走马胎离体培养及植株再生

以走马胎幼嫩叶片为外植体,研究不同培养基对走马胎叶片愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖及生根培养的影响。结果表明:叶片在MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1)培养基上诱导产生的愈伤组织最适合用于进行分化和增殖;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化率高达88.9%;壮苗培养基为MS+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+10%椰子水(CW);最适的生根培养基为MS+NAA0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1),生根率达100%,根系发达,植株生长健壮。经生根培养及练苗,走马胎的假植成活率达85%。     

不同激素对“五彩珍珠”番茄再生体系的影响

以"五彩珍珠"番茄为试材,选取6d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同激素浓度及配比对番茄愈伤组织的诱导、不定芽分化及生根的影响,以建立番茄再生体系。结果表明:诱导"五彩珍珠"番茄愈伤组织的最佳培养基为MS+0.4mg·L~(-1)IAA+2.0mg·L~(-1)6-BA,其子叶的诱导率为100%,下胚轴的诱导率为95%;不定芽分化的最佳培养基为MS+0.2mg·L~(-1) IAA+(1.0~3.0)mg·L~(-1) 6-BA;诱导生根的最佳培养基为1/2MS+0.10mg·L~(-1)NAA。子叶为最佳外植体,其不定芽的分化率及生长情况均优于下胚轴。     

以叶片为外植体的多花黄精组织培养

以叶片为外植体建立多花黄精组织培养快速繁殖技术体系,通过添加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D和蔗糖的MS培养基中培养,筛选愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、丛生芽诱导、丛生芽生根诱导的最佳培养基。结果表明:愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA 4.0 mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),愈伤组织诱导率最高为53.89%,生长情况最好;愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA3.0mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),增殖倍数7.87,生长情况相对最好;丛生芽诱导培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 4.0mg·L~(-1),出芽率最高为86.11%,生长情况最好,芽高最大为1.70cm;丛生芽生根诱导的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg·L~(-1),生根率最高为66.67%,根数、根长和根粗最好,分别为31.0条、0.46cm和1.100mm。以叶片为外殖体可短时间获得大量多花黄精组培苗,解决种植生产上的种苗短缺问题。     

红金银花茎段愈伤组织的诱导

以红金银花当年生幼嫩茎段为试材,采用正交实验设计,研究了红金银花愈伤组织诱导和增殖培养的影响因素。结果表明:6-BA、KT促进了愈伤组织的诱导,提高了出愈率;当NAA、KT分别为0.4、1.0mg·L~(-1)时最有利于愈伤组织的增殖培养。不同季节外植体愈伤组织诱导效果不同,春季采集的当年生的幼嫩茎段更有利于愈伤组织的诱导;MS培养基中添加6.5mg·L~(-1)琼脂比较适宜;红金银花愈伤组织诱导最适宜的培养基为MS+KT 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+6-BA 1.5mg·L~(-1);愈伤组织增殖培养最适宜的培养基为MS+6-BA 1.5mg·L~(-1)+NAA 0.4mg·L~(-1)+KT 0.1mg·L~(-1)。     

番茄子叶和下胚轴离体再生体系的建立

以‘09-22’番茄无菌苗子叶和下胚轴为外植体,研究了其在MS附加不同浓度6-BA和NAA/IAA的培养基上的诱导分化及不定芽生根情况。结果表明:IAA比NAA更利于该品种子叶的再生;在不同激素组合下,番茄子叶和下胚轴愈伤组织诱导率均达100%,但子叶的愈伤组织生长状态好于下胚轴,不定芽分化率也略高于下胚轴,然而,下胚轴来源芽的生根较快,且生根效果好于子叶来源芽。该研究筛选出‘09-22’番茄子叶和下胚轴不定芽再生的最佳培养基配方为MS+6-BA 1.0mg/L+IAA 0.5mg/L,最佳生根培养基配方为MS+IAA 0.1mg/L。     

