电针对食源性肥胖大鼠下丘脑自噬相关蛋白7表达的影响

【目的】探讨电针对食源性肥胖大鼠下丘脑自噬相关蛋白7(Autophagy-related protein 7,Atg7)表达的影响。【方法】将40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组8只和饮食诱导肥胖(Diet-induced obesity,DIO)造模组32只,造模组给予高脂饲料饲养14周制备DIO大鼠肥胖模型,取造模成功的16只大鼠随机分为肥胖模型组和针刺干预组,每组各8只。针刺干预组选取中脘、足三里、天枢、三阴交穴进行治疗,每天1次,每周连续针刺5 d,共针刺干预4周。观察各组大鼠体质量的变化,Western blot法检测大鼠下丘脑Atg7蛋白质的表达。【结果】高脂喂养14周后肥胖模型组和针刺干预组大鼠体质量均明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P 0.05)。电针干预4周后,针刺干预组大鼠体质量显著低于肥胖模型组(P 0.05)。肥胖模型组大鼠下丘脑Atg7蛋白质含量明显低于正常对照组(P 0.05),电针干预组大鼠下丘脑Atg7蛋白质含量高于肥胖模型组(P 0.05)。【结论】电针干预可减轻肥胖大鼠体质量,可能与调控下丘脑自噬水平变化有关。     

减重手术调控胃饥饿素对肥胖大鼠摄食量和体质量的影响

目的:探究减重手术调控胃饥饿素(Ghrelin)从而对肥胖大鼠摄食量和体质量的影响。方法:将90只雄性5周龄SD大鼠随机分为普通饲料喂养组(15只)和高脂饲料喂养组(75只),自由摄食水，经过5周高脂饲料喂养，高脂饲料组中体质量高于普通饲料组20%以上的大鼠视为肥胖模型构建成功。将高脂饲料组大鼠随机分为肥胖模型组、假手术组、减重手术组，15只/组，造模期间记录大鼠体质量(1次/周)和每日摄食量。减重手术组采用袖状胃切除术，术后记录各组大鼠1-4周体质量和摄食量的变化，第4周腹主动脉取血检测血清三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量，WB检测胃组织Ghrelin、mTOR、p-mTOR、p70s6k、p-p70s6k蛋白表达情况。结果:与肥胖模型组相比，减重手术组的肥胖大鼠摄食量和体质量下降(P<0.05);减重术后第4周减重手术组大鼠血清三酰甘油和总胆固醇含量低于假手术组与肥胖模型组(P<0.05);与肥胖模型组相比，减重手术组大鼠胃组织中p-mTOR、p-p70s6k和Ghrelin的蛋白表达降低(P<0.05)。结论:减重手术可能通过抑制mTOR/p70s6k通路...     

高脂饮食诱导的肥胖大鼠下丘脑及肝脏组织中Toll样受体4的表达

目的 探讨在高脂饮食诱导下Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)在肥胖大鼠下丘脑及肝脏组织中的表达.方法 建立高脂饮食诱导的肥胖(DIO)大鼠模型,应用免疫组化染色和Real Time PCR方法检测下丘脑及肝脏组织中TLR4的蛋白及mRNA的表达.结果 喂养8周后,DIO组平均体重为(456.38±19.20)g,高于正常饮食对照组平均体重(372.10±22.47)g,两组间比较差异有显著性意义(P＜0.01);DIO组饮食量为(1229.23±57.29)g,高于正常饮食对照组饮食量(905.50±52.17)g,两组大鼠饮食量比较差异有显著性意义(P＜0.01).Real Time PCR方法显示,DIO组大鼠下丘脑组织TLR4 mRNA含量(0.56±0.16),高于正常饮食对照组TLR4 mRNA (0.39±0.10),P＜0.05; DIO组大鼠肝脏组织TLR4 mRNA含量(0.87±0.24),高于正常饮食对照组TLR4 mRNA(0.54±0.16),两组间差异也有显著性意义(P＜0.01).免疫组化染色肥胖组大鼠下丘脑及肝脏TLR4表达呈强阳性.结论 Toll样受体4在肥胖大鼠下丘脑及肝脏中的表达增多,提示下丘脑及肝脏的炎症反应参与了高脂饮食诱导肥胖的发生.     

