氯沙坦对肺成纤维细胞转分化和胶原合成的抑制作用

目的观察血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人胚肺成纤维细胞（HLF）的转分化作用和对其结缔组织生长因子（CTGF）表达、胶原合成的影响，并检测AngⅡ受体拮抗剂氯沙坦对AngⅡ作用的干预。方法常规培养HLF细胞并随机分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ＋氯沙坦组和氯沙坦组，用免疫荧光法和Western免疫印迹法检测各组HLF转分化肌成纤维细胞中标志蛋白α-平滑肌动蛋白（α-5MA）的表达，逆转录-多聚酶链反应和免疫组织化学法检测各组CTGFmRNA及蛋白表达的改变；分别用AngⅡ、AngⅡ＋氯沙坦孵育CTGF反义、正义、错义寡核苷酸转染HLF细胞，观察各组细胞I型胶原蛋白mRNA和α—SMA的mRNA和蛋白水平变化，比色法测定各组细胞培养液中羟脯氨酸含量。结果AngⅡ组CTGFmRNA的吸光度值（0．82±0．07）较对照组（0．29±0．05）、AngⅡ＋氯沙坦组（0.51±0.04）、氯沙坦组（0.26±0．04）明显增高；AngⅡ组CTGF蛋白的吸光度值（0.24±0．05）明显高于其他组；AngⅡ组胶原蛋白mRNA的吸光度值为1．03±0．12，羟脯氨酸含量为（0．62±0．01）ng／ml，明显高于其他3组；AngⅡ孵育CTGF反义寡核苷酸转染细胞组α-SMA的吸光度值（1．14±0．15）和胶原蛋白mRNA的吸光度值（0．30±0．04）明显低于正义组（4．25±0．21和0．55±0．08）和错义组（4．34±0．31和0．58±0．06）；AngⅡ＋氯沙坦孵育CTGF反义寡核苷酸转染细胞组α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白mRNA的吸光度值（0.85±0．09和0．20±0．02）明显低于AngⅡ单独孵育时（4．39±0．29和1．03±0．12）。结论AngⅡ可通过上调HLF细胞CTGF表达水平诱导其转分化为肌成纤维细胞并促进胶原合成，阻断CTGF表达可使AngⅡ对HLF细胞的转分化及胶原诱导合成作用减低，氯沙坦可抑制AngⅡ对HLF细胞的诱导作用。     

反义寡核苷酸对精氨酸升压素诱导心脏成纤维细胞β1整合素表达的抑制作用

目的　探讨反义寡核苷酸对精氨酸升压素 (AVP)诱导心脏成纤维细胞 (CFs) β1整合素表达及细胞增殖的影响 ,为防治AVP诱导的心肌纤维化提供理论依据。方法　设计合成反义、正义及错配 β1整合素寡核苷酸片段 ,转入体外培养的CFs中 ,采用原位ELISA技术检测不同状态下 β1整合素表达水平 ,应用四氮唑盐 (MTT)比色法检测细胞增殖。结果　 (1)随着AVP浓度的增加 ,CFs表面β1整合素表达水平呈上升趋势 ,各实验组之间吸光度比较差异有显著意义 (F =4 93;P <0 0 1)。其中 1× 10 -7mol/LAVP和 1× 10 -6mol/LAVP组的CFsβ1整合素表达水平分别为 (0 2 5± 0 0 1)A值和(0 30± 0 0 4 )A值 ,均明显高于对照组的 (0 2 1± 0 0 2 )A值 ,差异有非常显著意义 (P <0 0 1) ;(2 )反义链 +AVP组的CFsβ1整合素表达水平为 (0 19± 0 0 2 )A值 ,反义链与AVP共同作用组明显低于AVP组的 (0 2 5± 0 0 1)A值 ,并有非常显著性差异 (P <0 0 1)。正义链 +AVP组和错配链 +AVP组的CFsβ1整合素表达水平分别为 (0 2 5± 0 0 1)和 (0 2 5± 0 0 2 )A值 ,均明显高于反义链与AVP共同作用组 (P <0 0 1)。 (3)空白对照组、AVP组、反义链 +AVP组、正义链 +AVP组和错配链 +AVP组CFsMTT法分别为 (0 36± 0 0 1)OD值、(0     