红掌实生苗根段病原菌的抑制及再生体系的建立

以红掌实生苗根段为外植体,通过在培养基中添加抗生素来抑制病原菌的快速繁殖,并建立了完整的再生体系。结果表明:硫酸链霉素抑制病原菌的效果最好,其次是卡那霉素,庆大霉素抑菌效果最差;30mg·L~(-1)的硫酸链霉素因抑菌效果好,保持更高的根段活率而更适合在组织培养中应用;愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+2,4-D0.5mg·L~(-1)+硫酸链霉素30mg·L~(-1),愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+2,4-D0.8mg·L~(-1),丛生芽诱导最佳培养基为1/2MS+6-BA0.5mg·L~(-1),丛生芽生根最佳培养基为1/2MS+NAA0.2mg·L~(-1),生根后的幼苗,移栽成活率高达100%。     

不同植物生长调节剂对橡胶草组培苗不定芽分化和生根的影响

以橡胶草为试材,研究不同植物生长调节剂(6-苄氨基腺嘌呤,简称6-BA;萘乙酸,简称NAA)对橡胶草组培苗不定芽分化和生根的影响。结果表明:不同6-BA和NAA激素配比对橡胶草组培苗不定芽分化影响差异显著,诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1);NAA对橡胶草组培苗生根有明显促进作用,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg·L~(-1)。     

云南野生早花象牙参叶片再生体系的建立

 以云南野生的早花象牙参叶片为外植体, 探讨了叶片的不同部位、植物生长调节剂组合、暗培养、水解酪蛋白和椰子汁对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明: 叶片基部, 暗培养, 水解酪蛋白和椰子汁均有利于愈伤组织的诱导; 暗培养促进了不定芽的再生。适宜早花象牙参叶片愈伤组织形成的诱导培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} +水解酪蛋白800 mg·L ^{- 1} +椰子汁50 mL ·L ^{- 1} , 再生培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 增殖培养基为MS + 6-BA 0.6 mg·L ^{- 1} + NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 生根培养基为1/2MS +NAA 0.8 mg·L ^{- 1}。     

枇杷属植物野生种的茎段愈伤组织诱导植株再生研究

【目的】建立野生种枇杷茎段愈伤组织诱导植株再生的离体培养技术体系。【方法】以枇杷属植物的2个野生种、1个属间杂交后代为试材,采用茎段为外植体,在不同植物生长调节剂的组合配比培养条件下,开展野生枇杷茎段诱导愈伤组织以及愈伤组织诱导出不定芽的植株再生研究。【结果】最适合野生种枇杷茎段愈伤组织诱导植株再生的培养基配方为:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+TDZ 0.1 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1),如栎叶枇杷茎段愈伤组织诱导植株再生,其愈伤率、丛芽率和成苗率均达到100%,不定芽数最多可达38.75个;但对于属间杂交后代的石斑木×台湾枇杷最适合茎段愈伤组织诱导植株再生的培养基配方为:MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1),其丛芽率和芽苗数量分别为100%和48个,成苗率也为100%;在众多的生长调节剂中,TDZ对野生枇杷的愈伤组织诱导再分化或脱分化是比较敏感的,高浓度的TDZ虽有利于愈伤组织诱导再分化不定芽,但不利于成苗。【结论】研究得出枇杷属植物以及属间杂交后代茎段愈伤诱导植株再生的共性规律和种间的差异性,建立起枇杷属植物野生种离体再生系统,简化植株再生诱导的步骤和缩短植株再生诱导的时间,能在短时间内产生一定数量的组培苗,为枇杷属种质资源研究积累了新的资料。     

加工番茄新番72号再生体系的建立

为建立一套优化的组织培养和遗传转化再生体系,以加工番茄新品种新番72号为试材,分别选取4～8 d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究了不同苗龄、外植体、激素浓度配比对番茄愈伤组织诱导、不定芽分化的影响,以建立番茄再生体系,为下一步基于CRISPR-Cas9定点突变改良新疆加工番茄耐贮性奠定基础。结果表明,新番72号加工番茄再生体系建立中以苗龄6 d的子叶为最佳外植体,愈伤诱导、芽分化率及生长情况均优于下胚轴;愈伤诱导最佳培养基为MS+0.5 mg·L~(-1)IAA+2.0 mg·L~(-1)6-BA+2.0 mg·L~(-1)ZT,子叶的诱导率为90.5%,下胚轴的诱导率为80.8%;继代培养芽分化的最佳培养基为MS+0.2 mg·L~(-1)IAA+1.0 mg·L~(-1)6-BA+1.0 mg·L~(-1)ZT,子叶的芽分化率较高,可以达到85.3%。     

半夏组织培养体系的建立

以半夏块茎和顶芽为试材,对顶芽愈伤组织诱导、顶芽愈伤组织不定芽分化、块茎不定芽分化和不定芽诱导生根的最佳条件进行了研究.结果表明:半夏最佳顶芽愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳顶芽愈伤组织不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L;最佳半夏块茎不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;最佳不定芽诱导生根培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 1.0 mg/L.     

