠腹腔巨噬细胞（PMФ）释放肿瘤坏死因子α-（TNF-α）及白细胞介素6（IL-6）的抑制作用，逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测PMB对LPS（100ng／m）刺激的小鼠PMФ的Toll样受体4（TLR4）、TNF-α和IL-6mRNA表达的影响。结果 PMB处理小鼠3d存活率为65％，显著高于LPS组的15％（P〈0．01）；PMB与LPS和Lipid A具有高亲和力，其与二者的解离常数分别为18、9nmol／L和11．1nmol／L，对LPS具有显著的中和作用，并在蛋白和核酸水平均显著抑制LPS诱导PMФ的TNF-α、IL-6和TLR4的释放和表达。结论 PMB可能通过抑制巨噬细胞活化实现对脓毒症小鼠的保护作用，其机制可能与PMB与Lipid A结合后中和LPS的活性有关。     

反义MAPK寡核苷酸对精氨酸加压素诱导下心肌成纤维细胞一氧化氮合成增加的抑制作用

目的：探讨反义丝裂素活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase）寡核苷酸对精氨酸加压素（AVP）诱导下心肌成纤维细胞（CFs）一氧化氮（NO）合成增加的抑制作用。方法：分离培养SD仔鼠CFs，采用分光光度法和硝酸还原酶法测定CFs一氧化氮合酶（NOS）活性和NO含量。结果：AVP显著提高CFs NOS活性和NO含量；反义MAPK寡核苷酸剂量依赖性地抑制AVP诱导下CFs NOS活性增高和NO含量增加，其中0．2μmol／L和0．3μmol／L反义MAPK寡核苷酸可将AVP诱导下CFs NOS活性和NO含量抑制到与对照组近似水平。结论：MAPK参与了AVP诱导下CFs NOS活性增高和NO含量增加，MAPK激酶有可能成为阻断或逆转心肌纤维化新的作用靶点。     

阿魏酸钠对抗Aβ_（25-35）诱导的鼠神经元凋亡作用研究

目的探讨阿魏酸钠对β淀粉样蛋白（Aβ25-35）通过谷氨酸诱导的鼠皮层神经元凋亡的影响。方法 培养的皮层神经元分别与谷氨酸（20μmol/L）、Aβ25-35（5μmol/L）、Aβ25-35（5μmol/L）＋谷氨酸（20μmol/L）孵育,采用Hoechst 33258荧光染色法分析神经细胞凋亡;然后用谷氨酸（50μmol/L）诱导神经元凋亡,采用荧光染色法和Western blot观察阿魏酸钠的保护作用。结果单独应用Aβ25-35（5μmol/L）和单独加入谷氨酸（20μmol/L）引起的皮层神经元凋亡率与对照组无明显差异;Aβ25-35与皮层神经元共同孵育5天,接着用谷氨酸处理24h,细胞凋亡率从正常的9.2%±1.5%增加到43%±8%;阿魏酸钠能够显著降低谷氨酸诱导的神经细胞凋亡百分比至21%±5%,并对抗谷氨酸引起的Bcl-2蛋白表达的降低。结论阿魏酸钠能够减弱Aβ25-35提高谷氨酸毒性诱导的鼠皮层神经元凋亡。     

杀菌性/通透性增加蛋白模拟肽与LPS/Lipid A的亲合力测定

为测定杀菌性／通透性增加蛋白（BPI）模拟肽BNEP与LPS／LipidA结合的亲合力，以探索BNEP中和LPS／Lipid A的作用机制，应用光学生物传感顺技术测定BNEP与LPS／Lipid A结合的亲合力，采用定量鲎基质显色法测定BNEP体外中和LPS的能力，结果发现，BNEP与LPS和Lipid A均具有高亲合力结合的能力，与LPS结合的Kd值为25．8－48．8nmol/L,与LipidA者为11．8－21．8nmol/L，体外中和LPS的结果显示，8ug/ml的BNEP可完全中和2ng/ml的LPS，说明BNEP与LPS和Lipid A均具有高亲合力的结合，结合位点为LPS的活性中心Lipid A亲水和二糖母核骨架，BNEP对LPS的结合作用与其发挥对LPS的中和作用是一致的。     

