2009-2011年上海市手足口病病原学检测及其临床特点分析

目的 了解上海市手足口病不同病原体的感染现状以及所致的手足口病的临床特点之间的差异,为制定观察、治疗方案,做好手足口病防控工作提供参考.方法 采集2009年3月至2011年12月在本院传染科门诊诊断为手足口病的357例病例的咽拭子、疱疹液、粪便共551份标本进行病原学检测.用RT-PCR法对肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)、肠道病毒通用型(PE)进行鉴别.结果 357例手足口病患儿共采集到551份标本,检测病毒总阳性率为79.7％,2009年手足口病以CoxA16流行为主,2011年以EV71流行为主,三年病毒流行株差异有统计学意义(P =0.005);疱疹液病毒检出率最高;EV71、CoxA16、PE病毒感染的手足口病患儿在发热、易惊的发生比例比较差异有统计学意义(P＜0.05);EV71感染的患儿外周血白细胞计数和中性粒细胞比例要高于CoxA16和PE感染的患儿,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 上海市手足口病在不同时期病原体呈现交替流行;对不同病原体临床特征的分析比较有助于EV71感染的防控、早期治疗、重症病例的筛查.     

2007-2012年北京市手足口病流行病学研究

目的 对2007-2012年北京市手足口病进行流行病学和病原学分析,为手足口病防控提供科学依据.方法 利用2007-2012年手足口病监测数据对其进行流行病学研究.结果 2007-2012年北京市手足口病流行呈现周期性趋势,北京市手足口病高发区域呈环形带分布,中心城区和远郊区县病例数少,近郊区和城区结合部报告病例数多.患者发病时间以4-9月份为主,高峰集中在5-7月份.病例发病年龄以5岁及以下儿童为主;本市户籍和外省户籍手足口病病例比为1.70∶1;散居儿童手足口病例中重症病例构成比和死亡例数高于幼托儿童.EV71和CoxA16为手足口病的主要病原体,CoxA16在重症病例和死亡病例中所占比例较低,而EV71所占比例较高,其他肠道病毒在重症病例中也占较高比例.结论 北京市手足口病发病呈现周期性变化,应加强城乡结合部、流动人口聚居地5岁以下儿童,特别是散居儿童手足口病防病知识宣传.     

2011年广州市手足口病病原谱分析

目的了解引起2011年广州市手足口病流行的病原体,确定其型别分布特征。方法收集手足口病疑似病例标本,用Real-time RT-PCR、巢式RT-PCR方法对其部分VP1基因进行扩增并测序,确定其病原谱构成,构建系统发育树。结果共收集2 067例疑似手足口病病例标本,其中实验室确诊肠道病毒阳性1 113份,包括EV71、CoxA16、CoxA6、CoxA10、CoxA9、HEV96、埃可病毒和柯萨奇B组等15种肠道病毒,其中EV71、CoxA16和CoxA6是主要病原体,分别占32.6%、39.2%和18.5%;死亡病例3例,全部由EV71引起;重症病例9例,6例由EV71引起,3例由CoxA6引起。VP1基因构建进化树分型发现,广州市2011年手足口病病原体属于HEV-A（97.2%）、HEV-B（2.5%）、HEV-C（0.3%）3个型别,未发现HEV-D型毒株。结论广州市2011年手足口病的流行主要由HEV-A型的EV71、CoxA16和CoxA6病毒引起,同时还存在HEV-B型和HEV-C型的CoxA9、EC、CoxB、CoxA24多种病毒。     

深圳市某街道2009-2010年手足口病病原体监测分析

目的对2009-2010年深圳市某街道手足口病进行病原学监测分析。方法收集5440份手足口病患者的病原学监测资料,对资料进行描述性分析和χ2检验。结果总肠道病毒（EV71和CoxA16）阳性率为43.3%,其中EV71阳性率为19.4%,CoxA16阳性率为23.9%,二者差异无统计学意义（χ2=0.396,P=0.529）。男性总肠道病毒阳性率为44.7%,女性阳性率为41.4%,不同性别间肠道病毒阳性率差异无统计学意义（χ2=0.076,P=0.783）。各年龄段肠道病毒阳性率差异有统计学意义（χ2=4.241,P=0.039）。12名重症患者中,EV71阳性率75.0%。结论深圳市某街道2009-2010年手足口病流行的病原体为EV71和CoxA16,不同性别的阳性率无差别,各年龄段肠道病毒阳性率差异有统计学意义。     