急性白血病患者WIF-1基因启动子甲基化及β连环蛋白表达的研究

目的 探讨急性白血病(AL)患者Wnt抑制因子1(WIF-1)基因启动子甲基化及β连环蛋白(β-catenin)的表达在白血病中的意义.方法 采用甲基化特异性PCR检测山东大学附属千佛山医院2009年1月至2010年6月55例AL患者及对照组骨髓单个核细胞WIF-1基因启动子甲基化情况,流式细胞术检测AL患者及对照组骨髓单个核细胞β-catenin表达.结果 32.7％(18/55)的AL患者WIF-1基因启动子区域有异常甲基化,对照组末检测到WIF-1基因甲基化,两组差异有统计学意义(P＜0.05).甲基化组首次诱导治疗完全缓解率(38.9％,7/18)低于非甲基化组(81.1％,30/37),差异有统计学意义(P＜0.05).甲基化组与非甲基化组β-catenin的表达(17.5％±3.3％、15.4％±3.6％)均高于对照组(10.5％±1.5％,均P＜0.05);甲基化组β-catenin的表达高于非甲基化组(P＜0.05).结论 WIF-1基因启动子甲基化及β-catenin过表达可能参与了AL患者Wnt/β-catenin途径的异常激活.     

INFLUENCE OF DIFFERENT DIET ON NPY EXPRESSION IN ARCUATE NUCLEUS OF RATS HYPOTHALAMUS

目的:研究不同膳食对大鼠下丘脑弓状核神经肽Y(NPY)表达的影响.方法:以高能饲料饲养大鼠建立膳食诱导肥胖(DIO)大鼠模型,采用SP免疫组织化学染色法观察大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白的表达.结果:DIO组大鼠、饥饿组大鼠下丘脑弓状核NPY蛋白的表达明显高于对照组大鼠(P＜0.01,P＜0.05);DIO组大鼠与饥饿组大鼠比较,下丘脑弓状核NPY蛋白的表达无明显差别(P＞0.05).结论:禁食和高能饲料喂养均可上调大鼠下丘脑弓状核NPY的表达.     

中药黄芪对肥胖大鼠内皮血管舒张功能的影响

目的 研究黄芪对肥胖大鼠内皮依赖性与非内皮依赖性血管舒张功能的影响,为代谢综合征患者早期药物干预治疗提供确切的实验依据.方法 15只SD雄性大鼠分为3组.对照组予普通饲料喂养,肥胖组予高脂饲料喂养,黄芪干预组高脂饲料喂养的同时饮用黄芪液.6周后处死动物,处死前空腹12 h,处死后采集心脏血液,检测血浆生化指标,观察各组动物体质量变化,计算体脂比,取出主动脉置于器官浴槽中,观察离体主动脉环对乙酰胆碱或硝普钠的舒张反应. 结果 肥胖组动物脂代谢紊乱,血浆甘油三酯、总胆固醇及游离脂肪酸浓度明显升高,平均体质量较对照组增加23%,腹腔平均脂肪质量较对照组增加1.4倍,体脂比显著高于对照组.黄芪干预组动物平均体质量与肥胖组基本一致,腹腔平均脂肪质量较肥胖组减少32%,体脂比介于对照组与肥胖组之间,血浆甘油三酯水平明显下降,游离脂肪酸水平有所下降,但差异无统计学意义.肥胖大鼠内皮血管舒张功能明显受损,其最大舒张程度仅为对照组的46%.黄芪干预组动物内皮依赖性血管舒张功能较肥胖组改善.结论 黄芪对肥胖动物受损的血管内皮细胞功能具有确切的保护作用.     