环孢霉素A阻断刀豆蛋白A肝损害肝细胞表达一氧化氮合酶的研究

以刀豆蛋白A（ConA）诱发的小鼠肝损害为实验模型，观察环孢霉素A（CsA）对肝细胞表达一氧化氮合酶（NOS）的影响。结果显示，对照组小鼠肝细胞未见NOS表达；ConA诱发肝损害后，肝细胞大量表达NOS，且越造近中央静脉的肝细胞表达赵多；用CsA预先抑制T细胞活化，则肝细胞表达NOS亦同时被阻断。上述实验结果提示，肝细胞表达NOS可能是对缺血缺氧的自身保护性反应，CsA通过抑制T细胞活化而阻断肝细胞表达NOS。     

NMDA受体NR1a与NR2A亚单位重组体在HEK-293细胞的功能表达

目的 :建立表达大鼠NMDA(N methyl D aspartate)受体NR1a与NR2A亚单位重组体的细胞模型 ,研究其生物学及药理学特性。方法 :利用脂质体转染方法将大鼠NR1a与NR2A亚单位重组体共转染到HEK 2 93细胞中 ,在细胞培养 4 8～ 72h后 ,利用膜片钳全细胞记录技术 ,观察和分析L 谷氨酸诱发的NMDA受体电流。结果 :向转染后的HEK 2 93细胞表面喷射NMDA受体激动剂L 谷氨酸可在 38%细胞上诱发出瞬时内向电流 ,该电流可被NMDA受体选择性拮抗剂D AP5 (5 0 μmol/L)完全阻断。L 谷氨酸诱发的电流具有快速失敏的动力学特征和内向整流特性 ,衰减时间常数 (τ值 )为 (5 3± 9)ms(n =2 0 )。L 谷氨酸诱发电流的EC50 值为 (8.5± 0 .5 ) μmol/L。 结论 :成功地将NR1a与NR2A亚单位转染入HEK 2 93细胞并形成NMDA受体的功能性表达 ,为进一步深入研究NMDA受体不同亚单位组成与其功能的关系及其药理学特性奠定了基础。     

异丙酚对N-甲基-D-天冬氨酸致PC12细胞损伤时氨基酸水平的影响

目的 观察静脉麻醉药异丙酚对N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）致PC12细胞损伤时氨基酸水平的影响，并探讨异丙酚细胞保护作用的可能机制。方法 建立300μmol／L NMDA诱导的PC12细胞损伤模型，采用高效液相色谱分析法测定PC12细胞氨基酸含量。结果300μmol／L NMDA处理4h可使PCI2细胞谷氨酸含量明显增加，但对天冬氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸含量无明显影响；12．5和125μmol／L异丙酚与300μmol／L NMDA同时处理PCI2细胞4h后，谷氨酸含量较单纯NMDA组明显降低（P〈0．05）。结论 异丙酚可明显抑制NMDA诱导PC12细胞损伤所致的谷氨酸合成或释放，提示异丙酚可能通过抑制谷氨酸的合成或释放而产生细胞保护作用。     

白英水提物诱导人卵巢癌A2780细胞bcl-2基因表达的影响

目的：观察白英水提物诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡的作用,初步探讨其分子机制。方法：常规方法制备白英水提物,体外培养人卵巢癌A2780细胞,MTT法提示其有较强的体外抑制A2780细胞作用。采用半定量RT—PCR法检测凋亡相关基因bcl-2表达。实验组设白英水提物12．5、25．0、50．0mg／ml 3种浓度,以顺铂（25．0μg／ml）为阳性对照组。结果：白英水提物对A2780细胞增殖有抑制作用,且呈明显的量效关系,半定量RT—PCR法检测显示bcl-2 mRNA表达下调,诱导其发生凋亡。结论：白英水提物对A2780细胞有较强的增殖抑制和诱导凋亡作用,其诱导A2780细胞凋亡的分子机制可能与下调bcl-2基因表达有关。     