2008年深圳地区手足口病病原学调查

目的 研究2008年深圳地区手足口病病原体EV71和CoxA16感染情况,为手足口病的防治提供依据.方法 应用RT-PCR技术检测307例手足口病患儿标本病原体EV71、CoxA16基因,将PCR产物测序,并应用ChstaIW2在线分析软件进行序列分析、进化树分析.结果 不同标本中EV71的阳性率分别为:大便标本24.4%(75/307)、咽拭子为7.8%(24/307)、外周血12.5%(1/8);CoxA16的阳性率分别为,大便13.8%(28/203),咽拭子11.0%(20/181),其中EV71和CoxA16同时为阳性的有3份(0.98%);脑脊液标本未检测到EV71和CoxA16.与标准株BrCr序列比对分析,测序的14例标本中,8例的EV71新出现多个位点变异,其中2例标本的A2528G变异导致氨基酸改变,即N595D,1例标本的A2714G变异引起氨基酸改变,即1658V.进化树分析显示,有2例标本的病毒株与anhui毒株亲缘关系较近,与标准株BrCr及深圳株SHH02-6、SHZH02-40、SHZH03-58等亲缘关系较远;而其余12株与上述毒株亲缘关系较远.根据文献报道的EV71基因分型方法分析,测序的14株EV71基因型为C型.结论 在引起2008年深圳手足口病病原体中相当的比例是EV71,且可能部分是anhui病毒株的入侵.     

实时荧光定量RT-PCR法定量检测手足口病病原体的探讨

目的了解北京市门头沟区手足口病患儿感染病毒的型别,探索用荧光定量RT—PCR法对手足口病患者咽拭子标本中肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A16（CoxA16）型病毒载量进行定量检测的可行性。方法采用实时荧光RT—PCR体外扩增法对81例手足口病患儿咽拭子标本提取的RNA进行检测。结果28例手足口病患者体内CoxA16病毒载量〉10^3 copies·ml-1。实时荧光定量RT—PCR法构建的标准曲线显示,样本阈值环数（Ct）值与病毒拷贝数的对数（10g10）之间的相关系数为0．9998,相关性良好。4例手足口病患者咽拭子标本中EV71型病毒载量〉10^3 copies·ml-1。实时荧光定量RT-PCR法标准曲线显示,Ct值与病毒拷贝数的对数之间的相关系数为0．9996,相关性较好。结论门头沟区手足口病病原谱以CoxA16型为主,34．6％的手足口病患儿CoxA16型病毒载量〉10^3 copies·ml-1,4．9％的患儿EV71型〉10^3 copies·ml-1。实时荧光定量RT-PCR法对咽拭子标本中CoxA16、EV71核酸定量检测比较简便快速、结果直观、稳定性强,为进一步探讨患者体内病毒载量与临床症状的关系打下了良好的基础。     

实时RT-PCR检测159例手足口病患儿样本中肠道病毒的结果分析

目的 了解2009年4-8月首都儿科研究所附属儿童医院手足口病患儿肠道病毒的感染状况,为临床诊治提供参考.方法 采集首诊手足口病159例患儿的咽拭子和疱疹液标本,以肠道病毒(EV)通用型、柯萨奇病毒A16(CA16)型、肠道病毒71(EV71)型核酸检测试剂盒,应用实时RT-PCR法检测标本中的肠道病毒.选取阳性标本扩增VP1区,产物进行序列测定和分析.结果 (1)EV、CA16、EV71的阳性病例数分别为152、102、43;阳性率为95.6%、64.2%、27.0%.(2)CA16占EV阳性的67.3%,EV71占EV阳性的28.3%,非CA16和EV71的EV病例7例,占EV阳性的4.6%.CA16:EV71为2.37:1.(3)部分阳性标本经测序验证与此法结果一致.结论 2009年我院手足口病患儿以EV71和CA16感染为主,EV71感染的手足口病比例较2007年出现明显上升.     