圆叶椒草的组织培养与植株再生研究

以圆叶椒草茎段为试材,采用植物组织培养方法,研究了6-BA、NAA、IBA对圆叶椒草的愈伤组织诱导、不定芽分化以及试管苗生根培养的影响,以期筛选出愈伤组织和芽分化以及生根诱导的最佳培养基.结果表明:愈伤组织诱导、愈伤组织和不定芽分化最理想的培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L;试管苗生根培养最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+0.5％活性炭.     

苦瓜下胚轴的离体再生体系

为了建立高频的苦瓜离体再生体系,为苦瓜遗传转化提供技术基础,筛选了最适消毒方法和外植体类型。以MS培养基为基础培养基,添加不同浓度激素组合,筛选最适于苦瓜不定芽诱导、伸长和生根的培养基。最佳的消毒方法为:用水浸泡去壳的种子15 min,在超净工作台中用75%酒精浸泡30 s后再用4%NaClO浸泡6 min,用无菌水冲洗4～5遍,污染率为0,发芽率为98%;最佳的愈伤组织诱导培养基为MS+2.5 mg·L~(-1)6-BA+0.01 mg·L~(-1)IBA,愈伤组织密度为0.79 g·cm~(-3),不定芽的分化率为39%,最佳外植体为下胚轴(12 d),诱导率为41%;最佳的增殖培养基为MS+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.005 mg·L~(-1)IBA;最佳的生根培养基为MS+0.1 mg·L~(-1)IBA,移栽存活率为74%。初步建立了苦瓜离体再生体系。     

翠菊‘花束绯红’叶片的植株再生体系建立

以翠菊‘花束绯红’无菌苗为材料,研究了植物生长调节剂浓度及组合、光照条件、不同附加物对叶片及其愈伤组织再生植株的影响。结果表明:(1)在光照培养条件下,诱导翠菊叶片不定芽形成的最适培养基为MS+6-BA3.0mg·L-1+IBA1.0mg·L-1,诱导率为56.7%,平均不定芽数为3.3;(2)黑暗培养不利于叶片不定芽的分化,但促进叶片愈伤组织的形成;(3)培养基中分别添加脯氨酸、水解酪蛋白和NH4NO3等均能明显促进愈伤组织不定芽的诱导,最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+脯氨酸300mg·L-1,诱导率为82.8%,平均不定芽数为4.5;(4)不定芽移到幼苗生根培养基(1/2MS+IBA0.1mg·L-1)上,生根率为89.1%,移栽后成活率达89.3%。     

朱顶红无菌苗叶片高效再生体系

以朱顶红(Hippeastrum vittatum)叶片为外植体进行离体培养,具有取材方便、试材充足、成本低等优势,但叶片诱导再生率极低,是朱顶红离体培养的一大难题。本试验中分别以‘花孔雀’和‘黑天鹅’朱顶红无菌苗叶片为外植体,探究了不同植物生长调节剂和不同取材部位对不定芽诱导和继代增殖的影响。结果表明:最佳外植体为MS培养基中培养10 d形成的幼嫩叶片基部(0.5 cm),在光照16h·d~(-1)(光照强度36μmol·m~(-2)·s~(-1))下,不定芽诱导的最适培养基为MS+2 mg·L~(-1) 6-BA+1 mg·L~(-1) NAA+2 mg·L~(-1) TDZ,两个品种的不定芽均以间接途径发生,其中‘花孔雀’在培养40 d后形成愈伤组织,55 d形成不定芽,诱导率可达69.44%;‘黑天鹅’在培养45d后形成愈伤组织,65d形成不定芽,诱导率达到66.67%;最适体细胞胚诱导培养基为MS+2 mg·L~(-1) 6-BA+1 mg·L~(-1) PIC,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的诱导率分别达到66.67%和63.89%;最佳不定芽增殖培养基为MS+2 mg·L~(-1) 6-BA+1 mg·L~(-1) NAA+1mg·L~(-1) TDZ,‘花孔雀’和‘黑天鹅’的增殖系数分别达到4.67和3.46;在不添加植物生长调节剂的MS培养基中进行生根培养,30 d后两个品种的生根率均达到100%;将生根培养30 d的小植株转移至室温条件下放置3 d,摘去封口膜再驯化3 d后,移栽至经高温消毒的草炭︰蛭石(体积比)为1︰1的基质中,成活率达到100%。     