IFN-γ预处理骨髓间充质干细胞及其抑制小胶质细胞 活化作用的影响

 目的 探讨干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)预处理大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)及其抑制脂多糖(lipopolysaccharide ,LPS)诱发的小胶质细胞(microglia,MG)活化作用的影响。方法 采用全骨髓贴壁法分离培养大鼠BMMSCs,利用含100 ng/ml 的IFN-γ完全培养液对BMMSCs进行预处理;利用LPS(10μg/ml)诱导大鼠小胶质细胞活化。小胶质细胞分离纯化后,以1×10⁵/孔种植于6孔板中,按以下分组将小胶质细胞和BMMSCs以直接接触的方式进行共培养24h:B组(单纯BMMSCs组)、L+B组(LPS+ BMMSCs组)、I+B组(IFN-γ预处理BMMSCs组)、L+I+B组(LPS+IFN-γ预处理BMMSCs组)、M组(单纯MG组)、L+M组(LPS+MG组)、B+L+M组(BMMSCs+LPS+MG组)、I+B+L+M组(IFN-γ预处理BMMSCs+LPS+MG组)。采用ELISA技术检测培养液上清TNF-α、IL-1β水平,免疫荧光法检测小胶质细胞表面标记物CD68表达。结果 L+M组小胶质细胞CD68表达增高,分泌TNF-α、IL-1β含量明显增多;B+L+M组以及I+B+L+M组的小胶质细胞CD68表达水平、TNF-α、IL-1β分泌量低于L+M组,且B+L+M组与I+B+L+M组相比有统计学差异(P＜0.05)。结论 BMMSCs和IFN-γ预处理的BMMSCs均可以直接接触的方式抑制LPS诱发的小胶质细胞的活化且经IFN-γ预处理后的BMMSCs对小胶质细胞活性抑制作用更强。     

α晶体蛋白对LPS刺激及视神经损伤后大鼠视网膜小胶质细胞增殖及数量的影响

目的 研究α晶体蛋白对大鼠视网膜小胶质细胞增殖能力及视神经损伤后小胶质细胞数量的影响.方法 脂多糖激活离体培养视网膜小胶质细胞,模拟视神经损伤,采用MTF分析α晶体蛋白对激活的小胶质细胞增殖能力的影响;建立大鼠视神经不全损伤模型,损伤后玻璃体腔注射α晶体蛋白,采用视网膜铺片及免疫荧光标记小胶质细胞并计数,比较不同组小胶质细胞的数量.结果 10-g/L～10-2 g/L浓度的脂多糖均可激活小胶质细胞(P＜0.05),10-6g/L和10-4g/L浓度的α晶体蛋白可明显抑制10-6g/L浓度的脂多糖激活的小胶质细胞的增殖;视神经损伤1～3周,α晶体蛋白注射组小胶质细胞的数量明显少于损伤组(P＜0.05).结论 α晶体蛋白可抑制视网膜上小胶质细胞的增殖和活化,减轻小胶质细胞对RGCs的过度吞噬和继发性损害,可能是视神经损伤后α晶体蛋白问接保护RGCs存活的另一机制.     

New insights on flow-independent mechanisms of 99mTc-HMPAO retention in nervous tissue: in vitro study.