湖南省祁阳县2012-2015年手足口病流行病学特征及防制策略研究

目的 分析湖南省祁阳县2012-2015年手足口病的流行病学特征,探索影响手足口病的影响因素,为调整控制策略提供依据.方法 运用SPSS 13.0软件对2012-2015年手足口病数据进行统计分析.结果 祁阳县2012-2015年共报告手足口病病例3 430例,年均发病率80.90/10万.病例发病时间集中分布在5-6月,占病例总数的44.99％.病例年龄最小的为3个月,最大的为17岁,0～5岁年龄组占发病数的94.08％,男女性别比为1.9:1.散居儿童占发病总数的91.05％.乡村高于城镇,其差异有统计学意义.致病病原体EV71、CoxA 16和其他肠道病毒同时存在,以EV71为主,占总数的50.49％.死亡病例2例均为EV71感染.结论 2012-2015年祁阳县手足口病发病水平呈逐年增高趋势,应重点加强对散居儿童的防控力度.     

深圳市61例手足口病重症病例流行病学特征

目的了解深圳市手足口病重症病例的流行病学特点和临床特征。方法对深圳市2010年61例手足口病重症病例进行个案调查,收集信息,建立数据库并进行统计分析。结果 5月是手足口病重症高发季节,男女比例为1.77：1,3岁以下患儿占80.33%,散居儿童占83.61%,临床表现以发热和皮疹为主,出现呕吐、嗜睡占67.21%,病原体为EV71占88.10%,从发病到首诊的时间间隔为1.98d。结论深圳市手足口病重症发病有季节性,以3岁以下散居儿童多发,应在流行季节针对重点人群开展综合防控措施。     

2012～2019年北京佑安医院手足口病流行特征及中性粒细胞/淋巴细胞比值的分析

目的 分析2012～2019年北京佑安医院手足口病(HFMD)流行趋势变化,比较不同型别HFMD中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR).方法 回顾分析2012年6月至2019年12月北京佑安医院收治HFMD流行病学资料和临床资料,统计分析各型别肠道病毒(EV)的流行趋势及NLR水平变化.结果 共收集8726例经临床确诊的手足口病例,好发年龄为1～3岁和3～6岁,男性多于女性,在2014年发病例数达到高峰(n=2032),随后逐年下降,2012、2014和2016年EV71、CA16为主要感染型别,2017年后EV71感染比例下降,CA16感染比例上升.其他EV型别在2013、2015和2018为主要型别,与EV71、CA16交替出现高峰,对2017、2018年97例样本分型显示主要型别为CA6、CA10,且存在共感染病例.EV71病例住院比例最高为30.88％,但NLR维持在低水平为1.54,CA6、CA10共感染病例NLR水平最高为4.26,但住院比例较低为8.33％.结论 不同型别EV的共同流行与共感染增加了病毒之间基因重组和病例重症化的风险,长期、持续监测其流行趋势变化,对H FMD及时、早期预防与控制具有重要意义.     

手足口病重症化的危险因素、病理改变及临床干预

目的探讨手足口病（HFMD）重症化的危险因素及病理改变,为临床干预提供依据。方法回顾性分析宁波市第二医院2010年1月至2012年12月住院的2606例HFMD患儿的临床资料,分为普通组和重症组,分析筛选出HFMD重症化的危险因素;并对1例死亡患儿实施尸体解剖,分析其病理改变。结果2606例患儿中,重症HFMD619例（23．7％）;多因素分析显示EV71感染、精神差、血糖〉9mmol／L、高热（体温≥39．1℃）持续3d以上、年龄〈3岁以及神经反射异常等6项指标是HFMD重症化的独立相关因素;重症患儿的病变主要在中枢神经系统、肺脏以及肠道。结论对于EV71感染、年龄〈3岁且伴有精神、神经系统症状和血糖升高的高热HFMD患儿需关注其病情变化,并进行针对性的临床干预,且肠道功能的保护不容忽视。     

