电针对脾虚证幼鼠海马区神经干细胞增殖和分化的影响

目的:通过观察电针对脾虚证幼鼠海马齿状回区神经干细胞增殖和分化的影响,探讨电针对中枢神经细胞损伤的保护和治疗作用。方法:4周龄SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、电针组,每组各24只。3组再分别随机分为7、14、28和49 d等4个亚组,每亚组6只。用利血平腹腔注射联合大黄灌胃造脾虚证模型。造模结束后,电针组取双侧"足三里"和"三阴交"穴,每次电针20 min,每日1次,直至大鼠被处死。运用双重免疫组化法检测大鼠海马齿状回区5-溴脱氧尿苷(Brdu)、Brdu/巢蛋白(Nestin)、Brdu/神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、Brdu/神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性细胞数。结果:与正常组同时相比较,Brdu、Brdu/GFAP、Brdu/NSE阳性细胞的表达在模型组7 d组和14 d组显著降低(P<0.05);Brdu、Brdu/Nestin、Brdu/GFAP阳性细胞的表达高峰出现在电针组14 d组,而Brdu/NSE阳性细胞表达的高峰出现在电针组28 d组,与同时相模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:脾虚证可导致神经干细胞增殖和分化能力降低。电针"足三里"三阴交"穴可促进脾虚证大鼠海马齿状回区神经干细胞的增殖,适当地促进增殖的神经干细胞向星形胶质细胞及神经元方向分化。     

四君子汤对脾虚大鼠腮腺唾液淀粉酶分泌障碍及VIP-cAMP信号通路的影响

目的:观察四君子汤对脾虚大鼠唾液淀粉酶分泌障碍治疗效果,并揭示其作用机制。方法:大鼠皮下注射利血平0.5 mg/kg,正常对照组大鼠注射等量生理盐水,共8 d;造模结束后模型动物分为模型组和四君子汤组,四君子汤组灌胃给予四君子汤,模型组和正常对照组灌胃给予等量双蒸水,给药4 w后进行取材。麻醉动物,取左侧腮腺,缝合伤口,大鼠稍清醒时,用10%冰乙酸溶液20μL刺激大鼠舌尖,1次/min,共刺激30次;处死,取下右侧腮腺。检测腮腺组织唾液淀粉酶活性(sAA)c、AMP及VIP含量、PKA活性和VAMP8、SNAP-23蛋白表达。结果:四君子汤组大鼠腮腺内sAA与正常对照组大鼠无显著差异,模型组大鼠酸刺激后sAA活性显著高于正常对照组大鼠,酸刺激前VIP含量、PKA活性各组大鼠无显著差异;酸刺激后,正常对照组大鼠VIP及cAMP含量、PKA活性显著升高,模型组大鼠VIP轻微升高,cAMP含量、PKA活性显著低于正常对照组,四君子汤组大鼠VIP及cAMP含量、PKA活性有一定程度恢复。模型组VAMP-8蛋白表达与正常对照组比较无显著差异,SNAP-23蛋白表达有所下降;与模型组比较,四君子汤组大鼠SNAP-23、VAMP-8蛋白表达增强。结论:四君子汤对利血平脾虚大鼠唾液淀粉酶分泌障碍有一定疗效,可能通过恢复脾虚大鼠腮腺细胞VIP-cAMP信号通路改变起到治疗作用,包括提高VIP含量和提高SNAP-23和VAMP-8蛋白表达。     

