双水相萃取分离苹果皮中果胶酶的研究

以苹果皮作为提取果胶酶的原材料,采用PEG/Na2HPO4双水相系统对果胶酶进行萃取分离,研究了PEG1000浓度、Na2HPO4浓度、pH、NaCl浓度等因素对果胶酶分配系数的影响。结果表明:双水相体系质量组成为PEG1000 26%、Na2HPO417%、NaCl 0.004%,pH为4.0时,果胶酶的萃取效率较好,实验中分配系数最高可达为13.8954。     

双水相萃取分离重组毕赤酵母碱性木聚糖酶

利用双水相萃取技术对来源于重组毕赤酵母的碱性木聚糖酶进行了初步分离。研究了聚乙二醇(PEG)分子量、PEG浓度、盐种类及浓度、Na Cl加入量和p H等因素对萃取效果的影响。结果表明,在PEG 4000浓度为20%,Na2HPO4浓度为18%,Na Cl浓度为0,p H6.0的条件下,获得最佳萃取效果,其结果为:分配系数(K)8.51,酶的活力回收率(Y)87.2%,纯化倍数(PF)2.54。     

聚乙二醇/(NH_4)_2SO_4双水相萃取香菇多糖中蛋白质

采用聚乙二醇(PEG)-硫酸铵双水相体系(ATPS)将香菇柄水提液中的多糖与蛋白质进行分离萃取研究,得香菇柄蛋白富集于上相,糖类富集于下相。综合考察PEG 4000、(NH4)2SO4、Na Cl浓度及p H对萃取结果的影响,通过正交试验进一步优化试验条件,得出最佳萃取参数。结果表明,香菇柄水提液5.00 mL, PEG 4000浓度18%,硫酸铵浓度17%, NaCl浓度1%, pH 6.5时,蛋白质萃取率达81.57%。     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取大豆脂肪氧合酶的研究

采用聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH4)2SO4]双水相体系对大豆中脂肪氧合酶进行分离萃取研究;通过综合考察酶分配系数、相比和回收率,探讨了(NH4)2SO4、PEG2000、Na Cl浓度以及p H对脂肪氧合酶萃取的影响,并通过正交实验进一步优化实验条件,结果表明在单一因素下的最佳工艺条件为:(NH4)2SO415%(wt%)、PEG2000 13%(wt%)、Na Cl 1%(wt%)、p H5.8;正交实验优选出的最佳工艺条件为:(NH4)2SO417%(wt%)、PEG2000 13%(wt%)、p H5.2,可获得酶的分配系数最高可达9.710,萃取率为87.6%。     

反胶束体系萃取鹰嘴豆蛋白的工艺研究

鹰嘴豆蛋白属完全蛋白质。利用超声波辅助反胶束(AOT/异辛烷)萃取鹰嘴豆蛋白,分析和讨论了W0、超声萃取时间、豆粉量对蛋白萃取率的影响,得到鹰嘴豆蛋白质的最佳萃取条件:W0=27.8,超声萃取时间30min,豆粉量为0.025g/mL,此时的萃取率为84.3%,并对超声波辅助反胶束萃取的机理进行了初步的分析。     

香菇多糖脱蛋白工艺及其抗氧化活性研究

采用低共溶剂(deep eutectic solvents,DES)-K2HPO4双水相体系(aqueous two-phase system,ATPS)将香菇多糖水提液中的多糖与蛋白质进行分离萃取,蛋白质富集于DES相,糖类富集于K2HPO4相。综合考察了DES物质的量比、K2HPO4浓度、DES的加入量以及萃取时间对蛋白质脱除率的影响,通过正交试验进一步优化试验条件,得出蛋白质脱除的最优工艺参数:以氯化胆碱/丙三醇(物质的量之比1∶2,2.6 mL)、K2HPO4(0.6 g/mL,3 mL)构建双水相体系,加入2 mL香菇多糖水提液,萃取30 min后,香菇多糖蛋白质的脱除率高达90.8%,香菇多糖回收率为98.0%。在此条件下得到的香菇多糖具有清除DPPH自由基的能力,说明脱蛋白后的香菇多糖具有一定的抗氧化性。     

应用响应面法优化木聚糖酶的双水相萃取条件

采用响应面分析法优化短小芽孢杆菌木聚糖酶在PEG2000/K2HPO4双水相体系中的萃取条件。确定最佳萃取条件为NaCl 6%、PEG 2000 18%、K2HPO4 10%。在最佳萃取条件下得木聚糖酶分配系数为3.38,蛋白分配系数为0.13,纯化倍数为7.93,回收率为84.24%。考察了萃取酶液的部分酶学性质,其最适温度为50℃,最适pH为7.0。     

双水相法萃取黑曲霉C2J6脂肪酶条件的优化

为提高黑曲霉C2J6发酵液中脂肪酶的分离纯化效率,采用PEG2000/(NH_4)_2SO_4双水相法进行萃取。探讨PEG2000质量浓度、(NH_4)_2SO_4质量浓度、p H、Na Cl质量浓度对脂肪酶萃取的影响,利用Box-Behnken响应面法优化萃取条件。结果表明:在PEG2000质量浓度35%、(NH_4)_2SO_4质量浓度21.60%、p H 6.90的条件下,脂肪酶萃取率高达85.92%,酶活力47.53 U/mL,比粗酶活力提高了3.02倍。此法简捷、高效,为黑曲霉脂肪酶的进一步纯化奠定基础。     

SDS/正辛醇/异辛烷反胶束体系萃取葵花籽粕蛋白工艺研究

利用SDS(十二烷基磺酸钠)/正辛醇/异辛烷反胶束体系对葵花籽粕蛋白进行萃取,探讨在超声辅助萃取下,W0、缓冲液p H、缓冲液浓度、料液比(g/m L)、温度、时间以及表面活性剂浓度等对蛋白质前萃取率以及后萃取率的影响。结果表明:前萃取工艺的最佳条件SDS浓度为0.07g/m L,料液比为1∶25,盐浓度为0.07mol/L,p H为6.5,W0=27,萃取时间为35min,温度为40℃;后萃取最佳工艺条件为:盐浓度为0.9mol/L、缓冲液p H为7.5、萃取时间为45min、萃取温度为35℃,在此条件下,蛋白质的前萃率为89.93%,后萃率为65.01%,蛋白质提取率为58.46%。     

双水相体系萃取粗状假丝酵母脂肪酶的研究

通过比较不同无机盐与PEG组成双水相体系对粗状假丝酵母脂肪酶的萃取效果,系统地研究了脂肪酶在PEG/(NH_4)_2SO_4双水相体系中的分配行为,考察了PEG:分子量、PEG浓度、(NH_4)_2SO_4浓度和体系pH对脂肪酶分配系数和萃取率的影响,并通过响应面分析法进一步优化了萃取条件.结果表明最佳萃取条件为:PEG2000浓度18.3%,(NH_4)_2SO_4浓度17.4%,pH8.0,室温条件下其分配系数可达到13.3,纯化倍数达到1.53,萃取率达到92.2%.