SPECT using 99mTc-hexamethyl propyleneamine oxime (HMPAO) mainly reflects regional cerebral blood flow, however metabolic abnormalities also affect the retention of 99mTc-HMPAO. METHODS: To rule out any flow factor, a test-tube model was used to evaluate the effects of metabolic alterations both on intracellular trapping of 99mTc-HMPAO and on extracellular glutamate and lactate dehydrogenase (LDH) outflow from rat brain slices. RESULTS: Under control conditions, slices took up 7.0%+/-1.4% of 99mTc-HMPAO contained in the medium, whereas prelabeled slices released 10.8%+/-2.6% of their radioactive content; glutamate and LDH outflow were 49.1+/-21.6 pmol/mg protein/ min and 4.8+/-0.9 U/L/mg protein/min, respectively. The control medium was altered by adding a metabolic poison (5 mmol/L azide), removing glucose and replacing O2 with N2 to mimic ischemia (in vitro ischemia) and replacing Krebs solution with hypotonic medium to evoke cell lysis. Both azide and in vitro ischemia induced a significant increase in 99mTc-HMPAO release (15.8%+/-3.3% and 18.3%+/-6.2%, respectively), without any modification in LDH efflux. However, only azide reduced the uptake of the tracer. Conversely, glutamate outflow was massive during in vitro ischemia and was far lower during azide treatment. Under hypotonic medium conditions, the release of 99mTc-HMPAO, glutamate and LDH were dramatically increased. Surprisingly, a two-fold increase of 99mTc-HMPAO uptake was also found. When 1 mmol/L glutathione was added to the medium, to convert native lipophilic 99mTc-HMPAO into hydrophilic derivatives, tracer uptake was inhibited both under control and hypotonic medium conditions. CONCLUSION: This study provides evidence that not only poisoning of the tissue but also in vitro ischemia induced a reduction of 99mTc-HMPAO retention. Moreover, we demonstrated that injuries causing cell membrane disruption led to hyperfixation of 99mTc-HMPAO.     

曲古菌素A对脂多糖致急性肺损伤小鼠的保护作用观察

目的 探讨曲古菌素A(TSA)对脂多糖(LPS)所致急性肺损伤小鼠的保护作用及其机制.方法 健康雄性BALB/c小鼠60只,随机分为空白对照组、TSA组(灌胃给予TSA1mg/kg)、LPS组(气管内给予LPS1mg/kg)及TSA+LPS组(气管内给予LPS前1h灌胃给予TSA),每组15只.分别于处理后1、3、6、12、24h获取各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法检测其中TNF-α和IL-1 β的浓度,并取肺组织测定肺干湿重比,HE染色后行病理组织学观察,ELISA法检测组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)活性及一氧化氮(NO)浓度.结果 与空白对照组及TSA组比较,LPS组小鼠肺组织可见明显的炎性细胞浸润等急性肺损伤病理学征象,肺组织湿干重比、MPO活性、NO浓度及BALF中TNF-α、IL-1 β浓度均明显升高(P＜0.05).与LPS组比较,TSA+LPS组上述改变均明显受抑,肺组织损伤减轻,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TSA对LPS诱导的急性肺损伤有保护作用,可能与其抑制了炎性细胞因子的生成有关.     

人参皂甙Rd对脊髓运动神经元抗谷氨酸损伤的作用观察

目的 探讨人参皂甙Rd对体外培养的脊髓运动神经元抗谷氨酸损伤的作用.方法 分离胎龄15d的SD大鼠的脊髓运动神经元,培养6d后分为4组:对照组,培养基中不加药液;谷氨酸(Glu)组,培养基中加入300μmol/L谷氨酸;人参皂甙Rd+谷氨酸(GSRd+Glu)组,培养基中预先加入10μmol/L人参皂甙Rd孵育30min,再加入300μmol/L谷氨酸;丙二醇+谷氨酸(Vehicle+Glu)组,培养基中预先加入等容量丙二醇孵育30min,再加入300μmol/L谷氨酸.继续培养24h,相差显微镜下观察神经元形态及生长状况,进行细胞计数,测定神经元存活率及培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果 Glu组存活的脊髓运动神经元数目少,偶有突起形成,细胞受损严重;GSRd+Glu组脊髓运动神经元数目明显增多(P＜0.05),突起较多,只少数死亡细胞;Vehicle+Glu组神经元形态与Glu组相似.Glu组及Vehicle+Glu 组脊髓运动神经元存活率分别为22.7％±2.3％、23.6％±2.1％,明显低于对照组(l00％±0％,P＜0.05)及GSRd+Glu组(58.6％±2.3％,P＜0.05),而Glu组与Vehicle+Glu组比较、对照组与GSRd+Glu组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).Glu组及Vehicle+Glu组培养上清中LDH活性分别为142.50±3.55、139.20±2.75U/L,明显高于对照组(42.3±3.6U/L)及GSRd+Glu组(84.2±2.5U/L,P＜0.05),而Glu组与Vehicle+Glu组比较、对照组与GSRd+Glu组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 人参皂甙Rd对脊髓运动神经元抗谷氨酸损伤具有保护作用.     