Exendin-4对肥胖大鼠内皮依赖性血管舒张功能的作用研究

目的 研究肽类肠道激素高血糖素样肽1(GLP-1)类似物艾塞那肽(exendin-4,Ex 4)对高脂饲料诱导的肥胖大鼠内皮依赖性血管舒张功能的影响.方法 将20只雄性Wistar大鼠随机分成2组(每组10只),正常对照组给予普通饲料喂养,肥胖组给予高脂饲料.观察各组动物体质量变化,10周后处死大鼠,采集心脏血液,检测血浆生化指标,计算体脂比,分离出主动脉置于器官浴槽中,肥胖组血管环分为肥胖Ex-4组与空白对照组两亚组(每组10个血血管环).肥胖EX-4组血管环以Ex-4加Krebs-Henseleit液(K-H液)孵育,正常对照组及肥胖空白对照组以K-H液孵育,加入不同浓度的乙酰胆碱和硝普钠,观察各组血管环内皮依赖性与非内皮依赖性血管舒张功能.结果 肥胖组动物脂代谢紊乱,血浆甘油三酯、总胆固醇及游离脂肪酸浓度较正常对照组升高(P＜0.01),腹腔脂肪质量及体脂比均高于正常对照组(P＜0.05).与正常对照组相比,肥胖大鼠内皮依赖性血管舒张功能受损(P＜0.05).肥胖EX-4组大鼠内皮依赖性血管舒张功能较肥胖空白对照组改善(P＜0.05).3组间非内皮依赖性血管舒张功能差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Ex-4对肥胖大鼠血管受损的内皮细胞具有确切的保护作用.     

长期高脂饮食导致的大鼠肥胖与小肠脂肪吸收相关分子的表达

【摘要】 目的 探讨高脂膳食诱导的肥胖大鼠小肠脂肪吸收相关分子apoB48、 apoAIV及MTP表达水平的变化情况。方法 选取出生21d,断乳3d的健康雄性SD大鼠60只,适应性喂养3d后,随机分为正常对照组20只［喂食基础饲料(290千卡/100g)］和高脂膳食组40只［喂食高脂饲料（430千卡/100g）］。大鼠均自由摄食和饮水,每周测量体重及身长。饲养24周后,高脂膳食组中肥胖大鼠共32只,随机选取20只作为肥胖组大鼠。测定记录大鼠体重,计算Lee’s 指数,测定并记录大鼠腹腔脂肪重量。记录大鼠每天摄食量,采用滴定法测定大鼠粪便脂肪含量,计算小肠脂肪吸收率。采用比色法测定大鼠空腹血糖及血脂水平,放免法测定胰岛素水平,计算HOMA指数。RT PCR及Real time PCR法测定大鼠小肠apoB、apoAIV及MTP mRNA表达水平。蛋白质免疫印迹法测定大鼠小肠MTP蛋白表达水平。用ELISA法测定大鼠小肠匀浆液apoB48含量。结果 肥胖组大鼠的体重、Lee''s指数、腹腔脂肪湿重、空腹血糖、TC、TG、胰岛素水平、HOMA指数及小肠脂肪吸收率较正常对照组大鼠显著增高（P＜005）; RT PCR及Real time PCR结果均显示,与正常对照组比较,肥胖组大鼠小肠apoB、apoAIV及MTP的mRNA表达水平均显著升高（P＜005）;蛋白质免疫印迹结果显示,与正常对照组比较,肥胖组大鼠小肠MTP蛋白表达水平显著升高（P＜001）;与正常对照组比较,肥胖组大鼠小肠匀浆液apoB48含量显著升高（P＜001）。结论 高脂膳食诱导的肥胖大鼠小肠apoB48、apoAIV及 MTP表达水平均显著增加,小肠脂肪吸收功能增强。     