利血平致脾虚大鼠唾液蛋白分泌改变及其机制的探讨

目的观察利血平致脾虚大鼠唾液蛋白分泌的改变并探讨其机制。方法利血平组大鼠20只皮下注射0.4mg/(kg.d)利血平9d造模,对照组大鼠20只注射生理盐水9d;10d时两组各随机抽取10只大鼠检测酸刺激前后唾液淀粉酶活性(sAA)比值,眼眶静脉采血检测血清的血管活性肠肽(VIP)和环磷酸腺苷(cAMP),处死动物取腮腺检测VIP和cAMP,取腮腺HE染色病理组织学观察和透射电镜计数腮腺酶原颗粒。两组剩余大鼠均停止注射并正常饲养40d,检测以上项目。结果利血平组大鼠较对照组食量明显减少、体重下降。10d时:利血平组sAA活性比值(0.39±0.18)显著低于对照组(0.80±0.21,P0.01),25d已恢复正常并持续至40d(与本组10d比较,P0.05;与对照组比较,P0.05);HE染色病理组织学检查未见两组腮腺有明显病理改变,透射电镜发现利血平组的单位观察视野腮腺酶原颗粒数(41.4±4.9)高于对照组(34.6±5.2,P0.01);血清VIP利血平组(22.5±13.1mg/L)低于对照组(38.5±14.1mg/L,P0.05),腮腺VIP两组差异无统计学意义;血清cAMP利血平组(125.8±15.5μmol/L)高于对照组(105.3±16.7μmol/L,P0.05),腮腺cAMP两组差异无统计学意义。40d时各项检测指标两组比较差异无统计学意义。结论利血平致脾虚大鼠酸刺激下唾液蛋白分泌减少,可能与VIP和cAMP调节途径有关。     

电针对脾虚型幼鼠海马区结构的影响

目的:观察电针对脾虚证幼鼠脑结构的影响。方法:健康SD 4周龄雄性大鼠15只,随机选取5只作为对照组,其余10只造模。造模成功后的大鼠随机分为模型组、电针组,每组各5只。用利血平腹腔注射和大黄灌胃联合造幼鼠脾虚证模型,采用行为学指标、体重测量和拉尾排便率相结合对脾虚证模型是否成功进行判定。造模结束后用电针刺激电针组大鼠双侧"足三里"和"三阴交"穴,每次20 min,每天1次。治疗14 d后采用光学显微镜和透射电镜观察各组大鼠海马区的结构。结果:造模14 d后大鼠均表现毛色不荣、精神倦怠、嗜卧、眼眯、四肢无力,或见颤抖、反应迟钝,甚则肛门脱垂,明显消瘦。与对照组比较,造模大鼠体重明显较轻(P0.01),拉尾排便次数增多。光镜下观察,模型组脑组织内神经元轮廓模糊,胞体肿大,周围间隙增宽,核碎裂,胞浆出现空洞,空泡形成,细胞带层次减少;电针组脑组织内神经元轮廓尚清晰,细胞核形态正常,细胞带尚均匀,可见有胶质细胞浸润。电镜下观察,模型组脑结构在神经元胞体和神经毡区都有改变,尤以线粒体和突触终末端的改变明显;电针组神经元损伤程度较轻,细胞结构良好。结论:脾虚证会引起大鼠脑内神经元胞体和突触的改变,而电针治疗对脑组织抗损伤能力和修复能力有积极作用。     

脾虚在哮病急性期的构成比及中医证候学特点

目的:探讨脾虚证候在哮病急性期中的构成比及脾虚证候学特点.方法:选择符合诊断标准的哮病急性发作期患者272例,统计脾虚在哮病急性期(热哮、浊哮、寒哮)的构成比,并对脾虚在该病的中医证候学特点进行分析.结果:哮病患者272例中,脾虚证型的哮病患者164例,占60.29％(95％ CI=52.80％～67.78％);经过辨证分型,其中脾虚证寒哮型患者52例,占寒哮型患者的57.78％ (95％ CI =44.36％～71.20％);脾虚证热哮型患者36例,占热哮型患者的64.29％ (95％ CI=48.64％～79.94％);脾虚证浊哮型患者76例,占浊哮型患者的73.08％ (95％ CI =63.11％～83.05％).结论:脾虚证候在哮病发作期占有重要地位,提示中医治疗脾虚型哮病采用补肺固卫、益气健脾治则具有重要意义.     