bcl-2反义寡核苷酸与VP16协同抑制小细胞肺癌细胞增殖的研究

目的 研究bcl-2反义寡核苷酸与足叶乙甙（VPl6）联用对小细胞肺癌细胞NCI—H69增殖的影响。方法 通过脂质体将不同寡核苷酸导入NCI—H69细胞中，分为反义寡核苷酸组、正义寡核苷酸组、无义寡核苷酸组和空白对照组4组。Western Blot法检测细胞bcl-2蛋白的表达。不同浓度的VP16作用于4组转染后的细胞，MTT法测定细胞存活分数。结果 4组细胞中。与空白对照组相比较，反义寡核苷酸组的bcl-2蛋白表达明显受到抑制。bcl-2反义寡核苷酸转染细胞与VP16作用后，反义寡核苷酸组细胞在各个浓度的存活分数均低于对照组，且有统计学意义（P〈0．01）。结论 bcl-2反义寡核苷酸与VP16能协同抑制小细胞肺癌细胞的增殖。     

Survivin反义寡核苷酸抑制肝癌移植瘤生长的作用

目的:检测Survivin反义寡核苷酸(ASODN)在人肝癌耐药细胞株裸鼠皮下移植瘤中的表达情况．方法:将30只裸鼠建立人肝癌耐药细胞系 SMMC-7721／ADM皮下移植瘤模型,随机分成6组:空白对照组(A)、脂质体转染对照组 (B)、正义链对照组(C)、200(D)、400(E)和 600 μg/L(F)反义链组(ASODN组),用不同的转染液注射后2,4,8,12,16,20 d,用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)和Western blot蛋白免疫印迹法检测治疗后各组肿瘤组织中Survivin mRNA和蛋白表达的变化．结果:注射后20 d,ASODN组肿瘤细胞生长明显抑制,空白对照组、脂质体转染对照组和正义链对照组裸鼠的mRNA和蛋白表达无明显差异,而ASODN组mRNA和蛋白表达随着时间和浓度的增加,Survivin表达减弱,E,F组与其余个组(A,B,C,D)相比有显著差异(mRNA: 0．33±0．04,0．28±0．03 vs 0．82±0．02,0．78± 0．05,0．72±0．04,0．57±0．03,P<0．05;蛋白: 34．9±3．89,21．2±3．65 vs 72．14±6．53,69．31 ±5.34,68．29±4．98,53．8±5．23,P<0．05)．结论:Survivin反义寡核苷酸能够下调 Survivin mRNA和蛋白的表达,抑制裸鼠皮下移植瘤的生长．     

慢性阻塞性肺疾病患者肺小血管低氧诱导因子-α的表达

目的通过观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺小动脉内低氧诱导因子(HIF)-α的表达,探讨其在肺血管重塑中的可能作用。方法选因肺肿瘤行肺叶切除者,诊断符合COPD者入选COPD组(12例),不符合者入选对照组(10例)。取2组患者的肺组织,原位杂交和免疫组化检测HIF-1α、HIF-2α、HIF-3α的mRNA及蛋白表达水平。光学显微镜观察并计算肺小动脉管壁厚度与外径的比值(WT%)及肺小动脉管壁面积与血管总面积的比值(WA%)。结果(1)COPD组WT%、WA%均较对照组高(P值均小于0·01)。(2)HIF-1αmRNA和蛋白表达在COPD组增强,吸光度(A)值分别为0·172±0·011、0·089±0·013,与对照组(0·103±0·010、0·042±0·010)比较差异有统计学意义(P值均小于0·01)。HIF-2αmRNA及蛋白表达在COPD组呈弱阳性,A值分别为0·038±0·010、0·077±0·010,与对照组(0·133±0·017、0·169±0·010)比较差异有统计学意义(P值均小于0·01)。HIF-3α仅mRNA表达在COPD组呈弱阳性,A值为0·077±0·010,与对照组(0·088±0·010)比较差异有统计学意义(P<0·05)。(3)相关分析HIF-1αmRNA及蛋白表达与WT%和WA%分别呈正相关,而HIF-2αmRNA及蛋白表达与WT%和WA%分别呈负相关,HIF-3αmRNA及蛋白表达与WT%和WA%均无相关性。结论COPD患者HIF-α基因表达有差异,此差异可能参与了COPD的肺血管重塑。     