肥胖大鼠瘦素信号传导通路的变化

目的筛选与人类代谢障碍性肥胖症发病病因学相似的肥胖大鼠模型,并对肥胖个体Leptin信号传导通路的改变情况进行初步研究。方法离乳雄性Wistar大鼠以高脂饲料喂养6周后,取体重增加值大的前1/4部分作为肥胖倾向组大鼠。对肥胖倾向组大鼠,继续进行高脂饲料喂养,并观察其体重、血清Leptin的变化趋势;试验49周后,大鼠处死,对内脏脂肪含量、附睾脂肪细胞大小以及下丘脑LRb(Leptin受体b亚型)表达水平及Stat3磷酸化水平(Tyr705磷酸化)进行测定。结果正常对照组大鼠和肥胖倾向组大鼠在不同饲料喂养的第17周开始体重相对增加值出现组间显著性差异;除第16周肥胖倾向组大鼠的血清Leptin浓度高于正常对照组,但不存在显著性差异之外,其它采血时间点,肥胖倾向组的血清Leptin浓度均显著高于正常对照组;动物处死后,肥胖倾向组大鼠的内脏脂肪含量和附睾脂肪细胞大小均显著大于正常对照组;两组大鼠在下丘脑LRb表达水平和细胞浆内Stat3磷酸化水平方面不存在显著性差异。结论本研究得到了与营养性肥胖人群临床表现相似的肥胖大鼠;同时发现,肥胖大鼠在长期高浓度Leptin刺激后,可能引起了中枢性Leptin抵抗,致使Leptin对体重调节的正常生理作用受到抑制,脂代谢异常的程度进一步加深,最终表现为脂肪细胞体积增大、内脏脂肪含量升高和体重增加。     

热量控制8周对胰岛素抵抗肥胖大鼠糖脂代谢及下丘脑POMC蛋白表达量影响

目的:探讨热量控制8周对于胰岛素抵抗肥胖大鼠糖脂代谢及下丘脑POMC蛋白表达量的影响。方法:选用SPF级8周龄大鼠50只,随机分为两组:空白组20只,普通饲料喂养;肥胖组30只,高脂饲料喂养。8周喂养后行造模检测,将肥胖组中符合造模条件的大鼠随机分为模型组、热量控制组(热控组),每组各10只,空白组中随机挑选10只组成正常组。模型组行高脂饲料喂养,热控组每日高脂饲料喂养量为模型组的70%,正常组仍按普通饲料喂养,干预时间均为8周。实验结束后处死大鼠,检测各组大鼠体质量、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、餐后血糖(PBG)和胰岛素(INS)水平变化。用Western Blotting法检测下丘脑POMC蛋白表达水平。结果:8周干预后,肥胖组大鼠GIR60～120明显低于空白组大鼠(P0.01)。与正常组比较,模型组大鼠的体质量明显增加(P0.05),并且TC、TG、PBG和INS的含量均显著升高(P0.01),但FBG的含量差异无统计学意义(P0.05),下丘脑POMC蛋白含量减少(P0.05)。与模型组比较,热控组大鼠的体质量显著降低(P0.01),TG含量有所下降(P0.05),且TC、PBG、INS含量均显著下降(P0.01),FBG的含量差异无统计学意义(P0.05),大鼠下丘脑POMC蛋白含量显著增多(P0.01)。结论:热量控制8周可以有效地控制胰岛素抵抗肥胖大鼠的体质量增长,并且改善胰岛素抵抗大鼠的糖脂代谢状况,其机制可能与下丘脑POMC蛋白的表达增多有关。     

鱼腥草素钠对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织PI3K?AKT1及mTOR mRNA 表达的影响