北京市2012年手足口病病原学监测重症病例危险因素分析

目的 分析北京市2012年手足口病病原学监测数据,了解北京市手足口病重症病例分布特征及危险因素,为调整防制策略提供依据.方法 对北京市18个区县疾控中心上报的手足口病病原学数据进行统计,采用现况研究的方法,利用EXCEL录入数据库,将所有病原学监测阳性病例分为重症病例组和轻症病例组,运用SPSS17.0软件分析患儿进展为重症病例的影响因素及因素间交互作用.结果 单因素分析中,年龄、居住地、是否为托幼儿童及EV71阳性对病例是否进展为重症病例有影响.多因素分析显示,年龄≤3岁（OR =4.58,95％CI 2.90 ～ 7.09）、散居儿童（OR =2.7,95％CI 1.72 ～4.26）、流行季病例（OR=2.46,95％CI 1.40 ～4.34）、居住地为郊区病例（OR=5.84,95％ CI 2.33～14.63）及EV71阳性（OR=2.77,95％CI 1.94 ～3.98）为手足口病例进展为重症病例的危险因素.交互作用分析显示居住地与年龄和看护类型、看护类型与性别、EV71与年龄和看护类型对于是否重症存在协同作用.结论 年龄≤3岁、居住在郊区、EV71阳性为手足口病例进展为重症病例的危险因素.     

临沂地区1426例手足口病流行病学及临床特征分析

目的探讨山东省临沂地区手足口病的流行病学及临床特征,为制定本地区疾病防治措施提供依据。方法制定手足口病观察项目表,采集2012年4—9月山东省临沂地区1426例手足口病患者的流行病学及临床特征,果用描述流行病学方法进行分析。结果临沂地区手足口病发病高峰为5月,以3岁以下散居及幼托儿童为主,发病率男童多于女童,农村高于城镇。临床表现主要包括发热、皮疹等,重症患儿可发生多系统并发症。辅助检查可见白细胞及中性粒细胞比值增高等特征。EV71为重症病例的主要病原,占重症病例的77．21％。结论山东省临沂地区手足口病流行具有明显季节性、人群性及地区性。针对本地区流行病特点,制定区域特异性防治措施至关重要。     

惠州市重症手足口病病原谱及EV71型VP1区基因特征分析

目的分析惠州市手足口病重症病例的病原谱构成,了解惠州市肠道病毒71型分离株的VPl区基因特征．为科学防治手足口病提供科学依据。方法采集300例重症手足口病（HFMD）患者标本,采用实时荧光RT-PCR检测肠道病毒核酸,并对肠道病毒7l型（EV71）和柯萨奇病毒A16型（CoxA16）进行分型检测;选择8株EV71分离株进行VPl区基因全长序列测定,测序结果利用DNASTAR软件进行核苷酸、氨基酸序列分析和同源性比较。并用Mega5．0软件构建亲缘性进化树。结果通过实时荧光RT-PCR特异性检测,EV71阳性结果154份,阳性率为51．33％;CoxAl6阳性结果38份,阳性率为12．67％。测序结果表明,8株EV71之间的VPl基因核苷酸同源性为96．9％～99．2％。氨基酸同源性为99．3％～100％。VPI区基因遗传进化分析表明。8株EV71分离株与c4基因亚型的代表株处于同一分支,均属于C4基因亚型的C4a进化分支。结论惠州市手足口病疫情主要病原EV71病毒均属于C4a基因亚型,与2004年以来的中国大陆EV71病毒流行的基因型一致,未产生明显的抗原漂移及变异。     