STAT3反义寡核苷酸对人宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭的影响

目的观察转染信号转导与转录激活因子3(STAT3)的反义寡核苷酸对人宫颈癌HeLa细胞定植和侵袭功能的影响。方法针对人STAT3的基因序列设计并合成反义寡核苷酸,用阳离子脂质体介导转染人宫颈癌He-La细胞。应用RT-PCR和Western blot法分别检测STAT3基因mRNA及蛋白表达水平,软琼脂集落培养检测细胞的定植功能,体外侵袭实验检测HeLa细胞的侵袭能力。结果转染STAT3反义寡核苷酸HeLa细胞(HeLaSTAT3-ASODN)STAT3基因的mRNA和蛋白表达水平均明显低于对照组(HeLaSTAT3-SODN)和正义组(HeLa),P<0.05;各组细胞在软琼脂中形成的克隆数和穿透Matrigel膜的细胞数分别为:HeLa组(74.31±7.62)、(44.85±6.26)个,HeLaSTAT3-SODN组(71.57±6.92)、(45.46±6.79)个,HeLaSTAT3-ASODN组(45.18±7.69)、(22.41±5.98)个。与HeLa组、HeLaSTAT3-SODN组比较,HeLaSTAT3-ASODN组克隆形成数和透膜细胞数明显减少(P<0.05)。结论 STAT3基因特异反义寡核苷酸可通过下调STAT3基因表达抑制细胞的定植和侵袭。     

Survivin反义寡核苷酸抑制宣威肺腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的研究

目的研究靶向survivin mRNA的反义寡核苷酸对裸鼠宣威肺腺癌细胞XWLC-05移植瘤的抑制作用。方法建立宣威肺腺癌细胞XWLC-05裸鼠移植瘤模型,随机分为：空白对照组、单纯脂质体转染组、正义链转染组、反义链转染组,观察裸鼠一般活动情况、移植瘤体积、计算抑瘤率。病理学检测各组对肿瘤的影响以及对心脏、肝脏、肾脏的影响情况。结果空白对照组、单纯脂质体转染组、正义链转染组移植瘤随时间增长而增大,但3组间无显著差异（P〉0．05）。反义链转染组注射反义寡核苷酸后,裸小鼠肿瘤生长速度较为缓慢;肿瘤重量低于其他3组;其肿瘤生长抑制率高于其他3组（P〈0．05）;病理检查见瘤组织中有大量的细胞坏死灶。各组裸鼠均未出现死亡,病理检查重要脏器未见明显损害。结论survivin反义寡核苷酸能够抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,未对其他脏器产生明显损害。     

反义β_1整合素寡核苷酸对精氨酸加压素促胶原凝胶收缩的抑制作用

目的 :探讨精氨酸加压素 (AVP)对心肌成纤维细胞 (CFs)与胶原构成的凝胶系统收缩的影响和 β1 整合素反义寡核苷酸的干预作用。方法 :设计合成反义、正义和错配 β1 整合素寡核苷酸片段 ,建立体外培养的成纤维细胞与胶原构成的凝胶三维培养体系 ,计算凝胶块的收缩指数。结果 :1AVP浓度≥ 1× 10 - 7m ol/ L 时 ,CFs的胶原凝胶收缩指数明显高于对照组 (P<0 .0 1) ;2 1× 10 - 7mol/ L AVP作用 4h凝胶收缩指数即大于对照组 (P<0 .0 1) ,并可持续 48h以上 ;3反义 β1 整合素寡核苷酸与 AVP共同作用组的胶原凝胶收缩指数明显低于 AVP组、正义链 AVP组和错配链 AVP组 ,并均有非常显著性意义 (P<0 .0 1)。结论 :β1 整合素反义寡核苷酸具有特异性抑制AVP刺激 CFs胶原凝胶收缩的作用。说明 β1 整合素在 AVP促 CFs迁移中起介导作用。     

可溶性支架转反义PCNA寡核苷酸预防静脉移植物再狭窄

目的　确定可溶性支架转反义 PCNA是否具有抑制静脉移植物内膜增殖的效果。方法　 2 5只健康纯种新西兰大耳白兔随机分为对照组 ,支架组 ,正义组 ,反义组 ,错配组。将颈外静脉移植于同侧颈总动脉后用可溶性支架将反义 ,正义及错配的基因片段导入静脉移植物。术后 2 8d进行表达检测。结果　 (1)反义组静脉桥的内膜厚度为(4 2 .72± 3.792 )μm,显著低于对照组、支架组、正义组及错配组 (79.0 0± 1.2 2 5 )μm ,(75 .0 4± 3.2 4 2 )μm ,(74 .77±8.5 35 )μm ,(78.6 1± 7.816 )μm,P<0 .0 1。 (2 )反义组内膜与中膜比值为 0 .6 8± 0 .2 12 ,明显低于对照组、支架组、正义组及错配组 (1.32± 0 .0 6 6 ,1.35± 0 .198,1.33± 0 .2 5 8,1.39± 0 .2 0 0 ,P<0 .0 1)。结论　运用可溶性支架转反义PCNA基因可明显抑制内膜的增殖。     

