三相萃取法纯化枸杞多糖

利用三相萃取法可避开多糖的醇沉过程,达到短时间内分离多糖的同时,也可一定程度的分离子水提液中的蛋白质和黄酮的原理,本文采用此法分离枸杞多糖,考察了叔丁醇-(NH₄)₂SO₄-水提液体系的三相萃取性质,研究了提取液中(NH₄)₂SO₄的添加量、叔丁醇添加量、萃取液pH、温度对枸杞提取液多糖、蛋白质、黄酮的萃取率的影响,并通过正交试验优化了多糖的萃取条件,研究发现:多糖最佳萃取条件是:10 mL提取液中(NH₄)₂SO₄添加量为30%(w/v)、叔丁醇添加量为10 mL、温度为35 ℃、pH为6,此时多糖的萃取率可达95.31%,蛋白质萃取率可达83.45%,黄酮萃取率可达50.66%。通过多糖的红外光谱、抗氧化活性实验可发现三相萃取法所得多糖与乙醇沉淀法所得多糖的化学结构,抗氧化活性均无太大差异。因此,该体系是一种可行的高效分离纯化枸杞多糖的绿色方法。     

正交实验优化柚皮中柚皮苷的超声辅助双水相提取工艺

采用超声辅助正丙醇/(NH₄)₂SO₄双水相萃取技术对菊花芯柚果皮中柚皮苷的提取分离工艺进行系统研究。采用单因素均分法系统考察了(NH₄)₂SO₄质量分数、正丙醇质量分数、柚皮干粉加入量、pH、温度和时间6种关键因素对柚皮苷得率的影响,通过正交实验设计确定了双水相萃取技术最优工艺条件,并进行了放大实验研究和对比实验。结果表明,柚皮苷主要富集于上相,在优水平下,构建10.0 g双水相体系,正丙醇质量分数为21%(w/w),(NH₄)₂SO₄质量分数为18%(w/w),柚皮干粉加入量为0.15 g,调节pH至4.5,40℃条件下,超声提取30 min,柚皮苷得率为4.27%,RSD为1.23%,100倍放大后柚皮苷得率达到4.25%。对比热回流提取,正丙醇/(NH₄)₂SO₄双水相提取具有提取时间短、温度低、能耗小、效果好等优点,优势明显,可以实现柚皮中柚皮苷的有效分离,为工业制备柚皮苷提供了一种新途径。     

大蒜多糖酶法辅助双水相提取工艺优化及抗氧化和降糖活性分析

以大蒜为原料，采用纤维素酶和果胶酶辅助双水相体系提取大蒜多糖。通过单因素实验分析了纤维素酶添加量、果胶酶添加量、(NH₄)₂SO₄质量分数以及聚乙二醇(Polyethylene glycol, PEG)质量分数对大蒜多糖提取率的影响。采用响应面法优化了大蒜多糖的提取工艺，并对其体外抗氧化活性和降血糖作用进行研究。结果表明，纤维素酶和果胶酶辅助双水相体系提取大蒜多糖的最优条件为：纤维素酶添加量2.00%、果胶酶添加量2.00%、(NH₄)₂SO₄质量分数18.00%、PEG质量分数20.00%，在此条件下，大蒜多糖提取率为29.69%。当浓度在0.5～2.5 mg/mL范围时，大蒜多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、羟基自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O₂^–.)的最大清除率分别为(47.84±5.47)%、(42.30±3.16)%和(41.86±3.65)%，对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的最...     

超声-酶辅助双水相提取枳壳黄烷酮工艺的建立与优化

枳壳是我国柑橘属常见的药食同源植物，所含丰富的黄烷酮即新橙皮苷和柚皮苷，是其主要的药理成分。为提高枳壳新橙皮苷和柚皮苷的提取分离效率，该研究采用响应面法优化了超声辅助双水相提取的最佳条件，并进一步建立超声-酶辅助双水相法(ultrasonic-enzyme assisted aqueous two-phase extraction, UEA-ATPE)提取工艺和制备液相色谱分离纯化方法。结果表明，(NH₄)₂SO₄/乙醇为最佳双水相体系，建立并优化的UEA-ATPE最佳工艺条件为乙醇质量分数27%,(NH₄)₂SO₄质量分数21%,超声功率137 W,复合酶质量比为中性蛋白酶∶果胶酶=1∶1。在此条件下，新橙皮苷和柚皮苷的得率分别为(92.27±2.13)、(72.24±1.56) mg/g,优于水煎煮法、50%乙醇浸提法、超声辅助95%乙醇提取法和超声辅助双水相法，同时此新方法提取液中杂质的种类和含量更少。提取液经制备型液相色谱进一步分离纯化后，得到了纯...     