丁桂儿脐贴对功能性消化不良大鼠和脾虚小鼠的影响

目的:观察丁桂儿脐贴对功能性消化不良大鼠(FD)和脾虚小鼠的影响,探讨其可能的作用机制.方法:采用不规则进食加稀酸喂养制作大鼠FD模型,连续给药14 d后,测定大鼠的体重、血清一氧化氮(NO)、胆碱酯酶(AChE)及胃窦部肥大细胞(MC).采用大黄造成脾虚小鼠模型观察其对胃排空的影响.结果:与模型组相比,丁桂儿脐贴各剂量组体重显著增加(P＜0.05)、丁桂儿脐贴中剂量组(含生药量1.34 g· kg-1)大鼠胃蛋白酶活性明显升高、丁桂儿脐贴高剂量组(含生药量2.67 g·kg-1)大鼠血清NO和胃窦部肥大细胞数显著降低(P＜0.05)、血清AChE含量显著升高.丁桂儿脐贴使脾虚小鼠体重显著增加,胃排空加速,改善脾虚小鼠症状.结论:丁桂儿脐贴对功能性消化不良有明显的改善作用,可显著降低血清NO、升高血清AChE和降低胃窦部肥大细胞数,可能是其治疗FD的机制.     

童康颗粒治疗小儿脾虚夹积型厌食的临床疗效观察

目的:探讨童康颗粒治疗小儿脾虚夹积型厌食的疗效。方法:观察治疗小儿厌食症60例,其中治疗组27例给予童康颗粒口服治疗,对照组33例给予四磨汤口服液口服治疗。治疗4周后,治疗组临床总有效率为95.15%,对照组总有效率为80.12%,在改善患儿食欲食量和体重方面,二者均有疗效,但治疗组优于对照组。结果:童康颗粒能有效改善脾虚夹积型厌食症患儿的厌食状况,使患儿体重增加。结论:童康颗粒组疗效优于四磨汤口服液组。     

健中愈疡片治疗脾虚型胃溃疡的临床与实验研究

目的:用临床观察及动物实验研究健中愈疡片治疗脾气虚型胃溃疡的效果及机理。方法:临床观察从症状、体征、症候疗效方面观察健中愈疡片治疗脾气虚型胃溃疡的效果,动物实验从精神、活动、食欲、皮毛及肠胀气等方面观察健中愈疡片对脾虚证的改善情况。结果:健中愈疡片组治疗后,患者胃脘疼痛、嗳气泛酸、腹胀痞满、纳呆食少、大便稀溏、体倦乏力等症状的改善与治疗前比较具有极显著性差异(P<0.01),效果优于胃舒平片组和法莫替丁胶囊组(P<0.05)。健中愈疡片组治疗后,大鼠精神转好,食欲增加,被毛转光泽,体重增加,肠胀气明显好转,与模型组比较具有极显著的差异(P<0.01)。结论:健中愈疡片正是从改善脾气虚证入手来促进脾气虚型胃溃疡患者的溃疡愈合速度和愈合质量,改善其各种临床症状,从而达到治疗目的。     

壮医药线点灸对脾虚患者唾液负荷分泌的影响

检测了 2 0例脾虚证患者壮医药线点灸治疗前后唾液流量、唾液淀粉酶活性、淀粉酶分泌率的变化 ,并设 2 0例空线对照组、2 0例四君子汤对照组及 2 0名健康人正常对照。结果表明 :壮医药线点灸有改善脾虚患者唾液负荷分泌作用 ,表现为提高患者对外源刺激 (酸刺激 )的反应性。其效果与中药四君子汤一致 ,空线对照效果不及壮医药线点灸。     