核因子κB、细胞间粘附分子1在吸烟大鼠气道上皮细胞中的表达

目的　探讨核因子κB (NF κB)和细胞间粘附分子 1 (ICAM 1 )在吸烟大鼠气道上皮细胞中表达的变化及其在气道炎症形成过程中的作用。方法　Wistar大鼠 39只 ,随机分为不吸烟组、吸烟1个月组、3个月组 ,每组 1 3只。采用免疫组织化学染色和原位杂交技术半定量检测各组NF κB亚单位p65和ICAM 1的表达。结果　 (1 )吸烟 1个月组、3个月组细支气管上皮细胞NF κB核染色阳性细胞百分比为 (63± 4) %、(51± 5) % ,与不吸烟组 [(2 7± 5) % ]比较 ,差异有显著性 (P分别 <0 .0 1 ) ;(2 )吸烟 1个月组、3个月组主、细支气管气道上皮细胞ICAM 1mRNA的表达为 0 .645± 0 .0 38、0 .747±0 0 4 1、0 .688± 0 .0 62、0 .80 9± 0 .0 2 3 ,与不吸烟组 (0 .52 6± 0 .0 2 3、0 .635± 0 .0 4 4 )比较差异有显著性 (P分别 <0 .0 1 ) ;而且 3个月组与 1个月组比较差异也有显著性 (P分别 <0 .0 5、0 .0 1 ) ;(3)吸烟 1个月组、3个月组主、细支气管气道上皮细胞ICAM 1蛋白表达为 0 .73± 0 .0 4、0 .94± 0 .0 5、0 .77± 0 .0 4、0 .99± 0 .0 3 ,与不吸烟组 (0 .57± 0 .0 4、0 .83± 0 .0 4 )比较 ,差异也有显著性 (P分别 <0 .0 1 ) ;而且 3个月组与 1个月组比较差异也有显著性 (P分别 <0 .0 5) ;(4)各组细支气管上皮     

Induction of macrophage inflammatory cytokines by Ox-LDL is ABCA1 dependent

Objective The current study aimed to evaluate whether the induction of macrophage inflammatory cytokines by Ox-LDL is related to the expression of ABCA1 pathway. Methods After THP1/PMA macrophages were transfected with ABCA1 antisense oligonucleotides (100nmol/L) followed by treatment with Ox-LDL (30mg/L), the expressions of ABCA1, ICAM-1 and MCP-1 mRNA and protein were determined by real-time fluorescent quantitative RT-PCR, Western blot or ELISA. Results Ox-LDL induced expressions of ABCA1, ICAM-1, and MCP-1 at both mRNA and protein levels from THP1/PMA macrophages. Transfection with ABCA1 antisense oligonucleotides reduced ABCA1 mRNA levels after 3 and 6 hours and protein levels after 12 and 24 hours. The expression of ICAM-1 and MCP-1 induced by Ox-LDL was also decreased after inhibition of ABCA1 protein expression by ABCA1 antisense oligonucleotide decreased. Conclusion The induction of macrophage inflammatory cytokines by Ox-LDL is partially dependent on expression of ABCA1. Our studies disclose new functions of ABCA1 in macrophages (J Geriatr Cardiol 2010; 7:166-170).     

雷公藤甲素对支气管哮喘小鼠STAT-1与ICAM-1表达的影响

目的 研究雷公藤甲素对支气管哮喘（简称哮喘）小鼠肺组织中信号转导和转录激活因子-1（STAT-1）与细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响,探讨其治疗哮喘的机制.方法 40只雄性昆明小鼠随机分成4组：正常对照组、哮喘组、地塞米松治疗组及雷公藤甲素治疗组,以卵清蛋白致敏和激发方法建立哮喘小鼠动物模型并给予相应治疗.24 d后处死小鼠,检测BALF中白细胞总数及嗜酸粒细胞（EOS）计数;采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测肺组织中STAT-1、ICAM-1 mRNA表达水平;采用免疫组织化学法检测肺组织中STAT-1、ICAM-1蛋白表达水平.结果 哮喘组STAT-1、ICAM-1 mRNA及蛋白表达明显高于正常对照组（P＜0.01）,雷公藤甲素治疗组及地塞米松组明显低于哮喘组（P＜0.01）.肺组织STAT-1蛋白的表达与BALF中白细胞数、EOS计数及肺组织ICAM-1蛋白表达呈正相关（r分别为0.665,0.735,0.677,P＜0.01）.肺组织ICAM-1蛋白表达与白细胞总数、EOS计数呈正相关（r分别为0.792,0.776,P＜0.01）.结论 雷公藤甲素抑制哮喘气道炎症的机制可能与其抑制STAT-1与ICAM-1的表达活性有关.     