盐析和双水相萃取法纯化细菌木聚糖酶的比较

通过对比硫酸铵盐析和双水相萃取两种木聚糖酶初级纯化方法的纯化效率,确定更加适于Paenibacillus sp.B1709木聚糖酶初级纯化的方法。结果显示,双水相萃取较盐析具有更好的木聚糖酶纯化回收效果,并对其主要实验参数进行优化,得出双水相萃取最佳条件为:聚乙二醇(PEG)4000 Da,浓度22%,最佳成相盐(NH₄)₂SO₄,最适浓度18%,最适pH6.0,NaCl 2%。在此条件下,可实现分配系数9.90,酶活力回收率为90.84%,纯化倍数6.13。实验结果显示双水相萃取相较于盐析在大规模纯化尤其针对复杂纯化目标时具备一定技术的优势。     

金花茶花总黄酮双水相提取工艺优化及其抗氧化活性分析

研究了超声波辅助聚乙二醇(PEG)/(NH₄)₂SO₄双水相提取金花茶花总黄酮工艺及其抗氧化活性。以黄酮萃取率为指标,在单因素实验的基础上,采用正交试验优化提取工艺。通过DPPH·和OH·清除率的测定,评价其抗氧化效果。采用HPLC分析对金花茶花中的芦丁、槲皮素和山奈酚等黄酮化合物进行了确认。实验结果表明,最佳提取条件为:PEG相对分子量600,PEG质量分数19%,硫酸铵质量分数20%,乙醇浓度80%,超声时间30 min, 黄酮的萃取率可达98.50%,黄酮得率可达13.54%。抗氧化实验结果表明,金花茶花黄酮提取物清除DPPH·的IC₅₀为0.070 mg/mL,清除OH·的IC₅₀为0.679 mg/mL。正交试验优化超声波辅助双水相提取金花茶花总黄酮工艺合理,得到的黄酮具有良好的抗氧化活性,可进一步开发利用。     

电子鼻结合GC-MS检测鸡肉蛋白酶对鸡肉风味的影响

采用PEG2000/(NH4)₂SO₄双水相体系萃取鸡肉内源性蛋白酶,并结合电子鼻和GC-MS检测蛋白酶处理前后肉品风味的变化情况。结果表明:当PEG2000质量百分浓度为32%,(NH₄)₂SO₄质量百分浓度为32%,pH为6.5,鸡肉蛋白酶的萃取率最高达到83.48%。用此条件下提取的蛋白酶处理鸡肉,采用电子鼻能够很好的区分处理前后鸡肉样品中挥发性风味物的变化。GC-MS共检测出66种挥发性成分,主要包括醛类、烃类、芳香族类、含硫化合物、有机酸以及醇和酯类挥发性物质,处理组醛类、芳香族类、含硫化合物相对含量明显高于空白组。综上结果表明鸡肉蛋白酶可以很好的增强鸡肉风味。     

3种石斛药材中奇数碳脂肪酸组成差异

目的:研究3种石斛奇数碳脂肪酸(OCFA)成分及其含量。方法:采用气相色谱—质谱法(GC-MS)分析不同地区的金钗石斛、铁皮石斛、鼓槌石斛3种石斛的脂肪酸组成。结果:OCFA占细胞中总脂肪酸的8%,占总脂肪酸的相对丰度百分比从高到低依次为C_15:0、C_17:0、C_23:0、C_19:0、C_21:0。金钗石斛和铁皮石斛中C_15:0和C_17:0相对丰度的比值(C_15:0/C_17:0)分别<1.6,>1.8,表明含有系列OCFA是兰科植物的共性。结论:植物中OCFA的存在可能与其药物活性具有相关性。     

Fe(Ⅲ)-草酸-葡萄糖酸钙媒介体系电化学性质及染色应用

以黄金电极作为工作电极,研究Fe（Ⅲ）-草酸-葡萄糖酸钙媒介体系的电化学性质,循环伏安曲线中峰电流与扫描速率平方根呈线性关系,确定Fe（Ⅲ）-草酸-葡萄糖酸钙媒介体系电化学反应为受扩散控制的准可逆反应过程。试验得出,组成为C₂H₂O₄ 10.08 g/L、Ca(C₆H₁₁O₇)₂ 17.92 g/L、Fe₂（SO₄）₃ 8 g/L及NaOH 45 g/L的阴极电解液不仅有好的电化学反应性,同时具有最佳的染色性能。     