2008至2009年北京地区分离的肠道病毒71型全基因组序列分析

目的了解2008至2009年从北京地区手足口病（HFMD）患儿分离到的肠道病毒71型（EV71）全基因组序列特点（未包括多聚腺苷尾）,以探讨基因序列的改变是否与病毒的致病性有关。方法选取首都儿科研究所病毒研究室2008年分离到的5株EV71毒株和2009年分离到的4株EV71毒株,其中4株来源于重症HFMD患儿（伴高热、持续抽搐及意识丧失等中枢神经系统症状）,5株来源于轻症HFMD患儿。设计覆盖病毒全基因组的10对特异性引物,对9株EV71毒株进行RT-PCR扩增、全基因组序列测定和分析。结果 9株EV71毒株的全基因组长度为7406bp或7405bp,部分毒株在5′UTR存在1处1个碱基的缺失。9株EV71毒株的全基因组核苷酸和氨基酸同源性分别为96.3%～99.4%和98.2%～99.6%,在VP1区核苷酸和氨基酸同源性分别为96.9%～99.9%和98.3%～100.0%。重症HFMD来源的4株毒株中有3株在VP2蛋白第144位及3D聚合酶（3Dpol）第140和263位同时出现相同的氨基酸变异（T144S、R140K和I263V）,并且在5′UTR区第208和254位同时出现相同的碱基变异（G208A和A254G）。9株EV71毒株的全基因组与C4亚型毒株具有最高的核苷酸同源性,在VP1区为94.3%～95.5%;在3D及3′UTR区与CV-A16/G10的同源性（84.3%～85.0%和89.0%～91.5%）高于与EV71-B型、A型及C型（C1～3、C5）的同源性。VP1和3D基因的遗传进化分析显示,9株EV71毒株与C4亚型毒株属同一分支。结论 VP2蛋白第144位氨基酸突变（T→S）、3Dpol第140和263位氨基酸突变（R→K和I→V）及5′UTR区第254位碱基突变（A→G）可能与EV71感染后引起的不同临床症状有关。根据VP1核苷酸序列,2008至2009年北京地区流行的EV71属于C4亚型;非结构蛋白基因在EV71进化中可能有一定的作用。     

轻型和重型手足口病临床和实验室特征分析

目的 研究2008年深圳市轻型和重型手足口病临床特点和实验室特征.方法 将深圳市东湖医院和儿童医院共145例手足口病住院患者作为研究对象,其中轻型124例,重型21例.收集患者临床和一般实验室资料,急性期与恢复期连续粪便和血标本,通过RT-PER检测EV71病毒核酸,分离和培养EV71肠道病毒,其中2例死亡患者行病理组织学检测.结果 与轻型患者比较,重型患者白细胞计数、血糖显著升高,但年龄显著降低,粪便中轻型和重型患者EV71基因检出率分别为35%与67%,重型患者EV71检出率显著高于轻型患者,从9例患者粪便中分离培养出肠道病毒,其中1例为死亡患者粪便标本.2例患者死于神经源性肺水肿和脑干脑炎.结论 EV71是重型患者和死亡患者的最主要病原体,神经源性肺水肿和脑干脑炎是EV71型手足口病的最主要死亡原因,对年龄小于4岁,高热、皮疹稀疏和高血糖的EV71型手足口病患者应警惕向重型发展.     

深圳市某地2011年正常人群手足口病隐性感染调查研究

目的了解深圳市某地2011年成人及健康儿童手足口病隐性感染情况。探讨健康人群隐性感染与儿童患手足ISl病的关系。方法随机选取该区域幼儿同学生和老师共150人,分为0～、2～、5-岁组各30人,15～、24～、〉50岁组各20人。每人采集粪便标本5～8g,进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A16型（CA16）核酸检测。结果共采集150份样本,EV通用型阳性13份（8．67％）,其中5岁以下的有11例（84．6％）。CA16阳性2份,EV71阳性1份,均属于0-岁组。结论肠道病毒在人群中隐性感染较为普遍,5岁以内儿童为主要感染人群。健康人群中引起手足口病常见的EV71和CA16阳性肠道病毒隐性感染率低。