非洲菊愈伤组织和不定芽的诱导

以非洲菊带芽短缩茎为外植体,研究了不同生长调节剂组合对其愈伤组织和不定芽诱导的影响。结果表明:外植体表面灭菌时间以0.1%HgCl2处理10 min为宜;愈伤组织诱导适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L,而不定芽诱导适宜培养基为MS+6-BA2.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L。不定芽经过增殖培养和生根培养,最终再生了生长健壮、叶色浓绿的植株。     

维多利亚菠萝组培快繁技术研究

以"维多利亚"菠萝品种的冠芽为外植体,采用6-BA、NAA、IBA等植物生长调节剂配比处理芽诱导、愈伤诱导、继代增殖和生根培养。结果表明,愈伤组织诱导率最高的培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L,愈伤诱导不定芽较理想配比为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA0.1mg/L,芽的继代增殖系数较高和芽较粗壮的培养基配比为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L,适宜生根的培养基为MS+IBA 0.5mg/L+NAA 1mg/L。     

两性株番木瓜愈伤组织分化初探

以番木瓜两性株的愈伤组织为材料,以MS为基本培养基,研究了不同植物生长调节剂及组合对愈伤组织诱导不定芽和无菌芽诱导生根的影响。结果表明,6-BA和TDZ对番木瓜愈伤组织分化都有一定的诱导作用,而6-BA的作用优于TDZ,最适浓度0.05mg/L。GA3具有促进6-BA诱导愈伤组织分化的作用,诱导番木瓜愈伤组织分化出芽的最佳培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+GA31.0mg/L。相对NAA而言,IBA更适于诱导不定芽生根,生根培养基以MS+IBA 0.3mg/L为宜。     

番茄材料‘851’高效离体再生体系的建立

以自育番茄‘851’为试材,采用植物组织培养的方法,研究了不同浸泡时间和光暗培养处理对番茄种子萌发和幼苗生长状态的影响;以MS+2.0 mg·L~(-1) 6-BA为基础培养基研究不同IAA浓度、苗龄和外植体对愈伤和不定芽形成的影响;用不同处理的生根培养基研究不定芽对生根的影响,以期建立番茄材料‘851’高效离体再生体系。结果表明:番茄种子浸泡3 h,先暗培养3 d后光培养能够获得最佳生长状态的无菌苗且其发芽势、发芽率和发芽指数均为最高,分别为89%、93%和5.20。子叶节、下胚轴和子叶为外植体在IAA浓度为0.2、0.3、0.5 mg·L~(-1)时最有利于愈伤组织和不定芽的形成,同时在10、14、8 d的苗龄下,不定芽诱导率分别为160%、91%和79%。最佳处理生根培养基为MS+0.5 mg·L~(-1) IAA,生根率为89%。     

印度南瓜愈伤组织诱导及其离体再生培养

以印度南瓜"北观"幼苗的下胚轴、子叶、真叶、茎段为外植体,采用离体再生方法,研究了不同种类激素对愈伤组织发育及离体再生的影响,以期为建立高效的南瓜再生体系奠定基础。结果表明:以印度南瓜幼苗的下胚轴、子叶、真叶、茎段为外植体均可诱导出愈伤组织,其中子叶和茎段较易诱导出愈伤组织;愈伤组织在MS+1.0mg·L~(-1) 6-BA(或2.0mg·L~(-1) KT)+0.2mg·L~(-1) NAA培养基上进行继代培养效果较好,可获得质量较好的愈伤组织;在诱导愈伤组织再生培养中,通过不同激素配比处理外植体均未分化出不定芽,仅部分分化出不定根。