厦门市某空气站PM2.5中水溶性离子污染特征与来源解析

为研究厦门市PM_2.5中水溶性离子的季节污染特征及来源,2022年7月—2023年6月文章利用位于厦门杏林片区的空气监测站进行空气样品的采集,采集频率为每3天1个PM_2.5样品,并对样品中水溶性离子组分质量浓度进行检测。检测结果表明:厦门市水溶性离子年均值为9.83μg/m³,主要水溶性离子为SO₄^2-、NO₃^-NH₄⁺,占水溶性离子质量浓度的80.9%;水溶性离子质量浓度呈春夏季高,秋冬季低的特征,受季节影响NO₃^-浓度变化较大,其他离子变化小;NH₄⁺主要以(NH₄)₂SO₄、NH₄HSO₄、NH₄NO₃的形式存在,NO₃     

离子液体辅助双水相系统提取茶渣中茶多酚工艺优化

为发展一种绿色、高效及温和的茶多酚提取方法,采用离子液体(IL)辅助乙醇/硫酸铵双水相系统(ATPS)提取茶渣中的茶多酚,考察了离子液体结构和用量对茶多酚得率和抗氧化性的影响,对提取工艺进行了正交试验优化。结果显示,少量IL添加可提高乙醇/硫酸铵ATPS的分相能力及其对茶多酚的得率,但对提取液的抗氧化活性没有明显影响;咪唑型离子液体对提取茶多酚具有更好的促进作用,咪唑环上侧链越长,其茶多酚得率越高;[C₄mim]Cl辅助乙醇/硫酸铵ATPS对茶渣中茶多酚得率明显高于其他体系,且其提取液中儿茶素类组分含量更高。茶渣多酚最佳提取工艺为[C₄mim]Cl质量分数10%、硫酸铵质量分数30%、乙醇体积分数60%,料液比1∶40 g/mL及超声功率540 W,在此条件下,茶渣中茶多酚得率为85.31±1.25 mg·g-1。IL辅助双水相系统是一种有前景的茶多酚提取工艺,在保持茶多酚活性的同时,能获得较高的茶多酚得率和儿茶素类组分含量。     

铁皮石斛多糖复合酶法提取工艺及其抗氧化性

探讨复合酶法提取铁皮石斛多糖的最佳工艺以及酶解多糖的抗氧化活性。利用单因素及L₁₈(37)正交实验研究了酶配比、酶浓度、酶解温度、酶解时间、料液比及pH对多糖得率的影响,并通过清除DPPH、ABTS自由基研究酶解多糖的抗氧化活性。结果显示酶解最优条件:中性蛋白酶与纤维素酶比例为2:1,酶浓度为10%,料液比为1:120,酶解温度为55 ℃,pH6.0,酶解时间为3 h,在此条件下多糖得率为43.85%±1.8%;酶解多糖对DPPH、ABTS自由基的IC₅₀分别为1.331、0.467 mg/mL,说明酶解石斛多糖具有较好的抗氧化活性。     

魔芋寡糖的膜分离及产物组成分析

本文采用高速离心、无机陶瓷微孔滤膜、超滤纳滤对250 g/L(w/v)的高浓度魔芋精粉的酶解液进行分离、过滤、浓缩、制备魔芋寡糖,分析了甘露聚糖酶水解催化高浓度魔芋粉形成的具有一定粘性的寡糖溶液,对过滤通量、寡糖的回收率和寡糖产物组成的影响。结果表明,150 g/L的寡糖混合物通过超滤膜过滤,寡糖回收率能达到86%以上;组合纳滤膜能使寡糖混合物进行有效浓缩,可以去除溶液中的金属离子、有机酸小分子和溶剂水,提高寡糖溶质纯度。100~5000 Da的魔芋寡糖混合物通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)分析发现,寡糖的构成比例中三糖为最高单一组分,含量为21.5%,二糖~十四糖的总含量达到90%,十五糖-二十糖的含量为9%。因此,采用膜过滤技术用于魔芋寡糖分离、提纯和浓缩工艺是可行的。     