目的 观察鱼腥草素钠对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织中PI3K?AKT1 及mTOR mRNA 表达的影响,并探讨其作用机制?方法 选取Wistar 雄性大鼠24 只,体重(220 ± 20)g,随机分为正常组?模型组?地塞米松组和鱼腥草素钠组(每组6 只)?采用烟熏和脂多糖气管滴注联合方法建立慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD) 大鼠模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PI3K?AKT1 及mTOR mRNA 表达,并观察大鼠肺组织病理变化?结果 与正常组相比,模型组大鼠肺组织PI3K?AKT1 mRNA 表达显著增高( P <0.01, P <0.05),mTOR mRNA 表达显著降低( P <0.01);与模型组相比,鱼腥草素钠组和地塞米松组肺组织PI3K?AKT1 mRNA 表达显著降低( P <0.01, P <0.05),mTOR mRNA 表达显著增高( P <0.01);与地塞米松组相比,鱼腥草素钠组肺组织mTOR mRNA 表达显著增高( P <0.05)?病理观察结果显示,与正常组比较,模型组局部肺实变,肺泡腔内大量中性粒细胞浸润,胶原染色显示肺间质纤维组织大量增生;鱼腥草素钠组和地塞米松组肺组织病理改变明显轻于模型组,鱼腥草素钠组和地塞米松组肺组织呈轻度间质性肺炎,仅见少量的纤维组织增生?结论 鱼腥草素钠能够减轻慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织损伤,其机制可能与其能够下调PI3K?AKT1 mRNA 的表达?上调mTORmRNA 表达有关?     

清润方对糖尿病大鼠肝脏PI3K/AKT/mTOR信号的影响

目的 研究清润方对2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠PI₃K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法 采用脂肪乳灌胃和腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）建立2型糖尿病胰岛素抵抗模型。将大鼠随机分成空白对照组、模型组、清润方大剂量组[11.2g/（kg·d）]、清润方中剂量组[5.6g/（kg·d）]、清润方小剂量组[2.8g/（kg·d）]、二甲双胍组[250mg/（kg·d）]。各组均灌胃给药。每天1次,连续8周。干预后检测血清中血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL-C）和高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL-C）,检测肝组织中p-AKT、p-PTEN及p70S6K的mRNA以及蛋白表达水平。结果 与模型组比较,清润方大剂量组和二甲双胍组的TC、TG和LDL-C降低,HDL-C升高（P<0.05）。清润方大剂量组的AKT和PTEN的mRNA表达升高（P<0.05）,p70S6K的mRNA表达下降（P<0.05）,与模型组比较,清润方大剂量组的p-AKT和p-PTEN的蛋白表达升高（P<0.05）,p-p70S6K的蛋白表达下降（P<0.05）。结论 清润方可能通过PI₃K/AKT/mTOR信号通路来改善胰岛素抵抗。     

维生素D对老龄大鼠超负荷诱导的骨骼肌肥大及维生素D受体表达的影响

目的 采用腓肠肌远端腱切术方案建立老龄大鼠骨骼肌肥大模型,探讨维生素D补充对老龄大鼠骨骼肌肥大的影响及可能机制。方法 雄性大鼠（24个月龄）20只,手术切断左后肢单侧腓肠肌远端肌腱造成超负荷骨骼肌肥大模型（Overload,Ovld侧）,另一侧行假手术（Sham侧）。造模完成后将大鼠随机分为对照组和维生素D组,维生素D组每天灌胃1 000 IU/kg的维生素D,对照组灌胃等量大豆油（溶剂）,干预1周后处死。无菌条件下取腹主动脉血待检;取左、右后肢跖肌称量,并液氮速冻,置低温冰箱保存待测。采用ELISA法检测血清25（OH）D含量和骨骼肌中维生素D受体（VDR）的含量;采用蛋白质印迹法检测mTOR、rpS6蛋白及其磷酸化水平的表达。结果 在实验期间,2组大鼠摄食量和体质量差异无统计学意义。2组大鼠 Ovld侧跖肌质量均较Sham侧增加（P<0.05）,且维生素D Ovld侧跖肌的质量高于对照组（P<0.05）,而2组Sham侧跖肌质量差异无统计学意义。ELISA结果显示,补充维生素D提高了大鼠血清25（OH）D水平（与对照组比较P<0.05）,促进了Ovld侧肌组织VDR的表达（与Sham侧比较,P<0.05）,而对照组Ovld侧肌组织VDR的表达与Sham侧比较差异无统计学意义。蛋白质印迹结果显示,2组Ovld侧肌组织中p-mTOR/mTOR、p-rpS6/rpS6比值均比Sham侧增加,但仅在维生素D组差异有统计学意义（P<0.05）。结论 腓肠肌远端腱切术能够有效促进老龄大鼠骨骼肌肥大,而维生素D补充能进一步促进骨骼肌肥大,其机制可能与维生素D促进老龄大鼠骨骼肌中VDR的表达和蛋白质合成相关信号蛋白mTOR、rpS6的表达有关。     