Exercise improved rat metabolism by raising PPAR-α

Based on the importance of exercise and crucial role of liver in metabolism, the aim of this study was to determine whether the expression of peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)-α, γ and adiponectin receptor 2 in OLETF rat liver were altered in conjunction with improved metabolism with exercise training. OLETF rats were randomly assigned to 2 groups: sedentary control group (n=26), and long-term exercise-trained group (n=26). Full data were available on 32 OLETF rats (16 for each group). Adiponectin, glucose, insulin, triglyceride and cholesterol were assessed. Livers were taken to determine the expression of PPAR-α, γ and adiponectin receptor 2. Compared with sedentary control group, fasting glucose (9.38 ± 2.99 mmol/L vs. 7.32 ± 1.76 mmol/L, P<0.05), triglyceride (1.73 ± 0.34 mmol/L vs. 0.89 ± 0.12 mmol/L, P<0.05) and cholesterol (4.41 ± 0.75 mmol/L vs. 2.13 ± 0.32 mmol/L, P<0.05) were substantially reduced after exercise, which significantly correlated with increased PPAR-α (P<0.05) in liver. The expression of PPAR-α upstream and target genes, including hepatocyte nuclear factor-4 (HNF4), carnitine palmitoyl transferase 1 (CPT-1), catalase (CAT) and ATPbinding cassette transporter A1 (ABCA1) also increased significantly. Therefore, our findings suggest that increased PPAR-α expression in OLETF rats liver is a contributory factor to the exercise-related improvements in whole-body metabolism.     

游泳对慢性低氧大鼠肺动脉L-精氨酸/一氧化氮途径的影响

目的 :探讨游泳锻炼对慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺动脉L -精氨酸 /一氧化氮途径的影响。方法 :采用慢性低氧高二氧化碳肺动脉高压的大鼠进行游泳锻炼。将大鼠肺动脉孵育 ,测定其对[3 H]-L -Arg的摄取率、一氧化氮合酶 (NOS)活性与一氧化氮 (NO)含量。结果 :与模型对照组比 :游泳锻炼组的肺动脉平均压 (mPAP)降低 2 9 2 % (P <0 0 1 ) ,血浆NO代谢产物的含量升高 1 72 4% (P <0 0 1 ) ,肺动脉组织cNOS的活性升高 5 4 5 % (P <0 0 1 ) ,离体孵育肺动脉摄取低浓度 (0 2mmol/L)和高浓度 (5 0mmol/L) [3 H]-L -Arg分别升高 3 8 6% (P <0 0 1 )与 40 0 %(P <0 0 1 )。结论 :游泳锻炼有降低慢性低氧高二氧化碳大鼠肺动脉压 ,增加NO释放的作用 ,其机制可能是提高了L-Arg的跨膜转运与cNOS的活性     