Blockage of transforming growth factor β receptors prevents progression of pig serum-induced rat liver fibrosis

AIM: To test the hypothesis that introduction of antisense TβR Ⅰ and TβR Ⅱ eukaryotic expressing plasmids into a rat model of immunologically induced liver fibrosis might block the action of TGF-β1 and halt the progression of liver fibrosis. METHODS: RT-Nest-PCR and gene recombination techniques were used to construct rat antisense TβR Ⅰ and TβR Ⅱ recombinant plasmids which could be expressed in eukaryotic cells. The recombinant plasmids and empty vector (pcDNA3) were encapsulated by glycosyl-poly-L-lysine and then transducted into rats of pig serum-induced liver fibrosis model. Expression of exogenously transfected gene was assessed by Northern blot, and hepatic expressions of TβR Ⅰ and TβR Ⅱ were evaluated by RT-PCR and Western blot.We also performed ELISA for serum TGF-β1, hydroxyproline of hepatic tissues, immunohistochemistry for collagen types Ⅰ and Ⅲ, and VG staining for pathological study of the liver tissues. RESULTS: The exogenous antisense TβR Ⅰ and TβR Ⅱ plasmids could be well expressed in vivo, and block mRNA and protein expression of TβR Ⅰ and TβR Ⅱ in the fibrotic liver at the level of mRNA respectively. These exogenous plasmid expressions reduced the level of TGF-β1 (antisense TβR Ⅰ group 23.998+3.045 ng/mL, antisense TβR Ⅱ group 23.156+3.131 ng/mL, disease control group 32.960+3.789 ng/mL; F-=-38.19, 36.73, P&lt;0.01). Compared with disease control group, the contents of hepatic hydroxyproline (antisense TβR Ⅰ group 0.169+0.015 mg/g liver, antisense TβR Ⅱ group 0.167+0.009 mg/g liver, disease control group 0.296+0.026 mg/g liver; F=14.39, 15.48, P&lt;0.01) and the deposition of collagen types Ⅰ and Ⅲ decreased in the two antisense treatment groups(antisense TβR Ⅰ group, collagen type Ⅰ 669.90+50.67, collagen type Ⅲ 657.29+49.48; antisense TβR Ⅱ group, collagen type Ⅰ 650.26+51.51, collagen type Ⅲ 661.58+55.28; disease control group, collagen type I 1209.44+116.60, collagen type Ⅲ 1175.14+121.44; F=15.48 to 74.89, P&lt;0.01). Their expression also improved the pathologic classification of liver fibrosis models (compared with disease control group, X^2=17.14, 17.24, P&lt;0.01). No difference was found in the level of TGF-β1, the contents of hepatic hydroxyproline and collagen types Ⅰ and Ⅲ and pathologic grade between pcDNA3 control group and disease control group or between the two antisense treatment groups (F=0.11 to1.06, X^2=0.13 to 0.16, P&gt;0.05). CONCLUSION: Antisense TβR Ⅰ and TβR Ⅱ recombinant plasmids have certain reverse effects on liver fibrosis and can be used as possible candidates for gene therapy.     