基于免疫机制从“脾虚生痰湿”论治多发性抽动症的研究＊

多发性抽动症的发病率逐年升高，严重影响儿童生长发育及心理健康。中医治疗多发性抽动症（脾虚痰湿型）取得显著效果，但作用机制仍不明确。近年来，诸多研究表明“脾虚生痰湿”和免疫系统之间存在密切关系，还揭示了免疫机制在抽动症发病中起重要作用。本文通过概述多发性抽动症（脾虚痰湿型）的病机与免疫之间的关系，发现多发性抽动症（脾虚痰湿型）患者免疫状态与大脑皮质-基底节-丘脑-皮层回路异常密切相关，细胞免疫损伤参与了多发性抽动症的发生和发展。并分析了健脾化痰祛湿中药治疗多发性抽动症的潜在机制，为从“脾虚生痰湿”论治多发性抽动症提供相关科学依据。     

运脾消食方对厌食症儿童唾液淀粉酶活性、血红蛋白含量影响的研究

目的:观察运脾消食方对厌食症儿童唾液淀粉酶活性、血红蛋白含量的影响.方法:将98例患者随机分为两组,治疗组49例服用运脾消食方(由焦三仙、炒白术、法半夏、陈皮、鸡内金、使君子、三棱、胡黄连、佩兰等中药组成),4周为1个疗程,治疗2个疗程.对照组49例口服小儿健脾化积口服液,疗程同治疗组.对治疗前后患儿的主、次要症状进行分级量化并进行疗效评定,并观察治疗前后身高、体重、唾液淀粉酶活性、血红蛋白含量的变化.结果:总有效率治疗组为95.92％,对照组为77.55％,两组比较,运脾消食方组在总有效率、症状、体征、唾液淀粉酶活性、血红蛋白含量改善等方面均明显优于小儿健脾化积口服液组(P＜0.01或P＜0.05).结论:运脾消食方对改善小儿厌食症的症状、体征疗效显著,并能增强患儿唾液淀粉酶活性、增加血红蛋白含量.     

黄芪注射液和电针对创伤应激大鼠细胞免疫功能的作用

目的:动态观察黄芪注射液和电针对创伤应激大鼠细胞免疫功能的影响。方法:观察大鼠脾脏淋巴细胞增殖反应、Con A 诱导的白细胞介素2(IL-2)水平和自然杀伤(NK)细胞活性在创伤手术前和手术后1、2、3、5、7天的动态变化,以及黄芪注射液和/或电针对以上3者的影响。结果:创伤后第1、2、3、5天大鼠脾淋巴细胞增殖反应、IL-2诱生水平及 NK 细胞活性均明显降低。电针足三里和阑尾穴能明显改善创伤后第1、2、3、5天的细胞免疫功能。每天腹腔注射1次黄芪注射液(2g/kg)在创伤手术后第2、3、5天对受抑的细胞免疫功能有明显改善,并且在创伤手术后第5天使3项指标恢复至正常。电针与黄芪注射液合用可使细胞免疫功能提前得到恢复,其在创伤后第2天对机体免疫功能改善作用明显强于单用电针或黄芪注射液。结论:黄芪注射液和/或电针均能改善创伤应激介导的免疫抑制,促进手术后机体的恢复。     

益气活血冲剂对创伤骨折致肾脏损伤的保护作用

目的：探讨益气活血冲剂对创伤骨折所致肾损伤的保护作用。方法：将大鼠或小鼠分为空白组、对照组和实验组。分别于术后不同时期处死动物,测定三组的肾指数、肾中柠檬酸、DNA、RNA含量及^3H-TdR ^3H-UR参入率。结果：创伤骨折引起大鼠肾指数明显下降,^3H-TdR 参入受抑制,DNA含量降低,^3H-UR参入率和RNA含量升高;应用益气活血冲剂可以改善这些变化、促进DNA和RNA的合成。结论：创伤骨折后应用益气活血冲剂可以改善创伤引起的肾脏的变化。     