超声波辅助双水相提取枇杷花总黄酮工艺优化及其抗氧化性

研究了超声辅助双水相法提取枇杷花总黄酮的工艺条件及其体外抗氧化活性。以总黄酮得率为指标,通过单因素实验和响应面分析法优化提取工艺;通过测定H₂O₂损伤、·OH清除率和总还原力,评价其抗氧化效果。结果表明最优提取工艺为:超声时间45 min,枇杷花质量分数0.2%,硫酸铵质量分数18%,PEG400质量分数28%,在此工艺得到枇杷花总黄酮的得率为26.96%。提取得到的黄酮抗过氧化氢损伤能力较好,其羟基自由基半数清除浓度（IC₅₀）值为0.297 mg/mL,优于Vc,表明枇杷花总黄酮具有较强的抗氧化活性。     

Distribution of Proteolytic Activity in the Different Protein Fractions of Tropical Shrimp Head Waste

Ammonium sulfate fractionated protein fractions at levels of 25%, 30%, 35%, 40%, 42.5% and 45% ammonium sulfate were recovered from the head waste of tropical marine tiger (MTS), culture tiger (CTS), white (WS) and brown shrimp (BS) and then characterized for protease activity. Distribution of buffer (pH 7.1) extracted protein among ammonium sulfate fractions showed that total protein in 25% fraction of MTS, CTS, WS and BS was 48, 54, 34 and 24 times more than that in the respective 42.5% fraction of the head waste of these shrimps. The highest proteolytic activity was observed in 42.5% (NH₄)₂SO₄ protein fraction of the head waste of MTS, CTS, WS and BS, the values were 19, 1.7, 11.6 and 2 times, respectively, more than that of the corresponding 25% (NH₄)₂SO₄ protein fractions. Highest caseinolytic activity (pH 8.5) and gelatinolytic activity (pH 7.1) was observed in the 42.5% fraction of the head waste of CTS and WS, respectively; but the highest albuminolytic activity (pH 8) was observed in the same fraction of the head waste of both MTS and BS. The optimum pH for highest gelatinolytic and albuminolytic activity of the 42.5% (NH₄)₂SO₄ protein fraction of the head waste of MTS and BS was 4; the same for highest gelatinolytic activity of the same protein fraction of the head waste of WS, and these fractions included acid proteases such as pepsin, the optimum pH for the above activity of the same fraction of CTS was 6-8.5, and the fraction was an alkaline protease such as chymotrypsin. The SDS-PAGE pattern of 42.5% (NH₄)₂SO₄ protein fraction of the head waste of BS, CTS, WS and MTS was almost similar with a dark band close to the marker band 20kDa. Proteases make up to 48% of industrial enzymes and are mostly used in detergents, leather production and food industry.     

黄酒生产用纯种根霉的筛选及其产酶条件的优化

该文从5种不同的黄酒生产用酒药中分离出5种根霉,通过比较发现1号根霉产液化酶活力、糖化酶活力、蛋白酶活力较高,并用单因素试验和正交试验优化了1号根霉的产酶条件,得出最佳的产酶条件是:温度31℃、料水比1:1.6、(NH4)2SO4的添加量0.4％.     

新型离子液体亲和萃取鸡蛋清中的溶菌酶

建立并优化利用辛巴蓝(Cibacron Blue F-3GA,CB)修饰[C₄MIM]Cl的新型离子液体[C₄MIM]₃CB特异性萃取分离鸡蛋清中溶菌酶的方法,并采用AutoDock Vina分析[C₄MIM]₃CB与蛋白的结合能,研究溶菌酶与[C₄MIM]₃CB相结合的能力。通过亲和萃取和反萃取并进一步脱盐、浓缩、冷冻干燥,得到溶菌酶产品。结果表明,通过对影响因素的研究,优化出最佳的萃取分离条件:蛋清粉溶液pH为7,新型离子液体中[C₄MIM]₃[CB]浓度为8 mg/mL,反应震荡时间为15 min,反萃取KCl溶液pH为7.0,浓度为1.5 mol/L。最终250 mg蛋清粉可得12.3 mg的溶菌酶产品,纯度为97.56%,酶活力为35000 U/mg,纯化倍数达到37.39,酶活回收率89.74%,且与其他蛋白达到完全分离。该方法具有选择性高、操作简便、产物纯度和活性高等优点。