Induction of macrophage inflammatory cytokines by Ox-LDL is ABCA1 dependent

Objective The current study aimed to evaluate whether the induction of macrophage inflammatory cytokines by Ox-LDL is related to the expression of ABCA 1 pathway. Methods After THP 1/PMA macrophages were transfected with ABCA1 antisense oligonucleotides （100nmol/L） followed by treatment with Ox-LDL （30mg/L）, the expressions of ABCA1, ICAM-1 and MCP-1 mRNA and protein were determined by real-time fluorescent quantitative RT-PCR, Western blot or ELISA. Results Ox-LDL induced expressions of ABCA1, ICAM-1, and MCP-1 at both mRNA and protein levels from THPI/PMA macrophages. Transfection with ABCAI antisense oligonucleotides reduced ABCA1 mRNA levels after 3 and 6 hours and protein levels after 12 and 24 hours. The expression of ICAM-1 and MCP-1 induced by Ox-LDL was also decreased after inhibition of ABCA 1 protein expression by ABCA 1 antisense oligonucleotide decreased. Conclusion The induction of macrophage inflammatory cytokines by Ox-LDL is partially dependent on expression ofABCA1. Our studies disclose new functions of ABCA1 in macrophages Objective The current study aimed to evaluate whether the induction of macrophage inflammatory eytokines by Ox-LDL is related to the expression of ABCA 1 pathway. Methods After THP 1/PMA macrophages were transfected with ABCA1 antisense oligonucleotides （100nmol/L） followed by treatment with Ox-LDL （30mg/L）, the expressions of ABCA1, ICAM-1 and MCP-1 mRNA and protein were determined by real-time fluorescent quantitative RT-PCR, Western blot or ELISA. Results Ox-LDL induced expressions of ABCA1, ICAM-1, and MCP-1 at both mRNA and protein levels from THPI/PMA macrophages. Transfection with ABCAI antisense oligonucleotides reduced ABCA1 mRNA levels after 3 and 6 hours and protein levels after 12 and 24 hours. The expression of ICAM-1 and MCP-1 induced by Ox-LDL was also decreased after inhibition of ABCA 1 protein expression by ABCA 1 antisense oligonucleotide decreased. Conclusion The induction of macrophage inflammatory cytokines by Ox-LDL is partially dependent on expression ofABCA1. Our studies disclose new functions of ABCA1 in macrophages     

血管内皮生长因子反义寡核苷酸抑制甲状腺癌血管生成的效应

目的探讨反义寡核苷酸(ASODN)抑制甲状腺癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达及内皮细胞生长的效应。方法设计合成靶向VEGF的ASODN转染人髓状甲状腺癌细胞系(TT)细胞,并制备相应条件培养基作用内皮细胞ECV304,设正义寡核苷酸(SODN)和空白对照组进行比较。观察细胞生长状态,RT PCR、免疫细胞化学法检测TT细胞VEGFmRNA和蛋白表达,四氮唑蓝法检测TT和ECV304细胞生长抑制率(IR),流式细胞仪、吖啶橙/溴化乙锭染色法检测ECV304细胞凋亡状态。结果ASODN组TT细胞VEGFmRNA和蛋白表达显著低于SODN和对照组(P<0.01),但IR差异无统计学意义(P>0.05);各转染组ECV304细胞IR差异亦无统计学意义(P>0.05);而经各ASODN组TT细胞条件培养基作用的ECV304细胞生长明显受抑,IR(分别为0.21±0.03、0.31±0.01、0.42±0.22)显著高于SODN组(0.05±0.03,P<0.01),并伴明显细胞凋亡,上述效应呈浓度依赖性。结论ASODN可通过特异性封闭甲状腺癌细胞VEGF表达,抑制内皮细胞生长,干扰肿瘤血管生成。     

反义转化生长因子βⅡ型受体表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的 观察反义转化生长因子βⅡ型受作(TGF βRⅡ)表达质粒对实验性肝纤维化的影响。方法 运用重组DNA技术中构建反义TGF βRⅡ真核细胞表达质粒,采用猪血清腹腔注射制备免疫性大鼠肝纤维化模型,实验动物分为肝纤维化模型组、反义TGF βRⅡ治疗组、pCDNA3对照组及正常对照组。反义TGF βRⅡ质粒和pCDNA3空质粒与糖化多聚赖氨酸偶联后经尾静脉分别导入大鼠体内,通过northern blot、RT-PCR、Western blot检测外源导入质粒在肝组织中的表达,检测血清转化生长因子β1(TGFβ1)、肝组织羟脯氨酸测定,Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组织化学与Van Gieson染色观察反义TGF βRⅡ质粒对大鼠肝纤维化的影响。 结果 反义TGF βRⅡ表达质粒可在肝组织中获得确切表达,其表达可使反义治疗组血清TGF β1含量下降,反义TGF βRⅡ治疗组为(23.16 ± 3.13)ng/ml,模型组为(32.96±3.79)ng/ml,F=36.73,P<0.01。肝组织羟脯氦酸含量下降,治疗组为(0.17±0.01)mg/g,模型组为(0.30±0.03)mg/g,F=15.48,P<0.01。减少了肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积,治疗组Ⅰ型胶原为650.26±51.51,Ⅲ型胶原为661.5 8±55.28,模型组Ⅰ型胶原为1209.44±16.60,Ⅲ型胶原为1175.14±121.44,F值分圳为69.87、70.46,P<0.01。并促进反义治疗组肝脏病理形态一定程度的改善。