原发性脾脏肿瘤31例诊治分析

目的探讨脾脏原发性肿瘤的诊断与治疗方法。方法回顾性分析我院1990年3月至2002年12月收治的31例原发性脾脏肿瘤病例。结果31例中有28例术前诊为脾脏肿瘤。B超检出率92．59％（25／27），CT检出率为92．0％（23／25）。18例良性肿瘤中14例行脾切除，4例行肿瘤切除或脾部分切除；13例恶性肿瘤中12例行脾切除术，1例广泛转移未手术。恶性肿瘤患者生存5年以上2例，生存3年以上3例，生存2年以上1例，小于1年6例，1例未手术在两个月内死亡：综合治疗患者5年生存率明显长于非综合治疗患者（P〈0．05）。良性肿瘤预后良好，恶性肿瘤预后较差。结论B超、CT等影像学检查是脾脏肿瘤的主要诊断方法，治疗以脾脏切除为主并根据不同性质的病变采取相应的治疗方法。根治手术和综合治疗是改善脾脏恶性肿瘤预后的重要措施。     

化湿液对湿阻证大鼠血清D-木糖及Ghrelin含量的影响

目的:研究化湿液对湿阻证大鼠血清D-木糖及生长激素释放肽(Ghrelin)的影响。方法:将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组,化湿液低、中、高剂量组,每组8只。正常组常规喂养,其余各组采用改进的环境加疲劳法制造湿阻证模型,连续造模6 d。造模成功后正常组和模型组予生理盐水ig(20 mL·kg-1),化湿液低、中、高剂量组分别按4,8,16 g·kg-1 ig,1次/d,连续8 d。采用比色法检测大鼠血清D-木糖含量,采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清Ghrelin的变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠脾虚症状明显,胃黏膜充血、水肿明显,血清D-木糖(P<0.01)和Ghrelin(P<0.05)含量明显降低;与模型组比较,化湿液低、中、高剂量组大鼠脾虚症状及胃黏膜充血、水肿的改善明显或完全消失,血清D-木糖(P<0.05)及Ghrelin(P<0.01)含量均有不同程度升高。结论:化湿液可明显改善湿阻证大鼠脾虚症状及胃黏膜的损伤,其机制可能与提高血清D-木糖和Ghrelin的含量有关。     

肺癌脾虚痰湿型肿瘤相关证候差异表达基因的筛选与鉴定

目的：构建脾虚痰湿型肺癌肿瘤相关消减cDNA文库,以寻找脾虚痰湿型肺癌证候特异基因。方法：以原发性肺癌脾虚痰湿型的患者肿瘤组织及瘤旁正常组织为材料,分离Poly（A）RNA,反转录合成单链及双链cDNA,经Rsa I酶切,将肿瘤组织cDNA分成两组,分别与两种不同的接头连接,再与正常肺组织cDNA进行两次消减杂交和两次抑制性PCR扩增,将第两次PCR产物与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞进行文库扩增,构建了消减cDNA文库,同法建立反向消减cDNA文库。对经反向斑点杂交验证,从cDNA文库中随机挑选的200个含差异片段的克隆,碱裂解法提取DNA,从克隆5’端进行单向测序。EST测序序列行生物信息学分析,所有基因聚类用BLASTX（E values〈10-5）和BLASTN（E values〈10-10）搜索GenBank的非冗余核酸序列数据库及蛋白质库予以注释。结果：经文库扩增,随机挑选克隆进行PCR鉴定,插入片段主要分布在250～1000bp之间,并以反向斑点杂交法进一步验证其阳性克隆,最终获得251个阳性克隆,其中正向消减文库获得165个阳性克隆,反向消减文库获得86个阳性克隆。测序发现了正向消减文库差异基因22个,反向消减文库差异基因6个。结论：成功构建脾虚痰湿型肺癌肿瘤相关消减cDNA文库,发现了那些有明确生物学功能的证候相关基因,其基因表达及分布特征初步反映了肺癌脾虚痰湿型在分子层面的证候特点。     

参苓白术散治疗脾虚型儿童功能性便秘49例临床观察

[目的]观察参苓白术散治疗脾虚型儿童功能性便秘疗效。[方法]采用前瞻性设计方法,对49例脾虚型儿童便秘患者使用参苓白术散,6g／次,3次／d,口服,连续治疗2周为1疗程。观察临床症状、大便性状、不良反应。治疗1疗程,判定疗效。[结果]痊愈2例,显效27例,有效16例,无效4例,总有效率为91．83％。[结论]参苓白术散治疗脾虚型儿童功能性便秘,疗效满意,无副作用,值得推广。     