增食欲素受体1在营养性肥胖大鼠肾上腺皮质中的表达及意义

 目的探讨营养性肥胖大鼠肾上腺皮质组织中增食欲素受体1（OX1R）的表达规律,以及下丘脑增食欲素（orexin）系统对其调节作用。方法高脂饮食诱导构建并评估营养性肥胖大鼠动物模型;免疫组化法检测肾上腺皮质组织中OX1R 的表达;侧脑室注射orexin 反义的硫代磷酸化鄄脱氧寡核苷酸（OX鄄PS鄄ODNs）干预下丘脑增食欲素系统,分析肾上腺皮质中OX1R 的变化规律。结果大鼠高脂膳食饲养8 周后,营养性肥胖组大鼠体质量、体脂含量、Lee忆s指数、血糖、胰岛素、甘油三酯、总胆固醇高于对照组（ < 0.05）。OX1R的蛋白表达定位于大鼠肾上腺皮质束状带细胞的细胞质中;与正常对照组相比,营养性肥胖大鼠
肾上腺皮质中的OX1R的表达升高（ < 0.05）,且OX1R的表达量与Lee忆s 指数、血糖、胰岛素、甘油三酯、总胆固醇呈显著负相关（ 分别为-0.829,-0.710,-0.801,-0.733和-0.756）。OX鄄PS鄄ODNs干预下丘脑orexin 系统2 d后,营养性肥胖大鼠肾上腺皮质中OX1R的表达明显下降（ < 0.05）。结论大鼠肾上腺皮质束状带细胞的细胞质中有OX1R 的表达,营养性肥胖大鼠体内orexin 系统可能通过下丘脑鄄垂体鄄肾上腺（HPA）轴参与调控能量代谢。     

四逆散对心理应激肝郁证模型大鼠ERK1/2-CREB信号通路的影响

[目的]探讨四逆散对心理应激肝郁证模型大鼠应激相关激素、神经递质及海马和下丘脑部位细胞外信号调节蛋白激酶1/2（ERK）1/2-cAMP反应元件结合蛋白（CREB）信号通路的影响。[方法]采用慢性束缚制动结合孤养的方法制备心理应激肝郁证大鼠模型,根据大鼠一般状态、体质量增长情况、高架十字迷宫实验验证模型成功。将120只大鼠随机分为正常对照组、模型空白组、模型+四逆散组（四逆散组）、模型+艾司唑仑组（艾司唑仑组）,各30只。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测大鼠血浆及脑脊液促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）、促肾上腺皮质激素（ACTH）、肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）的含量,半定量PCR法检测大鼠海马和下丘脑部位丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2（MEK1/2）、ERK1/2、CREB、c-fos mRNA的表达,蛋白印迹（Western blot）法检测大鼠海马和下丘脑部位磷酸化（p-）MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB、c-fos蛋白的表达。[结果]与正常对照组比较,模型空白组大鼠血浆和脑脊液中CRH、ACTH、E、NE的含量明显增加（P<0.05）,5-HT的含量明显减少（P<0.05）,海马和下丘脑部位MEK1/2、ERK1/2、CREB mRNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达明显降低（P<0.05）。与模型空白组比较,四逆散和艾司唑仑均可降低血浆和脑脊液中CRH、ACTH、E、NE的水平（P<0.05）,升高5-HT的水平（P<0.05）,上调海马和下丘脑部位MEK1/2、ERK1/2、CREB mRNA及p-MEK1/2、p-ERK1/2、p-CREB蛋白的表达（P<0.05）。各组之间大鼠海马和下丘脑部位c-fos mRNA和蛋白质的表达差异无统计学意义（P>0.05）。[结论]四逆散能降低心理应激肝郁证模型大鼠血浆和脑脊液CRH、ACTH、E、NE的水平,增加5-HT的含量,提高应激反应能力,其机制可能与上调ERK1/2-CREB信号通路活动有关。     