伊洛前列素对缺氧性肺动脉高压自由基代谢的影响

目的研究雾化吸入伊洛前列素对缺氧性肺动脉高压（HPH）患者自由基代谢的影响。方法在海拔3700 m、4300 m、5200 m和5380 m高原,对56例HPH患者采用雾化吸入伊洛前列素5μg 1次,吸药前、吸入后即刻采血检测超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸（BLA）、一氧化氮（NO）及其合酶（NOS）的含量。结果吸入后较吸入前,在海拔3700 m,SOD（90.50±7.13）U/ml vs（73.00±10.51）U/ml、NO（73.64±13.42）μmol/L vs（49.60±11.31）μmol/L、NOS（90.50±7.13）U/ml vs（73.00±10.51）U/ml增高,MDA（4.23±0.71）nmol/ml vs（5.61±1.13）nmol/ml、BLA（1.27±0.25）mmol/L vs（1.79±0.62）mmol/L降低,有非常显著差异（P〈0.01）;在海拔4300 m,SOD（86.78±5.12）U/ml vs（69.39±4.59）U/ml、NO（73.51±6.37）μmol/L vs（48.79±3.76）μmol/L、NOS（44.60±2.64）U/ml vs（40.23±2.31）U/ml增高,MDA（4.24±0.80）nmol/ml vs（6.44±1.51）nmol/ml、BLA（1.46±0.28）mmol/L vs（1.89±0.28）mmol/L降低,有显著差异（P〈0.05或P〈0.01）;在海拔5000 m以上,SOD（86.46±9.05）U/ml vs（66.00±9.95）U/ml、NO（65.50±8.32）μmol/L vs（47.62±11.38）μmol/L、NOS（37.06±2.22）U/ml vs（33.18±2.99）U/ml增高,MDA（6.42±1.59）nmol/ml vs（8.24±2.09）nmol/ml和BLA（2.46±1.24）mmol/L vs（5.18±1.48）mmol/L降低,有非常显著差异（P〈0.01）。结论伊洛前列素可改善HPH患者肺氧合效应,增强机体抗氧化酶活性和乳酸清除能力。     

蜂毒肽MP-1体外拮抗内毒素作用及其机制

目的 观察蜂毒肽MP-1的体外抗内毒素(LPS)活性并探讨其作用机制. 方法 应用生物传感器检测MP-1对类脂A(lipid A)的亲合力,采用动态比浊法鲎试验检测MP-1对LPS(2μg/L)的中和作用,激光扫描共聚焦显微镜观察不同浓度MP-1(5,10,20,40 μmol/L)干预后异硫氰酸荧光素标记LPS(FITC-LPS,100 μg/L)与小鼠RAW264.7细胞的结合,免疫细胞化学法观察MP-1对LPS(100μg/L)诱导的RAW264.7细胞TLR4表达的影响;实时荧光定量RT-PCR和ELISA法检测不同浓度MP-1作用下LPS(100μg/L)刺激的RAW264.7细胞TLR4、TNF-α和IL-6基因及蛋白的表达;MTT法检测MP-1对RAW264.7细胞活力的影响. 结果 MP-1具有一定的结合lipid A及中和LPS的作用,在10 μmol/L浓度可显著抑制FITC-LPS与RAW264.7细胞结合(P<0.05),并对LPS刺激的小鼠RAW264.7细胞TLR4、TNF-α和IL-6的基因及蛋白表达有抑制作用(P<0.05或<0.01),该作用具有一定的剂量效应关系.MP-1体外实验浓度对细胞活力无影响(P>0.05). 结论 MP-1可能通过中和LPS作用,阻断LPS与RAW264.7细胞膜受体的结合,从而抑制LPS介导的细胞活化.     

胞内钙离子浓度与咖啡因抗凋亡作用的关系

目的 :研究咖啡因对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用与细胞内钙离子浓度升高之间的关系。方法 :小脑颗粒神经元培养 ,凝胶电泳和fura 2荧光技术测胞内钙离子浓度。结果 :低钾的促凋亡作用可被咖啡因浓度依赖性地保护 ,且咖啡因的保护作用不受ryanodine敏感性钙释放的阻断剂 (ryanodine、dantrolene)的影响 ;也不被L 型钙通道阻断剂 (硝苯地平、维拉帕米和尼莫地平 )和NMDA受体阻断剂 (MK80 1)抑制。结论 :咖啡因对低钾诱导的小脑颗粒神经元凋亡的保护作用并不依赖胞内钙离子浓度的升高。