中西医结合治疗肺脾气虚型反复呼吸道感染30例

目的:观察综合治疗加玉屏风颗粒对肺脾气虚型反复呼吸道感染患儿免疫功能的影响.方法:采用随机对照研究方法将60例患儿随机分为对照组及治疗组各30例,对照组采用常规方法治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用玉屏风颗粒治疗,观察相关指标变化情况.结果:治疗组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平,血清IgG、IgA水平,酸刺激前后唾液淀粉酶活性比值升高,中医脾胃虚弱证候积分降低,与对照组比较差异均具有统计意义(P＜0.05);而CD8+及IgM水平组间差异无统计意义(P＞0.05).结论:在综合治疗基础上加用玉屏风颗粒治疗肺脾气虚型反复呼吸道感染患儿可提高患儿体液及细胞免疫水平、提高唾液淀粉酶活性比值、改善患儿证候.     

基于核磁共振的脾虚湿盛证肝癌患者血浆代谢组学研究

目的：本研究旨在了解脾虚湿盛证肝癌患者血浆代谢变化情况,探讨脾虚湿盛证肝癌患者体内代谢变化机理。方法：对30例脾虚湿盛证肝癌患者、30例非脾虚湿盛证肝癌患者和30名脾虚湿盛证健康人血浆进行核磁共振氢谱检测,谱图积分结果用正交偏最小二乘判别分析法（OPLS-DA）进行分析。结果：与脾虚湿盛证健康人比较,脾虚湿盛证肝癌患者血浆中多种氨基酸,包括亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、酪氨酸、甘氨酸、丙氨酸等含量明显下降（P<0.05）,血浆中乳酸、肌酸、β-葡萄糖、α-葡萄糖、胆碱含量也明显下降（P<0.05）,但是,脾虚湿盛证肝癌患者血浆中极低密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C）、β-羟丁酸、丙酮、乙酰乙酸以及不饱和脂类等代谢物含量却升高（P<0.05）。与非脾虚湿盛证肝癌患者相比较,脾虚湿盛证肝癌患者血浆中亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、酪氨酸、甘氨酸、丙氨酸等多种氨基酸含量明显偏低（P<0.05）,血浆中肌酸、肌酸酐等代谢物含量也明显偏低（P<0.05）,而脾虚湿盛证肝癌患者血浆中乳酸、丙酮、β-葡萄糖、α-葡萄糖、不饱和脂类等代谢物含量升高（P<0.05）。结论：脾虚湿盛证肝癌患者脂肪代谢增强,糖代谢紊乱,蛋白质合成代谢异常,体内多种正常生命代谢的紊乱程度较非脾虚湿盛证肝癌患者严重,其预后可能比后者差。     

马齿苋总黄酮对人红细胞膜的保护作用

为建立超氧阴离子自由基 (O2·- )引发人红细胞膜氧化损伤实验模型 ,研究马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤的保护作用。以邻苯三酚在碱性条件下自氧化产生 (O2·- )引发人红细胞膜氧化损伤 ,并以此为实验模型研究马齿苋总黄酮对红细胞膜封闭能力唾液酸、丙二醛 (MDA)含量的影响。结果显示 :(O2·- )能引起红细胞膜重封闭能力显著降低 ,其平均封闭度为 4 1 9% ,红细胞膜唾液酸含量较正常膜显著下降 ,MDA含量显著增加。而预先加入不同浓度的马齿苋总黄酮后能显著增加膜封闭能力 ,红细胞膜唾液酸含量较氧化膜显著增加 ,MDA含量显著降低。且存在明显的剂量效应依赖关系。提示 :马齿苋总黄酮对红细胞膜氧化损伤具有保护作用。