哮喘大鼠肺CD4＋T细胞Notch1基因启动子甲基化的研究

目的研究支气管哮喘模型大鼠肺CD4＋T细胞中的Notch1基因mRNA表达水平、Notch1基因启动子区DNA甲基化水平及其甲基化改变的位点。方法 20只Wistar大鼠随机分为对照组和哮喘组（每组10只）,哮喘组用卵白蛋白（OVA）致敏并激发的方法建立哮喘大鼠模型。免疫磁珠分离肺CD4＋T细胞并进行纯度鉴定。Real-time PCR检测肺CD4＋T细胞Notch1基因mRNA表达水平,重亚硫酸盐测序检测Notch1基因启动子区DNA甲基化水平。结果哮喘组大鼠肺CD4＋T细胞中Notch1基因mRNA表达水平为对照组的（2.254±0.403）倍（P〈0.01）。哮喘组大鼠肺CD4＋T淋巴细胞Notch1基因启动子区DNA 10个位点整体甲基化水平低于对照组（0.150±0.108比0.300±0.667,P〈0.01）。结论哮喘大鼠肺CD4＋T细胞Notch1基因DNA低甲基化可能参与了Notch1基因的转录调控,增高了Notch1基因的表达量,从而参与了哮喘的发病。     

苏子油对肥胖大鼠肝脏极低密度脂蛋白合成关键基因表达的影响

目的 探究富含n-3多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid,PUFA)的苏子油高脂饮食对肥胖大鼠肝脏极低密度脂蛋白(very low density lipoproteins,VLDL)合成关键基因表达的影响。方法 造模期:雄性SD大鼠随机分为2组,对照组(normal control group, NC)给予普通日粮,高脂组(high fat group, HF)给予高脂纯合日粮诱发肥胖大鼠模型;干预期:将肥胖大鼠随机分为4组:持续高脂组(consistent high fat group, CHF)和三个苏子油(perilla oil, PO)替代组,根据PO替代CHF中猪油比例的不同将替代组分为20% PO、50% PO、100% PO,4周后测定大鼠血清甘油三酯(tryglyceride, TG)水平;western blotting方法检测肝脏VLDL合成关键蛋白微粒体甘油三脂转运蛋白(microsomal triglyceride transfer protein,MTP)和载脂蛋白B(apolipoprotein B,APOB)蛋白表达;real-time PCR方法检测肝脏Mtp、Apob mRNA表达。结果 肥胖大鼠血清TG水平显著高于NC组,并且有严重的脂肪沉积,肝脏MTP和APOB的mRNA、蛋白表达均有不同程度的降低;干预4周后,与CHF组相比,各PO替代组大鼠血清TG水平明显降低,病理切片结果显示肝脏脂肪沉积有明显改善,并且肝脏MTP和APOB的mRNA、蛋白表达均有不同程度的升高。结论 不同比例PO替代均能促进肥胖大鼠肝脏VLDL合成与分泌,改善肝脏脂肪沉积,并且PO促进Mtp mRNA、蛋白表达具有剂量依赖性。     

电针对单纯性肥胖大鼠下丘脑肥胖抑制素表达的影响

目的：观察电针治疗对单纯性肥胖大鼠肥胖抑制素的影响。方法：采用高脂高糖饮食制备营养性肥胖大鼠模型。将造模成功的24只肥胖大鼠随机分为模型组和电针治疗组,另选12只正常大鼠作为空白对照组。电针治疗组的大鼠予电针刺激双侧足三里、天枢、脾俞穴,连续治疗15 d;空白对照组和模型组大鼠不予干预。观察各组大鼠体质量,治疗结束后,检测内脏脂肪量,用放射免疫法检测血清肥胖抑制素含量,免疫组织化学方法检测下丘脑组织中肥胖抑制素的表达。结果：模型组大鼠体质量显著高于空白对照组（P〈0.01）。造模后饲以普通饲料,模型组大鼠的体质量和内脏脂肪量显著高于空白对照组（P〈0.01）,体质量增加量显著低于空白对照组（P〈0.01）;电针治疗组大鼠的体质量、体质量增加量和内脏脂肪量显著低于模型组（P〈0.01）,与空白对照组比较差异无统计学意义。模型组下丘脑组织中肥胖抑制素表达水平和血清中肥胖抑制素含量明显高于空白对照组（P〈0.05,P〈0.01）;模型组下丘脑组织中肥胖抑制素表达水平与电针治疗组比较,差异亦有统计学意义（P〈0.01）。结论：电针对肥胖大鼠具有良好的减肥效果,其作用机制可能与增强下丘脑组织肥胖抑制素的表达有关。     

不同方法制备大鼠宫内发育迟缓模型的比较

目的宫内发育迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)是以新生儿出生体重低的方式表现出来。以实验中常用的三种方法建立IUGR模型,通过对实验数据比较分析,为科研工作中IUGR模型的建立提供参考依据。方法将20只妊娠第0天的孕鼠随机分为四组,每组5只,其中三组分别采用酒精干预法(A)、子宫动脉结扎法(U)、低蛋白饮食法(LP)等方法建立IUGR大鼠模型,第四组为正常对照组(CON),于大鼠孕期第20天剖宫产取胎鼠,称量胎鼠的体质量、脑质量、胎盘质量和双肾质量等,并测量身长及尾长,计算IUGR发生率、成活率和脑比重、胎盘比重等;各组随机将剖宫产的胎鼠继续饲养,在3周、6周、12周时测量其体质量、肾周脂肪质量及部分脏器质量。结果酒精干预法、子宫动脉结扎法、低蛋白饮食法中三组胎鼠平均体质量明显低于正常对照组(P0.05),同时胎鼠IUGR发生率明显高于正常对照组(P0.05),子宫动脉结扎组胎鼠成活率低于其他两组。大鼠饲养3周后,实验组大鼠平均体质量均明显低于正常对照组(P0.05);饲养6周后,实验组大鼠平均体质量仍低于正常对照组的水平,差异无显著性(P0.05);饲养12周后,酒精干预组和低蛋白饮食组大鼠平均体质量明显高于正常对照组(P0.05)。结论三种造模方法均可成功建立IUGR模型,其中低蛋白饮食组建立的IUGR动物模型发生率高,死胎率低,适用于模型研究;在追赶性生长这方面,酒精干预组及低蛋白饮食组在剖宫产大鼠产后及哺乳期时平均体质量均低于正常对照组,但哺乳期后生长速度远超过正常对照组,表明此两组实验组出现了追赶性生长。     

慢性应激对大鼠下丘脑CRHR1基因启动子区域DNA甲基化的作用

目的:研究慢性应激所致的动物下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素受体1(CRHR1)表达和基因启动子区域甲基化状态关系。方法:将大鼠随机分为抑郁组和对照组各9只,抑郁组进行21d的慢性不可预见性温和应激。进行行为学观察,用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹和亚硫酸氢盐修饰后测序分别检测mRNA及蛋白质表达和DNA甲基化。结果:抑郁组行为学有所改变,mRNA及蛋白质表达升高,均与对照组有显著差异,而DNA甲基化没有明显不同。结论:慢性应激后,CRHR1表达上调,但其非由DNA甲基化机制调控。